Guia de Trabajo Espectrofotometria

Universidad de La Serena Facultad de Ciencias Departamento de Biología Ped. En Química y Cs. Naturales

1. Describase o defina brevemente: a. Espectro de Absorción b.Radiacion monocromática 2. ¿Qué relación hay entre: a. la absorbancia y la transmitancia b.la absortividad a y la absortividad molar  Ɛ 3. Indiquese los factores que ocasionan desviaciones de la lineararidad de Beer  4. ¿Cuales son las unidades de la absortividad cuando la longitud de la trayectoria esta dada en centímetros y la concentración se expresa en: a. partes por millón litro

b. microgramos /litro

, c. por ciento peso-volumen , d.gramos por 

5. Expresense las siguientes absorbancias en términos de porcentajes de transmitancia: a. 0.0510 b.0.918 c. 0.379 d. 0.261 e. 0.485 f. 0.702 6. Conviértanse los siguientes datos de transmitancia en sus correspondientes absorbancias: a. b. c. d. e. f.

25.5 % 0.567% 32.8% 3.58% 0.085% 53.8%

Una solución que contiene 4.48 ppm de KMnO4 presenta una transmitancia de 0.309 , medida en una cubeta de 1.00 cm a 520 mm. Calcule la absortividad molar del KMnO4.

7.

8. Describa las diferencias entre : a. espectrofotómetros y fotómetros

9.¿ Cual es el propósito de: a. el ajuste a T O% b. el ajuste a T 100% de un espectrofotómetro.

10. . Conversiones 1-

Convierta 0.2 moles (M) a mili moles (m M ).

2. Convierta 0.12 mg a microgramos ( ug)

R: 200 m M R: 120 ug

3. ¿Cual es la concentración en mg/ ml de una disolución 4.0 % p/v .

R: 40 mg/ ml

4. ¿Como prepararía medio litro de disolución 100 m M de sacarosa, si dispone de una disolución 1 M? R: 50 mL

11. . Tenemos un compuesto de absortividad molar de 2.17 * 10 3 L mol-1 cm -1. Si se utiliza

una cubeta de 2.5 cm .¿ Que concentración del compuesto se necesitan para que la Transmitancia fuera de 8.42 %? 4. El complejo FeSCN 2+ , cuya longitud de onda máxima de Absorbancia a 580 nm ,tiene una absortividad molar de 7.0* 10 3 L mol-1cm-1 . a. La Absorbancia de una disolución del complejo 2.22* 10 -4 si se mide en una cubeta de 1.25 cm . b. La Transmitancia de una disolución de 4.06 * 10 -4 M y la cubeta de 1.25 cm

5. Una solución de 7.50*10 -5 de KMnO4 tuvo una transmitancia de 36.4% .cuando se midió en una celda de 1.05 cm a una λ de onda de 525 nm. Calcule a. Absorbancia de la solución b. Absortividad molar del KMnO 4 6. El coeficiente de extinción molar de un soluto es de 2.1 *10 4. Calcular las transmitancias a través de una cubierta con un trayecto de luz de 5,00 cm para una solución de 2,0 *10 -5 M.

CUESTIONARIO 1. ¿Que un espectro de absorción? 2. ¿Qué es una curva de calibración? 3. ¿Que es luz monocromática? Y por que se prefiere en la determinación fotométrica. 4. ¿Cual es el propósito de: a. Ajuste a T O%.

b. el ajuste a T 100 % de un espectrofotómetro

5. ¿ Que se entiende por coeficiente de extinción molar?. Y sus unidades respectivas 6. Se requiere determinar la concentración de una sustancia midiendo la Absorbancia en la longitud de onda en que también se absorbe el solvente. ¿Como descartar la absorción de este? 7. ¿Cuantas concentraciones diferentes cree Ud. que son necesarias para hacer la curva de calibración? 8. ¿Que cantidades de glucosa considera que debe usar para hacer la curva de calibración? 9. ¿Que resultados obtendría si usa una longitud de onda de 660 nm o 420 nm, para hacer las lecturas en el espectrofotómetro? 10. Si las soluciones coloreadas presentan una Absorbancia muy grande que dificulta la lectura en el espectrofotómetro , puede diluir esas soluciones? ¿ Que blanco usaría? 12. Explique en que consiste la ley de Lambert –Beer . 13.Nombre factores que impiden que se cumpla la Ley de Beer  14.¿ Por que se utiliza una solución patrón?