MÉTODO DE RITCHIE
1. Objetivo O objetivo deste método é pesquisar cistos de protozoários, ovos e larvas de helmintos.
2. Técnica O Método de Ritchie se fundamenta na centrífugo-sedimentação em um sistema de formol-éter para realização de exames parasitológicos de fezes. Para realiza-lo, basta misturar uma pequena amostra das fezes em água e filtrá-la para um tubo de ensaio em um funil f unil com gaze cirúrgica. Desta forma, os sedimentos grosseiros não irão atrapalhar a visualização das formas parasitas, prevenindo diagnósticos equivocados. Após a filtração, lavar 2 vezes com água colocando na centrífuga durante 60 segundos a 2500rpm (nas duas vezes). Após a segunda vez adicionar solução de formol 10%, agitar vigorosamente e deixar em repouso 3 minutos. Após o repouso adicionar 2 mL de éter, agitar bem e centrifugar por 60 segundos a 2500rpm A partir deste, faz-se uma lâmina, utilizando utilizando lugol como corante, para ser observada em microscópio e através da análise dos campos, é possível determinar, ou não, a presença de cistos e larvas.
3. Materiais e Reagentes Os materiais utilizados no método de Ritchie foram: - Abaixador de língua - Bastão de vidro - Centrífuga - Copo plástico - Espátula - Eter comercial - Funil - Gaze - Lâmina e Lamínula de vidro - Material fecal - Microscópio Microscópio
- Pipeta Pasteur - Solução de formol comercial 10% - Tubo de ensaio
4. Método Em um copo plástico descartável, adicionaram-se cerca de 1g de amostra e 10mL de água e dissolveu a amostra com auxílio do abaixador de língua. Após a diluição, filtrou-se a mesma para um tubo de ensaio utilizando um funil com gaze dobrada em quatro. Após a filtração lavou-se 2 vezes com água, ou seja, avolumou o tubo com água até 2/3 e colocou na centrífuga durante 60 segundos a 2500rpm, desprezou a fase líquida, avolumou novamente com água até 2/3 do tubo e ressuspendeu o sedimento. Colocou na centrífuga durante 60 segundos a 2500rpm. Jogou a fase líquida fora e adicionou solução de formol 10%. Agitou vigorosamente e e deixou em repouso durante 3 minutos. Após o repouso adicionou 2 mL de éter e agitou bem, colocou na centrífuga por 60 segundos a 2500rpm. Retirou-se a fase de gordura e com o auxílio de uma Pipeta Pasteur colheu um pouco do sedimento e fezse uma lâmina: utilizou uma gota de lugol como corante e colocou a lamínula por cima, e foi observada em microscópio.
5. Vantagens e Desvantagens As vantagens do método de Ritchie são a rapidez, facilidade e é excelente para cistos, pois é muito limpa, a gordura é retirada com o sistema formol-éter e então a visualização é melhor. Além da pesquisa de cistos, também é indicado para larva e ovos, por isso pode ser chamado de universal. Sua principal desvantagem é o custo, já que a aquisição de uma centrífuga é imprescindível. Além de menor sensibilidade, devido a pouca quantidade de amostra. Esse método requer alguns cuidados com a quantidade de amostra e na hora de agitar, para não machucar ninguém, pois pode formar gases na agitação do éter.
6. Conclusão O método de Ritchie apresenta excelentes resultados, porém devido a existência de métodos menos custosos e também universais, como o de Hoffman, esse método é mais recomendado para confirmação de alguma suspeita, já que apresenta uma boa visualização das estruturas parasitárias devido à retirada da gordura da amostra.
