MACAM-MACAM MEDIA CAIR
Diajukan untuk memenuhi salah satu tugas mata kuliah Mikrobiologi
Disusun Oleh : Citra Devi Rahmat
31110010
Hani Herlina
31110024
Muhammad Egi A
311100 32
Risa Rahayuni
31110042
Rizki Faturahman
31110044
Yelis Mila Rahmalati 31110051
Prodi Farmasi Sekolah Tinggi Ilmu Kesehatan Bakti Tunas Husada Tasikmalaya 2012
Nutrient Broth
Jenis media :
Nutrien broth (NB) merupakan medium berwarna coklat yang memiliki konsistensi yang cair.
Sifat media : Umum
Fungsi :
- Medium umum untuk menumbuhkan bakteri. - Kultivasi bakteri. Komposisi:
- 3 g Ekstrak daging (beef). - 5 g Pepton. - Aquadest 1 liter. Pembuatan Nutrient Broth :
- Larutkan 5 g pepton dalam 850 ml air distilasi/akuades. - Larutkan 3 g ekstrak daging dalam larutan yang dibuat pada langkah pertama. - Atur pH sampai 7,0. - Beri air distilasi sebanyak 1.000 ml. - Sterilisasi dengan autoklaf. Penggunaan :
Medium cair untuk pertumbuhan mikroorganisme yang umum digunakan dalam berbagai kultur mikroorganisme.
Lactose Broth
Jenis media : Enterococcus faecalis dan Pseudomonas aeruginosa bisa tumbuh baik pada medium
ini namun tidak memproduksi gas. Escherichia coli dan Klebsiella pneumonia bisa tumbuh baik dan memproduksi gas.
Sifat media : Umum
Komposisi per liter dari Lactose Broth terdiri dari :
- Peptone dari gelatin 5 gr/L, - Ekstrak daging (sapi) 3 gr/L, - Laktosa 5 gr/L. *Pepton dan ekstrak daging menyediakan nutrien esensial untuk memetabolisme bakteri. *Laktosa menyediakan sumber karbohidrat yang dapat difermentasi untuk organism koliform.
Fungsi :
- Untuk mendeteksi kehadiran bakteri koliform dalam air, makanan, dan produk susu. - Sebagai kaldu pemerkaya (pre-enrichment broth) untuk Salmonellae dan. - Untuk mempelajari fermentasi laktosa oleh bakteri pada umumnya. Cara pembuatan Lactose Broth :
- Campurkan 13 gr LB atau lebih dalam 1 L air, panaskan sambil aduk perlahan hingga homogen.
- Tuangkan dalam tabung reaksi yang berisi tabung durham, lalu sterilkan, - Lalu sterilkan autoklaf 15 menit pada suhu 121 oC selama kurang lebih 15 menit kemudian o
dinginkan. pHnya 6,9 ± 0,2 pada 25 C.
Trypticase Soy Broth (TSB)
Jenis media :
Media TSB mengandung kasein dan pepton kedelai yang menyediakan asam amino dan substansi nitrogen lainnya yang membuatnya menjadi media bernutrisi.
Sifat media : Umum
Fungsi :
- Medium dasar untuk menumbuhkan berbagai mikoorganisme. - Untuk isolasi bakteri. Komposisi :
- TSB ( Triptic Soy Broth) 30 g. - Aquadest 500 ml. *Dekstrosa adalah sumber energi dan natrium klorida mempertahankan kesetimbangan osmotik. *Dikalium fosfat ditambahkan sebagai buffer untuk mempertahankan pH.
Cara pembuatan Trypticase Soy Broth :
- TSB ( Triptic Soy Broth) ditimbang sebanyak 30 g. - Aquades diukur sebanyak 500 ml. - TSB dicampur dengan 500 ml aquades. - Campuran dipanaskan sampai mendidih selama ± 40 menit. Kemudian media ditunggu sampai hangat-hangat kuku.
- Dimasukkan ke dalam tabung erlenmeyer 100 ml masing-masing 18 ml. - Menutup erlenmeyer dengan kapas dan alumunium foil.
MacConkey Broth (MCB)
Jenis media :
MCB merupakan media perbenihan selektif yang mengandung garam empedu sebagai penghambat bakteri bukan coliform. Tabung Durham digunakan untuk mengetahui adanya pembentukan gas oleh bakteri yang terdapat dalam sampel tersebut. Terbentuknya gas dan asam menandakan adanya Escherichia coli dan bakteri Coliform. Jika hanya terbentuk gas menandakan adanya Coliform tanpa ada Escherichia coli.
Terbentuknya asam ditandai dengan perubahan warna biakan menjadi kuning.
Sifat media : Selektif
Fungsi :
- Kul ti vas i d an i sol asi sel ekt if bak ter i Coliform dal am s usu dan air. Komposisi : Formula Medium:
Oxbile 5 gram Lactose 10 gram Gelatin Peptone 20 gram Bromcresol 0,01 gram Cara pembuatan MacConkey Broth :
- Sebanyak 35.0 gram medium disuspensikan ked lam 1 L akuades atau deionized. - Medium dipanaskan sampai mendidih agar tercampur dengan sempurna selama 1 menit. - Disterilisasi di dalam autoklaf selama 15 menit, pada suhu 121 0C, tekamam 1-2 atm. - Tunggu hingga agak dingin sekitar suhu 40-45 0C.
- Masukkan ke dalam tabung reaksi. - Inokulasi mikroorganisme dan inkubasi pada suhu 35 0C selama 18-24 jam. Penggunaan :
MacConkey Broth adalah medium cair yang digunakan sebagai medium untuk isolasi, identifikasi, dan kultur enterobacter dari urin, air limba, air minum, kotoran, atau makanan yang berhubungan dengan sanitasi.
Eugon Broth
Jenis media :
Eugon broth adalah medium cair yang banyak digunakan untuk menghasilkan pertumbuhan mikroorganisme dengan hasil yang tinggi. Medium ini juga banyak digunakan untuk bakteri yang sulit dikultur, seperti Haemophillus sp., Pasteurella sp., Neisseria sp., Brucella sp., Lactobacillus sp., dll. Medium ini yang digunakan untuk kultur mikroorganisme
baik penelitian atau non-penelitian.
Sifat media : Umum
Fungsi :
-Berfungsi untuk kultur mikroorganisme baik penelitian atau non-penelitian.
Komposisi : Bahan
Ukuran (gram)
Casein Peptone
15.0
Dextrose
5.5
L – Cystine
0.7
Sodium Chloride
4.0
Sodium Sulfite
0.2
Soy Peptone
5.0
Cara pembuatan Eugon Broth :
- Sebanyak 30.4 g medium dalam satu L akuades atau air deionized - Dipanas dengan agitasi dan didihkan selama satu menit - Masukkan ke dalam tabung reaksi atau botol, lalu disterilkan pada 118 0C selama 15 menit - Diinginkan sampai 45-50 0C dan tambahkan 5% steril darah kelinci - Masukkan medium ke dalam tabung reaksi lalu masukkan mikroorganisme yang akan dikulturkan
- Homogenkan dan inkubasi pada incubator Penggunaan :
Medium ini sangat ideal untuk kultur mikroorganisme pathogen dan untuk mendapatkan angka tinggi budaya bakteri dalam penyusunan antigen dan vaksin. Dalam bakteriologi, medium ini digunakan untuk mendeteksi dan analisis keberadaan bakteri laktat pada sosis asap, daging mentah, susu, dan produk susu lainnya. Selain itu medium ini juga digunakan untuk analisis bahan klinis seperti darah dan cairan tulang punggung ke otak atau pleura yang umunya mengandung kultur murni.
Brain Heart Infusion Broth
Jenis media :
Brain Heart Infusion Broth (BHIB) adalah medium cair untuk berbagai mikroorganisme baik yang aerob atau anaerob dari bakteri, jamur, dan ragi. BHIB m erupakan modifikasi dari media yang dikembangkan oleh Rosenow dan Hayden. Tambahan otak sapi telah menggantikan jaringan otak dan dinatrium fosfat juga menggantikan buffer kalsium karbonat sehingga cocok untuk kultur Streptococcus, Pneumococcus, dan Meningcoccus. Medium ini sangat fleksibel dan mendukung pertumbuhan mikroorganisme dan medium cair harus digunakan pada hari yang sama persiapan agar pertumbuhan mikroorganisme menjadi optimal.
Sifat medium : Umum
Fungsi :
-Mendukung pertumbuhan mikroorganisme dan medium cair.
Komposisi : Bahan
Ukuran (gram)
Beef Heart Infusion from Solids
17.5
Dextrose
2.0
Disodium Phosphate
2.5
Gelatin Peptone
10.0
Sodium Chloride
5.0
Cara pembuatan Brain Heart Infusion Broth :
-
Sebanyak 37.0 gram medium disuspensikan ke dalam 1 L akuades atau deionized.
-
Jika perlu ditambahkan sedikit agr-agar (0.1%) untuk pertumbuhan dan isolasi pathogen dari darah dan bahan lain specimen.
-
Medium dipanaskan sampai mendidih agar tercampur dengan sempurna selama 1 menit.
-
Masukkan ke dalam tabung atau botol untuk disterilisasi di dalam autoklaf selama 15 0
menit, pada suhu 121 C, tekanan 1-2 atm. 0
-
Tunggu hingga agak dingin sekitar suhu 45 C.
-
Tuangkan ke dalam tabung reaksi untuk kultur.
-
Inokulasi mikroorganisme dan inkubasi pada suhu 37 C selama 24 jam.
0
Brilliant Green Bile Broth 2%
Jenis media :
Brilliant Green Bile Broth 2% adalah medium cair yang digunakan untuk metode standar untuk uji lengkap bakteri coliform pada air dan makanan. Brilliant Green Bile Broth 2% merupakan medium selektif yang direkomendasikanoleh APHA dalam uji coliform pada air minum, air limba, susu, produk susu, dan produk lainnya yang berhubungan dengan sanitasi. Brilliant Green Bile Broth akan menghambat perkembangan mikroorganisme selain coliformnya seperti Clostridium perfringens, sehingga mikroorganisme yang tumbuh pada medium ini adalah bakteri coliform.
Sifat media : Selektif
Fungsi :
-Untuk metode standar untuk uji lengkap bakteri coliform pada air dan makanan. Komposisi : Bahan
Brilliant Green
Ukuran (gram)
0.0133
Dehydrated Ox Bile
20.0
Gelatin Peptone
10.0
Lactose
10.0
Cara pembuatan Brilliant Green Bile Broth 2% :
- Sebanyak 40.0 gram medium disuspensikan ke dalan 1 L akuades atau deinoized.
- Medium dipanaskan sampai mendidih agar tercampur dengan sempurna selam 1 menit. - Masukkan ke dalam tabung reaksi. - Masukkan tabung Durham ke dalam tabung reaksi tersebut. - Disterilisasi di dalam autoklaf selam 15 menit pada suhu 121 0C, tekanan 1-2 atm. - Tunggu hingga agak dingin sekitar suhu 45 0C. - Inokulasi mikroorganisme dan inkubasi pada suhu 32-35 0C selama 24-48 jam.
Mueller-Hinton Broth
Jenis media :
Mueller-Hinton Broth adalah medium cair yang digunakan untuk uji sensitivitas, medium ini kaya nutrisi sehingga cocok untuk menguji sensitifitas mikroorganisme terutama Nesseria pathogen. Selain itu medium ini juga banyak digunakan untuk kultur mikroorganisme pathogen khususnya genus Neisseria seperti Neisseria gonorrhoeae dan Neisseria meningitides, tetapi juga bias digunakan untuk Escherichia coli, Listeria monocytogenes, Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus auresi, Streptococcus pyogenes,
dan Streptococcus faecalis.
Sifat media : Umum
Fungsi : -Untuk menguji sensitifitas mikroorganisme dan digunakan untuk kultur mikroorganisme
phatogen khususnya genus Neisseria. Komposisi : Bahan
Ukuran (gram)
Beef Infusion
3.0
Casein Peptone H
17.5
Starch
1.5
Cara pembuatan Mueller-Hinton Broth :
- Sebanyak 21.0 gram medium disuspensikan ke dalam 1 L akuades atau deionized. - Medium dipanaskan sampai mendidih agar tercampur dengan sempurna selam 1 menit. - Disterilisasi di dalam autoklaf selama 15 menit, pada suhu 121 0C, tekanan 1-2 atm. - Tunggu hingga agak dingin sekitar suhu 40-45 0C. - Masukkan ke dalam tabung reaksi. - Inokulasi mikroorganisme dan inkubasi pada suhu 37 0C selama 24-48 jam.
Malt Extract Broth
Jenis media :
Malt Extract Broth adalah medium cair yang banyak digunakan dalam medium kultur untuk pertumbuhan jamur dan ragi dalam industry gula, dalam pembuatan sirup, minuman ringan, dan minuman lainnya.
Sifat media : Umum
Fungsi : -Untuk pertumbuhan jamur dan ragi dalam industri gula, pembuatan sirup, minuman ringan
dan minuman lainnya. Komposisi : Bahan
Ukuran (gram)
Malt Extrase
6.0
Maltose Certified
6.0
Dextrose
6.0
Yeast Extract
1.2
Cara pembuatan Malt Ekstrak Broth :
- Sebanyak 19.0 gram medium disuspensikan ked lam 1 L akuades atau deionized. - Medium dipanaskan sampai mendidih agar tercampur dengan sempurna selama 1 menit. - Disterilisasi di dalam autoklaf selama 15 menit, pada suhu 115-118 0C, tekamam 1-2 atm. - Tunggu hingga agak dingin sekitar suhu 40-45 0C. - Masukkan ke dalam tabung reaksi. - Inokulasi mikroorganisme dan inkubasi pada suhu 37 0C selama 18-24 jam.
Thioglycollate Broth
Jenis media :
Thioglycollate Broth adalah medium cair yang diperkaya yang digunakan untuk membedakan tingkat kebutuhan oksigen dari berbagai mikroorganisme. Thioglycollate Broth ini memungkinkan diferensiasi aerobic, organisme anaerob, mikroaerofilik, dan fakultatif anaerob berdasarkan pada berbagai tingkat pertumbuhan di medium.
Sifat media : Diferensial
Fungsi : -Untuk membedakan tingkat kebutuhan oksigen dari mikroorganisme. Kommposisi : Bahan
Ukuran (gram)
Malt Extrase
6.0
Maltose Certified
6.0
Dextrose
6.0
Yeast Extract
1.2
Cara pembuatan Thioglycollate Broth :
- Sebanyak 28.5 gram medium disuspensikan ked lam 1 L akuades atau deionized. - Medium dipanaskan sampai mendidih agar tercampur dengan sempurna selama 1 menit. - Disterilisasi di dalam autoklaf selama 15 menit, pada suhu 121 0C, tekamam 1-2 atm. - Tunggu hingga agak dingin sekitar suhu 40-45 0C. - Masukkan ke dalam tabung reaksi. - Inokulasi mikroorganisme dan inkubasi pada suhu 37 0C selama 18-24 jam.
Selenite Cystine Broth
Jenis media :
Selenite Cystine Broth merupakan medium cair yang selektif digunakan untuk kultur Salmonella dan Shigella.
Sifat media : Selektif
Fungsi : -Untuk pertumbuhan kultur Salmonella dan Shigella. Komposisi : Bahan
Ukuran (gram)
Polipeptone
5.0
Sodium Phosphate
10.0
L-Cystine
0.01
Lactose
4.0
Sodium Selenite
4.0
Cara pembuatan Selenite Cystine Broth :
- Sebanyak 35.0 gram medium disuspensikan ked lam 1 L akuades atau deionized. - Medium dipanaskan sampai mendidih agar tercampur dengan sempurna selama 1 menit. - Disterilisasi di dalam autoklaf selama 15 menit, pada suhu 121 0C, tekamam 1-2 atm. - Tunggu hingga agak dingin sekitar suhu 40-45 0C. - Masukkan ke dalam tabung reaksi. - Inokulasi mikroorganisme dan inkubasi pada suhu 35 0C selama 18-24 jam.
Penggunaan :
Selenite Cystine Broth digunakan terutama untuk membasahi hilangnya sensitivitas yang mempengaruhi medium pengayaan lainnya terutama pada produk makanan dengan kandungan bahan organic tinggi, misalnya, makanan telur dan bubuk telur.
