LAPORAN PRAKTIKUM MIKROTEKNIK TUMBUHAN PEMBUATAN PREPARAT MASERASI
Sebagai tugas mata kuliah Mikroteknik Tumbuhan Dosen Pengampu: Dra. Ely Rudyatmi, M.Si
Nama : Laila Nur Hidayah NIM
: 4411412071
JURUSAN BIOLOGI FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM UNIVERSITAS NEGERI SEMARANG 2015
A. Judul Pembuatan Preparat Maserasi Batang Jati (Tectona grandis) B. Tujuan Membuat preparat batang jati (Tectona grandis) Menganalisa preparat maserasi batang jati (Tectona grandis) yang mengunakan metode Jeffrey C. Landasan Teori Pengamatan anatomi sel tumbuhan dapat dilakukan dengan cara membuat preparat yang sesuai dengan bagian yang ingin diamati. Untuk mendapatkan bagian-bagian dari sel maupun jaringan yang diinginkan, maka diperlukan suatu cara untuk menemukan bagian bagian tersebut. Mikroteknik adalah ilmu yang mempelajari tentang suatu teknik pembuatan preparat mikroskopis dan analisis kenampakan preparat yang diamati.preparat mikroskopis ialah preparat yang hanya dapat dilihat menggunakan mikrosko sehingga dapat dibedakan bagian yang satu dengan yang lainnya. Menurut Rudyatmi (2014), ada beberapa kriteria suatu preparat dikategorikn sebagai preprarat yang baik, yaitu: 1. Ukurannya kecil 2. Tipis 3. Transparan 4. Dapat dibedakan satu dengan yang lainnya
Pada spermatophyte, pengangkutan air serta garam-garam tanah maupun hasil-hasil fotosintesis dilakukan oleh jaringan pembuluh yang terdiri dari dua kelompok sel yang asalnya sama namun berbeda dalam bentuk, struktur dinding serta isi selnya. Jaringan pembuluh terdiri dari xilem dan floem. Kedua jaringan ini disebut jaringan kompleks karena terdiri dari berbagai jaringan yang berbeda struktur dan fungsinya. Menurut Sucipto (2009), pada pohon dewasa berdasarkan cross-section terdiri dari kulit luar, floem, cambium, kayu gubal, kayu teras hingga empu lur yang memilkiki fungsi masing-masing. Penampang kayu berdasarkan arah orientasi serat terdiri dari bidang lintag/transversal/aksial/cross-sectional (bidang tegak lurus terhadap sumbu batan g. Sel sel penyusun softwood adalah berupa sel trakeid (trakeid, trakeid damar dan trakeid rantai), sel parenkim (parenkim aksial dan p arenkim apitel), sel trakeid jari-jari, sel jari-jari dan sel epithel. Sedangkan pada hardwood adalah berupa sel pori, sel serabut (trakei serabut dan serabut libriform), sel trakeid (trakeid pori dan trakeid keliling pori), sel parenkim, sel-sel jari ( sel tegak dan sel baring). Sel serabut atau serat berbentuk panjang dengan dinding tebal daripada dinding sel parenkim atau pembuluh. Sel ini berfungsi sebagai penguat batang pohon sehingga
memiliki dinding yang tebal. Sel trakeid adalah sel yang berbentuk panjang dan ujungujungnya tertutup runcing. Sel trakeid merupakan komponen penyusun primer dengan komposisi 90-95% pada softwood. Xilem, terdiri dari trakeid, trakea / pembuluh kayu, parenkim xylem, dan serabut / serat xylem. Berdasarkan asal terbentuknya terbagi menjadi xylem primer dan xylem sekunder. Xilem primer berasal dari prokambium sedangkan xilem sekunder berasal dari kambium. Berdasarkan proses terbentuknya xilem primer dapat dibedakan menjadi protoxylem dan metaxylem. Elemen pengangkut terdiri dari trakeid dan komponen pembuluh kayu (trakea). Perbedaan utama antara kedua macam sel adalah bahwa trakeid berujung runcing yang tidak berperforasi atau berlubang sedangkan komponen pembuluh kayu berperforasi pada ujung selnya. Komponen pembuluh kayu tersusun dalam deretan sel memanjang yang berhubungan satu dengan yang lainpada dinding ujungnya. Dinding ujung komponen trakea yang terperforasi disebut papan perforasi. Papan perforasi sederhana memiliki hanya satu lubang dan papan perforasi majemuk berisi banyak lubang Pada dinding komponen trakea terdapat noktah sederhana maupun noktah terlindung yang jumlah serta susunannya bermacam-macam. Macam noktah tergantung kepada tipe sel yang berada disebelahnya. Diantara dua sel trakeal yang berdampingan biasanya terdapat sejumlah besar nktah terlindung. Diantara elemen pengangkut dan serat terdapat beberapa pasangan noktah. Pasangan noktah setengah terlindung atau sederhana terdapat antara elemen trakeal dengan parenkim xylem. Xylem merupakan pembuluh angkut yang terdiri dari berbagai macam bentuk sel. Keunikan dari setiap bentuk sel penyusun xylem ini dapat dijadikan sebagai suatu ciri khas tersendiri dari setiap spesies. Teknik yang dapat digunakan untuk mengamati berbagai macam bentuk sel penyusun xylem yang tepat adalah dengan maserasi. Maserasi adalah suatu teknik pembuatan preparat awetan permanen dengan cara pembusukan buatan, menghilangkan bagian-bagian tertentu menjadi lunak dan hilang, sedangkan bagian yang keras dan tahan terhadap maserator akan tetap utuh. Xylem merupakan bagian yang keras dan muncul dari pertumbuhan sekunder. Tanaman jati (Tectona grandis) maerupakan salah satu tanaman berkayu keras. Banyak digunakan sebagai bahan untuk furniture karena strukturnya yang kuat. Untuk mengetahui seperti apa susunan batang jati sehingga banyak dimanfaatkan dapat dianalisis menggunakan pengamatan mikroskopin dengan cara membuat sediaannya dengan metode maserasi. Kingdom : Plantae Divisi : Magnoliophyta
Kelas Sub Kelas Ordo Famili Genus Spesies
: Magnoliopsida : Asteridae : Lamiales : Lamiaceae : Tectona : Tectona grandis L.f.
D. Cara Kerja Metode Jeffrey Memotong batang jati (Tectona grandis) yang berdiameter 5 mm dan panjang 10 mm. potongan batang dibersihkan kulit bagian luar dan jaringan gabus di dalamnya sehingga hanya menyisakan jaringan xylem. Sampel direbus dalam air hingga tenggelam yang membutuhkan waktu hingga satu jam. Merebus kembali sampel dengan larutan KOH 10% dalam beaker glass yang dipanaskan diatas lampu bunsen selama 5 menit. Mencuci bahan yang berada dalam botol flakon dengan air mengalir selama 1 jam. Maserasi bahan dengan campuran asam nitrat 10% dan asam kromat 10% perbandingan 1:1 dalam botol flakon selama 35 hari hingga melunak sebanyak 5 ml. Mencuci bahan yang ada dalam flakon dengan air mengalir selama 1 jam hingga bersih. Mengganti air dengan larutan pewarna safranin dalam alcohol 70% dengan cara dehidrasi dengan alcohol bertingkat, dimulai dari alcohol 30%, 40%, 50%, 60%, 70% masing-masing selama 2 menit. Staining dengan cara mengganti larutan alcohol 70% dengan safranin 1% dalam alcohol 70% selama 24 jam. Mencuci sampel menggunakan alcohol sisa 70% sebanyak satu kali. Dehidrasi sampel secara bertingkat menggunakan alcohol 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, dan absolut masing-masing selama 2 menit. Dealkoholisasi dengan larutan alcohol xylol perbandingan 3:1, 1:1, 1:3, xylol murni I, xylol murni II selama 2 menit. Menyuwir-nyuwir sampel dengan menggunakan jarum hingga menjadi ba gian yang sangat tipis dan terurai kecil seperti benang. Mounting sampel pada gelas benda dengan jarak tepi kiri sampel 1 cm dengan cepat ditutup menggunakan enthellan sebagai media penutup dan diatur sedemikian rupa sehingga sampel berada pada posisi yang sesuai. Labelling sampel pada sisi kanan sampel yang berisi informasi mengenai nama preparat, macam preparat, metode, zat warna yang digunakan dan tanggal pembuatan yang ditulis singkat,padat dan jelas.
E. Hasil Pengamatan Gambar
Keterangan: a. Sieve tube (pembuluh)
a
M 40 x 10
b. Fibrosa
b
M 40 x 10
F. Pembahasan Dari praktikum yang telah dilakukan mengenai pembuatan preparat maserasi batang jati (Tectona grandis) yang memiliki struktur yang cukup keras membutuhkan waktu selama 35 hari maserasi. Sampel bisa melanjutkan ke tahapan selanjutnya ditandai melunaknya sampel tetapi tidak hancur dan batang yang mudah disuwir-suwir menjadi bagian yang lebih kecil
Preparat maserasi merupakan salah satu metode pembuatan preparat yang digunakan untuk melihat kenampakan sel secara utuh. Prinsip kerja dari teknik pembuatan ini adalah dengan cara memutuskan lamella tengah dari sel tumbuhan. Pemutusan lamella tengah bertujuan memisahkan bagian sel dengan sel lainnya sehingga sel bisa dilihat secara satuan utuh. Teknik ini sangat bermanfaat dan telah banyak penelitian dengan melakukan teknik ini untuk mengekstraksi suatu zat atau bagian tertentu dari sel tumbuhan. Organ yang digunakan adalah batang jati yang tidak terlalu tua dan juga tidak terlalu mudah. Karena apabila terlalu tua maka jaringan akan menjadi terlalu sulit untuk dilunakkan, sedangkan apabila terlalu muda strukturnya akan lebih mudah hancur dan kemungkinan jaringannya belum terbentuk dengan sempurna. Pada proses pembuatannya ditambahkan KOH 10 % dengan cara merebus batangnya selama 5 menit. Hal ini bertujuan untuk memisahkan pektin dalam jaringan sehinga mudah dipisahkan bagian keras penyusun batang. Maserator yang digunakan adalah campuran antara asam kromat 10% dan asam nitrat 10% yang mampu melunakkan bagian yang lunak dari jaringan yang ada pada batang jati, sedangkan bagian yang keras akan tetap bertahan. Cairan kloral hidrate dituangkan ke botol flakon lain dan sampel yang telah dimaserator kemudian cuci dalam air mengalir hingga sisa kloral hidrate hilang dan tidak mengganggu pada tahapan selanjutnya. Selain itu cairan kloral hidrate masih bisa digunakan kembali untuk sampel yang lain sehingga lebih efisien. Pewarnaan sampel cukup dengan sfaranin 1 % dalam alcohol 70% telah mampu mewarnai hingga sel trakeidnya. Tidak perlu menggunakan pewarna lain karena safranin mewarnai cukup kuat dengan warna merahnya. Agar maksimal maka lamanya pewarnaan adalah 24 jam sehingga zat warna benar-benar meresap ke dalam sel.
Bagian sel penyusun xylem sudah dapat terlihat dengan jelas, hanya saja preparat yang dibuat kurang tipis lagi dalam proses penyuwirannya sehingga masih terlalu banyak dan belum terpisah-pisah. Sieve tube (pembuluh) batang jati berbentuk memancang dengan ujung lancip. Selain itu, juga dapat ditemukan fibrosa yang masih terlihat berbentuk persegi panjang yang mengikat trakeid. Tidak ditemukannya bagian lain penyusun trakeid pada peraparat ini adalah karena terlalu tebalnya suwiran sehingga masih terlihat menumbuk satu sama lain. Untuk mmudahkan penyuwiran maka menggunakan jarum pentul. Tidak diperbolehkan menggunakan alat bantu yang terbuat dari kayu karena dikhawatirkan malah tertinggal di obyek glass sehingga menimbulkan kerancuan dalam menganalisis hasil sediaan. Agar preparat tidak gosong, maka ketika menyuwir dilakukan dengan cepat, teliti dan hati-hati sehingga jaringan tidak menghitam akibat teroksidasi oleh udara. Tterlalu lama berada diluar tanpa xylol dapat menyebabkan hitam dan sediaan menjadi sulit untuk diamati. Lamanya proses maserasi tidak hanya dipengaruhi oleh organ yang diambil, tetapi juga setiap spesies memiliki tingkat kesukaran yang berbeda-beda. Batang dikotil lebih lama dibandingkan batang monokotil. G. Simpulan Dari pembahasan berdasarkan hasil pengamatan preparat maserasi batang jati maka dapat disimpulkan bahwa: 1. Preparat maserasi batang jati (Tectona grandis) dapat dibuat dengan menggunakan metode Jeffrey dalam maserator khoral hidrate selama 32 hari. 2. Hasil analisis preparat maserasi batang jati (Tectona grandis) adalah sieve tube yang berbentuk lonjong dengan ujung lancip dan fibrosa. H. Saran 1. Sebaiknya melakukan proses penyuwiran dengan cepat, teliti dan hati-hati agar hasil suwiran lebih kecil seperti sehelai rambut, jelas dan terpisah-pisah bagiannya sehingga dapat dibedakan bagian-bagian trakeidnya secara mikroskopis. 2. Diusahakan menyuwir setipis mungkin hingga hamper tak terlihat secara kasat mata yang mengindikasikan bahwa sampel sudah terpisah dan tidak menumpuk. I. Daftar Pustaka
Sucipto, Tito. 2009. Struktur,Anatomi dan Identifikasi Jenis Kayu. Karya Tulis Ilmiah. Departemen Kehutanan Fakultas Pertanian Universitas Sumatera Utara. Rudyatmi, Ely. 2014. Mikroteknik . Semarang: Jurusan Biologi FMIPA Universitas Negeri Semarang
