Laboratorio de biología
Introducción
El ADN es la sustancia química donde se almacenan las instrucciones que dirigen el desarrollo de un huevo hasta formar un organismo adulto, que mantienen su funcionamiento y que permite la herencia. Es una molécula de longitud gigantesca, que está formada por agregación de tres tipos de sustancias a!"cares, llamados deso#irri$osas, el ácido fosfórico, y $ases nitrogenadas de cuatro tipos, la adenina, la guanina, la timina y la citosina. %os a!"cares y los ácidos fosfóricos se unen lineal y alternativamente, formando dos largas cadenas que se enrollan en hélice. %as $ases nitrogenadas se encuentran en el interior de esta do$le hélice y forman una estructura similar a los pelda&os de una escalera. 'e unen a las cadenas mediante un enlace con los a!"cares. (ada pelda&o está formado por la unión de dos $ases, formando los pares de $ases anteriormente mencionados) pero estos empare*amientos sólo pueden darse entre la adenina y la timina o entre la citosina y la guanina. %as secuencias +el orden en que se van poniendo+ que forman adenina, timina, citosina y guanina a lo largo de la cadena de ADN es lo que determina las instrucciones $iológicas que contiene. En el presente informe se mostraran los procedimientos que se reali!ó para o$tener el ADN de las células vegetales, en este caso el plátano
Objetivos
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dentificar la presencia de ADN -tili!ar unas sencillas técnicas para poder e#traer el ADN de un producto natural.
Procedimiento Experimental
A. Extracción de ADN del plátano - 'e cortó un tro!o de plátano y se depositó en un mortero con / ml de agua destilada. - se molió el plátano hasta que este quede como una pasta homogénea. - En un vaso de precipitado, se agregó 0/ ml de agua destilada y 1/ml de detergente, se agito con una varilla por unos minutos sin formar espuma. - 'e filtró la me!cla utili!ando el matra! 2itasato, el papel filtro y la $om$a de vacío.
Resultados:
Extracción ADN del plátano
Ilustración 1: Moliendo el plátano para romper la mayor de células posibles.
Ilustración 2: Utilizando el detergente en el plátano ya molido lo más posible para crear enlaces que ayuden a romper la pared celular y separar protenas y polisacáridos del !"#
Ilustración $: mezcla lista para proceder a la e%tracción del !"# libre de moléculas más grandes y sobrantes
Ilustración &: muestra en reposo
Ilustración ': !"# (isualizado con é%ito tras procedimientos y reposo de minuto
Pre!untas: ". 34ué método de lisis celular fue empleado5 - El método de lisis que fue empleado se llama hidrolisis alcalina ya que se utili!an detergentes anionicos presente en el producto 64ui#7. #. 3En la solución de lisis, qué efecto tiene la A8Nasa5 se usa A8Nasa para eliminar el A8N por hidrólisis y de esta manera nos aseguramos que la muestra solamente contenga ADN puro. $. 34ué efecto tiene las proteínas 25 - El efecto que tiene la proteínas 2 es el de eliminar proteínas.
%. Descri$a tres aplicaciones que pueda tener la preparación de ADN de una muestra de células o te*idos.
1. %isis de la mem$rana celular Esta es la primera etapa para la preparación de e#tracción del ADN, acá es donde ocurre la rotura de la mem$rana celular y nuclear, en eso la lisis provoca la disolución de lípidos que se puedan encontrar en la mem$rana nuclear y celular. . E#tracción la e#tracción es la segunda etapa de la purificación, aquí es donde se logran eliminar los polisacáridos que puedan arruinar la e#tracción, se logran separar para proceder a la "ltima etapa. 9. :recipitación en esta "ltima etapa se logra separar ADN del detergente, aquí es donde se utili!a la me!cla compuesta por cloruro de sodio y donde tam$ién puede utili!arse el etanol para una mayor purificación y finalmente poder ver el ADN e#traído.
Discusión
3:or qué el detergente sirve para la e#tracción del ADN5 :ara responder esto usaremos de referencia el e#perimento hecho, gracias al cual se pudo o$servar claramente la cromatina del plátano como peque&os hilitos enredados entre sí. ;racias a la función del detergente y del cloruro de sodio.
de una sustancia de la mem$rana, luego de esto, esta lisis act"a en la mem$rana celular como en n"cleo, y con el cloruro de sodio =Na(> se logra una purificación del ADN para o$tener una muestra de este sin ning"n tipo de alteración.
&onclusión
?inali!ando el informe y e#perimento, logramos comprender qué es el ADN y sus componentes, a su ve! en el procedimiento de la e#tracción del ADN de un plátano surgió la duda de por qué el detergente sirve para la e#tracción del ADN, una ve! terminado todo el proceso logramos ver paso a paso como ha sido el procedimiento y comprender que el detergente en fundamental para lograr la e#tracción del ADN celular, ya que sin su participación y composición química no se podrían crear enlaces fundamentales para la formación de la lisis, lisis que es la disolución de sustancias en el n"cleo y es esencial para el principio de la purificación del ADN y que este quede li$re de proteínas y polisacáridos, que a su ve! en este proceso lo ayuda el cloruro de sodio pero sin el detergente, este e#perimento no podría reali!arse por lo ya dicho. ?inalmente hemos podido visuali!ar el ADN del plátano con claridad y queda claro que cada componente tiene una tarea importante para lograrlo, pero todo parte por la ayuda del detergente.
Re'erencias:
+;uía de apuntes de $iología y la$oratorio de $iología. Autores @acarena alladares, :h.D en nutrición y Alimentos, Ana @aría Ahumada, %icenciada en educación, @agister en $iotecnología. Banya Neira, $ioquímico.
