Universidad Nacional Mayor de San Marcos (Universidad del Perú, DECANA DE AMÉRICA)
Facultad de Farmacia y Bioquímica Escuela Académico Profesional de Farmacia y Bioquímica LABORATORIO DE TOXICOLOGÍA Y QUÍMICA LEGAL 2007- I
DETERMINACIÓN ESPECTROFOTOMÉTRICA DE ETANOL EN SANGRE POR MICRODIFUSION ASIGNATURA
:
Toxicología oxicologí a y química legal
NÚMERO
:
6
INTEGRANTES
:
Cuenca Alfaro Jhudith Gerónimo Páez Xiomara Saldaña Mucching Maricielo Santos Álvaro Leslie
DOCENTE
:
LABORATORIO
:
José Alfonso Apesteguía JUEVES 10 a 2 pm
FECHA DE LA PRÁCTICA REALIZADA:
04-05-2017 - 10 a 2 pm
2017
DETERMINACIÓN ESPECTROFOTOMÉTRICA DE ETANOL EN SANGRE POR MICRODIFUSION
I.- INTRODUCCIÓN El alcohol etílico también conocido como etanol, alcohol vínico y alcohol de melazas, es un líquido incoloro y volátil de olor agradable, que puede ser obtenido por dos métodos principales: la fermentación de las azúcares y un método sintético a partir del etileno. La fermentación de las azúcares, es el proceso más común para su obtención a partir de macerados de granos, jugos de frutas, miel, leche, papas o melazas, utilizando levaduras que contienen enzimas catalizadoras que transforman los azúcares complejos a sencillos y a continuación en alcohol y dióxido de carbono. El alcohol diluído es utilizado en la elaboración de las bebidas o licores comerciales y la concentración para cada bebida suele expresarse en porcentaje de contenido alcohólico. El contenido de alcohol en las bebidas comerciales de mayor consumo en nuestro medio varía entre 8- 50 por ciento 1. El alcohol es una sustancia que actúa como depresora del SNC. Sus efectos son una consecuencia directa de su acción sobre las membranas celulares y sobre los neurotransmisores. Se potencian cuando el etanol se consume junto a otras drogas: sedantes, hipnóticos, anticonvulsionantes, antidepresivos, tranquilizantes, analgésicos, opiáceos, etc2. El alcohol produce tolerancia. Afecta el SNC, y produce además hipoglucemias, hepatitis aguda, trastornos cardíacos, rabdomiolisis, etc. El alcohol es probablemente la droga más antigua que se conoce 2. El alcohol etílico es la sustancia psicoactiva de uso más extendido y generalizado en el mundo. Junto con la nicotina ha sido la única droga permitida en casi todas las culturas y regiones geográficas, a excepción de los pueblos musulmanes para quienes la abstención es un deber religioso y un signo de distinción con las demás religiones 1. La Organización de Naciones Unidas a través de su oficina contra las drogas y el delito, en el informe presentado en abril de 2005 sobre las tendencias del consumo de drogas en el mundo, señala el alcohol etílico y la nicotina como las sustancias psicoactivas de mayor consumo en el mundo. Se estima que cerca del 40 por ciento de la población mundial (aproximadamente 2600 millones de personas) consumen en forma ocasional, abusiva o adictiva alcohol etílico, este consumo es aproximadamente 15 veces mayor que el consumo de todas las sustancias ilegales juntas 1. En esta revisión se determina espectrofotométricamente etanol en sangre por microdifusión.
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DETERMINACIÓN ESPECTROFOTOMÉTRICA DE ETANOL EN SANGRE POR MICRODIFUSION
II.- PARTE EXPERIMENTAL A) OBJETIVO DE LA PRACTICA • Realizar el análisis cuantitat ivo de etanol en una muestra de sangre mediante
el método de microdifusión. • Determinar la concentración de etanol por el método espectrofotométrico de microdifusion.
B) FUNDAMENTO DEL MÉTODO El ETOH es insoluble en soluciones saturadas de K2CO3, separándose de la M.P. (Sangre) y haciendo que flote sobre esta, debido a su menor densidad. Entonces el ETOH se difunde a través de la cámara de Conway y reacciona con la mezcla sulfocrómica (K2Cr2O7 al 0.1% en H2SO4 50% V/V- mezcla oxidante), donde el dicromato, de color rojo anaranjado, oxida el e tanol a acetaldehído y es reducido, a su vez, a cromo (III), de color verde, para luego poder ser medida la absorbancia en un espectrofotómetro UV.
C) MATERIALES, REACTIVOS Y EQUIPOS Reactivos: -
Solución sulfocrómica
-
K2CO3 10%
-
Solución de goma arábiga al 0,1%
-
Yoduro de potasio al 15%
Materiales: -
Tubos de ensayo de 15x100 de vidrio pirex
-
Pipetas graduadas terminales de vidrio pirex de 1, 2, 5 y 10 mL
-
Cámaras de Conway
-
Pipetas.
-
Probeta
Equipos: -
Estufa eléctrica
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D) PROCEDIMIENTO Dar de beber a una persona un vaso de vino (equivalente a 125mL) y después de 20 min extraer su sangre en un vial.
1.Colocar la muestra de sangre en el compartimiento externo. 2.Añadir 1mL de solución compartimiento interno.
sulfocrómica
en
el
3.Colocar base oleosa en los bordes de la placa Petri. 4.Añadir 1mL de K2CO3 10% sobre la sangre. 5.Tapar.
Llevar a 50°C de temperatura durante 2 min.
Vaciar la solución sulfocrómica en una probeta teniendo que llagar a 2mL.
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Luego llevar a una fiola de 10mL y enrasar. Preparar el reactivo blanco añadiendo 2mL de solución sulfocrómica a una fiola de 10mL y enrasar.
III.- RESULTADOS
Absorbancia de la MP
Absorbancia del Blanco
[mg OH-] = [Abs blco – Abs MP] [mg OH-] = 0.217 – 0.100
[mg OH-] = 0.117 mg/dL
Valore Normales de ETOH: menores de 0.30 mg/dL Valores legales ETOH: menores a 0,59 mg/dL del
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IV.- DISCUSIONES La concentración de alcohol etílico en sangre, resultó ser 0,117mg/dL, por lo que quiere decir, que la persona está dentro de los valores normales permitidos de alcohol ( < 0.30 mg/dl. Sin embargo, teoricamente le resultado debio ser mayor debido al consumo de vino 30min previo a la toma de muestra. Esto se puede explicar según Campos (2005) que manifiesta que la concentración de alcohol varía dependiendo del metabolismo de cada persona y la cantidad de fluido que se encuentre en su organismo, por ejemplo; una persona que se encuentre ligeramente deshidratada la concentración de alcohol en su sangre será mucho más elevada, es así que podría generar falsos positivos. 3 La cinética de absorción y eliminación tambien del alcohol en el organismo pueden estar disminuidos o aumentados en el momento en que se tomó la muestra en la sangre, por tal motivo la absorción depende de factores como la concentración del etanol, flujo sanguíneo al sitio de absorción, velocidad de la ingesta y alimentos. 4 Cantidades moderadas de alcohol si hubieran producido efectos bien conocidos como reducción de la normal inhibición que se suele ejercer sobre la conducta y el lenguaje, euforia, sentimiento de confianza en sí mismo y hacia los demás, disminución de la sensación de fatiga .5 Según la ley N° 27753 del Perú articulo 274 (4) sobre la conducción en estado de ebriedad o drogadicción, el paciente no debe exceder los 0.5 g/L si va a conducir, sin embargo como la paciente resulto con 0.177mg/dl de alcohol en sangre, este se encuentra dentro del rango permisible para poder conducir. 6
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V.- REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS 1. Téllez J, Cote M. ALCOHOL ETÍLICO: Un tóxico de alto riesgo para la salud humana socialmente aceptado. Revista de la Facultad de Medicina de la Universidad Nacional de Colombia, 2006. 54(1): 32-47 2. Roldán J, Frauca C, Dueñas A. Intoxicación por alcoholes. ANALES Sis San Navarra, 2003. 26(1): 129-139 3. CAMPOS, Manuel. Las nuevas tazas de intoxicación etílica. Ed. Tectnos, España, 2005, pg. 37. 4. Sifre R. Toxicología clínica. Primera ed. Valencia: PUV; 2004 5. Velasco A. Farmacología y toxicología del alcohol etílico, o etanol. Antonio Lavedan y la Real Academia de Cirugía de Valladolid, 2014. 51: 242-248 6. 4. Congreso de la República. Ley N° 27753. Lima. Perú. 2002
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