Deter!inar la presencia "e la enzi!a catalasa en "iersos te#i"os. Co!pro$ar el efecto "e la te!peratura so$re la actii"a" enzi!%tica. Co!pro$ar la acci&n 'i"rolítica "e la a!ilasa
7+ MARCO TE-RICO Reconocimiento 8e la catala4a (a catalasa es una enzi!a con un nu!ero ).)).).* antio+i"ante presente en la !ayoría "e los organis!os aero$ios. Cataliza la "is!utaci&n "el per&+i"o "e 'i"r&geno ,-/0 en agua y o+ígeno. (a !ayoría "e estas enzi!as son 'o!otetr%!eros con un grupo 'e!o en ca"a su$uni"a". Se 'a "eter!ina"o la estructura cristalogr%fica "e nuee catalasas. Algunas catalasas tienen su$uni"a"es peque1as ,!asa !olecular 2 *3 4Da0 y otras gran"es ,!asa !olecular 5 63 4Da0. Entre estos "os tipos "e catalasas e+isten "iferencias estructurales i!portantes. (as catalasas peque1as son !enos resistentes a la "esnaturalizaci&n7 unen 8ADP-7 tienen 'e!o $ y se in'i$en e inactian por sustrato. En ca!$io7 las catalasas gran"es tienen un "o!inio e+tra en el C9 ter!inal que es se!e#ante a la flao"o+ina7 son !uy resistentes a la "esnaturalizaci&n7 tienen 'e!o "7 presentan enlaces coalentes inusuales cercanos al sitio actio y son resistentes a concentraciones !olares "e -/. Aquí reisa!os los aspectos estructurales "e las catalasas y sus posi$les i!plicaciones funcionales.
Reacci9n 8e la catala4a -/
-/ / CA;A(ASA
"e4natrali;aci9n 8e la catala4a Me"iante esta e+periencia7 se estu"iar% la propie"a" "e "esnaturalizaci&n que tienen las proteínas y que consiste en la pér"i"a "e su estructura terciaria ,tri"i!ensional07 lo que afecta su funci&n. (a enzi!a catalasa7 al igual que otras proteínas7 se pue"e "esnaturalizar al e+ponerla a altas te!peraturas. Al per"er su estructura se per"er% ta!$ién la funci&n7 por lo que no po"r% "esco!poner el agua o+igena"a.
Amila4a (as a!ilasas son enzi!as que catalizan la 'i"r&lisis "e los polisac%ri"os7 tales co!o a!ilopectina7 a!ilosa7 gluc&genos y sus pro"uctos parcial!ente 'i"roliza"os. (a <9 a!ilasa ,a9)7=9glucan9=9glucano'i"rolasa7 E.C.>..).)0 se 'alla presente en los te#i"os y líqui"os "e ani!ales. Son !etaloenzi!as que contienen un !íni!o "e un %to!o "e calcio por !olécula y necesitan este !etal para e+presar sus actii"a"es catalíticas. E+isten otras a!ilasas co!a la ?9a!ilasa y la @9a!ilasa pero estas carecen "e interés clínico. En el 'o!$re la <9a!ilasa est% presente en el p%ncreas ,apro+i!a"a!ente 33 !g4g07 gl%n"ulas saliales7 'íga"o7 !Bsculo7 te#i"o a"iposo7 salia7 sangre7 orina7 'eces7 lec'e7 se!en7 ri1&n7 cere$ro7 pul!&n7 tro!pas "e falopio7 intestino7 $azo y ri1&n. (a <9a!ilasa presente en sangre y orina "e in"ii"uos nor!ales pre"o!inante!ente tiene un origen pancre%tico y salial. 8o se sa$e !uc'o so$re el !ecanis!o nor!al "e penetraci&n "e enzi!as pancre%ticas en la sangre. El incre!ento "e la actii"a" sérica "e la <9a!ilasa o$sera"a en las afecciones !%s co!unes "el p%ncreas7 se "e$e a un escape "e la enzi!a en el te#i"o intersticial y te#i"o peritoneal con !ayor a$sorci&n a traés "el siste!a linf%tico y enas.
Después "e la acci&n "e la a!ilasa reacci&n "e Ge'ling positia
*+ !ROCE"IMIENTO A+ Reconocimiento 8e la catala4a &+ Se coloca en un tu$o "e ensayo unos trocitos "e 'íga"o $+ Se a1a"e !l "e agua o+igena"a 7+ Se o$sera un intenso $ur$u#eo "e$i"o al "espren"i!iento "e o+ígeno. B+ "e4natrali;aci9n &+ Se coloca en un tu$o "e ensayo arios trocitos "e 'íga"o $+ Se a1a"e agua para 'erir la !uestra. -erir "urante unos !inutos 7+ Después "e este tie!po7 se retira el agua so$rante. <+ Se a1a"e el agua o+igena"a
?i8roli4i4 8el almi89n &+ Se to!an = tu$os "e ensayo nu!era"os "el ) al =. $+ Se a1a"e a ca"a tu$o !l "e una soluci&n "ilui"a "e al!i"&n 7+ A los tu$os > y = se a1a"e una peque1a canti"a" "e salia • •
En el tu$o ) se realiza la reacci&n "e Ge'ling En el tu$o se realiza la reacci&n "e (ugol. (os resulta"os son los espera"os para unos polisac%ri"os co!o el al!i"&n. (os tu$os > y = que contienen el al!i"&n7 al que le 'e!os ec'a"o la sala7 ponerlos en un aso "e precipitaci&n a $a1o María7 controla"o la te!peratura que no 'iera7 ya que lo que intenta!os7 es que la enzi!a "e la salia tra$a#e a unos >H IC. De#ar unos ) !inutos.
• •
A continuaci&n realizar las siguientes reacciones: En el tu$o nB!ero > se realiza la reacci&n "e Ge'ling En el tu$o nB!ero = se realiza la prue$a "e (ugol.
