4500-P PHOSPHORUS*#(204) 4500-P A. Introduction Introduction 1. Occurrence O fósforo ocorre em águas naturais e em efluentes quase que exclusivamente como fosfatos. Estes são classificados como ortofosfatos, fosfatos condensados (piro-, meta-e outros polifosfatos) e fosfatos ligados organicamente. Ocorrem em solução, em partículas ou detritos, ou nos corpos de organismos aquáticos. Estas formas de fosfato de surgir a partir de uma variedade de fontes. Pequenas quantidades de ortofosfato ou certos fosfatos condensados são adicionados a algumas fontes de água durante o tratamento. Grandes quantidades dos mesmos compostos compostos podem ser adicionados, quando a água é usada para a lavagem ou outros produtos de limpeza, pois estes materiais são os principais constituintes de muitas preparações de limpeza comerciais. Os fosfatos são amplamente utilizados no tratamento de águas de caldeira. Ortofosfatos aplicadas a terra cultivada agrícola ou residencial como fertilizantes são realizadas nas águas de superfície com escoamento tempestade e, em menor medida, com neve derretida. Fosfatos orgânicos são formados principalmente por processos biológicos. Eles são contribuiu para esgoto por resíduos do corpo e os resíduos de alimentos, e também pode ser formado a partir de ortofosfato em processos de tratamento biológico ou água através da recepção de biota. O fósforo é essencial para o crescimento de organismos organismos e pode ser o nutriente nutriente que limita a produtividade primária de um corpo de água. Nos casos em que o fosfato é um nutriente limitante do crescimento, a descarga de águas residuais em bruto ou tratada, t ratada, drenagem agrícola, ou certos resíduos industriais para que a água á gua possa estimular o crescimento de microrganismos aquáticos fotossintéticas e macrorganismos em quantidades de perturbação. Os fosfatos também ocorrer em sedimentos e em lamas biológicas, ambas as formas como inorgânicos precipitados e incorporado em compostos orgânicos.
2. Definição dos Termos As análises de fósforo incorporar duas etapas processuais gerais: (a +), a conversão da forma de fósforo de interesse para ortofosfato dissolvida, e (b) determinação colorimétrica do ortofosfato dissolvido. A separação de fósforo nas suas várias formas é definida analiticamente, mas as diferenciações analíticas foram selecionadas de modo que eles podem ser utilizados para fins de interpretação. A filtração através de um filtro de membrana de 0,45 mm de diâmetro de poro, separa dissolvido em suspensão a partir de formas de fósforo. Nenhuma reivindicação que é feita a filtração através de filtros de 0,45 mm é uma verdadeira separação de formas suspensos e dissolvidos de fósforo, é apenas uma técnica analítica conveniente e replicável projetado para fazer uma separação grosseira. A filtração por membrana é seleccionado durante a filtração de profundidade devido à maior probabilidade de se obter uma separação consistente de tamanhos de partículas. Pré-filtragem através de um filtro de fibra de vidro pode ser usado para aumentar a taxa de filtração. Fosfatos que respondem aos testes colorimétricos sem hidrólise preliminar ou digestão oxidativa da amostra são denominados'' fósforo reactivo.'' Embora fósforo reactivo é em grande parte uma medida de ortofosfato, uma pequena fracção de um fosfato condensado presente geralmente é hidrolisado inevitavelmente no procedimento. Fósforo reactiva ocorre em ambas as formas dissolvidas ou suspensas. A hidrólise ácida à temperatura de ebulição da água dissolvida e em suspensão converte fosfatos condensados para ortofosfato dissolvido. A hidrólise liberta inevitavelmente algum fosfato a partir de compostos orgânicos, mas este pode ser reduzido a um mínimo por seleção judiciosa de força do ácido e do tempo de hidrólise e da temperatura. O termo'' ácido hidrolisável fósforo'' é preferido sobre'''' fosfato condensado para esta fracção. As frações de fosfato que são convertidos para ortofosfato apenas pela destruição de oxidação da matéria orgânica presente são consideradas orgânica'''' ou'''' fósforo ligado organicamente. A gravidade da oxidação necessário para esta conversão depende da forma e, em certa medida, da quantidade, do fósforo orgânico presente. Como fósforo reactivo e fósforo ácido hidrolisável, fósforo orgânico ocorre tanto nas fracções dissolvidos e suspensos. Os teores de fósforo total, bem c omo as fracções de fósforo dissolvidos e suspensos cada um pode ser dividida em três analiticamente tipos químicos que foram descritos: reactivo, ácido hidrolisável, e orgânicos de fósforo. Figura 4.500-P: 1 mostra os passos para a análise de frações individuais. Tal como indicado, as determinações são realizadas geralmente apenas nas amostras não filtradas e filtrada. Suspenso fracções são geralmente determinadas por diferença, no entanto, podem ser determinados directamente por digestão do material retido num filtro de fibra de vidro. 3. Selecção do método a. Métodos Digestão: Porque fósforo podem ocorrer em associação com orgânico questão, um método para determinar a digestão total de fósforo deve ser capaz de oxidar a matéria orgânica de forma eficaz para libertar o fósforo como ortofosfato. Três métodos de digestão são apresentados na secção 4500-PB3, Seção 4500-PB4 e Seção 4500-PB5. O método de ácido perclórico, o método mais drástico e demorado, é recomendado apenas para amostras particularmente difíceis, tais como sedimentos. O método de ácido sulfúrico-ácido nítrico é recomendada para a maioria das amostras. De longe, o método mais simples é a técnica de oxidação de persulfato. Persulfato de oxidação é acoplado com luz ultravioleta durante uma digestão mais eficiente num automatizado em linha de digestão / determinação por análise de injecção de fluxo (4500-PI). Recomenda-se que métodos de oxidação de persulfato ser verificado contra uma ou mais das técnicas de digestão mais drásticas e ser adoptadas se recuperações idênticos são obtidos. Após a digestão, determinar ortofosfato liberado byMethod C, D, E, F, G, ou H. O método colorimétrico usado, ao invés do procedimento a digestão, regula em matéria de interferência e concentração mínima detectável.
b. Método M étodo colorimétrico: Três métodos de determinação ortofosfato são descritos. Seleção depende em grande parte da faixa de concentração de ortofosfato. O método do ácido vanadomolybdophosphoric (C) é mais útil para as análises de rotina na gama de 1 a 20 mg P / L. O método de cloreto de estanho (D) ou o método do ácido ascórbico (E) é mais adequada para o intervalo de 0,01 a 6 mg P / L. Um passo de extracção é recomendada para os níveis mais baixos desta gama, quando interferências deve ser superada. Versões automatizada do método do ácido ascórbico (F, G, e H) são também apresentados. Uma atenção cuidadosa ao procedimento pode pode permitir a aplicação destes métodos para níveis muito baixos baixos de fósforo, tais como aqueles encontrados em água doce intacto. Cromatografia de íons (Seção 4110) e eletroforese capilar de íons (Seção 4140) são úteis para a determinação de ortofosfato em amostras não digeridas.
4. Precisão e Bias Para ajudar na selecção do método, Tabela P-4500: I apresenta os resultados da várias combinações de digestão, hidrólise e técnicas colorimétricas dos três amostras sintéticas das composições composições seguintes: Amostra 1: 100 mg de fósforo orthosphosphate (PO43 - P / L), 80 mg de fósforo, fosfato condensado / L (hexametafosfato de sódio), 30 mg de fósforo orgânico / L (ácido adenílico), 1,5 mg de N-NH3 / l, 0,5 mg de NO3 -N / L, e 400 mg Cl-/ L. Exemplo 2: 600 mg de PO43 - P / L, 300 mg de fósforo, fosfato condensado / L (hexametafosfato de sódio), 90 mg de P / L (ácido adenílico) orgânico, 0,8 mg de N-NH3 / l, 5,0 mg de NO3 - / L, e 400 mg mg Cl-/ L. Amostra 3: 7,00 mg mg PO43 - P / L, 3,00 mg de fosfato condensado de fósforo / L (hexametafosfato de sódio), 0,230 mg de fósforo orgânico / L (ácido adenílico), 0,20 mg de N-NH3 / L, 0,05 mg de NO3 / L, e 400 mg Cl-/ L. 5. Amostragem e Armazenamento Se as formas de fósforo dissolvidos devem ser diferenciada da amostra, filtro imediatamente após coleção. Preserve pelo congelamento igual ou inferior a -10 ° C. Em alguns casos, HgCl2 40 mg / L podem ser adicionados às amostras, especialmente quando estão a ser armazenado por longos períodos, antes da análise. ATENÇÃO: HgCl2 é uma substância perigosa, tomar as precauções adequadas na disposição, uso de HgCl2 não é incentivado. Não adicionar ácido ou CHCI3 como conservante phosphorusforms phosphorusforms quando tiverem de ser determinados. Se o total de fósforo é o único a ser determinado, adicionar H2SO4 ou HCl para pH <2, e arrefecer a 4 ° C, ou por congelamento sem quaisquer adições. Não armazene amostras contendo baixas concentrações de fósforo em garrafas de plástico, a menos mantida em um estado congelado porque os fosfatos podem ser absorvidos nas paredes de garrafas de plástico. Lave todos os recipientes de vidro com HCl diluído quente, em seguida, lavar várias vezes em água reagente. Nunca use detergentes comerciais contendo fosfato de vidro de limpeza usados na análise de fosfato. 4500-P B. Preparação da amostra Para obter informações sobre a seleção do método de digestão (¶ s 3 a 5 abaixo), ver 4500P.A.3a. 1. Filtração preliminar Amostras de filtro para determinação de fósforo reativo dissolvido, dissolvidos ácido fósforo-hidrolizável, e fósforo total dissolvido através de filtros de membrana de 0,45 mm. Um filtro de fibra de vidro pode ser utilizado para pré-filtrar amostras difíceis de filtrar. Lave filtros de membrana por imersão em água destilada antes de usar, pois eles podem contribuem com quantidades significativas de fósforo para amostras contendo baixas concentrações de fosfato. Use uma das duas técnicas de lavagem: (a) absorver 50 filtros em 2 L de água destilada por 24 h, (b) absorver 50 filtros em 2 L de água destilada por 1 h, mudar água destilada e mergulhe filtros um adicional de 3 h. Os filtros de membrana também podem ser lavados, executando várias porções de 100 ml de água destilada através deles. Este procedimento requer determinação mais frequente dos valores em branco para garantir a consistência na lavagem e avaliar diferentes lotes dos filtros. 2. Hidrólise Ácida preliminar O teor de fósforo, ácido hidrolisável da amostra é definida operacionalmente como a diferença entre o fósforo reactivo tal como medido na amostra não tratada e fosfato encontrado após hidrólise ácida suave. Geralmente, ele inclui fosfatos condensados, tais como piro-, tripoly-, e as espécies de peso molecular mais elevado, tais como hexametafosfato. Além disso, algumas das águas naturais contêm compostos orgânicos de fosfato que são hidrolisados para ortofosfato nas condições do ensaio. Os polifosfatos geralmente não respondem a testes de fósforo reactivos, mas pode ser hidrolisado por ebulição com ortofosfato ácido. Após a hidrólise, o fósforo reactivo determinar por um método colorimétrico (C, D, ou E). Interferências de precisão, sensibilidade e diagonais, dependerá do método colorimétrico usado. a. Aparelho: Autoclave ou panela de pressão, capaz de operar a 98-137 kPa. b. Reagentes: 1) solução aquosa de i ndicador de fenolftaleína. 2) uma solução de ácido forte: Adiciona-se lentamente 300 mL de H2SO4 concentrado a cerca de 600 mL de água destilada água. Quando esfriar, adicione 4,0 mL de HNO3 concentrado e diluir para 1 L. 3) hidróxido de sódio, NaOH 6N. c. Procedimento: Para 100 mL de amostra, ou uma porção diluída para 100 ml, adicionar 0,05 ml (1 gota) uma solução de fenolftaleína. Se uma cor vermelha desenvolve, adicionar solução de ácido forte gota a gota, para apenas descarregar a cor. Em seguida, adicione 1 mL mais.
Ferver lentamente durante pelo menos 90 minutos, a adição de água destilada para manter o volume entre 25 e 50 mL. Alternativamente, o calor, durante 30 min numa autoclave ou panela de pressão a 98-137 kPa. Deixar arrefecer e neutralizar com uma cor rosada, com uma solução de NaOH, e para restaurar o volume de 100 mL original com água destilada. Prepara-se uma curva de calibração através da realização de uma série de padrões com ortofosfato (ver método colorimétrico E C, D, ou a) através do passo de hidrólise. Não utilizar padrões sem hidrólise de ortofosfato, porque os sais adicionados na hidrólise causar um aumento na intensidade da cor, em alguns métodos. Determinar o teor de fósforo reactivo de parcelas tratadas, utilizando o Método C, D ou E. Isto dá a soma de polifosfato e ortofosfato na amostra. Para calcular o teor de fósforo de ácido hidrolisável, determinar o fósforo reactivo numa parte da amostra que não foi hidrolisado, utilizando o mesmo método colorimétrico como para a amostra tratada, e subtrair. 3. Digestão Ácido perclórico a. Aparelho: 1) placa quente: A 30 - × superfície de aquecimento de 50 cm é suficiente. 2) Proteção de Segurança. 3) Óculos de segurança. 4) frascos de Erlenmeyer, de 125 ml, lavou-se com ácido e lavou-se com água destilada. b. Reagentes: 1) O ácido nítrico, HNO3, conc. 2) O ácido perclórico, HClO4 × 2H2O, comprado como 70 a 72% HClO4, reagente grau. 3) hidróxido de sódio, NaOH 6N. 4) solução do indicador alaranjado de metila. 5) solução aquosa de indicador de fenolftaleína. c. Procedimento: misturas ATENÇÃO-aquecidos da matéria HClO4 e orgânicos podem explodir violentamente. Evitar este perigo, tomando as seguintes precauções: (a) Não adicionar HClO4 a uma solução quente que podem conter matéria orgânica. (B) sempre iniciar a digestão das amostras que contêm matéria orgânica com HNO3. A digestão completa com a mistura de HNO3 e HCIO4. (C) Não fume com HClO4 em capuzes comuns. Use capuzes especialmente construídos para HClO4, fumante ou um eradicator vidro fume * # (205) ligado a uma bomba de água. (D) Nunca deixe as amostras serem digeridos com HClO4 evaporar à secura. Medida da amostra contendo a quantidade desejada de fósforo (isto será determinado pelo facto de o método C, D, ou E é para ser utilizado) num frasco erlenmeyer de 125 mL. Acidifica-se a metil-laranja com HNO3 conc, adicionar mais 5 mL de HNO3 concentrado, e evaporar num banho de vapor ou uma placa quente a 15 a 20 ml. Adicionam-se 10 mL de cada vez de ácido clorídrico cone HNO3 e HCIO4 para o balão volumétrico de 125 ml, arrefecendo o frasco entre as adições. Adicione algumas de ebulição, o calor em uma chapa quente e evaporar lentamente até fumos brancos densos de HClO4 apenas aparecer. Se a solução não é clara, cobrir o pescoço do frasco com um vidro de relógio e manter solução quase fervente até que ele limpa. Se necessário, adicione mais 10 mL HNO3 para ajudar oxidação. Solução legal digerido e adicionar uma gota de solução de fenolftaleína aquoso. Adicionar solução de NaOH 6N até que a solução só fica rosa. Se necessário, o filtro solução neutralizada liberalmente filtrar e lavar com água destilada. Completar a 100 ml com água destilada. Determinar o PO4 3 - teor de P da amostra tratada byMethod C, D ou E. Prepare uma curva de calibração, através da realização de uma série de normas que contêm ortofosfato (ver Método E C, D, ou) até a etapa de digestão. Não use padrões ortofosfato sem tratamento. 4. Digestão Ácido sulfúrico ácido nítrico a. Aparelho: 1) A digestão rack: Um rack digestão eletricamente ou aquecido a gás c om provisão para Recomenda retirada dos fumos. Cremalheiras Digestão típicos daqueles utilizados para a micro-Kjeldahl digestões são adequados. 2) Micro-kjeldahl frascos. b. Reagentes: 1) O ácido sulfúrico, H2SO4 conc. 2) O ácido nítrico, HNO3, conc. 3) solução aquosa indicador fenolftaleína. 4) de hidróxido de sódio, NaOH, 1N. c. Procedimento: Em um balão de micro-Kjeldahl, medir uma amostra contendo o desejado quantidade de fósforo (isto é determinado pelo método colorimétrico utilizado). Adicionar 1 mL de H2SO4 concentrado e 5 mL HNO3 conc. Digerir a um volume de 1 mL e, em seguida, continuar até que a solução se torna incolor para remover HNO3. Arrefecer e adicionar cerca de 20 ml de água destilada, 0,05 mL (1 gota) indicador fenolftaleína, e tanto uma solução de NaOH 1N como necessária para produzir uma coloração rosada. Transferir solução neutralizada, filtragem, se necessário, para remover o material em partículas ou turbidez, para um balão volumétrico de 100 ml. Adicionar lavagem do filtro no ba lão da amostra e ajustar o volume para 100 ml com água destilada. Determinar fósforo by Method C, D ou E, em que uma curva de calibração separado foi construído através da realização padrões através do procedimento de digestão ácida. 5. Método de digestão de persulfato a. Aparelho: 1) placa quente: A 30 - × superfície de aquecimento de 50 cm é suficiente. 2) Autoclave: Uma panela de pressão ou autoclave capaz de desenvolver 98-137 kPa pode
ser usado no lugar de uma placa quente. 3) colher de vidro, para manter quantidades necessárias de cristais de persulfato. b. Reagentes: 1) solução aquosa de indicador de fenolftaleína. 2) solução de ácido sulfúrico: adicionar cuidadosamente 300 mL de H2SO4 concentrado a aproximadamente 600 mL água destilada e diluído para 1 L com água destilada. 3) persulfato de amónio (NH4) 2S2O8, persulfato de sólidos, ou de potássio, K2S2O8, sólido. 4) de hidróxido de sódio, NaOH, 1N. c. Procedimento: Utilizar 50 mL ou uma porção adequada da amostra homogeneizada. Adicionar 0,05 ml (1 gota) uma solução de fenolftaleína. Se uma cor vermelha desenvolve, adicione gota a gota solução de H2SO4 apenas descarregar a cor. Em seguida, adicione 1 mL de solução de H2SO4 e ou 0,4 g sólido (NH4) 2S2O8 ou 0,5 g sólida K2S2O8. Ferver lentamente sobre uma placa quente para pré-aquecido de 30 a 40 minutos ou até um volume final de 10 ml é atingida. Os compostos organofosforados tais como AMP podem requerer tanto como 1,5 a 2 h para a digestão completa. Cool, diluída para 30 mL com água destilada, adicionar 0,05 mL (1 gota) solução do indicador fenolftaleína e neutralizar para uma cor rosada com NaOH. Alternativamente, o calor, durante 30 min numa autoclave ou panela de pressão a 98-137 kPa. Cool, adicionar 0,05 mL (1 gota) solução do indicador fenolftaleína e neutralizar para uma cor rosada com NaOH. Completar a 100 ml com água destilada. Em alguns exemplos pode formarse um precipitado, nesta fase, mas não se filtrar. Para qualquer subseqüente subdivisão da amostra, agite bem. O precipitado (o que é possivelmente um fosfato de cálcio) redissolve sob as condições ácidas do ensaio colorimétrico de fósforo reactivo. Determinar fósforo byMethod C, D ou E, em que uma curva de calibração separado foi construído através da realização padrões através do procedimento de digestão de persulfato.
4500-P D. Método de cloreto estanoso 1. Discussão Geral a. Princípio: ácido molibdofosfórico é formada e reduzida em cloreto estanoso para azul de molibdênio intensamente colorido. Este método é mais sensível do que o método C e faz medições viáveis até 7 mg P / L através da utilização de uma maior comprimento do percurso da luz. Abaixo de 100 mg P / L de uma etapa de extração podem aumentar a confiabilidade e reduzir a interferência. b. Interferência: Ver Seção 4500-P.C.1b. c. Concentração mínima detectável: A concentração mínima detectável é de cerca de 3 mg de P / L. A sensibilidade a 0,3010 absorvância é de cerca de 10 mg de P / L para uma mudança de absorvância of0.009. 2. aparelho O mesmo aparelho é necessário que para o Método C, excepto que uma lâmpada de pipetagem é necessário para o passo de extracção. Conjunto espectrofotómetro a 625 nm, na medição de extractos de benzeno-isobutanol e a 690 nm para as soluções aquosas. Se o instrumento não está equipado para ler a 690 nm, use um comprimento de onda de 650 nm, em solução aquosa, com uma sensibilidade um pouco reduzida e precisão. 3. Reagentes a. Solução aquosa de fenolftaleína. b. Solução de ácido forte: Prepare conforme indicado na Secção 4500-PB2b2). c. Reagente molibdato de amónio I: Dissolver 25 g de (NH4) 6Mo7O24 x 4H2O em 175 ml água destilada. Cautelosamente, adicionar 280 mL de H2SO4 conc 400 mL de água destilada. Cool, adicionar solução de molibdato e diluir para 1 L. d. Reagente de cloreto de estanho I: Dissolver 2,5 g fresco SnCl2 × 2H2O em 100 mL de glicerol. Aquecer a mistura em banho de água e agita-se com uma vareta de vidro para acelerar a dissolução. Este reagente é estável e não requer nem conservantes ou armazenamento especial. e. Solução de fosfato padrão: prepare conforme indicado na Secção 4500-PC3e. f. Reagentes para extração: 1) solvente benzeno-isobutanol: Misturar volumes iguais de benzeno e álcool isobutil. (ATENÇÃO-O solvente é altamente inflamável). 2) Molibdato de amónio reagente II: Dissolve-se 40,1 g de (NH4) 6Mo7O24 x 4H2O em cerca de 500 mL de água destilada. Lentamente, adicionar 396 mL de molibdato de amônio I. reagente fresco e diluir a 1 L. 3) solução de ácido sulfúrico alcoólica: Juntar com cuidado 20 mL de H2SO4 conc 980 mL de álcool metílico com agitação contínua. 4) cloreto estanoso Diluir reagente II: Mistura 8 ml de reagente de cloreto estanoso I com 50 ml glicerol. Este reagente é estável durante pelo menos 6 meses. 4. Procedimento a. Tratamento da amostra preliminar: Para 100 mL de amostra contendo no máximo 200 mg P e livres de cor e turbidez, adicionar 0,05 mL (1 gota) indicador fenolftaleína. Se a amostra fica rosa, adicione solução de ácido forte gota a gota, para descarregar a cor. Se for necessário mais de 0,25 ml (5 gotas), dê uma pequena amostra e diluir para 100 mL com água destilada após a primeira descarga da corde-rosa com ácido. b. O desenvolvimento da cor: adicionar, com mistura cuidadosa após cada adição, 4,0 mL de reagente de molibdato de I e de 0,5 ml (10 gotas) em cloreto estanoso reagente I. Taxa de desenvolvimento da cor e da intensidade da cor dependem da temperatura da solução final, cada 1 ° C de aumento produzindo cerca de 1% de aumento na cor. Por isso, mantêm a s amostras, padrões e reagentes dentro de 2 ° C, de um ao outro e numa gama de temperaturas entre 20 e 30 ° C.
c. Medição de cor: Após 10 min, mas antes de 12 min, utilizando o mesmo lapso de tempo determinado para todas as determinações de cor medida por fotometria a 690 nm e de comparação com uma curva de calibração, utilizando um branco de água destilada. Comprimentos de percurso de luz adequados para várias gamas de concentração são expressos como se segue: curva de calibração, utilizando um branco de água destilada. Comprimentos de percurso de luz adequados para várias gamas de concentração são expressos como se segue:
Sempre execute um espaço em branco em reagentes e água destilada. Porque a cor de primeiro se desenvolve progressivamente e depois desaparece, manter a igualdade de condições de tempo para amostras e padrões. Preparar pelo menos um padrão com cada conjunto de amostras ou uma vez em cada dia em que os testes são realizados. A curva de calibração pode desviar-se uma linha reta nas concentrações superiores da faixa de 0,3 a 2,0 mg / L. d. Extracção: Quando sensibilidade aumentada é desejada ou interferências deve ser superado, extrair o fosfato do seguinte modo: Pipetar uma amostra de 40 ml, diluiuse uma ou a esse volume, num funil de separação de 125 mL. Adicionar 50,0 ml de solvente de benzeno-isobutanol e 15,0 mL de reagente de molibdato II. Feche funil de uma só vez e agitar vigorosamente durante exactamente 15 s. Se o fosfato condensado estiver presente, qualquer atraso irá aumentar a sua conversão em ortofosfato. Remover rolha e com 25,0 mL de sorteio camada orgânica separada, utilizando uma pipeta com lâmpada de segurança. Transfira para um balão volumétrico de 50 mL, adicionar 15-16 mL solução alcoólica H2SO4, redemoinho, adicionar 0,50 mL (10 gotas) diluir o reagente cloreto de estanho II, redemoinho, e diluir até à marca com H2SO4 alcoólica. Misture bem. Depois de 10 min, mas antes de 30 min, leia frente ao Branco a 625 nm. Prepare branco através da realização de 40 mL de água destilada pelo mesmo procedimento utilizado para a amostra. Leia a concentração de fosfato de uma curva de calibração preparada tomando padrões de fosfato conhecidos através do mesmo procedimento utilizado para as amostras. 5. cálculo Calcular como se segue: a. Procedimento direto:
b. Procedimento de extração:
4500-P E. Ascorbic Acid Method 1. General Discussion a. Princípio: molibdato de amônio e tartarato de potássio antimonial reagir em ácido meio com ortofosfato para formar um heteropoli-ácido fosfomolibdico-ácido que é reduzido para o azul de molibdénio intensamente colorido por ácido ascórbico. b. Interferências: Arseniatos reagir com o reagente molibdato de produzir uma cor azul semelhante ao que se formou com fosfato. Concentrações tão baixas quanto 0,1 mg A / G interfere com a determinação de fosfato. Crómio hexavalente e NO2interfere para dar resultados baixos de cerca de 3% a concentrações de 1 mg / L e 10 a 15% a partir de 10 mg / L. Sulfeto (Na2S) e silicato não interferem, em concentrações de 1,0 e 10 mg / L. c. Concentração mínima detectável: aproximadamente 10 mg P / L. P gamas são como se segue:
2. aparelho a. Equipamento colorimétrico: Um dos seguintes é necessário: 1) Espectrofotómetro de infravermelhos com fototubo para uso em 880 nm, proporcionando um percurso de luz de 2,5 cm ou mais longas. 2) Filtro de fotómetro, equipado com um filtro de cor vermelha e um percurso de luz de 0,5 cm ou mais longas. b. Vidro Acid-lavada: Consultar a Secção 4500-P.C.2b. 3. reagentes a. Ácido sulfúrico, H2SO4 5N: Diluir 70 ml de H2SO4 conc para 500 mL com água destilada. b. Solução de tartarato de antimonial potássio: dissolver 1,3715 g K (SBO) C4H4O6 × 1/2H2O em 400 mL de água destilada em um balão volumétrico de 500 mL e diluir ao volume. Armazenar em garrafa de vidro com rolha.
c. Solução de molibdato de amônio: Dissolver 20 g (NH4) 6Mo7O24 × 4H2O em 500 mL água destilada. Guarde em um frasco de vidro c om rolha. d. Ácido ascórbico, 0,1 M: Dissolver 1,76 g de ácido ascórbico em 100 ml de água destilada. O solução é estável durante cerca de 1 semana a 4 ° C. e. Reagente Combinado: Misture os reagentes acima referidos, nas seguintes proporções em 100 mL do reagente combinado: 50 ml de H2SO4 5N, 5 mL de solução de tartarato de potássio antimonial, 15 mL de solução de molibdato de amónio, solução de ácido ascórbico e 30 mL. Misturar após a adição de cada reagente. Deixe todos os reagentes atingirem a temperatura ambiente antes de serem misturados e misture na ordem dada. Se as formas de turbidez no reagente combinado, agite e deixe repousar por alguns minutos até que a turbidez desaparece antes de prosseguir. O reagente é estável durante 4 h. f. Solução de fosfato: Ver Seção 4500-PC3e. g. Solução padrão de fosfato: Diluir 50,0 mL de solução de fosfato de estoque a 1000 ml com água destilada, 1,00 mL = 2,50 mg P. 4. Procedimento a. Tratamento da amostra: Pipetar 50,0 ml da amostra para um tubo de ensaio limpo e seco ou 125 mL erlenmeyer. Adicionar 0,05 mL (1 gota) indicador fenolftaleína. Se uma cor vermelha desenvolve add H2SO4 5N solução gota a gota para apenas descarregar a cor. Adicionar 8,0 mL de reagente combinado e misture bem. Após pelo menos 10 minutos, mas não mais do que 30 minutos, medida a absorvância de cada amostra a 880 nm, utilizando um branco de reagente como a solução de referência. b. Correção de turbidez ou interferir cor: Natural de água geralmente não interfere com o elevado comprimento de onda utilizado. Para as águas altamente colorido ou turvo, preparar uma peça em bruto por adição de todos os reagentes excepto o ácido ascórbico e tartarato de potássio antimonial à amostra. Subtrair a absorvância do branco da absorvância de cada amostra. c. Preparação da curva de calibração: Preparar as curvas de calibragem individuais de uma série de seis padrões dentro da fosfato intervalos indicados na ¶ 1c acima. Usar um branco de água destilada, com o reagente combinado para fazer leituras fotométricos para a curva de calibração. Plot absorbância vs concentração de fosfato para dar uma linha reta passando pela origem. Teste, pelo menos, um padrão de fosfato com cada conjunto de amostras. 5. Calculation
6. Precisão e Bias Os valores de precisão e viés apresentados na Tabela 4500-P: I são para um procedimento de solução única dada na 13 ª edição. O presente processo difere em proporções de reagentes para amostras, sem adição de solvente, e condições de acidez. Ele é superior em termos de precisão e de polarização com a técnica anterior, na análise de ambos água destilada e água de rio no nível de 228 mg de P / L (Tabela P-4500: II).
