DETERMINACION DE LA HEMOGLOBINA Y HEMATOCRITO EN SANGRE. RECUENTO DE ERITROCITOS.
1. INTRODUCCION La hemoglobina es una de las variables de mayor importancia dentro de la biometría hemática, se mide en gramos por decilitro (g/dL), lo que representa la cantidad de esta proteína por unidad de volumen. Sus cifras normales o de referencia son variables, y dependen de la edad, sexo, raza, altitud sobre el nivel del mar (snm) del lugar de residencia, ocupación, entre otras variables 1. Algunos autores, refieren que el nivel de hemoglobina hemoglobina sanguínea sanguínea define la existencia de anemia, y que sólo en presencia de valores inferiores a los parámetros “normales” puede aseverarse la presencia de esta enfermedad. Sin embargo, existen algunos tipos de anemia en los que exi ste “hemoglobina normal” como la presente en el choque hipovolémico. 1 Las diferencias raciales son importantes al hablar de cifras de hemoglobina; los individuos
afroamericanos
clínicamente
sanos
presentan
concentraciones
inferiores cuando se les compara con sujetos de raza blanca. Esta diferencia se atribuyó inicialmente a dietas deficientes en hierro 2; sin embargo, eventualmente se descubrió que las personas de raza
negra poseen niveles séricos de
transferrina más elevados en comparación con las de raza blanca, lo que se traduce en concentraciones menores de hemoglobina 3. Sobre la influencia de la edad, se ha demostrado que el nivel de hemoglobina sanguínea aumenta desde la infancia hacia la adolescencia 4, y que la concentración de hemoglobina puede ser normal en adultos mayores que presentan anemia clínica, esto debido a alteraciones hepáticas propias del envejecimiento 5. Por otra parte, el hematocrito, que expresa el porcentaje aproximado que representa el volumen de células dentro del volumen de sangre, es otra variable de la biometría hemática que ayuda a definir el estado de salud de una persona, y
al igual que la hemoglobina, sus cifras están influenciadas por la edad, el sexo y la geografía, entre otras variables 5. En cuanto al recuento de hematíes (número de hematíes/ mm3) también constituye uno de los índices eritrocitarios primarios empleados para evaluar la normalidad, anemia o policitemia de un paciente. 6 En diversos estudios se ha establecido que este parámetro presenta variaciones entre las personas, es así que los hombres presentan un recuento eritrocitario mayor que el de las mujeres,
7
el promedio del recuento eritrocitario va disminuyendo con la edad hasta los 20 años en donde estabiliza, también se muestran variaciones en función al área geográfica en donde se realice el estudio. 8
2. RESUMEN En el presente trabajo se realizó la toma de muestras de sangre venosa de dos estudiantes de medicina de cuarto año, y se analizó los niveles de hemoglobina y hematocrito en sangre, y el posterior recuento de eritrocitos.
3. PROBLEMA ¿Existe diferencias en el valor de hemoglobina, hematocrito y en el recuento de eritrocitos
de
dos alumnos de diferente sexo que cursan el cuarto año de
medicina en la facultad de Medicina de la Universidad Nacional de Trujillo?
4. HIPÓTESIS:
Sí existen diferencias en el valor de hemoglobina, hematocrito y en el recuento de eritrocitos
de
dos alumnos de diferente sexo que cursan el cuarto año de
medicina en la facultad de Medicina de la Universidad Nacional de Trujillo.
5. OBJETIVOS:
Objetivo General: o
Determinar las diferencias en el valor de hemoglobina, hematocrito y en el recuento de eritrocitos de dos alumnos de diferente sexo que cursan el cuarto año de medicina en la facultad de Medicina de la Universidad Nacional de Trujillo.
Objetivo Específicos: o
Realizar de manera correcta la toma de muestras de sangre venosa.
o
Realiza de manera correcta el cálculo de la hemoglobina y hematocrito.
o
Realizar de manera correcta el recuento de eritrocitos en sangre.
6. MATERIALES Y EQUIPOS:
Jebe látex tubular.
Agujas N° 21.
Guantes descartables
.
Algodón.
Camara de Neubauer, para recuento
Alcohol iodado.
Frascos
pequeños
de
eritrocitos.
Boquillas
Microscopio
Gradilla y tubos de ensayo
con
anticoagulante (EDTA).
Tubos de ensaye 13x100
Micropipeta
Espectrofotómetro.
Capilares para hematocrito.
Tabla
para
hematocrito.
lectura
de
7. METODOS: Extracción de sangre venosa: 1. Tener listo materiales a utilizar (aguja, guantes, jebe, etc.). 2. Desinfectar con alcohol el área de punción. 3. Realizar torniquete con el jebe de látex en el brazo. 4. Palpar vena superficiales mayores para la punción respectiva (donde la vena sea más notoria). 5. Recoger la sangre en un frasco con EDTA. 6. Retirar el jebe. 7. Retirar aguja. 8. Colocar algodón con alcohol y pedir que se haga presión en ese lugar para evitar sangrado (en caso de que sea en antebrazo, flexionar). 9. Desechar materiales utilizados. 10. Etiquetar muestra.
Determinación de la Hemoglobina en sangre:
Reactivo: o
Bicarbonato de sodio: 1,0 gr.
o
Cianuro de K:
0,05gr.
o
Ferricianuro de K:
0,2 gr.
o
Agua destilada C.S.P: 1,000ml
Muestra: o
Sangre venosa con antigoagulante (EDTA)
Procedimiento: En un tubo de prueba se colocó el reactivo (5ml) y la sangre (medida con la micropipeta 0,02ml). Se enjuago bien la boquilla utilizada con la solución reactiva varias veces (aspirando y expulsando). Se mezcló bien y se dejó en repodo de 5 a 10 minutos, luego se leyó en el espectrofotómetro a 540mm, usando el mismo reactivo como blanco de lectura. Se tomó datos de la hemoglobina en sangre de ambos estudiantes.
Determinación del hematocrito:
Muestra o
Sangre venosa con EDTA.
Procedimiento: o
Se mezcló bien la muestra de sangre con EDTA, luego se llenó el tubo capilar con sangre hasta las tres cuartas partes, mediante la acción capilar, luego se selló el extremo seco del tubo con plastilina.
o
Se colocó los tubos capilares en las ranuras de la microcentrifuga, se centrifugo durante 5 minutos a 10,000RPM, luego se leyó en la escala para hematocrito.
Lectura: o
En un lector de hematocrito (escala), se alineo la base de la sangre del tubo capilar en la columna cero de la escala y la parte superior del menisco del plasma con el 100 de la escala, se leyó la columna de glóbulos rojos, y el resultado se expresó en porcentaje (%)
Recuento de eritrocitos:
Procedimiento: o
Se diluyo la sangre 1/20 con un líquido que hemoliza los glóbulos blancos y no altera los glóbulos rojos, luego con la micropipeta y una boquilla se recogió 10 microlitros de esta mezcla, y se hizo caer una gota en la cámara de Neubauer para el recuento posterior de los eritrocitos. Anexo 1.
o
Se usó un microscopio con el objetivo en 10X para la lectura.
o
El procedimiento de lectura de la cámara se muestra en el anexo 2.
Valores normales:
HEMOGLOBINA - Adulto: a) mujeres: 12-16 g/100 mL. b) hombres: 13-17 g/100 mL
-
Gestante: > 11 g/100 ml
-
Niños. De acuerdo a Edad
HEMATOCRITO -
Adulto: a) mujeres: 36-46%. b) hombres: 39-52%
-
Gestante: >33 %
-
Niños: Según edad
HEMATIES - Adulto: a) mujeres: 3,5 – 5,0 millones/mm3 b) hombres: 4.0 – 5,5 millones/mm3 - R/N: 5,0 - 6,5 millones/mm3
8. RESULTADOS Estudiante de sexo masculino Hemoglobina
Hematocrito
Recuento de Hematíes
Alumno (A)
14,7 gr/dl
45%
4.7 millones/ mm3.
Alumna (B)
13.1 gr/dl
38%
4.3 millones/ mm3
9. DISCUSIÓN
Evaluando los índices eritrocitarios primarios de los dos alumnos, en cuanto a su hemoglobina tanto de A cuya hemoglobina fue de 14,7 g/dl (valor anormal: 13-17) como de B cuya hemoglobina fue de 13.1 g/dl (valor normal: 12-16) se encuentra dentro del valor normal; También se puede apreciar una mayor concentración de hemoglobina en el alumno de sexo masculina (A), aunque esto no necesariamente siempre ocurre pero promedio general los hombres presentan un nivel de hemoglobina mayor que el de las mujeres.6.7
En cuanto al hematocrito, el alumno A tubo 45 %(39-52 %) y la alumna B tubo 38 % (36-46 %), el hematocrito de ambos alumno está dentro del rango normal. También se puede apreciar un mayor nivel de hematocrito en el alumno de sexo masculino. 6.7
Al evaluar el recuento de hematíes, encontramos que el alumno a tubo 4,7 millones/mm3 (4- 5.5 millones/mm3) y la alumna B tubo 4.3 millones/mm3 (3.5-5millones / mm3), en ambos casos los valores se encuentran dentro de los límites normales.6.7
Evaluando los índices eritrocitarios secundarios, encontramos que la hemoglobina corpuscular media (HCM) del alumno A fue de 31,28 pg (30 +-3 pg) y de la alumna B fue de 30,46 pg (30 +- 3 pg), en ambos casos los valores están dentro del rango normal, mostrándose los eritrocitos normocrómicos.8.9
En cuanto al volumen corpuscular medio (VCM) en el alumno A fue de 95,74 fl (90 +-8 fl) y en la alumna B fue de 88,37 fl (90+-8 fl), en ambos casos los valores están dentro del rango normal, mostrándose los eritrocitos normocíticos.8.9
Por último se evaluó la concentración media de hemoglobina corpuscular (CMHC) la cual en el alumno A fue de 32, 67% (33+-2%) y en la alumna B fue de 34,47% (33+-2%).8.9 Entendiéndose la anemia como un síndrome y como tal involucra múltiples causas, los parámetros evaluados nos permiten descartar diversos tipos de anemias entre ellas por deficiencia de hierro o B12, aplasia medular, esferocitosis hereditaria, hemolítica megaloblástica, entre otras, pero sin embargo en algunas de estas causas se requieren otros exámenes auxiliares para confirmalos.6.9
BIBLIOGRAFIA 1. Ruiz-Argüelles GJ. Fundamentos de Hematología. 3a Ed. Editorial Panamericana. México D.F., México. 2004. Pp.45. 2. Beutler E, West C. Hematologic differences between African-Americans and whites: the roles of iron deficiency and alpha-thalassemia on hemoglobin levels and mean corpuscular volume. Blood 2005;15(2):7405. 5. Perry GS, Byers T, Yip R., Margen S. Iron nutrition does not account for the hemoglobin differences between blacks and whites. J Nutr 1992;122(7):1417-24. 3. Bao W, Dalferes ER Jr, Srinivasan SR, Webber LS, Berenson GS. Normative distribution of complete blood count from early childhoos through adolescence: the Bogalusa Heart Study. Prev Med 1993;22(6):825-37. 4. Eisenstaedt R, Penninx BW, Woodman RC. Anemia in the elderly: Current understanding and emerging concepts. Blood Reviews 2006;20(4):213-26. 5. Secretaría de Salud. Norma Oficial Mexicana NOM-003-SSA2-1993 “Para la disposición de sangre humana y sus componentes con fines terapéuticos”. México D.F., México. Diario Oficial de la Federación. 1994. P.p.10. 6. Carlos Amalguer Gaona, Interpretación Clínica de la Biometría Hemática, Medicina Universitaria, 2003; 5(18):35-40. 7. R. Hurtado Monroy, Y. Mellado Ortiz, G. Flores Rico et al, Semiología de la Citometría Hemática, Revista de la Facultad de Medicina de la UNAM, Vol. 53, N.o 4. Julio-Agosto 2010. 8. Pablo Díaz Piedra, Gabriela Olay Fuentes, Ricardo Hernández Gómez, R Daniel Cervantes- Villagrana, José Miguel Presno-Bernal, Luz Elena, Alcántara Gómez, Determinación de los intervalos de referencia de biometría hemática en población mexicana, Rev Latinoamer Patol Clin, Vol. 59, Núm. 4, pp 243-250 • Octubre - Diciembre, 2012. 9. T.L.C. Sara E. Cambero Martínez, Manual de prácticas de laboratorio “Biometría Hemática”, CENTRO DE BACHILLERATO TECNOLOGICO Industrial y de Servicios No. 41
ANEXOS ANEXO 1
ANEXO 2
