DASAR TEORI COOMB’S TEST
Pemeri Pemeriksa ksaan an Coomb’ Coomb’sst test test adalah adalah pemeri pemeriksa ksaan an yang dignak dignakan an ntk ntk mendete mendeteksi ksi adanya adanya antibo antibody dy pada permkaa permkaan n eritro eritrosit sit dan anti!a anti!ab b eritro eritrosit sit dalams dalamserm erm"" Anti Anti body body ini menyelimti permkaan sel eritrosit yang meyebabkan mr eritrosit men#adi lebih pendek dan sering menyebabkan reaksi inkompetibel pada trans$se darah" Tes Tes antibodi antibodi dilakkan dilakkan ntk mendeteksi keberadaan antibodi tertent tertent yang menyerang menyerang sel darah darah merah" merah" Antib Antibodi odi adalah adalah protei protein n yang yang dibat dibat oleh oleh sistem sistem kekebal kekebalan an tbh tbh yang yang ber$ngsi ntk mela%an &at!&at asing yang mask ke dalam tbh dan kemdian memsnahkannya' seperti bakteri dan (irs" Beberapa kondisi di ba%ah ini dapat menyebabkan pembentkkan antibodi dalam tbh) a. Reaksi Transfusi
Darah mansia mansia mempnyai mempnyai tanda sendiri sendiri *disebt *disebt antigen+ antigen+ pada permkaan permkaan sel darah merah" Dalam proses trans$si darah' darah yang ditrans$sikan hars ,o,ok dengan tipe darah si
penerima" It berarti darah yang ditrans$sikan hars memiliki antigen yang sama seperti sel darah merah pasien" -ika dilakkan trans$si darah dengan antigen yang berbeda *darah yang tidak ,o,ok+' maka sistem kekebalan tbh akan menghan,rkan sel!sel darah yang ditrans$sikan" Ini disebt reaksi trans$si dan dapat menyebabkan komplikasi yang seris ata bahkan kematian" Inilah sebabnya mengapa pen,o,okan golongan darah sangat penting" b. Rh sensitisasi
Rh
adalah
antigen"
.ama
lengkap
ntk
antigen
ini
Rhess
$aktor"
-ika seorang %anita Rh! hamil dengan Rh bayi *#anin+ positi$' sensitisasi Rh mngkin ter#adi" Bayi mngkin memiliki darah Rh/ #ika ayah memiliki darah Rh/" Sensitisasi Rh ter#adi ketika darah bayi ber,ampr dengan darah ib selama kehamilan ata proses persalinan" 0al ini menyebabkan sistem kekebalan tbh ib membat antibodi terhadap sel darah merah bayi darah di kehamilan beriktnya" Respon antibodi ini disebt sensitisasi Rh dan bisa menghan,rkan sel!sel darah merah bayi sebelm ata setelah lahir" -ika sensitisasi ter#adi' #anin ata
bayi
yang
bar
lahir
dapat
mengembangkan
ringan
sampai
*disebt Rh disease ata erythroblastosis fetalis+" -ika Rh disease ini
tidak
masalah
berat
diobati' akan
menyebabkan kematian #anin ata bayi yang bar dilahirkan" Seorang
%anita
dengan
Rh!
dian#rkan
ntk
mendapatkan
sntikan Immunoglobulin anti RhD ntk men,egah sensitisasi" Masalah sensitisasi Rh * Rh disease+ mengalami penrnan drastis dan men#adi sangat langka setelah Immunoglobulin anti RhD ditemkan" c. Anemia Hemolitik Autoimun
Anemia hemolitik atoimn ata yang biasa disebt anemia hemolitik adalah penyakit langka yang menyebabkan antibodi dalam tbh menyerang sel darah merahnya sendiri
Ada 2 jenis Tes Antibodi:
1" Dire,t Coombs’ test *langsng+ ) pemeriksaan dilakkan pada sel darah merah 2" Indire,t Coombs’ test *tidak langsng+ ) pemeriksaan dilakkan pada serm darah
Direct Coombs’ Test
Tes ini dilakkan pada sampel eritrosit langsng dari tbh" Tes ini akan mendeteksi antibody yang ada di permkaan eritrosit" Terbentknya antibodi ini karena adanya penyakit
ata berasal dari trans$se darah" Tes ini #ga dapat dilakkan pada bayi bar lahir dengan darahRh positi$ dimana ibnya mempnyai Rh negati$" Tes ini akan menn#kkan apakah ibnya telah
membentk
antibodi dan
mask
ke dalam
darah
bayinya
melali
plasenta"
Beberapa penyakit dan obat!obatan *kinidin' metildopa' dan prokainamid+ dapat memi, prodksi antibodi ini" Antibodi ini terkadang menghan,rkan eritrosit dan menyebabkan anemia" Tes ini terkadang menn#kkan diagnosis penyebab anemia ata #andi,e"
Indirect Coombs’ Test
Tes ini dilakkan pada sampel dari bagian ,air dari darah *serm+" Tes ini akan mendeteksiantibodi yang ada dalam aliran darah dan dapat mengikat eritrosit tertent yang memi,ter#adinya masalah bila ter#adi per,ampran darah" Tes ini biasanya dilakkan ntk menemkan antibodi pada darah donor ata resipien sebelm dilakkan trans$si
HASI !. "ormal •
Tidak ditemkan antibodi *hasil test negati$+
•
Dire,t Coombs’ Test negati$ berarti tidak ada antibodi dalam sel darah merah
•
Indire,t Coombs’ Test negati$ berarti darah pendonor dan darah penerima kompatibel *,o,ok+
•
Indire,t Coombs’ Test negati$ pada %anita Rh! yang hamil berarti tidak ada antibodi anti Rh/ dalam darah dan belm ter#adi sensitisasi
2. Abnormal •
Dire,t Coombs’ Test positi$ berarti ada antibodi yang akan mela%an dan menghan,rkan sel darah merah" 0al ini dapat disebabkan oleh trans$si darah yang tidak ,o,ok ata penyakit anemia hemolitik
•
Indire,t Coombs’ Test positi$ berarti darah pendonor tidak ,o,ok dengan darah si penerima
•
Indire,t Coombs’ Test positi$ pada %anita Rh! yang hamil ata beren,ana ntk hamil berarti dia memiliki antibodi terhadap darah Rh/ *sensitisasi Rh+" Saat a%al kehamilan #enis darah bayi akan diperiksa' #ika darah bayi Rh/ maka ib hars mendapat
penga%asan ketat selama kehamilan ntk men,egah masalah dengan sel darah merah bayi" -ika sensitisasi belm ter#adi maka dapat di,egah dengan sntikan Immunoglobulin anti
RhD.
3aktor yang mempengarhi perlekatan Antibodi pada sel darah merah in(itro ) !. Tem#eratur
Antibodi yang menyelbngi eritrosit dan serm bereaksi optimal pada sh 456 C" sh yang terlal rendah akan mempengarhi ke,epatan asosiasi Antigen dan Antibodi" Sebaliknya sh yang terlal tinggi akan mersak eritrosit dan molekl Antibodi"
2. Ionic Strength.
Eritrosit dapat disspensikan ke dalam berbagai media misalnya dalam lartan garam $isiologis'
lartan
albmin'
7ISS
dan
reagen
aditi$
seperti polyethylene
glycol *PE8+9hexadimethrine bromide *polybrene+" Dalam ,airan isotonik' .a ion dan Cl ion bergerombol sekeliling sel dan sebagian menetralisir matan yang berseberangan pada Antigen dan molekl antibodi" E$ek penyelbngan ini yang merintangi assosiasi Antigen dengan Antigen dan dapat dikrangi dengan ,ara mengrangi ionic strength dari media reaksi" :onsekensi menrnkan konsentrasi garam dari media reaksi meningkatkan antibodi yang melekat pada eritrosit" Penggnaan albmin ke,ali bila dignakan diba%ah kondisi ion yang rendah #ga dapat melakkan perlekatan molekl antibodi" " $. %ro#orsi Serum Terhada# Sel
Sspensi eritrosit yang terlal tinggi ata terlal rendah dapat mempengarhi dera#at antibodi yang menyelimti eritrosit" Dengan meningkatkan ratio serm terhadap sel dapat mendeteksi antibodi yang bereaksi lemah yang tidak terdeteksi diba%ah sspensi normal eritrosit"
&. 'aktu Inkubasi
Tehnik albmin %akt inkbasi 1; < 46 menit sh 456 C = %akt yang adekat ntk mendeteksi antibodi yang menyelimti sel darah merah yang se,ara klinis berarti" Antibodi yang bereaksi lemah' reaksi antigen!antibodi tidak dapat men,apai keseimbangan dalam %akt
inkbasi selama 46 menit dan dengan memperpan#ang %akt inkbasi dapat membktikan keberadaannya"
Sumber (esalahan
0asil negati$ pals pada pemeriksaan disebabkan oleh) 1" Tidak men,,i sdm dengan bersih dan baik' karena globlin yang bebas yang tidak berikatan dengan sel akan menetralisir A08" 2"
Pemeriksaan tergangg ata tertnda" •
Pelaksanaan proses pen,,ian hars dilakkan se,epat mngkin ntk mengrangi kehilangan Ab yang terlepas dari sel"
•
A08 hars ditambahkan segera setelah proses pen,,ian selesai karena Ab yang telah mengadakan ikatan akan terlepas kembali"
•
Setelah A08 ditambahkan hars segera diptar dan diba,a' karena reaksi Ig8 yang menyelimti sdm akan melemah setelah inkbasi"
4" Reagen kehilangan reakti(itas yang disebabkan oleh penyimpanan yang tidak baik' kontaminasi bakteri 9 serm mansia" Penyimpanan A08 dian#rkan pada 2 < >6 C' #angan dibekkan' bila %arna berbah tidak dignakan lagi" A08 mengalami netralisasi bila terkontaminasi dengan serm mansia 9 anti
0asil Positi$ pals pada pemeriksaan disebabkan oleh 1" Sel darah merah sdah disentri$gasi sebelm dilakkan pen,,ian" Apabila tidak terlihat agltinasi yang tampak setelah penambahan A08 dapat disalahinterpretasikan pemba,aannya sebagai akibat perselbngan Ig8 9 komplemen" Eritrosit penderita cold reactauto antibodi yang kat beragltinasi pada ,ontoh darah yang disimpan pada sh kamar ata diba%ah sh kamar" 2" Tablasi gelas yang tidak bersih terkontaminasi dengan deb' detergent 9 material lain yang menyebabkan sdm menggmpal 9 aggregasi" 4" Over centrifugation dapat memadatkan eritrosis yait agregasi disalahartikan dengan agltinasi" ?" Reagen yang dibat tidak baik dan dapat mengandng antibodi yang mengakibatkan agltinasi pada sel yang tidak diselbngi" Enzyme treated red blood cells dapat meningkatkan reakti(itas dengan antispe,ies antibodi dan dapat bereaksi langsng dengan reagen A08 yang mengandng kontaminasi akti(itas"
DA3TAR PSTA:A .astion' Arman Tony" 2614" Pemeriksaan oomb!s "est " Online" http)99armantonnynastion"blogspot",om926149619,ara!pemeriksaan!,oombs!test"html" Diakses tanggal > -ni 261?" .atalina' 2616" Pemeriksaan oomb!s "es" Online" http)99%%%"rhessnegati$",om9arti,ledetail"phpid1?1sthash"F&ioGB?8"dp$" Diakses tanggal > -ni 261?" Ptri' Retna" 2611" oomb "est " Online" http)99id"s,ribd",om9do,95@HH52H?9Coomb!Test" Diakses tanggal > -ni 261?"