CAPITULO I
EL CONTEXTO DE INVESTIGACION
1.- Planeamiento del problema
¿Cual es el daño que provoca el maquillaje y cosméticos en la piel? ¿El maquillaje provoca daños a corto mediano o largo plazo? ¿Cuáles son los químicos dañinos que contiene el maquillaje? ¿Cuáles son las marcas de maquillaje y cosméticos que contienen en mayor cantidad químicos que dañan la piel? ¿En que cantidades se encuentran los químicos en el maquillaje que daña la salud de la piel? El problem problema a es que que existen existen maquillaj maquillajes es que, que, a la larga larga provoc provocan an daños
a la salud en la piel, esto se debe a los químicos
implantados en ellos para su elaboración el problema aquí es que tan grande y que daños provocan estos químicos a corto mediano y larg largo o plaz plazo o y así así post poster erio iorm rmen ente te las las posi posibl bles es solu soluci cion ones es a los los diferentes problemas que se puedan presentar, además al realizar una investigación a fondo que ofrezca los resultados de que daños producen realmente los cosméticos que diariamente utilizamos y saber en que cantidades y cuales son los que provocan mas daño .Hablando claro del proceso para su elaboración lugares y marcas esto con la finalidad de obtener información que sustente lo que posteriormente acabo de suscitar . .[“]La lista de químicos dañinos para la salud pueden ser tan comunes en los cosméticos tanto para el hombre como la mujer de hoy que pueden estar presentes en casi todos los cosméticos.[“]
(Por Por FERNANDA Por FERNANDA BECCAGLIA Friday, Friday, March 16, 2007)
Mi duda ocurre al observar cuanta demanda generan los productos de maquillaje en el mercado comercial, el problema ocurre a que, debi debido do a la util utiliz izac ació ión n de cosm cosmét étic icos os,, las las pers person onas as pres presen enta tan n prob proble lema mass en la piel piel,, yo quis quisie iera ra sabe saberr si esto esto se debe debe a la utilización de maquillaje a lo largo o corto de su vida esto para tener información clara clara de los daños del maquillaje en la piel el problema problema
ocur ocurre re con mis duda dudass acer acercca de si los los cosm osmétic éticos os que que uso diariamente producen algún efecto secundario que pueda causar o dañar de por vida mi salud cutánea, y ofrecer así la la respuesta a mi preg pregun unta ta y las las preg pregun unta tass que que post poster erio iorm rmen ente te surj surjan an conf confor orme me realice mi investigación. Si no se resu resuel elve ve el prob proble lema ma y es cier cierto to lo que que afir afirmo mo muy muy probablemente muchas mujeres estén pagando un precio muy alto a costa de la belleza belleza así mismo mismo no resolveré resolveré mi duda ya que esta se realiza con la finalidad de obtener cierta información que ayude a mejorar la química de alguna u otra forma así que al no poder hacerlo no sabré de los daños que causa el uso del maquillaje claro no pasar nada que no este pasando ya pero de lo contrario muchas personas se beneficiaran de la investigación propuesta al menos eso es lo que yo creo De alguna manera todos estamos involucrados en este tema ya que las mujeres en su gran mayoría usan cierto tipo de maquillajes y muchos de los hombres que cuidan demasiado su imagen personal también es decir todo aquel que cuida su imagen personal se invo involu lucr cra a de mane manera ra dire direct cta a e indi indire rect cta a en el tema tema igua igualm lmen ente te también los creadores de este tipo de métodos para el “cuidado de la piel” los fabricantes los promotores los vendedores. Claro los mas dañados somos nosotros como usuarios ya que además del gasto económico que no es lo importante pues sabemos que los daños a la salud de la piel que para mi punto de vista es lo mas importante. Bueno principalmente se relaciona con la belleza bueno eso es lo que
vende
aparentemente
ayuda,
marcas
reconocidas
mund mundia ialm lmen ente te está están n invo involu lucr crad adas as en la vent venta a de prod produc ucto toss
elaborados con químicos que dañan la piel a corto largo o mediano plazo entre algunos aspectos de la realidad que se involucran en el tema esta la mercadotecnia y el impacto visual que estos tienen en los receptores ya que promueven cosméticos usados por jóvenes bellas que a través de un mensaje explicito ofrecen a los receptores obtener belleza al adquirirlos sin promover presentar o prevenir los daños causados por estos mismos. Solo vendiendo imágenes y empaque lindos sin la certeza de que este producto sea bueno. [“]Prácticas engañosas: se acusa a los mercadologos de prácticas engañosas, que hacen creer a los consumidores que obtendrán un valor mayor al real. Ofreciendo falsos precios de “fabrica” o de “mayoreo” u ofrecer una considerable reducción de precios. Otra táctica es exagerar las características o el desempeño del producto, además de un envasado engañoso exagerando el contenido del envase por medio de un diseño sutil, no llenar el envase hasta el tope
[“](rock21,
Septiembre 27th. 2008)
2.- Objetivos de investigación
a) Saber Saber si las persona personass que usan cosmét cosmético icoss tienen tienen arrugas arrugas prematuras es decir en menos tiempo de las que no lo usan. b) Hace Hacerr una una comp compar arac ació ión n y aver averig igua uarr si al util utiliz izar ar un mism mismo o producto ejemplo: un lápiz labial pero ambos de diferente marca durante cierto tiempo produce diferente o igual efecto. c) El objetivo de mi trabajo es generar información que ayude a erradicar el uso de cosméticos que dañen la salud de la piel promoviendo así el uso de la información como base fundamental además de ayudar a la población a obtener productos de mucho mejor mejor calidad calidad que sean elabor elaborado adoss con product productos os natural naturales es
o
químicos que no dañen la salud humana. 3.- Justificación
Las pers ersonas que se benefician principalmente con esta investigación es la sociedad en su mayoría de mujeres que cada
año consumen millones de cosméticos que venden por medio de anuncios de publicidad que garantizan proveer de belleza a las mujere mujeress que adquie adquieran ran cierto ciertoss produc productos tos la indust industria ria químic química a y cosmetologica los publicistas. Las Las mujere jeress son bene beneffici iciadas adas al obt obtener ener infor nform mació ción para ara posterior posteriorment mente e cuidar cuidar un poco mas la piel recibiendo recibiendo productos productos de mayor calidad y evitando comprar productos que tengan ciertas características características como químicos posteriormente mencionados y cuidar muy probablemente su economía. La química se vera beneficiada debido a que muy probablemente expo expong nga a dife difere rent ntes es método métodoss
de elab elabor orac ació ión n de maqu maquililla laje je o
cosm cosmét étic icos os sin sin la nece necesi sida dad d de util utiliz izar ar quím químic icos os que que como como consecuencias generen daños y usar algún producto mas natural la industria cosmetologica será beneficiada en cuanto a la venta ya que muy probablem probablemente ente elaboren elaboren productos productos menos menos dañino dañino y este ser adquirido por muchas personas igualmente los publicistas que no perderán la oportunidad de ofrecer estos productos. Mi investigación aportara información sustentable que garantiza la fiabilidad en el trabajo las soluciones posibles de cada problema es decir el problema principal que aquí se presenta son los químicos dañi dañino noss que que empl emplea ea la elab elabor orac ació ión n de cosm cosmét étic icos os
ento entonc nces es
ofreceré elaboración con diferentes tipos de ingredientes que se apeguen mas a lo natural y ofrezcan muchos mas beneficios que los usados actualmente. 4.-Antecedentes
La hist histor oria ia del del perf perfum ume e se remo remont nta a a los los comi comien enzo zoss de la civilización. El antiguo testamento se refiere en varias partes al perf perfum ume e que que en aque aquellllas as époc épocas as se pres presen enta taba ba en for forma de incienso.
Ya desde siglos antes de la era cristiana, el hombre se dedicó a utilizar elementos que despidieran diversos aromas, y la finalidad en los los prim primer eros os tiem tiempo pos, s, era era tribu tributa tarr con con olor olores es agra agrada dabl bles es a sus sus dioses, sus momias, y sus templos sagrados. Esa costumbre se extendió
a
los
reyes
y
reinas.
El término "perfume" "perfume" tuvo su origen origen en el latín "per fumo", fumo", es decir: decir: "por "por el humo humo". ". Y se fuer fueron on supe supera rand ndo o los los expe experi rime ment ntos os para para perfeccionar el producto, pues tenía un significado de adoración y reverencia, y con el paso del tiempo, de súplica y seducción. Se perfeccionaban los ungüentos y fragancias y a la vez se trataban de realizar envases exóticos, trabajados con dedicación artesanal y ciertos recipientes llegaron a constituir verdaderas obras de arte. Desde tiempos muy remotos aparecen datos del frecuente uso de elementos de perfumería y cosmética: en la Dinastía I de Egipto (alr (alre ededo dedorr del del 3100 3100 al 2907 2907 a.C a.C.) ya se util utiliz izab aban an cier iertos tos prep prepar arad ados os.. En las las tum tumbas se ha enc encont ontrad rado jarr jarro ones nes con ungüentos perfumados según fue comprobado por los hallazgos realizados
después.
Homb Hombre ress y muje mujere ress egip egipci cias as usar usaron on acei aceite tess perf perfum umad ados os para para mantener su piel suave y para aminorar el efecto del clima seco de su región. Se decoraban, además, los ojos aplicando un color verde oscuro en el párpado inferior y oscureciendo las pestañas y el párpado superior con kohl, un preparado de antimonio u hollín. En las pinturas y frescos se pueden observar claramente las pinturas en
los
ojos.
Se cree que los judíos adoptaran la aplicación de los cosméticos de los egipcios, puesto que el Antiguo Testamento hace referencia a pinturas
para
la
cara.
A partir de la mitad del siglo I antes de Cristo los romanos utilizaron algunos cosméticos como el kohl para oscurecer las pestañas y los párpados, la tiza (o gis) para blanquear la cara, el colorete, los elemen elementos tos depila depilator torios ios (compu (compuest estos os para para elimin eliminar ar el vello) vello) y la piedra
pómez
para
limpiar
los
dientes.
En Europa se generalizó recién en la edad media cuando los cruz cruzad ados os obse observ rvar aron on el uso uso de los los cos cosméti mético coss en el Orie Orient nte e Próximo, y fueron ellos quienes lo propagaron en sus regiones. Durante el siglo XIX, en Francia se investigó científica y profundamente el preparado de perfumes y ungüentos, tratando de mejorar los productos que se iban utilizando profusamente ya en estos
tiempos
modernos.
El cosmético, el perfume y la moda se van desarrollando para parale lela lame ment nte, e, y hay hay gran grande dess for formas mas espe especi cial aliz izad adas as en la producción de mejores productos, como Dior, Balenciaga, Balmain y Chanel de París; Norman Hartnell, Hardy Amies y Belville Sassoon, de Gran Bretaña; Giorgio Armani, Gianni Versace y Romeo Gigli en Italia; y Balenciaga, Paco Rabanne, Manuel Piña, Adolfo Domínguez y
Vittorio
&
Lucchino,
en
España,
entre
otros.
Por lo general utilizan firmas famosas de la moda para comercializar varios tipos de productos para la mujer y el hombre, así promocionan sus carteras, perfumes, pañuelos, echarpes, bolsos,
maletas
y
bijouterie.
El uso de los adornos, pinturas y cremas se dio en todas las civilizaciones y en todas partes del mundo. Las pinturas que se realizaban realizaban en el cuerpo cuerpo los indígenas indígenas americanos, americanos, los tatuajes, tatuajes, las incisiones superficiales en la piel (orejas, nariz, etc.) para colocarse adornos, fueron usados por culturas primitivas y también por las más adelantadas, y se sigue guen usando en la actualidad. Hoy Hoy en día día esta esta indu indust stri ria a tien tiene e un impo import rtan ante te desa desarr rrol ollo lo en productos de belleza para hombres y mujeres y es muy rentable, como lo es el proceso de obtención de los perfumes que tienen origen animal o vegetal, y otros artificiales a partir de compuestos químicos
naturales.
Las principales fuentes de obtención de materias primas para lograr las esencias son: animales (el almizcle, la algalia, el ámbar gris y el castóreo) y vegetal (las hojas de salvia, tomillo y menta; la corteza de la canela, la cáscara de naranja, la madera de cedro y de sándalo; las raíces de lirio; los pétalos de rosas, violetas y otras flores y las gomas resinosas segregadas por el alcanfor y la mirra). La extracción de los perfumes naturales se hace por destilación, extracción Cosmética
y
exprimido. bucal
En la actual actualida idad d se usan usan dentíf dentífric ricos, os, hilos hilos dental dentales, es, enjuag enjuagues ues buca bucale les, s, polv polvos os dent dental ales es y otro otross impl implem emen ento tos. s. El prof profes esio iona nall odontólogo arregla caries, coloca coronas y prótesis. Pero en la antigüedad, ¿cómo se las arreglarían? En los comienzos de la era
cristiana, las limpiezas se realizaron con piedra pómez. Un doctor francés, Chemant, realizó alrededor de 1770 una dentadura con dientes
de
porcelana,
con
muelle.
Exist Existen en grabad grabados os en escrit escritura urass cuneif cuneiform ormes es sumer sumerias ias del 5000 5000 antes de Cristo donde adjudicaban el dolor de muelas a gusanos que roían desde el interior los dientes. En el Antiguo Egipto se inició la odontología como una de las especialidades médicas, prueba de lo cual cual son son insc inscri ripc pcio ione ness enco encont ntra rada dass en tumb tumbas as egip egipci cias as de apro aproxi xima mada dame ment nte e el 3000 3000 ante antess de Cris Cristo to.. Por Por su part parte, e, los los etruscos, alrededor del 700 antes de Cristo, ya reemplazaban las piezas
dentales
perdidas.
Al estudio de los dientes se dedicaron Hipócrates (400 a.C. ), Aristóteles (alrededor del 350 a.C. ), y ya en el primer siglo de nuestra era, Aurio Celso trató las enfermedades dentales, y en el Siglo II, el médico médico griego griego Galeno Galeno aconsejab aconsejaba a limpiar limpiar las caries caries con una
lima.
Recién en el S. XVI aparece la primera publicación especializada: Libellus de Dentibus (Escrito sobre dientes, 1563), d el anatomista italiano
Bartolomeo
Eustachio.
En 1728, el odontólogo francés Pierre Fauchard publica El cirujano dentista (1728), y a partir de esto la odontología se consideró una rama científica independiente de la medicina. En 1771 el cirujano ingl inglés és John John Hunt Hunter er publ public icó ó la Hist Histor oria ia natu natura rall de la dent dentad adur ura a humana, que muchos sostienen que es el fundamento de todos los text textos os mode modern rnos os sobr sobre e la anat anatom omía ía de la mand mandíb íbul ula a y de los los dientes.
En 1840 se funda la primera escuela dental en el mundo, el Colegio de Baltimore de Cirugía Dental, en Baltimore, Estados Unidos, y se crea
la
Sociedad
Americana
de
Cirugía
Dental.
En 1844, el dentista Horace Wells de Estados Unidos, usó como anestésico para sus pacientes el llamado "gas de la risa" (el óxido nitroso). En 1935 se comienza a utilizar la resina acrílica polimerizada como una base para los dientes artificiales. Y a partir de allí se estudian día a día nuevas formas de mejorar el aspecto con nuevas técnicas, mejores resultados y sin dolor. dolor.
CAPITULO II
FUNDAMENTACION
5.-Conceptos
Cosmético: Un cosmético es un preparado químico, (artesanal o industrial) que se aplica sobre la piel, cumpliendo las funciones: Higiénicas
–
Corr Correc ectitiva vass
–
Preventivas
leche
de
limpieza,
desc descon onge gest stiv ivas as,,
hume humect ctan ante tes, s,
-
de
factor
shampoo. para para
protección
arru arruga gas. s. solar.
Decorativas – maquillaje. Cremas: es una emulsión de sustancias oleosas y acuosas en forma sólida o líquida. Una emulsión es una mezcla de aceites grasas y ceras con
agua
Según
que su
forman función
un
sistema
se
estable
clasifican
en:
Locion Lociones: es: soluci solución ón acuosa acuosa o hidroa hidroalco lcohól hólica ica de sustan sustancia ciass que produc producen en algún algún efecto efecto especi especial al sobre sobre la piel. piel. Tambié ambién n llamad llamada a tónico. Según Loci Loción ón
sus
P.A.
astr astrin inge gent nte, e,
es
la
función
desc descon onge gest stiv iva, a,
que
blan blanqu queo eo,,
presenta. hume humect ctan ante te..
Máscaras faciales: 1. Plá Plástic sticas as o ceros erosas as:: se funde unden n y se usa usa en luga lugarr de lim limpiez pieza a profunda. 2. Hidroc Hidrocolo oloida idales les:: geles geles para para pieles pieles ardida ardidas, s, descon desconges gestiv tivo, o, pieles pieles muy deshidratadas. 3. Arc Arcill illosa osas: másc áscaras aras tens ensora oras a bas base de tierr ierras as volc volcá ánic nicas, as, bentonita, tierra de fuller, fuller, ricas en minerales. Gel: es un coloide formado por agua y agentes gelificantes (goma acacia,
goma
tragacanto,
metil
celulosa,
gelatina)
Aerosoles: es un sistema coloidal de partículas sólidas de tamaño
muy pequeño, dispersas en el seno de un gas, contenido en un envase descartable que es descargado a través de una válvula por la fuerza de un propelente (gas comprimido o licuado). Plomo: El plomo es un elemento químico de la tabla periódica, periódica, cuyo símbolo es Pb y su número atómico es 82 según la tabla actual, ya que no formaba parte en la tabla de Mendeleyev. Mendeleyev. Este químico no lo reco recono nocí cía a como omo un elem elemen entto metálic álico o comú común n por por su gra gran elasti elasticid cidad ad molecu molecular lar.. Cabe Cabe destac destacar ar que la elasti elasticid cidad ad de este este elemento depende de las temperaturas del ambiente, las cuales distienden sus átomos, o los extienden. Según March, quién toma como como refe refere renc ncia ia el elem elemen ento to,, la inve invest stig igac ació ión n de todo todoss los los hidrocarburos se basan en el plomo. El plomo es un metal pesado de densidad relativa o gravedad específica 11,4 a 16 °C, de color azuloso, azuloso, que se empaña para adquirir un color gris mate. Es flexible, inelástico y se funde con facilidad. Su fusión se produce a 327,4 °C y hierve a 1725 °C. Las valencias químicas normales son 2 y 4. Es relativamente resistente al ataque de ácido sulfúrico y ácido clorhídrico, clorhídrico, aunque se disuelve con con lent lentititud ud en ácido ácido nítric nítrico o y ante la presencia de bases nitrogenadas. El plomo es anfótero, anfótero, ya que forma sales de plomo de los ácidos, así como sales metálicas del ácido plúmbico. Tiene la capac apacid idad ad de forma ormarr mucha uchass sales ales,, óxidos y comp compue uest stos os organo organomet metáli álicos cos.. Los cuatro cuatro isótop isótopos os natura naturales les son, son, por orden orden decreciente de abundancia, 208, 206, 207 y 204. Se cristaliza en el sistema cúbico en forma de cara centrada invertida o amorfa. Maquillaje: La palabra maquillaje proviene de maquiller (maquillar) un término francés utilizado en la jerga teatral francesa durante el siglo XIX. XIX. Aunque la palabra sea moderna, el concepto es antiguo.
Se trata de aplicar al rostro preparados artificiales para adecuarlo a la iluminación o bien para obtener una caracterización. caracterización. La palabra maquillaje dejó de ser utilizada únicamente en teatro y se generalizó, siendo utilizada en cualquier ámbito de la vida para indicar que a un rostro (o cualquier otra parte del cuerpo) se le ha aplicado un cosmético. cosmético. m. Acción de maquillar el rostro. Aplicación de cosméticos para embellecerlo o para obtener determinados efectos en el teatro. Químicos: Se denomina química (del egipcio kēme kēme (kem), (kem), que significa "tierra") a la ciencia que estudia la composición, estructura y propiedades de la materia, materia, como los cambios que ésta experime experimenta nta durante durante las reacciones reacciones químicas químicas.. Histór Histórica icamen mente te la química moderna es la evolución de la alquimia tras la revolución química (1733). 1733). Las disciplinas de la química han sido agrupadas por la clase de materia bajo estudio o el tipo de estudio realizado. Entre éstas se tienen la química inorgánica, inorgánica, que estudia la materia inorgánica; inorgánica; la química orgánica, orgánica, que trata con la materia orgánica; orgánica; la bioquímica, bioquímica, el estu estudi dio o de subs substa tanc ncia iass en orga organi nism smos os biol biológ ógic icos os;; la físi físico co-química, comprende los aspectos energéticos de sistemas químicos a escalas macroscópicas, macroscópicas, moleculares y submoleculares; submoleculares; la química analítica, analítica, que analiza muestras de materia tratando de entender su composición y estructura. Otras ramas de la química han emergido en tiempos recientes, por ejemplo, la neuroquímica que estudia los aspectos químicos del cerebro. cerebro.
Piel: La piel es el mayor órgano del cuerpo humano, humano, o animal. animal. Ocupa aproximadamente 2 m², m², y su espesor varía entre los 0,5 mm (en los párpados) párpados) a los 4 mm (en el talón). talón). Su peso aproximado es de 5 kg. kg. Actúa como barrera protectora que aísla al organismo del medio medio que lo rodea, rodea, proteg protegién iéndol dolo o y contri contribuy buyend endo o a manten mantener er íntegras sus estructuras, al tiempo que actúa como sistema de comu comuni nica caci ción ón con con el ento entorn rno, o, y éste éste vari varia a en cada cada especie. especie. Anatómicamente se toma como referencia las medidas estándar dentro de la piel humana. humana. La biología estudi estudia a tres tres capas capas princi principal pales es que, que, de superf superfici icie e a profundidad, son: •
la epidermis epidermis,,
•
la dermis y
•
la hipodermis
Aunque en el estudio de la medicina, medicina, para el perfil histoanatómico y dermológico, dermológico, se le estudian dos capas para lograr fines prácticos, estas son a ciencia cierta la epidermis y la dermis. dermis. De la piel dependen ciertas estructuras llamados anexos cutáneos que son los pelos, pelos, las uñas, las glándulas sebáceas y las sudoríparas. sudoríparas. Está Está compu compuest esta a de corpúsculos: corpúsculos: de Meissner (Georg (Georg Meissner Meissner ) presentes en el tacto de piel sin pelos, palmas, plantas, yema de los dedos, labios, punta de la lengua, pezones, glande y clítoris (tacto fino); de Krause, Krause, que generan la sensación de frío, de [[Corpúsculos de Paccini Paccini que dan la sensación de presión; de Ruffini, Ruffini, que registran el calor y de Merckel, Merckel, el tacto superficial.
La piel, puede sufrir de varias enfermedades distintas, denominadas denominadas derm dermat atititis is,, como como la seborrea. seborrea. Éstas stas son son estu estudi diad ada as por las las disciplinas de la dermatología, dermatología, y la patología principalmente. En la piel del ser humano, sobretodo la del varón se produce más secreción sebácea que la que tiene la mujer. Esto es debido a la mayor cantidad de andrógenos (hormona sexual masculina) que produce el varón. Como consecuencia, la piel masculina es más gruesa, y grasa que la femenina. La piel es el órgano más extenso del cuerpo, al que recubre en su totalidad. Además de actuar como escudo protector contra el calor, la luz, lesiones e infecciones, la piel también cumple estas funciones: •
Regula la temperatura corporal.
•
Almacena agua y grasa.
•
Es un órgano sensorial.
•
Evita la pérdida de agua.
•
Previene la entrada de bacterias.
Las características (es decir, el grosor, el color, la textura) de la piel no son son unif unifor orme mess en todo todo el cuer cuerpo po.. Por Por ejem ejempl plo, o, la cabe cabeza za presenta más folículos pilosos que cualquier otra parte, mientras que la planta de los pies no tiene ninguno. Además, la piel de la planta de los pies y de la palma de las manos es más gruesa. La piel está compuesta por las siguientes capas, cada una de ellas desempeña distintas funciones: •
Epidermis.
•
Dermis.
•
Capa de grasa subcutánea.
Sustancia: Una sustancia (también (también escrito escrito substancia) es toda porc porció ión n de materia que compa comparte rte determ determina inadas das propiedades intensivas. intensivas. Sustancia es la clase de materia de la que están formados los cuerpos. Se denomina sustancias puras (llamada así para distinguirla de una mezcla) mezcla) a aquel sistema sistema homogéneo homogéneo que que pose posea a un solo solo componente. componente. Las Las sust ustanci ancias as pura purass pued puede en ser ser ele element entos o compuestos si su composición es constante y definida. También se refiere a la unión de uno o más átomos iguales con interacción química, es decir, que se encuentran enlazados con fuertes lazos químicos, que no es posible separar de manera física. sustancia elemento elemento es aque Una sustancia aquelllla a sust sustan anci cia a pura pura que que está está
formada por átomos por átomos de un único elemento en sus posibles estados alotrópicos, alotrópicos, que que no pued pueden en desc descom ompo poner nerse se en sust sustan anci cias as más más simples. y se clasifican en metales, No metales y metaloides.Por ejemplo: el cobre(formado por átomos de cobre) Una sustancia aquelllla a sust sustan anci cia a pura pura en cuya cuya sustancia compuesto compuesto es aque comp compos osic ició ión n enco encont ntra ramo moss vari varias as clas clases es de átom átomos os en una una proporción constante.
Que son los cosméticos y el maquillaje. http://www.google.com.mx/search?sourceid=navclient&hl=es&ie=UT F8&rlz=1T4ADBF_esMX324MX324&q=que+s 8&rlz=1T4ADBF_esMX324MX324&q=que+son+los+cosm on+los+cosmeticos+y+ eticos+y+ el+maquillaje Fecha de consulta 28 de marzo 2009 Los cosméticos son sustancias las cuales se elaboran para que interactúen con distintas zonas externas del cuerpo para su limpieza o embellecimiento, con un especial énfasis en el rostro (en el caso del maquillaje).Los cosméticos, nunca deben ser ingeridos. Ya que su actuar trabaja de manera exclusiva, con la piel, las uñas, los dien diente tes, s, etc. etc. Todas odas aque aquellllas as zona zonass que que se ven ven expu expues esta tass al medi medioa oamb mbie ient nte. e. Son Son dise diseña ñado doss para para prot proteg eger er repa repara rarr corr correg egir ir defe defect ctos os y perf perfum umar ar las las supe superf rfic icie iess de la piel piel en dond donde e son son aplicados. Ficha de síntesis
Que son los cosméticos y el maquillaje. http://www.google.com.mx/search?sourceid=navclient&hl=es&ie=UT F8&rlz=1T4ADBF_esMX324MX324&q=que+s 8&rlz=1T4ADBF_esMX324MX324&q=que+son+los+cosm on+los+cosmeticos+y+ eticos+y+ el+maquillaje Fecha de consulta 28 de marzo 2009 Los Los cosm cosmét étic icos os son son sust sustan anci cias as las las cual cuales es son son apli aplica cada dass en el cuerpo para diferentes usos como embellecimiento y limpieza de la piel estos son utilizados principalmente en el rostro Los cosméticos
no pueden ser ingeridos debido a que no están elaborados para ello. Los cosméticos trabajan las zonas principalmente para proteger, repa repara rarr, corr correg egir ir defe defect ctos os es deci decirr, arre arregl glar ar las las zona zonass que que se encuentren dañadas .Tienen diferente consistencia según su uso, exis existe ten n en form forma a de crem crema a que que son son prod produc ucto toss prin princi cipa palm lmen ente te utilizados en la piel, polvos (maquillaje). Ficha de síntesis
Que son los cosméticos y el maquillaje. http://www.google.com.mx/search?sourceid=navclient&hl=es&ie=UT F8&rlz=1T4ADBF_esMX324MX324&q=que+s 8&rlz=1T4ADBF_esMX324MX324&q=que+son+los+cosm on+los+cosmeticos+y+ eticos+y+ el+maquillaje Fecha de consulta 28 de marzo 2009 También bién han han surgi urgido do div divers ersos tip tipos de maqui aquilllla aje com como el permanente que se aboca principalmente al procedimiento procedimiento para la elab elabo orac ración ión de un tatu tatuaj aje e aunq aunqu ue est esta técn técnic ica a ya exis existtía anteriormente ahora se ha masificado es decir, que su demanda ha aumentado debido a los beneficios que este provee en cuestión de tiempo y economía.
Ficha de síntesis
Lo feo de lo bello: cosméticos que hacen daño Fernanda Beccaglia 2007 http://www.lapalmainteractivo.c http://www.lapalmainteractivo.com/vida/c om/vida/content/vida/salud/0316_s ontent/vida/salud/0316_sal al ud.html Fecha de consulta 16 de abril 2009 Los adultos usamos cada día unos nueve productos de cuidado pers person onal al expo exponi nién éndo dono noss a unos unos 126 126 quím químic icos os,, algu alguno noss de los los cuales no han sido probados en profundidad. Phthates: Son disolventes que usan en algunas cremas, esmaltes de uñas, perfumes, fijadores de pelo y desodorantes. Aceites minerales: Son derivados del petróleo que se usan para dar textura a las cremas, pastas de dientes, los aceites para bebes y productos capilares. Algunos investigadores sostienen que estos aceites pueden ser cancerigenos lo cierto es que las cremas tapan los poros y no dejan salir las toxinas. Ficha de resumen Lo feo de lo bello: cosméticos que hacen daño Fernanda Beccaglia 2007 http://www.lapalmainteractivo.c http://www.lapalmainteractivo.com/vida/c om/vida/content/vida/salud/0316_s ontent/vida/salud/0316_sal al ud.html Fecha de consulta 16 de abril 2009 El res result ultado ado es que en vez de mejora jorarr la piel piel,, la empeor peora an produciendo acne alergias y enrojecimiento. Aparecen en la etiqueta como aceite mineral, parafina liquida o petróleo. Perfumes
artificiales:
Se
utilizan
par para
producir
jabones,
deso desodo dora rant ntes es,, cham champú pús, s, crem cremas as para para bebe bebe y crem cremas as para para el
cuerpo. El uso repetitivo acumula sustancias químicas en el cuerpo además de ser altamente absorbente por la piel y poder producir manchas en la piel, alteraciones en el sistema nervioso, mareos. Fenol: Se usa como conservante para los cosméticos. Al Al tratarse de un alco alcoho holl que que se obti obtien ene e medi median ante te la oxid oxidac ació ión n parc parcia iall del del benceno, su uso prolongado puede dañar la piel y afectar el sistema nerv nervio ioso so cent centra ral.l.Se Se encu encuen entr tra a con con el nomb nombre re de nitr nitrop ophe heno no,, nonylphenol, phenolphthalein o clorophenol. Ficha de resumen Lo feo de lo bello: cosméticos que hacen daño Fernanda Beccaglia 2007 http://www.lapalmainteractivo.c http://www.lapalmainteractivo.com/vida/c om/vida/content/vida/salud/0316_s ontent/vida/salud/0316_sal al ud.html Fecha de consulta 16 de abril 2009 Fenil: Es otro tipo de alcohol que se utiliza para enjuagues bucales y fijadores de cabello bajo el nombre de phenylendiamine sulfate. Mercurio: A pesar de ser un metal que afecta al sistema nervioso, algunas cremas desmaquilladoras lo tienen entre sus ingredientes por que sirve como conservante. En la etiqueta figura como tosaliciato de etilmercurio. Las mujeres embarazada embarazadass deben prestar especial atención antes de usar estos cosméticos porque el mercurio puede dañar el cerebro del feto.
Ficha de resumen
Lo feo de lo bello: cosméticos que hacen daño Fernanda Beccaglia 2007 http://www.lapalmainteractivo.c http://www.lapalmainteractivo.com/vida/c om/vida/content/vida/salud/0316_s ontent/vida/salud/0316_sal al ud.html Fecha de consulta 16 de abril 2009 Aluminio: Aluminio: Tal Tal vez el mas conocido conocido de todos, y en muchos muchos casos el menos ignorado hallado en todos los antitranspirantes bajo la forma de aluminum zirconium. Mientras que muchos lo relacionan con el cáncer de mama y la enfe enferm rmed edad ad de Alzh Alzhei eime merr,
otro otross nieg niegan an toda toda rela relaci ción ón con con la
acumulación de las toxinas y por ende, el surgimiento de cáncer. Padima Padimatete-o: o: Este Este element elemento o al ser expuest expuesto o a los rayos del sol puede dañar el ADN. El DABA o p-acido benzoico. Su uso uso se cree cree gene genera ra desd desde e derm dermat atititis is escl esclod oder ermi mia a hast hasta a infertilidad en la mujer. mujer. Ficha de resumen
Plomo en labiales afecta terriblemente la salud El siglo de Durango 2006 http://www.elsiglodedurango.com. http://www.elsiglodedurango.com.mx/noticia/106341. mx/noticia/106341.plomo-enplomo-enlabiales-afecta-terriblemente-la-sal.html Fecha de consulta 14 de abril 2009 Los Los cosm cosmét étic icos os se util utiliz izan an para para real realza zarl rla a bell bellez eza a del del cuer cuerpo po humano, su uso esta extendido entre las mujeres, pero algunas marcas emplean materiales que no son muy buenos para la salud.
El plomo es uno de los cuatro metales que tienen mayor efecto dañino sobre la salud humana. Sus compuestos son tóxicos y han prod produc ucid ido o enve envene nena nami mien ento to por por su uso uso inad inadec ecua uado do y por por una una exposición excesiva a los mismos. La preocupación radica en que los labios, al igual que el organismo podrían sufrir alteraciones importantes dañinas a la salud. Ficha de resumen
Tus cosméticos te están dañando Admin 2008 http://www.foreversoft.com.mx/articulos/%C2%BFtus-cosmeticos-teestan-danando/ Fecha de consulta 13 de abril 2009 Lauril Sulfato de Sodio (SLS) y Lauril Sulfato de Amonio (ALS): A menu menudo do desc descri rito to como como un deri deriva vado do de coco coco para para disf disfra raza zarr su nat natural urale eza toxic oxica a esto estoss quím uímico icos se usan san comúnme únment nte e en cham champú púes es,, past pasta a dent dentri rififica ca,, emul emulsi sione oness faci facial ales es,, limp limpia iador dores es corporales y baños de espuma. Tanto el SLS como ALS pueden ocasionar irritación cutánea y son absorbidos por el cuerpo con facilidad, provocando problemas de salud a largo plazo. Asi mismo, pueden derivar en cataratas y obstruir el desarrollo normal de los ojos de los niños. Ficha de resumen
Tus cosméticos te están dañando Admin 2008 http://www.foreversoft.com.mx/articulos/%C2%BFtus-cosmeticos-teestan-danando/ Fecha de consulta 13 de abril 2009 El Gl Glic icol ol Propí Propílilico co:: Pued Puede e ocas ocasio iona narr irri irrita taci ción ón y derm dermat atititis is.. Así Así mismo, se ha demostrado su nocividad para los riñones y el hígado. Alcohol Isoprpilico: El alcohol es usado como solvente en muchos productos para el cuidado de la piel. Este ocasiona irritación y elimina el mantel acido propio de la piel, promoviendo el crecimiento de
bacterias,
hongos
y
virus. Además,
puede
provocar
envejecimiento prematuro de la piel. DEA
(Dietanolamina),
TEA
(Trietanolamina)
y
MEA
(Monoetanolamina): Estas sustancias son solventes abrasivos y detergentes usados en los los cos cosmétic éticos os y en las las crem remas de cara ara y corpo orpora rale less como emolientes. Pueden generar reacción alérgica y el uso prolongado de productos basados en Dietanolamina esta relacionado al cáncer de riñón y de hígado. Ficha de resumen
Tus cosméticos te están dañando Admin 2008 http://www.foreversoft.com.mx/articulos/%C2%BFtus-cosmeticos-teestan-danando/ Fecha de consulta 13 de abril 2009
Aluminio: Ingrediente común en los antitranspirantes, el aluminio ha sido relacionado con el mal de Alzheimer. Alzheimer. Acei Aceite tess mine minera rale les: s: Deri Deriva vado do del del petr petról óleo eo,, el acei aceite te mine minera rale less encontrado con frecuencia como ingrediente principal de las cremas faciales y corporales y de cosméticos. ¡El aceite de bebe es 100 % aceite mineral! Este recubre la piel como si fuera una película plástica, tapando los poros e impidiéndoles eliminar las toxinas. Esto puede derivar en acne y en otros desordenes de la piel. Otros ingr ingred edie ient ntes es basa basado doss en el petr petról óleo eo son: son: petr petrol olat ato, o, acei aceite te de parafina y cera de parafina. Ficha de resumen
Tus cosméticos te están dañando Admin 2008 http://www.foreversoft.com.mx/articulos/%C2%BFtus-cosmeticos-teestan-danando/ Fecha de consulta 13 de abril 2009 Polietilenglicol: Usado como condensador de productos cosméticos y de cuidado de la piel, provocando un incremento del envejecimiento y dejando la piel vulnerable de las bacterias. Talco: El talco es un mineral usado en diversos polvos cosméticos y en polvos desodorantes.
Ficha de resumen
Tus cosméticos te están dañando Admin 2008 http://www.foreversoft.com.mx/articulos/%C2%BFtus-cosmeticos-teestan-danando/ Fecha de consulta 13 de abril 2009 Lauril Sulfato de Sodio (SLS) y Lauril Sulfato de Amonio (ALS): A menudo se describe como un “derivado de coco” para que los consumidores no se den cuenta de lo dañino que es bajo este nomb nombre re se elab elabo oran ran dive divers rsos os produ roduct ctos os com como cham hampúes púes,, limpiadores corporales, etc. Estos dos químicos pueden ocasionar diversas reacciones en el cuerpo produciendo problemas que se desarrollaran a corto o largo plazo. Parabenos: Estos son utilizados principalmente en productos para bebe para preservarlos durante mas tiempo. Ficha de síntesis Tus cosméticos te están dañando Admin 2008 http://www.foreversoft.com.mx/articulos/%C2%BFtus-cosmeticos-teestan-danando/ Fecha de consulta 13 de abril 2009 Se realizaron diversos estudios los cuales revelaron que el cáncer de mama mama esta estaba ba fuer fuerte teme ment nte e relac relacio iona nado dota ta que que el 90% 90% de las las muje mujere ress que que fuer fueron on anal analiz izad ados os cont conten enía ían n para parabe beno no en alta altass concentraciones es decir, que el parabeno debe ser eliminado de
todos los productos cosméticos y ser sustituido por otro que no cause ningún daño. Glicol Propilico: También causante de diversos daños aunque se ha demostrado que es dañino para los riñones y el hígado este se encuentra en productos cosméticos como cremas. Ficha de síntesis 6.- Historia de la cosmetología
La palabra cosmética deriva del griego Kósmetikos que significa ador adorna narr, sien siendo do el arte arte de pres preser erva varr y aume aument ntar ar la bell bellez eza. a. Cosmetología es la parte de la medicina que trata especialmente de los
cuidados,
del
aseo
y
belleza
de
la
piel.
Desde lo más profundo de la historia nos llegan noticias de que la mujer siempre trato de ser más bella. Desde la mujer del paleolítico que se embadurnaba con la grasa de los animales que cazaban los hombres hasta la mujer actual que es capaz de gastar una fortuna en
cosméticos.
5.000 años antes de nuestra era, en las ruinas arqueológicas de Ur, se encontraron en la tumba de la reina Shub-ad, de la civilización sume sumeri ria, a, gran gran cant cantid idad ad de uten utensi sililios os de bell bellez eza. a. Las Las tabl tablililla lass sumerias nos descubren antiguas fórmulas para preparar ungüentos y afeites, siendo médicos los que las preparaban. En Babilonia flor florec ece e el come comerc rcio io de perf perfum umes es y esen esenci cias as aro aromáti mática cas. s. La civilización egipcia da suma importancia a la cosmética. En la tumba de la rein reina a Mir-h ir-hot otep ep se hall hallar aron on num numeros erosos os env envases ases con preparaciones cosmetológicas. Entre los papiros de ebers se halla uno llamado” kosmetikon” escrito durante la dinastía Ptolomeica y que
habla
de
diversos
preparados
cosmetológicos.
Los médicos egipcios escribían largos tratados sobre la belleza y
maquillajes. En Grecia, luego de las conquistas de Alejandro Magno hubo hubo una una flor florec ecie ient nte e indu indust stri ria a de los los prod produc ucto toss de bell bellez eza a y perf perfum umes es.. Los Los roma romano noss dier dieron on gran gran auge auge e impo import rtan anci cia a a la cosmetología. De los más apartados rincones del imperio iban a Roma los más sofisticados productos para aumentar y preservar la belleza
de
las
patricias
romanas.
Criton, en la época del Emperador Trajano, escribió un tratado sobre Cosmética en 4 tomos. Ovidio también escribe sobre belleza. Son famosos los baños de leche de la Emperatriz Popea, esposa de Nerón. En el Anti Antigu guo o Testa estame ment nto o Bíbl Bíblic ico o enco encont ntra ramo moss en Jere Jeremí mías as,, Ezequiel, Cantar de los Cantares y otros libros claras referencias a los
cosméticos
usados
por
los
israelitas.
Durante la edad media el ascetismo se impone y se dejan de lado las preparaciones cosméticas, considerándolas pecaminosas. Con el Renacimiento vuelven nuevamente éstas prácticas. En 1370 hizo furo furorr en Euro Europa pa un agua agua perf perfum umad ada a comp compue uest sta a por por tint tintur ura a de rome romero ro,, cedr cedro, o, trem tremen entitina na y alco alcoho holl llam llamad ada a Agua Agua Húng Húngar ara. a. Venec neciano ianoss y Geno Genove vese sess fuero ueron n acti activvos com comerc erciant iantes es en cosm cosmét étic icos os.. Cata Catalilina na de Médi Médici cis, s, al casa casars rse e con con Enri Enriqu que e II de Fran Franccia, ia, int introdu roducce en Franc rancia ia las las técni écniccas de fabr abricac icació ión n cosmetológicas. En el siglo XVIII se expande la cosmética. En 1770 el Parlamento Inglés promulgó un curioso decreto prohibiendo el uso de afeites y declarando nulo cualquier matrimonio dónde la mujer hubiese usado tinturas, pomadas, afeites o cualquier otro artificio para mejorar su rostro. Josefina, esposa de Napoleón, gastó fabulosas sumas en pomadas, cremas y perfumes que le conseguía Monsieur Lubin, su proveedor. En el siglo XX los franceses y luego los americanos crean toda una industria farmacológica apoyada por los los desc descub ubri rimi mien ento toss cien cientí tífifico cos. s. Nuev Nuevos os prod produc ucto toss inva invade den n el
mercado continuamente. Los productos de belleza dejan de ser prod produc ucto toss de lujo lujo para para lleg llegar ar a las las más más ampli mplias as capa capass de la población. La publicidad de masas estimula el consumo. Hoy se dice que no hay hay muje mujere ress feas feas,, sino sino muje mujere ress que que no quie quiere ren n o no sabe saben n arreglarse para parecer bellas Plomo afecta terriblemente la salud El siglo de Durango 2006 http://www.elsiglodedurango.com. http://www.elsiglodedurango.com.mx/noticia/106341. mx/noticia/106341.plomo-enplomo-enlabiales-afecta-terriblemente-la-sal.html Fecha de consulta 14 de abril 2009 El hombre y pruebas arqueológicas sostenían que ya en la antigua babilonia (5000 años a.C.) se fabricaba un labial con un polvo acre derivado derivado de la arcilla. arcilla. Pero no deja de representar representar un peligro peligro para la salud. El plomo es un metal que acarrea una serie de enfermedades en el organismo en general incluyendo la piel. El plomo y el mercurio se utilizaban con anterioridad en cremas desm desman anch chad adot otas as cuyo uyo efect fecto o a la larg larga a era era prob proble lem mas por por pigmentación que se producían en la piel. Ficha de síntesis
Que son los cosméticos y el maquillaje. http://www.google.com.mx/search?sourceid=navclient&hl=es&ie=UT F-
8&rlz=1T4ADBF_esMX324MX324&q=que+s 8&rlz=1T4ADBF_esMX324MX324&q=que+son+los+cosm on+los+cosmeticos+y+ eticos+y+ el+maquillaje Fecha de consulta 28 de marzo 2009 Los Los cosm cosmét étic icos os,, como como prod produc ucto toss pued pueden en ser ser pres presen enta tado doss de diversas maneras, ya sea como cremas (productos para la piel y uñas), polvos (maquillaje para el rostro), líquidos (productos para la piel), como gel (productos para el cabello y dientes, así mismo, como como aero aeroso sole less en el caso caso de los los deso desodo dora rant ntes es), ), entr entre e otra otrass presentaciones. Se sabe, que los cosméticos, fueron utilizados hace más de 5000 años atrás por los egipcios. Y es que en aquella época, los cosméticos no eran privativos de las mujeres. Tanto los hombres como las mujeres los empleaban. Ficha de resumen Que son los cosméticos y el maquillaje. http://www.google.com.mx/search?sourceid=navclient&hl=es&ie=UT F8&rlz=1T4ADBF_esMX324MX324&q=que+s 8&rlz=1T4ADBF_esMX324MX324&q=que+son+los+cosm on+los+cosmeticos+y+ eticos+y+ el+maquillaje Fecha de consulta 28 de marzo 2009 Por ejemplo, los faraones, monarcas de Egipto eran asiduos al uso del del maqu maquililla laje je,, para para resa resaltltar ar sus sus rasg rasgos os real reales es.. Incl Inclus uso, o, los los cosm cosmét étic icos os,, eran eran util utiliz izad ados os como como una una mane manera ra de pres preser erva varr la castidad castidad de las doncellas doncellas egipcias. egipcias. Ya Ya que se colocaba colocaba por todo el
cuerpo; de esa manera si era tocada por otro hombre su marido se enteraría de inmediato. Así Así mis mismo, mo, los los grie griego goss y los los rom romanos anos,, tamb tambié ién n util utiliz izar aron on cosméticos. Nuevamente, los cosméticos eran utilizados tanto por hombres, como por mujeres. Lo mismo ocurrió en la cultura persa. La cual, al igual que los egipcios utilizaban los cosméticos, para resaltar sus rasgos faciales. Ficha de resumen Que son los cosméticos y el maquillaje. http://www.google.com.mx/search?sourceid=navclient&hl=es&ie=UT F8&rlz=1T4ADBF_esMX324MX324&q=que+s 8&rlz=1T4ADBF_esMX324MX324&q=que+son+los+cosm on+los+cosmeticos+y+ eticos+y+ el+maquillaje Fecha de consulta 28 de marzo 2009 En la cult cultur ura a japo japone nesa sa,, los los cosm cosmét étic icos os eran eran util utiliz izad ados os por por las las famo famosa sass geis geisha has. s. Aque Aquellllas as muje mujere ress que que eran eran entr entren enad adas as para para satisfacer por completo, a los varones. Ellas utilizaban una gran capa de maquillaje en su cara. La cual era pintada de una manera muy prolija, principalmente con un color blanco, para provocar un aspecto intrigante frente al varón. Ficha de resumen
Que son los cosméticos y el maquillaje. http://www.google.com.mx/search?sourceid=navclient&hl=es&ie=UT F8&rlz=1T4ADBF_esMX324MX324&q=que+s 8&rlz=1T4ADBF_esMX324MX324&q=que+son+los+cosm on+los+cosmeticos+y+ eticos+y+ el+maquillaje Fecha de consulta 28 de marzo 2009 Pero en la actualidad, los cosméticos son una marca indeleble de belleza y juventud. Y esto se debe, ya que a comienzos del siglo xx, los cosméticos comenzaron a ser producidos en masa. Con lo cual la oferta creció y la demanda aumento, de manera natural. Una de las tendencias que se observa en la actualidad es la preferencia por cremas y productos orgánicos o de origen natural para la piel.
Ficha de resumen Que son los cosméticos y el maquillaje. http://www.google.com.mx/search?sourceid=navclient&hl=es&ie=UT F8&rlz=1T4ADBF_esMX324MX324&q=que+s 8&rlz=1T4ADBF_esMX324MX324&q=que+son+los+cosm on+los+cosmeticos+y+ eticos+y+ el+maquillaje Fecha de consulta 28 de marzo 2009 En la actualidad han surgido nuevos subgéneros de los cosméticos como como en el caso caso del del maqu maquililla laje je perm perman anen ente te.. Aunq Aunque ue form formas as rudimentarias de este procedimiento se utilizan desde la época de los los egip egipci cios os,, hoy hoy en día día se han han masi masififica cado do,, y exis existe ten n cent centro ross especializados en esta modalidad. Otros nombres para esta técnica
son son micr micro o pigm pigmen enta taci ción ón que es el mism mismos os que que se util utiliz iza a para para elaborar los tatuajes, pero orientados a la funcionalidad cosmética; por esto algunos le llaman tatuaje cosmético. cosmético. 7.-Normatividad
NORMA OFICIAL MEXICANA NOM-039-SSA1-1993, BIENES Y SERVICIOS. PRODUCTOS DE PERFUMERÍA Y BELLEZA. DETERMINACIÓN DE LOS ÍNDICES DE IRRITACIÓN OCULAR, PRIMARIA DÉRMICA Y SENSIBILIZACIÓN. INDICE 0. 1.
INTRODUCCION OBJETIVO
Y
CAMPO
DE
APLICACION
2.
FUNDAMENTO
3.
DEFINICIONES
4.
SIMBOLOS
Y
5.
PRUEBAS
6.
PRUEBAS
ABREVIATURAS IN
VIVO
IN
VITRO
7. 8.
MUESTREO CON ONC COR ORD DANCI NCIA
CON
NOR NO RMAS
INTERNAC RNACIION ONA ALES LES
9. 10.
BIBLIOGRAFIA OBSERVANCIA
11. 12.
Apéndice A 0. Introducción
LA
NORMA VIGENCIA
APENDICE
Apéndice 13.
DE
NORMATIVO A
APENDICE
INFORMATIVO
Los Los prod produc ucto toss de perf perfum umer ería ía y bell bellez eza a son son form formul ulac acion iones es que que contienen sustancias químicas e ingredientes que pueden causar lesiones en ojos o en la piel, por ser éstos de uso cotidiano es importante comprobar que su contenido sea inocuo. Con objeto de determinar si un producto es irritante o sensibilizante, las primeras pruebas se efectuaron en animales, como es la denominada Prueba de Draize. Draize. Estas pruebas in vivo demostraron demostraron que habían habían cambios cambios visi visibl bles es cuan cuantitififica cabl bles es.. En la actu actual alid idad ad,, adem además ás de ésta éstas, s, se realizan pruebas de parche por inducción en humanos, ambas son útil útiles es para para eval evalua uarr los los daño dañoss que que pued puedan an pres presen enta tarr dich dichos os productos. La cont contin inui uida dad d en los los estu estudi dios os de los los efec efecto toss tóxi tóxico coss de los los productos en general, han sido publicados en la última década, un número de aproximaciones de pruebas in vitro, cuyo objetivo es minimizar la necesidad de usar animales de prueba. Las pruebas in vitro itro se llev llevan an a efec efectto por por difer ifere ente ntes técn técnic icas as:: unas unas son pres presen enta tada dass como como prue prueba bass de cito citoto toxi xici cida dad, d, otra otrass estu estudi dian an la dest destru rucc cció ión n celu celula larr, inhi inhibi bici ción ón del del crec crecim imie ient nto, o, inte integr grid idad ad o permeabilidad de la membrana y al final se media por el consumo celular de colorantes no tóxicos. La intensidad del teñido de la célula célula está está direct directam ament ente e relaci relaciona onado do con el número número de célula célulass sobrev sobrevivi ivient entes. es. Varios arios de los llama llamados dos siste sistemas mas interm intermedi edios os se proponen como alternativos, lo que parece estar relacionado más íntimamente con el objetivo in vivo o aun usan órganos aislados, como el ojo de bovino. También se efectuan pruebas en huevos de gallina, donde la membrana corioalantoica se usa como modelo de membrana vascularizada.
Esta
Norma
establece
los
métodos
para
determinar las
características características de irritación y de sensibilización, con el fin de que los fabricantes puedan asegurar que sus productos sean "no irritantes" para para el usua usuari rio o y pre preven venir los los daño dañoss a la salud alud que que pued pueda an ocasionar, ocasionar, al aplicarse o usarse directamente. 1. Objetivo y campo de aplicación
1.1 Esta Norma Oficial Mexicana establece los métodos de prueba para determinar los índices de irritación ocular, primaria dérmica y sensibilización, así como los límites máximos de aceptación. 1.2 Esta Norma Oficial Mexicana es de observancia obligatoria en el territorio nacional para las personas físicas o morales que requieran la determinación de estos índices. 2. Fundamento
Los animales se han utilizado para determinar la irritación ocular, primaria dérmica y la sensibilización en los productos de perfumería y belleza. Estas pruebas in vivo se efectúan poniendo la muestra del producto en contacto con el ojo o la piel del animal, para observar los los camb cambio ioss visi visibl bles es y obte obtene nerr los los resu resultltad ados os haci hacien endo do las las medi medici cion ones es corr corres espo pond ndie ient ntes es.. En la prue prueba ba del del "par "parch che" e" en huma humano nos, s, de mane manera ra simi simila larr, se pone pone en cont contac acto to exte extern rno o la muestra con la piel de la persona para medir la irritación dérmica y la sensibilización. Las Las nuev nuevas as estr estrat ateg egia iass para para dete determ rmin inar ar la segu seguri rida dad d de los los cosméticos permiten escoger ensayos sensibles in vitro, pruebas conf confia iabl bles es,, repr reprod oduc ucib ible les, s, prác práctitica cass y ruti rutina nari rias as,, dond donde e los los parámetros parámetros de prueba prueba se enfocan a los factores factores causales causales del daño
en el tejido. Existen ahora un buen número de pruebas in vitro, que son alternativas potenciales para sustituir las pruebas en animales. Se han observado que los procesos agudos de irritación primaria en la piel y membranas mucosas se correlacionan bastante bien con los datos de diferentes sistemas de pruebas in vitro. 3. Definiciones
Para fines de esta Norma se entiende por: 3.1 Cepo, el aparato que sirve para sujetar e inmovilizar animales para experimentación. 3.2 Conjuntiva bulbar, la mucosa que tapiza la superficie anterior del ojo. 3.3 Conjuntiva palpebral, la mucosa que tapiza la cara posterior del párpado. 3.4 Córnea, sección anterior transparente del globo ocular. 3.5 Desafío, aplicación del mismo agente empleado en el proceso de inducción para verificar si es sensibilizante. 3.6 Edema, Edema, inflam inflamaci ación ón produc producida ida por acumul acumulaci ación ón excesi excesiva va de líqu líquid ido o sero seroal albu bumi mino noso so en el teji tejido do celul celular ar,, debi debida da a dive divers rsas as causas. 3.7 3.7 Erit Eritem ema, a, enro enroje jeci cimi mien ento to difu difuso so o en manc mancha hass de la piel piel,, producido por la congestión de los capilares, debido a diversas causas.
3.8 Hemólisis, desintegración de los corpúsculos sanguíneos con liberación de hemoglobina. 3.9 Inducción, acción y efecto de inducir o causar una reacción por aplicación de un agente. 3.10 Irritación dérmica, alteración fisiológica de la piel provocada por algún agente físico, químico o biológico. 3.1 3.11 Irri Irrita taci ción ón ocul ocular ar,, alte altera raci ción ón fisi fisiol ológ ógic ica a de las las memb membra rana nass oculares, provocada por algún agente físico, químico o biológico. 3.12 3.12 Membr Membrana ana corioa corioalan lantoi toica, ca, capa capa celula celularr extra extra embri embriona onaria ria formada por la porción externa de la membrana alantoides, sobre las membranas amniótica y vitelina, que fija el embrión a la pared uterina, nutre y envuelve al huevo. 3.13 Membrana nictante, tejido delgado y flexible que envuelve y cubre el ojo. 3.14 Opacidad corneal, corneal, la turbidez turbidez de la transpare transparencia ncia corneal que se manifiesta en forma de una capa blanquecina. 3.15 Quemosis, engrosamiento de las conjuntivas ocular y palpebral y del tejido celular subyacente, de coloración rojiza más o menos acentuada, según el grado de inflamación. 3.16 3.16 Secrec Secreción ión,, produc producto to del funcio funciona namie miento nto fisiol fisiológi ógico co de una glán glándu dula la;; cuan cuando do la secr secrec eció ión n elab elabor orad ada a es lanz lanzad ada a por por un conducto excretor a otro órgano al exterior, es externa y cuando el prod produc ucto to segr segreg egad ado o es vert vertid ido o a la circ circul ulac ació ión n sang sanguí uíne nea, a, es interna.
3.17 Sensibilización, proceso por el que las células se hacen más sensibles a la acción de un agente. 4. Símbolos y abreviaturas
Cuando en esta Norma se haga referencia a los siguientes símbolos y abreviaturas se entiende por: ºC grados Celsius g gramo kg kilogramo µl microlitro mg miligramo mg/ml miligramo por mililitro ml mililitro mm milímetro mmol/l milimol por litro M molar nm nanómetro p/v peso por volumen % por ciento rpm revoluciones por minuto
v/v volumen por volumen Cuando en la presente Norma se mencione al Reglamento, debe entenderse que se trata del Reglamento de la Ley General de Salud en Materia de Control Sanitario de Actividades, Establecimientos, Productos y Servicios. 5. Disposiciones sanitarias
5.1 Los productos en los cuales se aplicarán los métodos objeto de esta esta Norm Norma, a, se encu encuen entr tran an esta establ blec ecid idos os en el Regl Reglam amen ento to.. Adic Adicio iona nalm lmen ente te,, los los fabr fabric ican ante tess efec efectu tuar arán án esta estass prue prueba bass en prod produc ucto toss cuy cuyos text textos os publ public icititar ario ioss incl incluy uyan an las las sigu siguie ient ntes es leyendas: "no irrita", "producto hipoalergénico". 5.2 En los casos de que los ingredientes de la fórmula sean los mismos con relación a otros productos del mismo fabricante, ya exis existtente entess y que que cuent uenten en con infor nform mació ción sobre obre prue prueba bass toxicológicas que documenten que son aceptables para su uso en huma humano nos, s, el fabr fabric ican ante te podr podrá á pres presen enta tarr esta estass prue prueba bass como como jus justitififica caci ción ón de que que el nuev nuevo o prod produc ucto to es toxi toxico coló lógi gica came ment nte e adecuado para su uso. 5.3 5.3 Los Los fabr fabric ican ante tess podr podrán án efec efectu tuar ar méto método doss dife difere rent ntes es a los los incluidos en esta Norma, para el control interno de sus productos; pero para efectos de comprobación de resultados por acciones de verificación sanitaria, se deben ajustar a los métodos de la presente Norma. 5.4 Las pruebas en humanos deben ser realizadas a través de prot protoc ocol olos os étic éticam amen ente te desa desarr rrol olla lado doss y supe superv rvis isad ados os por por la Secretaría de Salud.
5.5 5.5 En el caso caso de estu estudi dios os efec efectu tuad ados os en el extr extran anje jero, ro, será serán n aceptados si se llevan a cabo de acuerdo a las buenas prácticas clíni líniccas est estable ableccidas idas en el paí país de orige rigen. n. Esto sto debe debe ser documentado a través de un escrito certificado por una institución educativa, asociación científica reconocida o Autoridad Sanitaria del país de procedencia. 6. Pruebas in vivo
6.1 Prueba de Irritación Ocular 6.1.1 Materiales y reactivos Una jeringa de 1 ml (sin aguja) o pipetas de 1 ml con divisiones de 0,10 ml o pipetas de 0,1 ml con divisiones de 0,01ml Tres conejos albinos con un peso entre 2 y 3 kg con ojos sanos y sin defectos Tres cepos Agua destilada esterilizada Un matraz Erlenmeyer de 125 ml esterilizado Una lente de aumento Solución salina al 0,9% esterilizada Mortero Tamiz del No. 40 (0,42 mm de abertura de malla) Balanza analítica
6.1.2 Procedimiento Esta prueba debe realizarse en 3 conejos. Sujetar los conejos en los cepos. Asimismo sujetar suavemente el párpado del conejo para mantener el ojo de prueba abierto. Aplicar Aplicar directamente en la córnea 0,1 ml del líquido de prueba o 0,01 ml si se opta por la prueba con volumen bajo, utilizando la jeringa o la pipeta (utilizar una jeringa limpia para cada sustancia de prueba). El otro ojo queda como testigo aplicando la misma cantidad de agua destilada y de la misma manera. En el caso de jabones y champúes deberá prepararse una solución al 10% (p/v o v/v), utilizando como vehículo agua destilada: aplicar 0,1 ml o 0,01 ml de esta solución de la manera antes descrita. Para sólidos, el material de prueba deberá ser pulverizado con ayuda de un mortero, tamizado y con éste hacer una suspensión acuo acuosa sa al 10%. 10%. Aplic Aplicar ar 0,1 0,1 ml o 0,01 0,01 ml de esta esta susp suspen ensi sión ón directamente en la córnea del ojo de prueba, quedando el otro ojo como testigo. En el caso de pastas, calcular la densidad en mg/ml, dividir 0,1 g o 0,01 g entre la densidad y la cantidad resultante del material de prueba, se aplica directamente en la córnea del ojo. Liberar el párpado inmediatamente después de la aplicación, sin forzar el parpadeo ni manipular. Llevar un registro de la hora de aplicación. Y anotar además si los animales de prueba mostraron cualquier signo de malestar como consecuencia de la aplicación de la sustancia de prueba.
Mantener a los animales en sus cepos durante tres horas y después regresarlos a sus jaulas. 6.1.3 Evaluación de la prueba 6.1.3.1 Observar los ojos de los conejos a la 1a., 2a. y 3a. hora, a las 24 y 48 horas y al 4o., 5o., 6o. y 7o. días después de aplicada la sust sustan anci cia a de prue prueba ba,, usan usando do el ojo ojo no trat tratad ado o como como cont contro roll o testigo, haciéndose las anotaciones correspondientes. 6.1.3.2 La prueba podrá suspenderse después del 3er. día, siempre y cuando no se observe irritación alguna en los ojos de prueba. 6.1.3.3 Evaluar en los ojos de prueba la reacción que ante la aplicación de la muestra presentan la conjuntiva, la córnea y el iris, con ayuda de una lente de aumento, utilizando la siguiente escala de calificación. 6.1.4 Escala para la evaluación numérica de las lesiones oculares Obse Observ rvar ar en el ojo ojo cerr cerrad ado o la quem quemos osis is y lacr lacrim imac ació ión, n, abri abrirr el párpado para evaluar la conjuntiva, la córnea y el iris, utilizando la lente de aumento. 6.1.4.1 Conjuntiva Enro Enroje jeci cimi mien ento to (se (se refi refier ere e a la conj conjun untitiva va palp palpeb ebra rall y bulb bulbar ar,, excluyendo la córnea y el iris) Vasos normales 0 Vasos capilares con ligero enrojecimiento 1 Enrojecimiento 2
Enrojecimiento difuso intenso 3 Quemosis No hay inflamación 0 Inflamación ligera, incluyendo la membrana nictante 1 Inflamación con eversión parcial del párpado 2 Inflamación con párpados cerrados a la mitad 3 Inflamación con párpados totalmente cerrados 4 Secreción Ausencia de secreción 0 Secreción ligera apenas perceptible 1 Secr Secrec eció ión n con con hum humedec edecim imie ien nto de los los párp párpad ados os y del del pelo pelo adyacente al borde palpebral externo 2 Secreción con humedecimiento de los párpados y del pelo sobre grandes zonas alrededor del ojo 3 Calificación total (a + b + c) x 2 = 20 (máximo) Donde: a = Valor del enrojecimiento b = Valor de la quemosis
c = Valor de la secreción 6.1.4.2 Córnea Grado de opacidad No hay opacidad (no hay pérdida de brillantez o luminosidad) 0 Ligera opacidad (sin perder la transparencia pero sí la brillantez) 1 Pres Presen enci cia a de opac opacid idad ad aún aún tras traslú lúci cida da con con el iris iris liger ligeram amen ente te obscurecido 2 Presencia Presencia de opacidad opacidad con iris poco visible y contorno contorno de la pupila dificilmente visible 3 Presencia de opacidad que hace al iris invisible 4 Areas de opacidad Menos de un cuarto 1 Entre un cuarto hasta la mitad 2 Más de la mitad y tres cuartos 3 De tres cuartos a toda el área 4 Total de lesiones en córnea a x b x 5 = 80 (máximo) Donde: a = Valor del grado de opacidad
b = Valor del área de opacidad 6.1.4.3 Iris Valores Normal 0 Congestionado, con inyecciones circuncorneales y obviamente más arrugado que lo normal (una o varias de estas características), con el iris aún reaccionando a la luz (una reacción lenta es una reacción positiva) 1 No hay reacción a la luz, hemorragia, lesión considerable (una o varias de estas características) 2 Total de lesiones en iris a x 5 = 10 (máxima) Donde: a = Valor de la lesión en iris 6.1.5 Interpretación de los resultados Se suman las calificaciones obtenidas en conjuntiva, córnea e iris para cada conejo, se promedian los valores de los 3 conejos, obteniéndose así la calificación de la prueba por día. Una vez terminada la prueba, según lo mencionado en el párrafo 6.1. 6.1.3. 3.2 2 e incl incluy uyen endo do el valo valorr del del últi último mo día día de la prue prueba ba,, se promedian los valores de las calificaciones de la prueba por día.
El valor promedio obtenido se divide entre 110 (suma total de las cali calififica caci cion ones es máxi máxima mass posi posibl bles es)) y depe depend ndie iend ndo o del del coci cocien ente te obtenido se clasificará el producto de acuerdo a la siguiente tabla: 0,0 a 0,1 no irritante Más de 0,1 a 0,3 ligeramente irritante Más de 0,3 a 0,5 irritante Más de 0,5 a 1,0 irritante severo 6.1.6 Criterio de aceptación El prod produc ucto to que que teng tenga a una una cali calififica caci ción ón no mayo mayorr de 0,3 0,3 será será aceptado como producto apto para uso humano. En el caso de productos destinados a bebés la calificación máxima deberá ser 0,1. 6.2 Prueba de irritación en piel de conejos 6.2.1 Materiales y reactivos 3 conejos albinos de 2,0 a 3,5 kg de peso, cualquier sexo y sin daño en la piel 3 cepos 3 jaulas individuales de malla metálica Máquina rasuradora eléctrica, para animales pequeños, con peine del No.40 y del No. 0 Pipeta de 1 ml graduada en centésimas Matraces Erlenmeyer
Matraces aforados de 50 ml Agua destilada esterilizada Fuente de luz blanca mínimo de 60 watts Lente de aumento Gasa quirúrgica esterilizada Tela adhesiva Tela permeable pe rmeable Mortero con pistilo Balanza analítica Tamiz del No. 40 (0,42 mm de abertura de malla) La cantidad de sustancia de prueba para cada tipo de productos se especifica en la tabla 1. 6.2.2 Procedimiento 6.2.2.1 Preparación de los animales: el día anterior a la realización de la prueba, se rasura el dorso de los conejos de manera que quede sin pelo desde la región escapular a la lumbar a un lado y otro de la columna vertebral. Para ello utilizar primero el peine del No. 40 y después el del No. 0. Esto debe hacerse con mucho cuidado, a fin de no lesionar la piel al rasurar. 6.2.2.2 El material de prueba se aplicará directamente en el dorso de cada animal, cubrir con un parche de gasa quirúrgica de 2 x 2
cm, con un grosor de 4 a 8 monocapas, colocado en el sitio elegido. Considerar como control cualquier otra área de la piel en esta zona. 6.2. 6.2.2. 2.3 3 Colo Coloca carr a cada cada anim animal al en un cepo cepo para para mini minimi miza zarr sus sus movimientos durante la prueba. Si la sustancia de prueba es un líquido, aplicar la cantidad que se indica en la tabla 1 directaménte en la piel, después, sujetar la gasa al conejo con una tela adhesiva. En el caso de materiales sólidos, semisólidos o en polvo, sujetar el parche a la piel en uno de los lados utilizando tela adhesiva; a continuación colocar el material de prueba en la cantidad que se indica en la tabla 1, entre el parche y la piel, posteriormente cerrar el lado restante con tela adhesiva. Para sólidos y polvos, el producto deberá molerse y tamizarse antes de pesarse. Cuando el material de prueba contenga sustancias volátiles, se deberá permitir la evaporación del disolvente antes de aplicar el parche con la sustancia de prueba y de colocarlo en la piel del conejo. El tie tiempo mpo de apli aplica caci ción ón del del parc parche he varí varía a depe depend ndie iend ndo o de la naturaleza del producto; este tiempo para cada grupo de productos se especifica en la tabla 1. 6.2.3 Evaluación de la prueba Una vez que ha transcurrido el tiempo de aplicación, sacar a los conejos de los cepos, remover el parche y eliminar los restos del material de prueba con una toalla húmeda. Regresar cada animal a su jaula. Después de haber removido los parches, evaluar el sitio de prueba de acuerdo con las siguientes escalas:
Eritema 0 No eritema 1 Eritema ligero, apenas perceptible 2 Eritema bien definido 3 Eritema de moderado a severo 4 Eritema severo (rojo betabel) Calificación máxima posible de eritema: 4 Edema 0 No edema 1 Edema ligero apenas perceptible 2 Edema ligero con bordes sobresalientes con elevación definida 3 Edema dema mode modera rado do,, con con una una elev elevac ació ión n máxi áxima de 1 mm, mm, aproximadamente 4 Edema severo, elevación mayor de 1 mm extendiéndose más allá del sitio de aplicación Calificación máxima posible de edema: 4 Las evaluaciones deberán realizarse a los 30 o 60 minutos después de remover el parche, a las 24 horas y a las 72 horas de iniciada la prueba. 6.2.4 Análisis de datos
Una vez obtenidas las lecturas de Eritema y Edema, promediar las calificaciones de eritema de las 3 evaluaciones (1/2 o 1 hora, 24 y 72 horas después de remover el parche) para los tres animales (9 calificaciones en total) y por separado promediar las calificaciones de edema de la misma manera (9 calificaciones en total). A partir de estos promedios, calcular el índice de irritación primaria como sigue: Indice de irritación primaria = Promedio de eritema + Promedio de edema. 6.2.5 Interpretación de los resultados Con base en el Indice de Irritación Primaria, los productos podrán ubicarse en alguna de las siguientes categorías: 0 - 1 No irritante 1,1 - 2 Ligeramente irritante 2,1 - 5 Moderadamente irritante 5,1 - 6 Irritante moderado a severo 6,1 - 8 Irritante severo 6.2.6 Criterio de aceptación Todos los productos para uso en bebés deberán tener un índice de irritación primaria no mayor de 2. El producto que tenga un índice de irritación primaria no mayor de 5 será aceptado como un producto apto para uso en adultos.
Cuando un producto obtenga una calificación entre 5,1 y 6 deberá optar por cualquiera de las tres alternativas siguientes: 6.2.6.1 Ostentar la leyenda "Precaución, este producto es irritante". 6.2.6.2 Repetir la prueba en animales vírgenes, si los resultados de esta segunda prueba confirman los obtenidos en la primera, deberá optarse por la alternativa 6.2.6.1. Si el índice de irritación primaria obtenido en la segunda prueba tiene un valor aceptable conforme a lo que se establece en el punto 6.2.6, el producto será considerado apto para uso humano. Los productos que tengan una calificación mayor de 6 no serán aceptados para su uso en humanos. 6.2.6.3 Proceder a realizar la prueba en humanos, descrita en el punto 6.3. TABLA 1 PREPARACION DE LA MUESTRA PRODUCTO PREPARACION DE LA CANTIDAD A CONDICIONES DE MUESTRA APLICAR APLICACION Champú, jabón líquido, 10% sol. acuosa 0,3 ml Parche semiocluido 4 acondicionador horas. enjuague, jabón, crema y
espuma de afeitar, jabón de tocador, jabón desodorante, productos para baño o ducha. horas. Loción capilar Presentación original 0,3 ml Dejar evaporar por 15 min. Parche semiocluido 4 horas. Perfume, loción y Presentación original 0,3 ml Dejar evaporar por 15 similares min. Parche semiocluido 24 horas. Endurecedor, adhesivo y Presentación original Lo suficiente para Dejar evaporar por 15 reparador de uñas cubrir 1 cm2 del min. Parche semiocluido parche. 4 horas. Removedor de cutícula Presentación original 0,3 ml o g Parche semiocluido 1 hora. Sombra, crema, Presentación original 0,3 g Parche semiocluido 24 maquillaje, talco, polvo, horas.
lápiz labial Desmaquillante, Presentación Presentación original 0,3 g Dejar evaporar por 15 delineador, delineador, máscara min. Parche semiocluido para pestañas, por 24 horas. bronceador, filtro solar Tinte Presentación Presentación original 0,3 ml Parche semiocluido 1 hora. Ondulante, fijador Presentación original 0,3 ml Parche semiocluido 1 permanente hora. Desodorante y Presentación original 0,3 g o ml Parche semiocluido 24 antitranspirante horas. Depilatorio Presentación original 0,3 g Parche semiocluido 1 hora. 6.3 Prueba de irritación en piel de humanos (Prueba del parche con tres aplicaciones) 6.3.1 Materiales y reactivos Un mínimo de 10 voluntarios, los cuales, antes de comenzar su participación en el estudio, deben proporcionar al investigador una carta donde informen por escrito su consentimiento para participar
volu volunt ntar aria iame ment nte e en la prue prueba ba (de (de acue acuerd rdo o al form format ato o que que se encu encuen enttra en el apé apéndic ndice e inf inform ormativ ativo o A 1). 1). El inve invest stig igad ador or proporcionará a cada voluntario la información necesaria acerca del propósito y naturaleza del estudio, cada sujeto recibirá una copia del informe de consentimiento. consentimiento. Matraces aforados Pipetas volumétricas Agua destilada esterilizada Fuente de luz, lámpara incandescente de 100 watts de luz de día con bulbo azul Lente de aumento Matraces Erlenmeyer Parc Parche hess de gas gasa quir quirúr úrgi gicca ester sterililiz izad ada a de un gros grosor or de 4 monocapas, de 2 cm por lado Micr Microp opor ore e u otra otra cint cinta a adhe adhesi siva va poro porosa sa simi simila larr util utiliz izada ada en la práctica médica Mortero y pistilo Balanza analítica Tamiz No. 40 (0,42 mm de abertura de malla) Alcohol etílico 6.3.2 Elección de los voluntarios
Para Para que que un volu volunt ntar ario io pued pueda a part partic icip ipar ar en esta esta prue prueba ba,, debe debe cumplir con los siguientes requisitos: Que sea una persona sana. Que Que hay haya tran transc scur urri rido do por por lo meno menoss un mes mes desd desde e su últi última ma participación en una prueba de parche. Que tenga por lo menos 18 años ños. No más del 20% de los participantes podrán tener más de 65 años. Un voluntario NO podrá participar en esta prueba por cualquiera de las siguientes razones: Si ha sido sometido a algún transplante de órgano que requiere el uso uso de medic edica amentos ntos inm inmunod unode epres presor ores es (a exce excepc pció ión n de transplante de córnea). Si presenta psoriasis, eczema u otro tipo de erupciones en cualquier sitio de la piel, cáncer en la piel o alguna enfermedad de ésta, que pudiera interferir con las evaluaciones efectuadas en este estudio, o que pudieran exponer al voluntario a un riesgo inaceptable. Si el voluntario está tomando algún medicamento esteroide antiinflamatorio por administración sistémica, o si se está aplicando cualquier medicamento en el sitio de aplicación del parche. Si presenta diabetes y está tomando insulina. Si presenta asma severo o algún tipo de alergia respiratoria que requiere de una terapia crónica o frecuente con administración de medicamentos.
Si se le ha practicado mastectomía bilateral o unilateral durante el último año, o extirpación de nódulos linfáticos axilares. Si está recibiendo tratamiento para cualquier tipo de cáncer, o si ha sido tratado contra cáncer durante los últimos 6 meses. Si pres presen enta ta algu alguna na enfe enferm rmed edad ad de inmu inmuno node defifici cien enci cia a (lup (lupus us,, tiroiditis, etc.). Si se desarrolló alergia como consecuencia de su participación en pruebas de parche previas. Si la persona se encuentra embarazada o en periodo de lactancia. Si la persona presenta antecedentes de trastornos mentales. La elec elecci ción ón de los los volu volunt ntar ario ioss será será eval evalua uada da a trav través és de un cuestionario (que se encuentra en el Apéndice informativo A 2) que debe debe ser ser llen llenad ado o por cada ada pers perso ona. na. Antes ntes de comenz enzar su participación en el estudio, los voluntarios que sean elegidos en esta prueba deben proporcionar al investigador una carta en la que informen por escrito su consentimiento a participar voluntariamente en la prue prueba ba (Apé (Apénd ndic ice e info inform rmat ativ ivo o A 1). 1). El inve invest stig igad ador or debe debe proporcion proporcionar ar a cada voluntario voluntario la informaci información ón necesaria necesaria acerca acerca del propósito y naturaleza del estudio, cada sujeto recibirá una copia del informe de consentimiento. consentimiento. 6.3.3 Preparación de la sustancia de prueba Los productos que el usuario emplea tal como se presentan a la venta, se aplican directamente sobre la piel. Los que se emplean en polvo (maquillajes, sombras de ojos, etc.) se aplican como polvos al realizar esta prueba. En el caso de los que el usuario emplea
diluidos, la concentración del material de prueba debe ser aplicada en el parche de acuerdo a lo que se indica en la Tabla Tabla 1. En el caso de los sólidos, éstos deben ser pulverizados previamente utilizando un mortero y después tamizados (tamiz del No. 40). En el caso caso de los los líqu líquid idos os,, se prep prepar arar ará á la conc concen entr trac ació ión n adec adecua uada da utilizando agua destilada (ver Tabla 1). Se utilizan parches de algodón o similares a los utilizados en la prác práctitica ca médi médica ca,, apli aplica carr la cant cantid idad ad de sust sustan anci cia a de prue prueba ba especificada en la Tabla 1. Debe tenerse cuidado de no aplicar una cantidad excesiva de la sustancia, ya que podría escurrir o abarcar un área mayor que la del parche. 6.3.4 Procedimiento Se pueden aplicar hasta 4 parches por brazo y sólo en caso de mucha necesidad un total de 8 parches por voluntario, con un espacio mínimo entre los bordes de cada parche de 2 cm. Los parches se aplican en la superficie lateral del brazo entre el hombro y el codo, con el brazo en una posición relajada al lado del cuer cuerpo po.. Los Los luga lugare ress de apli aplica caci ción ón de los los parc parche hess se elig eligen en aleatoriamente y se deben rotar entre los diferentes voluntarios para minimizar la variación entre los sitios, como en el siguiente ejemplo: 4 muestras: 1-2-3-4, 2-3-4-1, 3-4-1-2, 4-1-2-3 3 muestras: 1-2-3, 2-3-1, 3-1-2 2 muestras: 1-2, 2-1
El siti sitio o de apli aplica caci ción ón para para cada cada mues muestr tra a y para para cada cada suje sujeto to volunt voluntari ario, o, se anota anota claram clarament ente, e, conser conserván vándos dose e su locali localizac zación ión durante todo el tiempo que dure la prueba. Los sitios de prueba son marcados con 2 puntos arriba y 1 abajo con una solución al 0,5% de viol violet eta a de genc gencia iana na,, de form forma a que que la loca localiliza zaci ción ón del del siti sitio o de apli aplica cacción ión
sea
clara laram mente ente
visib isible le
para ara
las las
subse ubsecu cuen enttes
evaluaciones y nuevas reaplicaciones del parche. Los parches se aplican 3 veces, cada uno durante el tiempo que se especifica en la tabla 1 por 24 horas y después se remueven. Los sitios se evalúan 48 horas después de cada aplicación (72 horas después de un fin de semana). Los parches se aplican y se evalúan de la siguiente manera: Primer día: Se aplican los parches y se mantienen en su lugar el tiempo que se especifica en la Tabla 1, cubriéndose con material adhesivo como micropore, dicho material debe colocarse de manera que se ejerza igual presión sobre todo el parche. Segundo día: Se instruye al voluntario para que él mismo se retire el parc parche he y elim elimin ine e cual cualqu quie ierr resi residu duo o de la sust sustan anci cia a de prue prueba ba utilizando una toalla o un trozo de algodón húmedos. Tercer día: Acudir al centro de prueba donde se realiza la evaluación del área expuesta, empleando una fuente luminosa artificial, de ser nece necesa sari rio, o, auxi auxililiar arse se con con una una lent lente e de aume aument nto. o. Al term termin inar ar la evaluación se aplica el siguiente parche. Cuarto día: Proceder como el segundo día. Quinto día: Proceder como el tercer día.
Sexto día: Proceder como el segundo día. Séptimo día: Proceder como el tercer día sin aplicar nuevo parche. Las evaluaciones se califican utilizando la siguiente escala: 6.3.5 Escala de evaluación 0 No se presenta reacción visible en la piel 0,5 Mayor que 0 y menor que 1 1 Eritema ligero definido, sin erupciones ni grietas en la piel o bien ausencia de eritema con presencia de resequedad 1,5 Mayor que 1 y menor que 2 2 Eritema Eritema moderado, moderado, puede presentars presentarse e algunas algunas pápulas pápulas o fisuras fisuras profundas y presentarse eritema moderado o severo en las grietas 2,5 Mayor que 2 y menor que 3 3 Eritema severo (color rojo brillante), pueden presentarse pápulas genera generaliz lizada adass o eritem eritema a severo severo con edema edema ligero ligero (borde (bordess bien bien definidos y elevados) 3,5 Mayor que 3 y menor que 4 4 Vesículas generalizadas o eritema moderado a severo o edema que se extiende más allá del área del parche Los voluntarios deben ser evaluados por la misma persona durante toda la prueba.
Los parches no se aplican en el sitio que ha presentado una cali calififica caci ción ón igua iguall o mayo mayorr de 2. Esta Esta cali calififica caci ción ón se regi regist stra ra adecuadamente. La reaplicación del parche se hará en la parte ante anteri rior or al siti sitio o inic inicia iall de apli aplica caci ción ón,, si este este siti sitio o obti obtien ene e una una calificación igual o mayor de 2, el tercer sitio se eligirá en la parte posterior al sitio inicial. Si se presenta una irritación irritación excesiva excesiva (calificación (calificación >2) en todos los part partic icip ipan ante tess en la prim primer era a eval evalua uaci ción ón,, para para las las apli aplica caci cion ones es subsecuentes debe disminuirse la concentración de la sustancia de prueba a la mitad para los productos que se aplicaron diluidos, o se disminuirá el tiempo de aplicación de esta sustancia a la mitad para aquellos productos que se aplican en su presentación original (ver Tabla 1). En cualquier caso el parche se reaplica en la parte anterior al sitio inicial de aplicación y, si se requiere, el tercer sitio se eligirá en la part parte e post poster erio iorr al siti sitio o inic inicia ial.l. Esto Esto debe debe docu docume ment ntars arse e CLARAMENTE y tomarse en cuenta en los criterios de aceptación del producto. 6.3.6 Análisis de datos En el caso de que obtenga una calificación de 3 o más, no se reap reaplilicca parc parch he y se supo supone ne una una calif alific icac ació ión n de 3 para ara las las evaluaciones restantes. Duran urantte la prue prueba ba se puede ueden n pres presen enttar como omo res respue puestas stas esperadas, reacciones que van de medio a moderado eritema, con alguna comezón o sensación de ardor. Los voluntarios deben de tener la forma de comunicarse (proporcionar un número telefónico) con el centro de prueba, tan pronto como la respuesta sea de mayor
intensidad intensidad,, a fin de que cuente con asistencia asistencia médica las 24 horas del día. Cualquier sujeto que falte a una aplicación o evaluación debe ser elim elimin inad ado o del del estu estudi dio. o. La razó razón n por por la cual cual se elim elimin inó ó algú algún n voluntario debe ser anotada para tomarse en cuenta al hacer la evaluación final. 6.3.7 Interpretación de los resultados Después que han completado todas las sesiones de evaluación se suman las calificaciones obtenidas por día y se dividen entre el núme número ro tot total de sujet jetos, os, lo que que repr repres esen enta ta al prom romedio edio de calificación para este día. El promedio de estas calificaciones es el INDICE DE IRRITACION PROMEDIO FINAL. 6.3.8 Criterios de aceptación Los productos para uso en bebés deben presentar un índice de irritación promedio final no mayor de 1. Los productos que tengan una calificación menor o igual a 1,5 serán aceptados como productos aptos para uso humano. 6.4 Prueba de sensibilización Esta prueba podrá realizarse en piel de cobayos o en piel de humanos. 6.4.1 Prueba de sensibilización en piel de cobayos 6.4.1.1 Materiales y reactivos
En esta prueba deben utilizarse cobayos de la cepa Hartley, con un peso entre 300 y 400 g, para cada fase de la prueba se aconseja emplear el mismo número de hembras que de machos. El número de animales necesarios en cada fase es el siguiente: Un mínimo de 10 animales de prueba (de preferencia 20) para las fases de inducción y desafío 10 animales control para la fase de redesafío, cuando ésta se requiera 4 animales para el estudio de irritación, previo a la fase de inducción 8 animales para el estudio de irritación, previo a la fase de desafío Cepos dotados de una banda elástica de hule, h ule, para mantener sujeto al animal durante el tiempo de aplicación de los parches Jaulas individuales de malla metálica u otro material adecuado Rasuradora eléctrica, equipo para animales pequeños, con peines del No. 40 y del No. 0 Pipetas de volumen ajustable, graduadas en décimas de ml Agua destilada esterilizada Balanza analítica Fuente de luz blanca fluorescente de 160 watts Gasa quirúrgica esterilizada Tela adhesiva (de adhesión suave)
Tamiz del No. 40 (0,42 mm de abertura de malla) Bandas elásticas (tensoplast) quirúrgicas 6.4.1.2 Procedimiento Consideraciones generales El único periodo de estrés a que deben ser sometidos los animales es el tiem iempo que que se les les mant antiene iene en los los cepo epos, dura duran nte la expo expossició ición n a la sust ustanc ancia de pru prueba. eba. La adm adminis inisttrac ración ión de analgésicos o sedantes puede modificar la respuesta inflamatoria a evaluar. Tambi ambién én pued puede e modi modififica cars rse e el tono tono musc muscul ular ar,, tray trayen endo do como como consecuencia que las condiciones de oclusión de los parches se modifiquen de manera importante. Por lo tanto, no se debe administrar este tipo de sustancias ni otros medicamentos a los animales durante el tiempo que dura la prueba. 6.4.1.3 Métodos de tratamiento y observación 6.4.1.3.1 El día anterior a la prueba debe rasurarse el dorso del animal en el área de aplicación de los parches con la rasuradora eléctrica, utilizando primero el peine del No. 40 y después el del No. 0. Esto debe hacerse cuidadosamente, sin lesionar la piel al rasurar. rasurar. 6.4.1.3.2 Los parches a aplicar deben ser ocluidos, preparándose como como sigu sigue: e: El mate materi rial al de prue prueba ba se apli aplica cará rá dire direct ctam amen ente te al animal, cubrir con el parche de gasa quirúrgica esterilizada de 2 x 2 cm, con un grosor de 4 a 8 monocapas, colocado en cualquier sitio del dorso del animal. Considerar como control cualquier otra área de
la piel en esta zona. En el caso de líquidos, aplicar 0,4 ml, en el caso de sólidos, polvos o pastas sujetar el parche a la piel en uno de los lados utilizando utilizando tela adhesiva, adhesiva, colocar el material material de prueba prueba 0,4 g sobre la piel, y cerrar el lado restante del parche con tela adhesiva. Los sólidos y polvos deberán ser molidos y tamizados antes de pesar. Cuando el material de prueba contenga sustancias volátiles, se debe debe perm permititir ir la evap evapor orac ació ión n del diso disolv lven ente te ante antess de apli aplica carr el material de prueba con la sustancia y de colocarlo en la piel del animal. 6.4.1.3.3 Colocar el animal en el cepo y aplicar el parche en el área adecuada. Ocluir el parche utilizando la banda elástica, ajustándola de manera que haga contacto con la región dorsal del animal de manera uniforme. Ajustar el cepo para minimizar los movimientos del animal durante el periodo de exposición. Mien Mientr tras as perm perman anez ezca can n en el cepo cepo,, los los anim animal ales es debe deberá rán n ser ser revi revisa sado doss cada cada 60 o 90 minu minuto tos, s, anot anotán ándo dose se cuid cuidad ados osam amen ente te cualquier síntoma de molestia. Los parches deberán permanecer por 6 horas en todas las fases de la prueba. Transcurrido este tiempo, remover el parche y limpiar el área de aplicación con una toalla o gasa húmeda y regresar los animales a su jaula. 6.4.1.4 Evaluación de la prueba Se debe realizar la evaluación a las 18 horas, utilizando la escala que se incluye en la Tabla 2. Repe Repetitirr la eval evalua uaci ción ón 24 hora horass más más tard tarde e (es (es deci decirr 48 hora horass después de haber removido el parche).
Debe utilizarse esta escala para realizar las evaluaciones de las prue prueba bass prel prelim imin inar ares es de irri irrita taci ción ón y de la fase fase de desa desafí fío. o. La evaluación de todos los animales debe realizarse colocándolos bajo una fuente de luz blanca fluorescente de 160 watts, a una distancia de 90 cm y sobre un fondo negro plano. Esta evaluación debe hacerse por dos técnicos, los cuales deben estar de acuerdo en la calificación que se registre. Adem Además ás,, cuan cuando do la resp respue uest sta a sea sea difí difíci cill de eval evalua uarr pued pueden en compararse los sitios de aplicación del parche de otros animales en el grupo de prueba y en el control antes de emitir la calificación. 6.4.1.5 Estudio de irritación previo a la fase de inducción Efectuar un estudio previo a la fase de inducción, con objeto de determinar el potencial de irritación de la sustancia de prueba. Para ello utilizar un grupo de 4 cobayos, de preferencia 2 hembras y 2 machos. Rasurar el pelo en el lomo y los flancos de cada animal, un día antes de iniciar la prueba. Transcurridas 24 horas, aplicar los parches como se indicó en la 6.4.1.3.2, utilizando 4 concentraciones de la sustancia, incluido el 100%. Para hacer diluciones deberá utilizarse un vehículo adecuado (agua, aceite mineral, alcohol, etc.), dependiendo de la naturaleza de la sustancia de prueba. Los sitios de aplicación del parche en cada animal para esta fase del estudio deberán ser los indicados en la figura 1.
Deben eben alt alterna ernars rse e los los sitio itioss de apli apliccació ación n de las las dif diferen erenttes concentraciones entre los 4 animales, como se indica en la figura 2, para minimizar la variación de la respuesta entre sitios.
El sitio de aplicación de cada concentración en el animal deberá anotarse claramente. Los parches deberán permanecer aplicados durante 6 horas, después se remueven de acuerdo a lo indicado en el punto 6.4.1.3.3. Evaluar la reacción de cada sitio de prueba a las 24 y 48 horas como como se expl explic ica a en el punt punto o 6.4. 6.4.1. 1.4, 4, util utiliz izan ando do la esca escala la de evaluación (Tabla 2). Elegir la concentración que provoque una irritación dérmica ligera, para realizar la fase de inducción. Si como resultado de esa prueba se encuentra que la máxima concentración no produce irritación, esta concentración será elegida para realizar la fase de inducción y la fase de desafío. En aquellos casos en que una de las concentraciones utilizadas provoca una
irrita irritació ción n dérmi dérmica ca ligera ligera,, será será necesa necesario rio realiz realizar ar otro otro estudi estudio o de irr irritac itació ión n prev previo io a la fase ase de desa desafí fío, o, como se des describ cribe e a continuación. 6.4.1.6 Estudio de irritación previo a la fase de desafío Cuando sea necesario, realizar un nuevo estudio de irritación previo a la fase de desafío, considerando la concentración que provocó una irritación dérmica ligera como concentración máxima. A partir de este este valor valor,, elegir elegir otras otras 3 concen concentra tracio ciones nes menore menoress a interv intervalo aloss regulares. En este caso sólo podrán aplicarse 2 parches en cada animal, como se muestra en la figura 3. Alternar los sitios de aplicación entre los 8 animales, como se indica en la figura 4, para minimizar la variación entre sitios.
Aplicar los parches de la manera antes descrita, durante 6 horas. Transcurrido este tiempo, remover el parche y limpiar el área de aplicación de acuerdo a lo mencionado en el punto 6.4.1.3.3. Evaluar a las 24 y 48 horas, utilizando la escala incluida en la Tabla 2.
Elegir Elegir la máxim máxima a concen concentra tració ción n que NO provoc provoca a irrita irritació ción n para para realizar la fase de desafío. 6.4.1.7 Fase de inducción Emplear un mínimo de 10 cobayos como animales de prueba. Día 0: Rasurar el pelo del flanco superior izquierdo de cada animal del grupo, como se describió en el punto 6.4.1.3.1. Día 1: Aplicar los parches a los animales de acuerdo a lo descrito en el punto 6.4.1.3.2. El sitio de aplicación del parche de inducción en cada animal se indica en la figura 5.
Después de 6 horas de aplicado el parche, removerlo, limpiar como lo indica el punto 6.4.1.3.3 y regresarlo a su jaula. Días 6 y 13: Rasurar nuevamente a los animales. Días 7 y 14: Proceder como el día 1. Anotar cualquier reacción de la piel en el sitio de aplicación del parche durante esta fase. 6.4.1.8 Fase de desafío
Día 27: Rasurar el flanco posterior izquierdo de los 10 (o 20) cobayos de la fase de inducción y a 10 animales no expuestos a sustancias de prueba, que servirán como control. Día 28: Aplicar un parche de desafío a cada uno de los 20 (o 30) animales (10 o 20 de prueba y 10 de control) como se describe en el punto 6.4.1.3.2, en el sitio que se indica en la figura 6. Note que este sitio es DIFERENTE al empleado para aplicar el parche de inducción.
Remover el parche después de 6 horas de aplicación, limpiar el sitio y regresar cada animal a su jaula. Día 29: Evaluar la respuesta a las 24 horas de haber removido el parche de desafío, utilizando la escala incluida en la Tabla Tabla 2. Día 30: Evaluar la respuesta a las 48 horas de haber removido el parche de desafío. Proceder como el día 29. 6.4.1.9 Fase de re-desafío Cuando la respuesta obtenida en la fase de desafío es dudosa, deberá realizarse un re-desafío en el grupo de prueba de 7 a 15 días después del primer desafío.
Deberán incluirse otros 10 cobayos no expuestos anteriomente a la sustancia de prueba como control. Rasurarse la porción dorsal derecha, como se indica en el punto 6.4.1.3.1, en el sitio indicado en la figura 7. Note que este sitio es DIFERENTE a los sitios de aplicación del parche de inducción y del parche de desafío.
Remover el parche después de 6 horas de d e aplicación y evaluar a las 24 y 48 horas después de la remoción del parche, como se indica en el punto 6.4.1.3.3, utilizando la escala incluida en la Tabla 2. Los Los anim animal ales es util utiliz izad ados os en este este estud studiio no podr podrán án usar usarsse nuevamente en una prueba de sensibilización. TABLA 2 ESCALA DE EVALUACION 0 = No hay evidencia de reacción ± = Eritema muy ligero, apenas perceptible, que se presenta sólo en algunas zonas en el área de aplicación del parche
1 = Eritema ligero confluente (reacción ligera pero definida en todo el sitio sitio del parche parche)) o eritem eritema a modera moderado do pero pero irregu irregular lar (erite (eritema ma moderado desarrollado en el 50% del área del parche) 2 = Eritema moderado evidente 3 = Eritema severo con o sin edema 6.4.1.10 Análisis Análisis de datos Tabular las evaluaciones como se indica en las tablas incluidas en el apéndice normativo A 1 y 2. Una comparación de los resultados entre los animales del grupo de prueba y de los grupos de control permite la identificación de la sensibilización. Los resultados se expresan en términos de incidencia y severidad de la respuesta. Incidencia: El número de animales que muestra una calificación mayor de 1 a las 24 o 48 horas dividido entre el número de animales tratados. Severidad: Severidad: La suma suma de las calificacione calificacioness divididas divididas entre el número número de animales tratados. 6.4.1.11 Interpretación de los resultados Como Como regla regla gene genera ral,l, un mate materi rial al pued puede e clas clasifific icar arse se como como un sens sensib ibililiz izan ante te por por cont contac acto to si se prod produc uce e una una reac reacci ción ón con con calificación mayor de 1 en 20% o más en los animales de prueba, siempre y cuando la incidencia en el grupo de control sea menor de la mitad que en el grupo de prueba, además por lo menos en uno de
los cobayos del grupo de prueba que presentaron reacción, ésta deberá haber persistido durante 48 horas. A contin continuac uación ión se incluy incluyen en ejemp ejemplos los que ilustr ilustran an result resultado adoss de prueba de sensibilización y su interpretación. Ejemplo Grupo Incidencia (*) Interpretación 1 Prueba 4/20 Positiva Control 0/10 2 Prueba 9/20 Positiva Control 2/10 3 Prueba 10/20 Cuestionable Control 3/10 4 Prueba 3/20 Cuestionable Control 0/10 5 Prueba 0/20 Negativa Control 1/10 (*) Número total de animales que muestran una reacción de la piel ³ a 1 a las 24 o 48 horas después del tratamiento, con respecto al número total de animales incluidos. 6.4.1.12 Criterio de aceptación
Los Los prod produc ucttos para para los los que que se obt obtenga enga una una inte interp rpre rettació ación n NEGATIVA en esta prueba de sensiblización, serán aceptados como productos aptos para uso humano. Si en un producto se obtiene una interpretación CUESTIONABLE, se podrá optar por cualquiera de las siguientes alternativas: 6.4 6.4.1.1 .1.12 2.1 Os Osttent entar la ley leyenda enda "Es "Este produ roduccto puede uede ser sensibilizante". 6.4.1.12.2 Repetir la prueba. Si los resultados de esta segunda prueba confirman los obtenidos en la primera, deberá optarse por la alternativa del punto 6.4.1.12.1, si la interpretación obtenida en la segunda prueba es negativa, el producto será considerado apto para uso humano. 6.4.1.12.3 Proceder a la prueba en humanos. Si los resultados son negativos, se considerará el producto apto para uso humano. 6.4.2 Prueba de sensibilización en humanos Esta prueba tiene por objeto proporcionar información con respecto al potencial de sensibilización (desarrollo de reacciones alérgicas) como como consec consecuen uencia cia de exposi exposicio ciones nes repeti repetidas das del materi material al de prueba en piel intacta. Esto se evalúa en voluntarios, mediante contacto externo del material de prueba con la piel, utilizando un procedimiento de aplicaciones repetidas con parche ocluidos. 6.4.2.1 Materiales y reactivos Agua destilada esterilizada Fuente de luz blanca mínimo de 60 watts
Lente de aumento Matraz Erlenmeyer Gasa quirúrgica esterilizada Tela adhesiva o micropore Tela ahulada Mortero Balanza analítica Tamiz del No. 40 (0.42 mm de abertura de malla) Para desarrollar este estudio se requiere la participación de un mínimo de 80 voluntarios. 6.4.2.2 Procedimiento Cada uno de los voluntarios, previo a su participación en el estudio, debe proporcionar al investigador un documento en que exprese su consentimiento a participar en esta prueba. Un modelo de este tipo de doc documento ento se inc incluye luye en el apén apénd dice ice info inforrmativ ativo o A. El investigad investigador or informará informará a cada voluntario voluntario del propósito propósito y naturaleza naturaleza del estudio. 6.4.2.3 Elección de los voluntarios La persona puede ser elegible para este estudio, de acuerdo a los crit criter erio ioss que que se menc mencio iona nan n en el punt punto o 6.3. 6.3.2. 2.1 1 y adem además ás los los siguientes:
Si una una pers person ona a part partic icip ipó ó ante anterriorm iormen ente te en una una prue prueba ba de sens sensib ibililiz izac ació ión n y no se le desa desarr rrol olló ló aler alergi gia, a, pued puede e part partic icip ipar ar nuevamente en una prueba de este tipo, sólo si ya han transcurrido un mínimo de 6 meses de la prueba anterior. Si una una pers person ona a part partic icip ipó ó ante anterriorm iormen ente te en una una prue prueba ba de sens sensib ibililiz izac ació ión n y se le desa desarr rrol olló ló aler alergi gia, a, no podr podrá á part partic icip ipar ar nuevamente en un estudio de este tipo. La elección de cada sujeto potencial se determina a través del llenado de un cuestionario que cubre aspectos de historia alérgica y derma dermatol tológic ógica a del pacien paciente te (ver (ver apéndi apéndice ce infor informat mativo ivo A 3). Los sujetos se excluirán de la prueba por una o más de las razones expuestas anteriormente. El centro de prueba podrá, a su criterio, incluir casos adicionales para determinar la elección. Todas odas las las dec decisio isione ness con con relac elació ión n a la ele elecc cció ión n deb deben ser docu docum ment entadas adas
adec adecua uada dam ment ente
hac haciend iendo o
las
anot anotac acio ione ness
pert pertin inen ente tess en el cues cuestition onar ario io corr corres espo pond ndie ient nte e a cada cada suje sujeto to.. Cuan Cuando do sea sea nece necesa sari rio, o, el supe superv rvis isor or podr podrá á cons consul ulta tarr con con un dermatólogo para determinar la elección de un sujeto. 6.4.2.4 Aplicación Aplicación de los parches Los sitios de la aplicación de los parches deben ser marcados adecuadamente, de manera que la localización de cada sitio de apli aplica caci ción ón de parc parche he qued quede e indi indica cada da clar claram amen ente te.. Esto Esto pued puede e realizarse utilizando una solución de violeta de genciana al 0,5%. Este marcado de los sitios de aplicación de los parches permite la aplicación en los mismos sitios a lo largo de la fase de inducción del estudio.
En cada parche debe aplicarse 0,3 ml (líquidos) o 0,3 g (sólidos, polvos o pastas) de la sustancia de prueba. La sustancia de prueba debe prepararse de la siguiente manera: En el caso de productos que el consumidor utiliza al 100% y se dejan aplicados sobre la piel todo el día, tales como cremas, talcos, etc etc., ésto éstoss debe deben n ser apli apliccados ados en el parc parch he tal y como se presentan a la venta. Para productos que se emplean diluidos (champúes (shampoos), jabones, etc.), los que se usan al 100% pero que no se aplican directamente sobre la piel durante su uso normal (máscaras para pestañas, etc.), y en los que se utilizan al 100% y se enjuagan un tiempo después (tintes, ondulantes, fijadores, depilatorios, etc.), la susta ustanc ncia ia de prue prueba ba se debe debe prepa repara rarr como una una diluc ilució ión n empleando un vehículo adecuado (agua destilada, aceite mineral, etc.) dependiendo de la naturaleza del producto. En este caso, la concentración de la sustancia de prueba que se aplique en el parche debe ser la que provoque una mínima irritación en la piel humana en una prueba de parche. Para productos que presentan un solvente (como lociones, quita esmalt esmaltes, es, etc.) etc.) éste éste debe debe dejars dejarse e evapor evaporar ar durant durante e 15 minuto minutoss antes de efectuar la prueba. Para los productos que se aplican diluidos en la prueba, debe incluirse un parche en que se aplique el vehículo, a modo de control, además del parche con la sustancia de prueba. Para Para aseg asegur urar ar una una buen buena a adhe adhesi sión ón de los los parc parche hes, s, ésto éstoss se aseg asegur uran an sobr sobre e la piel piel util utiliz izan ando do tela tela adhe adhesi siva va poro porosa sa,, como como micr microp opor ore e o derm dermic icel el.. Esta Estass "ban "banda dass de refu refuer erzo zos" s" debe deben n ser ser
aplicadas de manera que ejerzan una presión homogénea sobre el parche. Los materiales de prueba se aplican a los participantes en una secuencia establecida previamente. Esta secuencia de aplicación debe rotarse entre los participantes con objeto de minimizar sesgos debi debido doss a la posi posici ción ón del del parc parche he en el braz brazo, o, de la sigu siguie ient nte e manera: Cuatro muestras: 1-2-3-4, 2-3-4-1, 3-4-1-2, 4-1-2-3 Tres muestras: 1-2-3, 2-3-1, 3-1-2 Dos muestras: 1-2, 2-1 Esta Esta secu secuen enci cia a debe debe ser ser docu docume ment ntada ada clar claram amen ente te para para cada cada participante a lo largo de la prueba. 6.4.2.5 Inducción Los parches con el material de prueba deben ser aplicados en la superficie lateral superior del brazo, en el orden asignado a cada sujeto. Antes de la aplicación del primer parche de inducción y de la aplicación de los parches de desafío, el área del brazo a tratar debe limpiarse con una gasa saturada con alcohol al 95% (etanol o isopropanol) para remover grasa superficial de la piel y exceso de humedad. Debe permitirse la evaporación del alcohol antes de que se apliquen los parches.
El brazo de inducción se determina por el supervisor de la prueba y se anota. Este brazo no debe tener cicatrices grandes de vacuna, tatuajes, vitiligios o cualquier otro tipo de cicatrices. Los parches se aplican longitudinal y centralmente entre el hombro y el codo en la superficie lateral del brazo, con el brazo en una posición relajada al lado del cuerpo. Cada parche de inducción se aplica al mismo sitio que el parche previo con la sustancia de prueba, prueba, a menos que el grado de reacción reacción a ésta haya sido tal que se necesi necesite te reubic reubicaci ación. ón. Los sitios sitios altern alternati ativos vos en estos estos casos casos debe deben n esta estarr adya adyace cent ntes es al siti sitio o orig origin inal al ya sea sea haci hacia a la part parte e anterior o la posterior de la superficie lateral del brazo. Después de colocar un parche en ambos sitios adyacentes durante la fase de indu induccción, ión, el parc parche he deb debe ser colo coloca cad do nuev nueva ament ente en la localización original central, siempre y cuando haya desaparecido la respuesta inicial. En caso de que no sea adecuado colocar el parche en este sitio central nuevamente, el parche no se aplica hasta hasta que la reacci reacción ón residu residual al desapa desaparez rezca ca totalm totalment ente. e. Si esto esto ocurre, debe documentarse adecuadamente. Si sólo una pequeña porción del sitio de aplicación muestra una resp respue uest sta a
sufi suficcient ientem emen entte
inten ntenssa
como
para para amer ameritita ar
la
reloc relocal aliz izac ació ión n del del parc parche he,, el sigu siguie ient nte e parc parche he debe debe ajus ajusta tars rse e ligeramente para evitar esta área. Este caso no se considera una relocalización completa. Cada Cada volunt voluntari ario o partic participa ipante nte recibe recibe instru instrucc ccion iones es para para mante mantener ner todos los parches tan secos como sea posible y remover o desechar los parches después de 24 horas. El área donde estaba colocado cada cada parc parche he debe debe ser ser limp limpia iada da de la mane manera ra acos acostu tumb mbra rada da después de la remoción, pero sin que esto elimine la marca que
identi identific fica a los sitios sitios de aplica aplicació ción n de los parche parches. s. Las person personas as participantes pueden bañarse después de quitar el parche. Este tipo de instru instrucci ccione oness deben deben propor proporcio cionar narse se a cada cada partic participa ipante nte por escrito al comenzar la prueba. Los parches de inducción se aplican en lunes, miércoles y viernes de las primeras 3 semanas de la prueba (nueve aplicaciones en total), y se valúan 48 horas después de su aplicación. En los participantes que se ausenten una vez durante estas 9 aplicaciones, el último parche de inducción deberá aplicarse el cuarto lunes de la prueba. Esta aplicación deberá evaluarse 48 horas más tarde. 6.4.2.6 Desafío Los Los parc parche hess de desa desafí fío o se apli aplica can n simu simultltán ánea eame ment nte e a ambo amboss brazos (de inducción y desafío) de cada participante, durante 24 hora horas. s. En el brazo razo de indu induccción ión los los parc parche hess son apli aplica cado doss apro aproxi xima mada dame ment nte e en los los mism mismos os siti sitios os que que los los parc parche hess de inducción. Si la reacción residual de la fase de inducción es severa, el parche de desafío deberá aplicarse hasta que esta reacción desa desapa parrezca ezca.. El parc arche de desa desafí fío o se col coloca oca en el braz brazo o correspondiente, en posición similar a la del parche de inducción. Cualquier modificación debe ser debidamente documentada. Los Los parc parche hess de desa desafí fío o se apli aplica can n apro aproxi xima mada dame ment nte e 17 días días después de la última aplicación de inducción. Cualquier sujeto que se ausente más de una vez durante la fase de inducción o durante la semana de desafío, debe ser eliminado de la prueba. El número final de individuos que completaron el estudio deberá incluir solamente a aquellos participantes que hayan tenido
9 parc parche hess de indu inducc cció ión n y cuyo cuyo parc parche he de desa desafí fío o haya haya sido sido evaluado 2 veces. Todos los voluntarios deben ser informados adecuadamente sobre las fechas en que deben asistir al lugar en que se hará la evaluación de la prue prueba ba y de los los núme número ross tele telefó fóni nico coss de emer emerge genc ncia ia.. Se sugier sugiere e propor proporcio cionar narles les un calend calendari ario o en que estén estén claram clarament ente e marcadas todas las fechas de asistencia, así como una explicación por escrito de los días de los requerimientos pertinentes. Además, debe deberá rá prop propor orci cion onar arse se el núme número ro tele telefó fóni nico co de las las pers person onas as apro apropi piad adas as rela relaci cion onad adas as con con la prue prueba ba,, de mane manera ra que que ésta éstass puedan ser localizadas cualquier día a cualquier hora. 6.4.2.7 Evaluación de los sitios de prueba Para iluminar el área del parche durante cada evaluación debe utilizarse una fuente de luz artificial, de preferencia una lámpara con foco azul incandescente de 100 watts. El brazo del sujeto debe perm perman anece ecerr en posi posici ción ón rela relaja jada da al lado lado del del cuer cuerpo po.. Los Los siti sitios os deben ser evaluados 48 horas después de la aplicación del parche durante la fase de inducción (72 horas si el parche se aplicó en viernes). Durante la fase de desafío los sitios de aplicación del parche deben ser evaluados a las 48 y 96 o bien a las 48 y 72 horas después de la aplicación. La evaluación de los sitios de parche se hará de acuerdo a la escala de evaluación que se incluye en el punto 5.6.1. La misma persona debe evaluar los sitios de parche para los sujetos durante todo el estudio. 6.4.2.8 Participantes que no completaron la prueba
Si un sujeto sujeto se elimina elimina del estudio, estudio, debido a que no asistió asistió a todas las sesiones, esto debe ser debidamente documentado. En estos casos, debe determinarse la razón por la que el individuo no asistió. Si el sujeto se encuentra preocupado por la respuesta a un parche, si asocia algún problema con su participación en la prueba, le disgusta algún aspecto de la prueba, etc., se deben realizar esfuerzos para comunicarse con dicho sujeto, animarlo a seguir participando en caso de que esto sea pertinente, o bien obtener evaluaciones en los sitios de prueba si se va a retirar del estu estudi dio. o. Se debe debe ofre ofrece cerr cons consul ulta ta,, diag diagno nosi siss y trat tratam amie ient ntos os dermatológicos en aquellos casos que así lo requieran. Se debe dar un seguimiento adecuado en aquellos casos en que un sujeto muestra señales de una posible sensibilización a la sustancia de prueba, independientemente de que se haya retirado o no del estudio. Sin un sujeto demuestra ser alérgico a una determinada sustancia de prueba y se retira del d el estudio, deben aplicarse parches de desafío para corroborar esta reacción. 6.4.2.9 Guía para la interpretación de los datos En aquellas respuestas de la piel en los sitios de desafío que sean más severas a la sustancia de prueba, en comparación con la respuesta durante las aplicaciones de inducción, se considera como posiblemente debidas al desarrollo de hipersensibilidad retardada por por cont contac acto to (ale (alerg rgia ia). ). Adem Además ás,, aque aquellllas as resp respue uest stas as que que se incrementan en severidad durante las evaluaciones de desafío de 48 a 96 horas, también serán consideradas como posiblemente debidas a una alergia por contacto, mientras que aquellas que
disminuyen en severidad de las 48 a las 96 horas, generalmente son indicativas de irritación primaria. Si se presentan respuestas persistentes de la piel (por 96 horas o más) con pápulas o edema que se presenten durante la primera semana de inducción, se considera generalmente que esto indica una alergia preexistente. Si se desarrollan reacciones persistentes de este tipo durante la segunda o tercera semana de la fase de indu inducc cció ión, n, se cons consid ider era a que que esto esto pued puede e indi indica carr desa desarr rrol ollo lo de reacciones alérgicas durante la prueba. Las Las resp respue uest stas as de la piel piel que que sugi sugier eren en hipe hipers rsen ensi sibi bililida dad d por por contacto durante esta prueba pueden realmente resultar de irritación primaria y no de alergia cutánea. En estos casos pueden ser muy útil útiles es prue prueba bass de re-d re-des esaf afío ío para para dife difere renc ncia iarr entr entre e reac reacci cion ones es alérgicas y reacciones de irritación. 6.4.2.10 Prueba de re-desafío confirmatoria Cual Cualqu quie ierr sust sustan anci cia a de prue prueba ba sosp sospec echo hosa sa de habe haberr indu induci cido do sens sensib ibililiz izac ació ión n dura durant nte e la prue prueba ba orig origin inal al pued puede e ser ser apli aplica cada da nuev nuevam amen ente te al sujeto jeto en cuest uestió ión, n, así así com como a sujeto jetoss no sensibilizados (control) hasta 3 meses después del desafío original, una vez que se ha obtenido su consentimiento. Los parches se aplican aplican en la superficie superficie lateral superior superior de ambos ambos brazos. brazos. Después Después de 6 horas los parches se quitan y desechan. Se efectúan por lo menos dos evaluaciones de la respuesta, ya sea a las 48 y 96 horas o bien a las 48 y 72 horas después de la aplicación. 6.4.2.11 Escala de evaluación
0 No hay reacción visible. Esta calificación puede incluir reacciones superficiales de la piel, tales como brillo o resequedad. 1 Reacción eritematosa ligera, color rosado pálido o rosado 1E* Reacción eritematosa ligera, con pápulas y/o edema 2 Reacción eritematosa moderada. Eritema definido rosado a rojo 2E* Reacción eritematosa moderada con edema y/o pápulas 3 Reacción eritematosa marcada. Color rojo brillante 3E* Reacción eritematosa marcada con edema marcado, pápulas y/o algunas vesículas 4 Reacc Reacción ión eritem eritemato atosa sa severa severa con eritem eritema, a, pápula pápulas, s, edema edema y vesículas 5 Reacción bulosa (S) Reacción presente más allá del área del parche Nota: Se considera que se presenta eritema, pápulas y vesículas cuando éstas involucran 25% o más del sitio del parche. E* Si se presentan pápulas, añadir una P a la calificación; si se presentan vesículas, añadir una V a la calificación. Criterio de relocalización: Cualquier calificación mayor o igual a 2 (incluyendo la adición de V o P) durante la inducción, requiere que el parche se relocalice en la siguiente aplicación. Cali Calififica caci ción ón dobl doble: e: Indi Indica ca que que el parc parche he se movi movió ó a un siti sitio o adyacente al original. La primera calificación será la correspondiente
para el sitio nuevo; el segundo número es la calificación de la reacción residual en el sitio original. Generalmente, una reacción residual se califica y reporta una sola vez después de la relocalización. Si se sospecha sensibilización, la calificación residual del sitio original podrá reportarse más de una vez. 7. Pruebas in vitro
7.1 Prueba de la membrana corioalantoica 7.1.1 Materiales y reactivos 10 huevos frescos fertilizados de gallina Lehmann-Leghorn con un peso entre 50 y 60 g por cada concentración de sustancia empleada Incubadora con charolas de rotado automático Fresa dental con rotor de baja velocidad (12000 a 15000 rpm) Microscopio estéreo de alta magnificación Solución salina isotónica 7.1.2 Procedimiento Se ponen a incubar los huevos a 37,5 ± 0,5ºC de temperatura, a una humedad de 62,5 ± 7,5% durante 10 días, girándolos al 5o. día para controlar el crecimiento. El décimo día se abren los huevos, por por el extr extrem emo o anc ancho dond donde e se loc localiz aliza a la burb burbuj uja a de aire aire,, empleando una fresa dental con rotor, a la membrana interior del huevo se empapa con una solución salina isotónica para removerla mecánicamente,
una
vez
removida
ésta,
corioalantoica está lista para analizar productos.
la
membrana
Se le aplican 0,3 ml de la muestra de prueba, se observa direct directame amente nte o se emple emplea a un estere estereom omicr icrosc oscopio opio para para observ observar ar hasta la reacción más ligera. 7.1.3 Análisis Análisis de los datos Se deja el producto en contacto con la membrana 5 minutos (300 segundos) y se prueban distintas concentraciones. concentraciones. Se observa si se presentan reacciones y se anotará el índice de acuerdo con la sigu siguie ient nte e Tabla abla si no hay reac reacci ción ón dete detect ctab able le,, se cali calififica cará rá al producto como no irritante. TABLA No. 3 REACCION CALIFICACION Vasos capilares más inyectados de lo normal 1 Enrojecimiento con los vasos difícilmente distinguibles 2 Enrojecimiento intenso 3 Enrojecimiento intenso con inflamación 4 Hemorragia generalizada 5 Lisis (destrucción de vasos) 7 Coagulación 10 (Desnaturalización protéica con trombosis, decoloración, opacidad y turbidez intra y extravascular) Se califica cada serie de huevos y se obtiene el promedio.
7.1.4 Interpretación de los resultados De los promedios obtenidos se obtiene una clasificación así: INDICE CLASIFICACION de 0.0 a 0.9 No irritante de 1.0 a 3.9 Ligeramente irritante de 4.0 a 8.9 Moderadamente irritante de 9.0 y mayores Severamente irritante 7.1.5 Criterio de aceptación Los productos para uso en bebés deben ser no irritantes. Los Los demá demáss prod produc ucto tos, s, para para perm perman anec ecer er en el merc mercad ado, o, debe deben n obtener una calificación no mayor de 4. Los Los prod produc ucto toss que que teng tengan an una una cali calififica caci ción ón mayo mayorr de 4 debe deben n ostentar en etiquetas la leyenda: "Producto irritante". Los productos con una calificación mayor de 9 no podrán destinarse para uso humano. 7.2 Ensayo en ojo de bovino 7.2.1 Materiales y reactivos. 8 ojos sanos de ternera extraídos de animales recién sacrificados se colocan dentro de los 10 minutos siguientes a la extracción en una soluc olució ión n salin alina a (0, (0,15 M de cloru lorurro de sodi sodio o en agua agua)) y se transportan a una temperatura entre 15 y 20°C (por cada producto a
investigar) se verifican dentro de la solución salina y se descartan los ojos con daños o anormalidades y el resto se mantiene en solución salina. Equipo para baño maría Tamiz del No. 40 (0,42 mm de abertura de malla) Charola portahuevos de plástico Mortero con pistilo Anillos de silicón con diámetro interior de 8 mm y diámetro exterior de 13 mm Solución salina isotónica Solución de fluoresceína (2% en solución pH 7,0) Lente de aumento Fuente de luz blanca Balanza analítica Matraz Erlenmeyer de 1,5 ml 7.2.2 Procedimiento Los Los ojo ojos se emple plean dent dentro ro de las las 4 hora horass sigui iguien enttes a su extracción, se destinan 5 a la prueba y 3 como controles y se colocan en una atmósfera húmeda en el baño maría cerrado por 5 minutos, se les aplican 0,1 ml del producto de prueba si es líquido y si es sólido se pulveriza en un mortero hasta hacerlo pasar por un tamiz del No. 40 y se calcula la dosis a aplicar mediante una
multiplicación de la densidad del producto en mg/ml por 0,1. La cant cantid idad ad a apli aplica cars rse e debe debe pesa pesars rse e con con una una prec precis isió ión n del del 1% utilizando una balanza analítica. Se aplica la sustancia de prueba directamente en la córnea dentro del anillo, en los 5 ojos de prueba, de los ojos de control uno se deja sin tratar y a los otros se les aplica 0,1 ml de tolueno y acetona, respectivamente, después de 30 segundos los ojos se riegan con solución solución salina 10 ml en total, total, se continúa continúa la incubación incubación en el baño maría cerrado, 10 minutos más; se les aplica fluoresceína y se examinan los resultados. 7.2.3 Interpretación de los resultados Se examina con una lente de aumento auxiliándose con una fuente de luz, los ojos de prueba, se observa la integridad del epitelio de la córnea, las calificaciones se establecen de acuerdo a la Tabla No. 4, la cali calififica caci ción ón fina finall se obti obtien ene e suma sumand ndo o las las cali calififica caci cion ones es de opacidad, integridad epitelial y desprendimiento epitelial y dividiendo entre el número de ojos expuestos en cada caso. TABLA No. 4 OPAC OPACID IDAD AD
CALI CALIFI FICA CACI CION ON
INTE INTEGR GRID IDAD AD
DESPRENDIMIENTO CALIFICACION EPITELIAL EPITELIAL (GRADO DE TINCION) NINGUNA 0 NINGUNA 0 SIN GRAVES 0 ANORMALIDADES
CALIF ALIFIC ICAC ACIO ION N
LIGERA 1 DIFUSA O DEBIL 0,5 ARRUGAMIENTO DE 2 LA SUPERFICIE MARCADA 2 CONFLUENTE Y 1 PERDIDA DE 3 DEBIL EPITELIO SEVERA 3 CONFLUENTE E 1,5 AUSENCIA DE 4 INTENSA EPITELIO CORNEA OPACA 4 7.2.4 Criterio de aceptación Todos los productos para uso en bebés deberán obtener resultados de 0 (cero) en los tres parámetros. Los demás productos deberán obtener una calificación de opacidad no mayor de 2, una de integridad del epitelio no mayor de 0,5 y no mayor de 0 (cero) de desprendimiento epitelial. Los productos productos que obtengan obtengan calificac calificaciones iones mayores podrán repetir la prueba o imprimir en etiquetas la nota "Este producto es irritante". 7.3 Ensayo en células rojas de sangre 7.3.1 Material Células rojas de sangre Centrífuga clínica estándar (10 000 rpm) Espectrofotómetro Espectrofotómetro UV visible
Tubo de ensayo Dodecil sulfato de sodio al 1% ( solución estándar) Matraces Erlenmeyer suficientes 7.3.2 Procedimiento 7.3.2.1 Preparación de las células rojas Las células rojas de sangre se aíslan por centrifugación de sangre citrada de ternera o cerdos recién sacrificados y lavada con solución de buffer salino fosfatado isotónico hasta eliminar trazas de plasma y células blancas. Para uso posterior, cuidadosamente se preparan suspensiones de célu célula lass roja rojass de sang sangre re cont conten enie iend ndo o gluc glucos osa a (10 (10 mmol mmol/l/l)) y se ajustaron para rendir aproximadamente 8 x 109 células/ml. La suspensión se prepara semanalmente y se almacena a 4ºC, en cond condic icio ione ness adec adecua uada da pued puede e dura durarr hast hasta a 6 sema semana nass con con leve leve pérdida de 25%. 7.3.2.2 Hemólisis Se prep prepa aran ran alí alícuota uotass de suspe uspens nsió ión n de cél célula ulas roja rojass con concentración fija de 0,125 mmol/1 de oxihemoglobina, se incuban por 10 minutos a temperatura ambiente con agitación, asimismo dilu diluci cion ones es del del dode dodeci cill-su sulflfat ato o de sodi sodio o al 1% con con incr increm emen ento toss equivalentes de la concentración de la muestra de prueba, para establecer una relación concentración-respuesta. concentración-respuesta.
El peri period odo o de incu incuba baci ción ón se term termin ina a con con una una cort corta a y rápi rápida da centrifugación (1 minuto a 10 000 rpm). El sobrenadante resultante se monitorea fotométricamente para hemólisis a 530 nm y 560 nm contra un blanco y un control. La experiencia anota que a una concentración de 0,125 mmol/l de dodecil sulfato de sodio la desnaturalización es total (100%). A partir de este dato se traza una curva de respuesta concentración. 7.3.2.3 Desnaturalización de proteínas El producto de prueba a una concentración del 1%, se incuba 10 minutos a temperatura ambiente, con una alícuota de células rojas ajus ajusta tada dass a la conc concen entr trac ació ión n de oxih oxihem emog oglo lobi bina na,, prev previa iame ment nte e desc descri rita ta.. Agit Agitar ar vigor vigoros osam amen ente te y cent centri rifu fuga garr a 10 000 000 rpm, rpm, el sobrenadante se analiza a 540 y 575 nm en el espectrofotómetro. La extinción medida a 575 nm se divide por la extinción medida a 540 nm para obtener el llamado Radio (R1) que es usado para calcular el índice de desnaturalización de hemoglobina DI (%). Para la oxihemoglobina, el radio R1 es 1,05 ± 0,001, mientras que el estándar interno (SDS) (a 3,5 mmol/l como concentración final de prueba) da una relación R2. La diferencia R1-R2 se define como igual al 100% de desnaturalización de oxihemoglobina y es usado para calcular la potencia relativa individual de desnaturalización de las muestras, de acuerdo a la siguiente fórmula: 100 (R1-Rs) DI (%) = -----------------------(R1-R2)
Donde: Rs = Radio obtenido por la muestra 7.3.3 Interpretación de los resultados La inclinación positiva de la curva, muestra el aumento en el daño celular, la liberación inmediata de oxihemoglobina se refleja en el aumento de absorbancia a mayor concentración del estándar al habe haberr dest destru rucc cció ión n celu celula larr las las abso absorb rban anci cias as a 540 540 y 575 575 nm disminuyen por la desnaturalización; la absorbancia a 560 nm no cambia. A partir de esta curva se hace el ensayo a distintas concentraciones de prueba de la sustancia a investigar con las células rojas y se estima su índice de desnaturalización. 7.3.4 Criterio de aceptación Los productos para uso humano no deberán presentar ningún índice de desnaturalización de células rojas de sangre. 7.4 Ensayo membrana-reactivo membrana-reactivo 7.4.1 Materiales y reactivos Memb Membra rana na prot protei eica ca de quer querat atin ina a y colá coláge geno no disp dispon onib ible le (ya (ya preparada en el comercio especializado) Reactivo de globulinas y colágeno liofilizado (disponible y preparado en el comercio especializado). Fotocolorímetro Fotocolorímetro con celdillas suficientes
Colorante rojo básico No. 2 Incubadora (para mantener la temperatura a 25 ºC) Soporte de (anillo) disco Estándares de lauril sulfato de sodio a distintas concentraciones 7.4.2 Procedimiento 7.4.2.1 Matrices Se prepara en una solución salina estabilizada a pH 8,0 de 10% de queratina 1% colágeno, 0,1% glutaraldehído y acetato de celulosa (suficiente); se deja a 25ºC durante una hora, a esta preparación, se le adiciona colorante rojo básico No. 2 y se deja 10 minutos a 25ºC. Las películas que se forman se lavan exhaustivamente con agua destilada se cortan en círculos y se montan en soportes de disco, se guardan en recipientes de plástico a 4ºC conservándose así hasta 180 días. 7.4.2.2 Reactivo Un polvo liofilizado de globulinas, colágeno, glicosaminoglicanos, ácidos grasos libres, aminoácidos, fosfolípidos y sales buffer, se rehidrata con agua destilada a 4ºC y se conserva así hasta 15 días. 7.4.2.3 Curva dosis-respuesta Se determina el índice de irritación primaria dérmica IN VIVO y además con este procedimiento empleando soluciones estándares de laur laurilil sulf sulfat ato o de sodi sodio o (u otro otro irri irrita tant nte e cono conoci cido do)) a dist distin inta tass conc concen entr trac acio ione ness se traz traza a una una curv curva a de equi equiva vale lenc ncia ia entr entre e los los
índices IN VIVO e IN VITRO, medido como densidad óptica a 470 nm 7.4.2.4 Aplicación Aplicación de la muestra Las muestras se preparan a dosis de 30 µl hasta 100 µl en parches de 0,25 cm3, se aplican directamente en la barrera, luego ésta se inserta en el reactivo y se incuba por 3 horas los sólidos se aplican sin diluir, perfectamente molidos y tamizados. Se determina la densidad óptica a 470 nm en un fotocolorímetro se ext extrapo rapola la en la curv urva de dosi dosiss res respues puestta y se lee lee como el equivalente de la prueba IN VITRO y el índice de irritación primaria dérmica IN VIVO. 7.4.3 Interpretación de los resultados La clas clasifific icac ació ión n de irri irrita taci ción ón dér dérmica mica IN VITR VITRO O corr corres espo pond nde e directamente con la clasificación IN VIVO (en piel de conejos) así: INDICE DE IRRITACION PRIMARIA Prueba Prueba Calificación Calificación IN VIVO IN VITRO IN VIVO IN VITRO 0-0,5 0-0,5 No irritante Mínimo Irritante 0,51-1,5 0,51-1,5 Ligeramente Levemente 1,6-3,0 1,6-2,0 Levemente Levemente 2.1-3.0 Levemente Moderadamente Moderadamente 3,1-5,0 3,1-5,0 Moderadamente Moderadamente
5,1 y mayores 5,1 y mayores Severamente Severamente 7.4.4 Criterio de aceptación Los productos para uso en bebés deberán tener un índice de irritación menor a 0,5 Los demás productos deberán tener un índice no mayor de 3 en esta esta prue prueba ba para para cons consid ider erar arse se apto aptoss para para uso uso huma humano no o bien bien deberán incluir en sus etiquetas la leyenda " Este producto es irritante". Debe Debe anot anotar arse se que que esta esta prue prueba ba sust sustitituy uye e a los los ensa ensayo yoss para para dete determ rmin inac ació ión n de irri irrita taci ción ón prim primar aria ia dérm dérmic ica, a, pero pero no pued puede e prop propor orci cion onar ar ning ningún ún indi indici cio o sobr sobre e resp respue uest stas as alér alérgi gica cass o de velocidad de recuperación después de una reacción por lo que no sustituye a las pruebas de sensibilización. 7.5 Ensayo de desnaturalización de proteínas 7.5.1 Materiales y reactivos Fotocolorímetro Filtros a 400 nm, 430 nm, 730 nm Celdillas de plástico de 1,5 ml (100) Solución de formacina al 5%, al 10% y al 20% en agua destilada. Papel pH Soluciones conocidas de irritantes por ejemplo lauril sulfato de sodio al 5%, 10%, 15%, 20% y 25%
Reactivo proteico en polvo para prueba de desnaturalización IN VITRO (disponible en el mercado especializado). Activador del reactivo (disponible en el mercado) Micropipetas de 100 µl Tapas de plástico para las celdillas Dosificador Eppendor + con micropipetas de 250 µl a 1 ml con incrementos de 250 µl Micropipetas de 20 a 200 µl Soportes para las celdillas Incubadora Papel filtro grande de 8 pulgadas de diámetro Embudo de gran capacidad Probeta graduada Matraz Erlenmeyer con tapón Ampolletas reutilizables Espátulas Pipeta de rocío 7.5.2 Procedimiento 7.5.2.1 Unidades de medición
Para fines prácticos de medición del grado de desnaturalización se emplean unidades de densidad óptica multiplicadas por 1000 que se reportan como "unidades de opacidad". La densidad óptica de las soluciones de formacina que se emplean como calibradores deberá estar en los siguientes intervalos: Solución Densidad óptica Unidades de opacidad 5% 0,400 - 0,650 400 - 650 10% 0,800 - 1,050 800 -1050 20% 1,350 - 1,800 1350 -1800 7.5.2.2 Determinación de la densidad óptica Para determinar si este es el procedimiento adecuado, se deberá desarrollar lo siguiente: se colocan 100 ml o 100 mg de la muestra de prueba en 1 ml de disolvente en una celdilla. Se ajusta el colorímetro a cero con una celdilla que contenga sólo disolvente, después se lee la muestra a 400 nm si la densida óptica es mayor de 0,5 se deberá optar por la técnica de membrana, si es menor se puede emplear esta técnica. 7.5.2.3 Prueba de pH Se determinará el pH de la muestra, si éste es mayor de 8,5 deberán aplicarse modificaciones a la técnica. 7.5.2.4 Control de calidad
Para todos los casos realice pruebas con controles conocidos cada 60 días días por por trip triplilica cado do en ensa ensayo yoss sepa separa rado doss para para veri verififica car r procedimientos. 7.5.3 Curva dosis-respuesta Se determina el índice de irritación primaria dérmica IN VIVO y además con esta técnica, empleando soluciones estándar de un irritante conocido a diferentes concentraciones se traza una curva de equivalencia entre los índices IN VIVO y las IN VITRO medidas como omo dens ensidad idad ópt óptica ica a 400 400 nm o a la que que corr corres espo pond nda a en muestras coloridas y reactivos. 7.5.4 Cálculo de la densidad óptica Prep Prepar are e una una solu soluci ción ón del del reac reactitivo vo prot protei eico co,, añad añadie iend ndo o agua agua destilada hasta dilución total, filtre y transfiera el reactivo empleando una pieza de papel filtro ajustada al embudo y una ampolleta para reactivo, deje que se filtre lentamente (de 30 a 45 minutos) etiquete con la fecha de elaboración. El reactivo es estable por 30 días almacenado de 4º a 8ºC. Para activar el reactivo añada el activador en proporciones IX, 3X a 5X así, si el pH es menor de 8,5 adicione: IX o sea 0,5 ml de activador a 25 ml del reactivo preparado (la activación se efectúa ante antess de cada cada ensa ensayyo), o), si se va hace hacerr en prop propor orci ción ón 3X se adicionan adicionan 1,5 ml de activador activador a 25 ml de reactivo reactivo y si es 5X, 2,5 ml de activador activador a 25 ml de reactivo reactivo si el pH es mayor de 8,5 no active el reactivo. Se preparan soluciones de la muestra a partir de 1000 mg/kg
Se aplican a diferentes concentraciones del reactivo, y se determina la densidad óptica del reactivo desnaturalizado a 400 nm, o a la que corresponda según el tipo de muestra y se extrapola en la curva de dosis respuesta. 7.5.5 Muestras que no califican Si la mues muestr tra a es muy muy colo colori rida da dará dará lect lectur uras as dema demasi siad ado o alta altas, s, entonces deberá cambiarse el filtro para tener una lectura a 470 nm o 730 nm Si la muestra es reactiva y afecta la celdilla se analiza poniendo prim primer ero o el reac reactitivo vo o el diso disolv lven ente te y añad añadie iend ndo o la mues muestr tra. a. Si todavía reacciona el producto puede medirse en tubos de ensayo, si sigu sigue e habi habien endo do reac reacci ción ón o vapo vapori riza zaci ción ón debe debe opta optars rse e por por otro otro método. 7.5.6 Interpretación de los resultados La clasificación de irritación IN VITRO corresponde con la IN VIVO extrapolada de la curva y debe leerse así: I N D I C E CLASIFICACION 0 - 0,5 No irritante 0,51- 1,5 Ligeramente irritante 1,6 - 3,0 Moderadamente irritante 3,1 - 5,0 Irritante 5,1 - mayores Severamente irritante.
7.5.7 Criterios de aceptación Los productos para uso en bebés deberán ser no irritantes. Los demás productos deberán tener índice no mayor de 3 en esta prueba para considerarse aptos para uso humano, o bien deberán incluir en sus etiquetas la leyenda "Este producto es irritante". 8. Muestreo
El procedimiento de muestreo para los productos objeto de esta Norma, se sujetará a lo que establece la Ley General de Salud. 9. Concordancia con normas internacionales
Esta Norma no tiene concordancia con normas internacionales 10. Bibliografía
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La vigilancia del cumplimiento de la presente Norma corresponde a la Secretaría de Salud. 12. Vigencia
La pres presen ente te Norm Norma a Ofic Oficia iall Mexi Mexica cana na entr entrar ará á en vigo vigorr con con su cará caráct cter er obli obliga gato tori rio o a los los trei treint nta a días días sigui siguien ente tess a part partir ir de su publicación en el Diario Oficial de la Federación. Sufragio Efectivo. No Reelección. México, D.F., a 29 de noviembre de 1994.- El Director General de Control Sanitario de Bienes y Servicios, José Meljem Moctezuma.Rúbrica.
CAPITULO III
METODOLOGIA
9.-Hipótesis
Prim Primer eram amen ente te los los cosm cosmét étic icos os o maqu maquililla laje je cont contie iene nen n algu alguno noss químicos que de alguna manera a la larga causan daños ya que degeneran de manera mas rápida la piel es decir, la envejece además algunos lápices labiales de marcas reconocidas contienen en cantidades excesivas plomo par que este se adhiera durante un
mayor tiempo a la piel, este es nocivo para la salud humana y que se acumula y provoca daños principalmente a los bebes como problemas en el lenguaje y el aprendizaje así, como trastornos de conducta y agresión. 10.- Tipo de estudio
El tipo de estudio que se llevo a cabo para elaborar este texto es documental. 11.-Material y procedimientos
El material que se utilizo para la elaboració elaboración n del documento documento fueron fueron publicaciones en Internet así como artículos literarios de revistas que están asociados con el tema. El proc proced edim imie ient nto o llev llevad ado o a cabo cabo es la util utiliz izac ació ión n de los los text textos os encontrados asociados al tema y la aplicación adecuada de este.
CAPITULO IV
RESULTADOS
13.-Resultados
Los resultados obtenidos de acuerdo a los objetivos planteados y las investigaciones realizadas son que existen algunos cosméticos que contienen químicos dañinos para la salud. Estos dañan la salud a corto mediano y largo plazo.
Los Los daño dañoss que ocas ocasio iona na el uso uso de cosm cosmét étic icos os con con sust sustan anci cias as noci nociva vass va desd desde e una una simp simple le derm dermat atititis is hast hasta a prob proble lema mass tan tan graves como son el cáncer la perdida de memoria entre otras. 14.-Tipo de análisis
Mi tipo de análisis es cualitativo debido a que se utilizaron diferentes artículos escritos para determinar los resultados 15.-Conclusiones
Existe gran cantidad de mujeres y hombres que año con año aplican una gran cantidad de cosméticos en su cuerpo con la finalidad de lucir mejor ante una sociedad cada vez mas exigente en cuanto al aspecto físico se refiere. Muchas de estas personas no saben lo que en realidad están consumiendo debido a que los vendedores solo anuncian una parte de lo que estos contienen siendo así para su beneficio. Actualmente exis existe ten n much muchas as empr empres esas as sani sanita tari rias as que que se preo preocu cupa pan n por por el bienestar de la población y por ello se realizan periódicas revisiones a los productos que salen al mercado mediante reglas y normas que han sido elaboradas para ello con esta investigación observamos que, existe gran cantidad de cosméticos que dañan la salud a corto mediano y largo plazo afectando así diferentes zonas de l cuerpo dependiendo de la aplicación y uso que se le de si es verdad que muchas empresas cosmetologicas debido a la presión que se le esta esta ejer ejerci ciend endo o han han aban abando dona nado do algu alguno noss ingr ingred edie ient ntes es acti activo voss dañinos también hay otras que se resisten esto habla de que debemos tener una cultura mucho mas desarrollada acerca de leer saber lo que consumimos.
Bibliografía
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