REPORTE DE PRÁCTICA #2: IDENTIFICACIÓN DEL CORPÚSCULO DE BARR "quipo , : 2 ;odríue(
a(min, >a(min, ?ea ;amíre( Fig. 1.XX c!"$c%&$ '( B)!! (* Luis 4le%andro, @apata ?$(que( ?$(que( *halía! Mi#rcoles 1A16hrs! 1C9C71D! +iclo escolar 4osto c+&%&)$ ,((*i*)$. X c+&%&)$ 2iciembre 71D!
RESUMEN Mary Mary Lyon yon en 1961 1961 desc descub ubri rió ó que que el corpúsculo de Barr era un cromosoma X inactivado, y de ahí surió la teoría Lyon! "lla suirió que dentro de cada c#lula de hembra se inactivaría cualquier crom cromos osom oma a X alea aleato tori riam amen ente te,, y si la c#lula tuviera m$s de un cromosoma X se inactivarían todos menos uno! "n el pres presen ente te repor eporte te se desc descri ribe be el proc proced edim imiient ento lleva levado do a cab cabo para ara cumplir el ob%etivo que &ue la identi'cación del corpúsculo de Barr en c#lu c#lula las s de la muco mucosa sa oral oral util utili( i(an ando do acetorceína para colorear el corpúsculo y en c#lulas de un &rotis sanuíneo uti utili(ando ndo coloran rante )ri riht! ht! *ales tincio tinciones nes &acili &acilitar tarón ón la observ observací acíon on del del cromosoma X inactivo ba%o el microscópio!
PALABRAS CLAVE +romosoma X, inactivo, inter&ase, mu%er, identi'cación, heterocromatina, peri&eria!
INTRODUCCION "n 199, 199, Murray Murray Barr Barr observ observo o cuerpo cuerpos s condensados que se tenían intensamente en los los núcle núcleos os de las las c#lu c#lula las s de ato atos s hembras! "sta estructura oscura comen(ó a conocerse como corpúsculo de Barr -' 1.! "n 1961, Mary Lyon propuso que el corpúsculo de Barr era un cromosoma X inactivado! "sta investiadora suirió que dentro de cada
c#lula de la hembra uno uno de los dos cromosomas X se inactivaría aleatoriamente! /i la c#lula contu ntuviera m$s de dos crom cromos osom omas as X se inac inacti tiva varí rían an todo todos s menos uno! La inactivación del cromosoma X tiene luar en una etapa temp tempra rana na del del desa desarr rrol ollo lo00 en los los sere seres s humanos, dentro de las primeras sema semana nas! s! +uan +uando do un crom cromos osom oma a X se inacti inactiva va en una c#lula c#lula este este perman permanece ece inac inacti tivo vo para para siem siempr pre e y, adem adem$s $s,, est$ est$ inacti inactivo vo en todas todas las c#lula c#lulas s som$ti som$ticas cas que descienden de esa c#lula! or consiuiente, las c#lulas vecinas tienden a tener el mismo cromosoma X inactivado! La condensación del cromosoma X inactivo hace que sus secuencias de 234 perman permane(c e(can an &ísic &ísicame amente nte inacc inaccesi esibl bles es para para la maqu maquina inari ria a tran transc scri ripc pcio iona nal! l! La inactivación del cromosoma X es produ producid cida a por la acci acción ón del cent centro ro de inac nactivación del X, una reión del cromosoma X que contiene al menos tres enes! 5no de estos enes es el Xist -' 7.! La mayor parte de los enes que se locali(a locali(an n en el cromosoma cromosoma X inactivado inactivado no se e8presan, pero Xist es una e8cep 8cepci ción ón!! "ste "ste en en no codi codi'c 'ca a una una proteína, sino que produce una mol#cula 1
de ;34 que cubre el cromosoma X e induce su inactivación! F1G
MATERIALES METODOS
corpúsculos de Barr en la peri&eria del núcleo celular! ara la toma de muestra sanuínea tambi#n eleimos un voluntario del equipo al que le pedimos que se desin&ectara el dedo índice para reali(ar la punción con lanceta, la ota de sanre se colocó en el portaob%etos y se hiso un &rotis el cual se de%ó secar, una ve( seco se tiJo con )riht por espacio de K minutos y posteriormente se le coloco buer para )riht por 1 minutos -'A., se lavó al chorro de aua y se de%ó secar nuevamente! Hbservamos a 1X y locali(amos las c#lulas, posteriormente a X pero tuvimos la misma &alla que al observar la muestra de mucosa por lo que tambi#n nos cambiamos de microscopio, observamos a inmersión y pudimos
rimeramente eleimos a alún interante del equipo para que donara la muestra de mucosa oral, se le pidió que se en%uaara la boca y tomamos la Fig. 2.- U* '(& ")!) &) i*)c3i4)ci5* '(& c!$) X ! el ;34 de inter&erencia y las proteínas cromosómicas se combinan e
muestra con un abatelenuas y la depositamos en un portaob%etos limpio y seco, '%amos al calor, areamos una ota de acetoina -'A. y cubrimos con un cubreob%etos! Hbservamos con el microscopio a 1X para identi'car las c#lulas, lueo observamos a X pero con nuestro microscopio se veía un poco borroso por lo que nos cambiamos a otro microscopio para observar adecuadamente!
locali(ar los corpúsculos de Barr!
Fig./.- c!"$c%& '( B)!! (* c+&%&) '( &)
RESULTADOS %c$) !)& 0*) $c%!).
Iinalmente observamos a inmersión y pudimos locali(ar per&ectamente los
7
"n mu%eres se observaron claramente los corpúsculos de Barr en &orma de un punto de heterocromatina condensada en la peri&eria de cada núcleo, de color m$s oscuro que el núcleo! Los corpúsculos son la e8presión del cromosoma inactivo X de la mu%er -ya que como ya sabemos la mu%er tiene 7 cromosomas se8uales XX uno activo y uno inactivo.!
CONCLUSIÓN "n esta pr$ctica se cumplió con el ob%etivo planteado en la identi'cación del corpúsculo de barr o tambi#n llamado cromosoma XN inactivo! Las observaciones &ueron llevadas a cabo en una muestra de c#lulas de la mucosa oral que &ue un poco m$s di&ícil su observación ya que, en la primera muestraFig. que tomó no'( seB)!! observó nada 6.-se c!"$c%& (* debido a un e8ceso de "(!i,+!ic) colorante0,!3i$ que hi(o *(%3!57& '( $)*g!( que la muestra$)*g%8*(. se perdiera, por lo tanto se volvió a reali(ar la toma de muestra en la cual si &ue posible la observación! or otro lado el corpúsculo de Barr observado en neutró'los de un &rotis sanuíneo &ue &$cil de identi'car! 2urante la identi'cación del corpúsculo se tuvieron problemas al encontrar neutó'los y a en&ocar el núcleo de estos ya que los ob%etivos del microscopio estaban sucios y astados! "sto se corriió utili(ando un microscopio con ob%etivos m$s limpios y me%or conservados! osteriormente se pudieron locali(ar las c#lulas, lueo los núcleos y 'nalmente el cromosoma X inactivo!
cromatina X que se observa en los núcleos de c#lulas &emeninas en inter&ase! F1G "n la mu%er se observó el corpúsculo lo cual e8presa la inactivación de uno de sus cromosomas X ya que la cromatina X o corpúsculo de Barr es un cromosoma inactivo que puede verse en alunas c#lulas en inter&ase como una masa de heterocromatina adherida a la membrana nuclear! /e observa como un pequeJo punto adicional! "n el hombre normalmente no se observa corpúsculos de Barr debido a que no posee el cromosoma X inactivo o en su de&ecto no posee un cromosoma X adicional por lo que se podría decir que es un su%eto X> normal ya que si poseyera un cromosoma X adicional, presentaría el síndrome de Oline&elter - XX>. lo cual indica a individuos con &enotipo masculino y con
cromatina X! F1G
REFERENCIAS 1! irce B! 79!
DISCUSIÓN
7! /adava 2! 79! ?ida, la ciencia de la bioloía! Ked! Medica anamericana!
La inactivación del cromosoma X resulta en la &ormación del corpúsculo de Barr o
A! Bo%órque(
2isponible enP httpPCCsirio!uac%!m8CQ+BCcqbClicenciaturaen biolo
R+AR42aC2ocumentsCManualesCavan(ad oC<"3"*Q+4!pd&
