BACTERIAS HALÓFILAS
Se llam llaman an haló halófl flos os a aque aquell llos os orga organi nism smos os que que requ requier ieren en ciert cierta a concentración de NaCl para su desarrollo y crecimiento. Pueden ser clasifcados en unción de la cantidad de sal que requieren, siendo capaces de crecer en condiciones de extrema salinidad. a) Características morfológicas y de cultio
Características Morología Cocos, !acilos, ormas raras. Coloreadas por la presencia de Carotenoides Características de culti"o #alóflos extremos extremos $crecen me%or en medios que contienen &.'( '.& M de sales totales), halóflos extremos en el límite $crecen me%or en medios que contienen *.'(+. M de sales totales), halóflos moderados $crecen me%or en medio que contienen .'(&. (&.' M de sales totales). -sim simismo smo, un micro croorganismo halotoleran halotolerante te es el que no muestra muestra un a!soluto a!soluto requerimiento requerimiento de sal para crecer pero que se desarrolla !ien en alta salinidades. !) H"!itat y fue#tes de aislamie#to
a di"e di"ersi rsida dad d de los los micr microo oorg rgan anism ismos os haló halóflo floss es muy muy "aria "ariada da.. Muchos de estos microorganismos han sido aislados de h/!itats que presentan alta salinidad. os am!ientes extremadamente salinos son raros, la mayoría se encuentran en 0onas calientes y secas, como son lagos salinos, suelos salados y alimentos salados principalmente. Se han aislado halóflos extremos en alimentos con alta concentración de sal, como salmueras, salsa de soya y pescado c) Resiste#cia a los age#tes físicos y $uímicos
-lta resistencia contra los anti!ióticos y los agentes líticos
d) Co#tami#ació# y efecto so!re los alime#tos
as primeras e"idencias de contaminación de alimentos por !acterias halóflas, o amantes de la sal, pro"ienen de principios del siglo 11, cuando se o!ser"a!a crecimientos !acterianos de coloración ro%o( p2rp p2rpur ura a en algu alguno noss alim alimen ento toss sala salado dos. s. 3nto 3ntonc nces, es, si la idea idea era era preser"ar por largos periodos de tiempo los alimentos salados, la presencia de esas manchas color ro%o(p2rpura era muy mala noticia. Sucede que las !acterias halóflas secretan carotenoides, un tipo de pigm pigmen ento toss que que les les per permite mite o!te o!tene nerr ener energí gía a y prot proteg eger erse se de la
radiación 45. 3se era el origen de las manchas coloridas6 se7al de la irremedia!le descomposición de los alimentos.
e) Factores $ue i#%uye# e# su su&erie#cia y desarrollo
as c8lulas de los organismos no halóflos se rompen cuando son expuestas a salinidades mayores de *(*&9 de NaCl, de!ido a la marcada dierencia en la concentración del catión sodio $Na:) entre el interior y el exterior de las c8lulas6 pues la alta concentración de Na: en el exterior pro"oca un incremento en la presión e%ercida so!re la c8lula, lo que conduce a una p8rdida de agua celular y, consecuentemente, a su ine"ita!le ruptura. 3sto no sucede con las c8lulas de los organismos halóflos, porque ellos cuentan con alguna de las dos estrategias adaptati"as conocidas, las cuales e"itan su ruptura. 4na de ellas es utili0ada por los halóflos m/s extremos, y consiste en li!erar cationes de sodio $Na:) hacia el exterior de la c8lula, al mismo tiempo que incorporan iones de potasio $;:). 3sta estrategia se conoce como sal interior. as cargas positi"as acumuladas se compensan con iones negati"os, como cloruro $Cl() o osato $P< =&(). >e este modo, se propicia la adaptación de todos los sistemas intracelulares a una alta concentración $hasta =?= g@) de cloruro de potasio $;Cl) en el citoplasma. a estrategia de sal(interior es utili0ada por las haloarqueas y las !acterias del orden #alanaero!iales, así como Salinibacter ruber . a otra estrategia se !asa en la síntesis o acumulación de solutos compati!les. 3n este caso, los sistemas intracelulares no requieren adaptación alguna, ya que la sal se mantiene uera de la c8lula. Por ello, esta estrategia se conoce como sal(exterior. os solutos compati!les son compuestos org/nicos de tipo amino/cido, a02car o alcohol $fgura &), y su presencia es característica de cada especie. os m/s comunes son aquellos que requieren poca energía para su producción dentro de la c8lula, como polioles Aalcohol polihídroxilado A y a02cares, los cuales tam!i8n se pueden incorporar del medio. Para ello, los halóflos utili0an transportadores específcos locali0ados en la mem!rana celular que permiten la entrada de los solutos compati!les hacia el citoplasma o interior de la c8lula. -lgunos microorganismos anaero!ios, con meta!olismos de !a%a energía, simplemente incorporan solutos compati!les cuando 8stos se agregan al medio de culti"o en el que se desarrollan. 3stos mecanismos de adaptación a la salinidad permiten a los
halóflos tener tiempos r8cord de "ida en ase de latencia. Se ha reportado la presencia de haloarqueas dentro de halitas, o rocas de sal, que constituyen una orma mineral del NaCl, con una edad de hasta &' millones de a7os, y pueden crecer si son colocadas en un medio nutriti"o. Por otro lado, se ha demostrado que microorganismos encontrados en cristales de yeso(halita $ormas minerales del sulato de calcio A CaS<+B&#&
f) 'emostració# y recue#to e# el la!oratorio
3l m8todo se !asa en reali0ar un culti"o so!re un medio sólido selecti"o y o!ser"ar el desarrollo de colonias ro%as propias de las !acterias halóflas.
REACTI(S
Medio de culti"o $>ussault y achance). Me0clar, en un recipiente adecuado, ' g de sulato de magnesio, * g de nitrato de magnesio, ,&' g de cloruro 8rrico, ' g de peptona, * g de glicerina, & g de cloruro de sodio y * cm= de agua destilada. Calentar un poco la me0cla para disol"er los ingredientes, a%ustar el p# de la solución a ?,' usando un medidor potenciom8trico de p#, esterili0arla en autocla"e a *&* C durante *' min y luego di"idirla en dos porciones iguales. - la una porción, -, a7adir un * por ciento de leche descremada y a la otra, D, un = por ciento de agar. Enmediatamente antes de usar el medio, undir la porción D, calentar la porción - $que de!e estar !ien me0clada para asegurar una suspensión uniorme) y, luego de me0clarlas íntimamente, "erter porciones de *' cm = a & cm= en cada ca%a de Petri y de%arlas solidifcar a temperatura am!iente. *RE*ARACIÓ+ 'E LA ,-ESTRA
Me0clar íntimamente la muestra y guardarla en un rasco est8ril herm8ticamente cerrado hasta el momento del an/lisis. *RCE'I,IE+T
3spol"orear * g de la muestra para ensayo $"er ?.*) so!re la superfcie del medio de culti"o en una ca%a de Petri.
g) I#ter&retació# de su .alla/go y a!u#da#cia
Se encuentran en el agua saturada o casi saturada de sal. Fam!i8n son llamados halóflos extremos, aunque este nom!re tam!i8n se refere a otros organismos que "i"en en medios con alta concentración salina. os am!ientes hipersalinos contienen una concentración de sales mayor de la que se considera promedio en los mares y oc8anos terrestres, que es de, aproximadamente, =.'9 de NaCl. 3xisten dos tipos de am!ientes hipersalinos los talasohalinos A $del griego thalasa mar y hals, halós sal) que surgen a partir de la e"aporación del agua marina, por lo que su proporción inicial de sales es similar a la del agua de marA y los atalasohalinos Aque proceden de la disolución de los depósitos de sales originalmente u!icados en los continentesA. 3n los am!ientes talasohalinos predomina inicialmente el NaCl, pero "an acumulando otras sales a medida que el agua se e"apora. as salinas son e%emplos típicos de am!ientes talasohalinos.
.) 01#eros y es&ecies &romi#e#tes
>omini -rchaea o Gilo
Euryarchaeota
Clase
Halomebacteria Cavalier-Smith 1986 Halobacteria Grant et al. 2002 Haloarchaea asSarma et asSarma 2008
Halobacteriales
Gamilia
Halobacteriaceae
HI-NF J -IS3N, *KLK HEDD
BACTERIAS S,ÓFILAS
os e!aryomyces. 3l t8rmino Saccharomyces deri"a del griego, que signifca moho del a02car.
a) Características morfológicas y de cultio Casi todos los microorganismos osmóflos son le"aduras y de!ido a que el g8nero en la mayoría de los casos es Saccharomyces, en !ase a esto se presentar/ su morología
as le"aduras son muy parecidas a !acterias macroscópicamente pero son m/s cremosas y los colores que presentan son !lancos, !eiges o un poco m/s oscuros. -lgunas son rosadas o ro%as porque tienen carotenoides6 son unicelulares6 sus c8lulas tienen orma y dimensiones di"ersas, desde las es8ricas o"oides y elipsoidales, a las cilíndricas que pueden ser muy alargadas y aun flamentosas.
as le"aduras crecen en medios sólidos $con agar) ormando colonias muy seme%antes a las de las !acterias. a mayoría de las colonias %ó"enes son redondas, de &(= mm de di/metro, !lancuosas.
!) H"!itat y fue#tes de aislamie#to 3stos microorganismos "i"en en presencia de alta concentración de a02cares, por e%emplo rutas, ores, y corte0as de ar!oles. 3l aislamiento de las le"aduras puede eectuarse, ha!itualmente, con el m8todo de las placas. 3ste consiste en introducir un asa de platino esterili0ada en una suspensión de microorganismos con"enientemente diluida6 esta despu8s se deposita so!re la superfcie del culti"o agari0ado en placa petri.
c) Resiste#cia a los age#tes físicos y $uímicos 1.-!"i#eno
as le"aduras crecen !a%o condiciones aero!ias. -lgunas son estrictamente aero!ias y otras son acultati"as. as acultati"as crecen me%or en aero!iosis y !a%o condiciones anaero!ias lo hacen m/s lentamente. as le"aduras aero!ias estrictas se conocen como oxidati"as6 y las que pueden desarrollarse tanto en medios aero!ios como anaero!ios se denominan ermentati"as. 2.-$H
a acide0 o alcalinidad de un medio de culti"o se expresa por su p#. Para la mayoría de las !acterias el p# óptimo de crecimiento est/ entre O,' y ?,' aun cuando algunas pocas especies pueden crecer en los extremos del rango de p#. 3n general, se considera que las le"aduras, al igual que los mohos, se desarrollan me%or en medios /cidos $=,L( '.O). Sin em!argo estas pueden tolerar un rango de p# que "a desde &. hasta los L.. %.- &em$eratura
3xisten le"aduras que pueden crecer a muy di"ersas temperaturas, generalmente en un rango que "a de a 'C. la mayoría de las especies
sapróftas, sin em!argo, tienen temperaturas optimas de crecimiento entre los && y =C. '.- Concentración (e soluto
as le"aduras pueden generalmente desarrollarse en medios con concentraciones relati"amente altas de solutos. 3xiste, adem/s, un grupo de le"aduras que toleran cantidades de soluto aun mayores, por lo que se denominan osmóflas. ).- *ctivi(a( (e *#ua
3l a mínimo en que las !acterias crecen "aría ampliamente pero los "alores óptimos para la mayoría de las especies son mayores de ,KK. 3xisten ciertos microorganismos que pueden crecer en medios con ele"adas concentraciones de solutos y se conocen como osmotolerantes.
d) Co#tami#ació# y efecto so!re los alime#tos
Son importantes de!ido a que causan el deterioro de la industria a0ucarera y productos dulces, con productos como 0umos de rutas, 0umos concentrados de rutas, a02cares líquidos, la miel y en algunos casos el ma0ap/n.
os organismos
e) Factores $ue i#%uye# e# su su&erie#cia y desarrollo • •
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Iequieren para crecer un medio con alta presión osmótica. os microorganismos
f) 'emostració# y recue#to e# el la!oratorio Control micro!iológico de los alimentos. Microorganismos osmóflos. Iecuento en placa por siem!ra prounda. N
a cantidad de muestra "a a depender del tipo de alimento y de los par/metros que existan, sin ol"idar que se guarde una relación *: K o sea parte del alimento y K partes de diluyente. Se inorma el n2mero de 4GC@g o ml de alimento. Iecuento de le"aduras. as le"aduras se pueden encontrar como carga normal de los alimentos con !a%o p# y -, alto contenido de sólidos como sal o a02car y temperaturas !a%as de almacenamiento. Para la determinación de e"aduras se preparan diluciones de igual orma que para recuento en placa. 3l agar a necesitar es extracto de malta( oxitetraciclina $
g) I#ter&retació# de su .alla/go y a!u#da#cia as le"aduras encontradas en el a02car son principalmente osmóflas, de igual orma las !acterias osmóflas crecen en concentraciones ele"adas de a02car. 3ste tipo de microorganismos est/ presente y alteran alimentos como caramelos, confturas, rutas deshidratadas, rutos Secos y copos de cereales, etc. Por de!a%o de un "alor de a .O ya no tienen lugar la multiplicación micro!iana. os 1eróflos son organismos que se defnen como aquellos que crecen m/s r/pidamente !a%o condiciones de relati"a sequedad o capaces de multiplicarse a a ineriores a ,L'. Fodos los microorganismos xeróflos conocidos son mohos o le"aduras, así mismo los microorganismos osmóflos son aquellos que crecen en h/!itats con altas presiones osmóticas, este t8rmino se aplica ha!itualmente a las le"aduras tolerantes al a02car y es sinónimo de xeróflo.
#ay especies de le"aduras osmóflas que deterioran alimentos con un porcenta%e ele"ado de a02car, tales como mermelada, miel de a!e%a y confturas. as cuales son consideradas diíciles de deteriorar por microorganismos. -simismo estas se alteran en consecuencia del crecimiento de estas en la película de la mela0a con meta!olismo preerencial del componente de ructuosa de los a0ucares in"ertidos.
Muchas de las "eces al producir agua y /cidos org/nicos, que aumentan la $-) y reducen el p#, a"oreciendo el crecimiento posterior de las le"aduras osmóflas, mientras que el p# disminuido acarrea la hidrólisis de la sacarosa para producir m/s a02car in"ertido.
.) 01#eros y es&ecies &romi#e#tes Saccharomyces cerevisiae.
e"adura de la cer"e0a. 3ste g8nero se usa en la producción de "ino, pan y cer"e0a. Saccharomyces boular(ii.
Con potencial pro!iótico, tanto en los alimentos como en nutrac8uticos. Saccharomyces bayanus.
Se emplea undamentalmente en la ela!oración del "ino así como de la sidra, en concreto de los procesos de ermentación alcohólica. ebaryomyces.
Folera ele"adas concentraciones de sal, siendo capases de crecer en la superfcie de las salmueras de los quesos con altas concentraciones de sal de orden &+ por cien. -dem/s los microorganismos
Bi!liografía Ie"ista ciencia y desarrollo T "ida microscópica en mundos salados T Mar0o( a!ril del &*= http@@.cyd.conacyt.go!.mx@&O+@articulos@"idas(microscopicas(mundos( salados.html
UiVipedia enciclopedia li!re T #alo!acteria https@@es.iVipedia.org@iVi@#alo!acteria S- C3 D-CF3IE-S #-XGE-S T Enstituto 3cuatoriano de Normali0ación http@@.normali0acion.go!.ec@p( content@uploads@donloads@&*=@**@nteYinenY''.pd Slideshare T 3cología >e as Dacterias http@@es.slideshare.net@la!oratorioY*@=(ecologiadelas!acterias UiVipedia enciclopedia li!re T Staphylococcus https@@es.iVipedia.org@iVi@Staphylococcus
http://html.rincondelvago.com/microbiologia_2.html sisbib.unmsm.edu.pe/bvrevistas/ciencia/v13_n1/pdf/a08v13n1.pdf http://www.scielo.org.ve/scielo.php?script=sci_arttet!pid="131#$ 2##%200&00010000& http://www.redal'c.org/pdf/#()/#()3(30(.pdf http://www.diversidadmicrobiana.com/inde.php? option=com_content!view=article!id=2#0!*temid=2(% http://www.m'biolumi.com/rapid$microbiological$testing$of$osmophilic$'east$with$ the$biolumi$vial/
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