Nama
: Dwi Sri Yani Yani Purwanti Purwanti
NIM
: P07134014038 P07134014038
Semester
: IV
ANTIBODI DENGUE Ig G DAN Ig M RAPID TEST Tanggal Praktikum Tem"at "raktikum I.
: 2 uni 201! : #a$%rat% at%riu rium Imu Imun%ser ser%l%gi &'
Tujuan
Tes kualita kualitati( ti( untuk untuk men)et men)eteks eksii *irus *irus )engue )engue Ns1 antigen antigen )alam serum+"lasma serum+"lasma "asien guna mem$antu mem$antu meneta"kan )iagn%sa in(eksi *irus )engue, II.
Metode Tes imun%kr%mat%gra(i untuk men)eteksi a)an-a anti$%)i Ig. )an
IgM *irus )engue "a)a serum+"lasma manusia se/ara imun%l%gis, III.
Prinsip
Tera)in-a reaksi antara anti$%)i Ig. )an Igm )alam serum+ "lasma )engan rek%m$inan *irus )engue se$agai antigen -ang akan menim$ulkan garis warna "a)a alat ra"i) test, I.
DASAR TEORI
Virus )engue a)ala (la*i*irus -ang )itularkan %le n-amuk ae)es Aedes Aedes aegypti dan Aedes albopictus), albopictus) , &)a em"at ser%ti"e erat terkai terkaitt teta"i teta"i antigen antigen -ang -ang $er$e) $er$e)aa )ari *irus *irus Dengue Dengue DN1 DN1−45, Virus Dengue ini ter)iri )ari 3 "r%tein struktural -aitu mem$ran M56 ka"sul 56 en*el%"e 5 )an tuu n%nstruktural "r%tein -aitu NS16 NS2a6 NS2$6 NS36 NS4a6 NS4$6 )an NS, In(eksi setia" ser%ti"e men-e$a$kan s"ektrum klinis mulai )ari in(eksi tan"a geala6 )emam ti)ak ti)ak $er)i( $er)i(eren erensia siasi si )an )emam )emam $er)ar $er)ara a klasik klasik D95 D95 mani(es mani(estasi tasi sama sama meng mengan an/a /amn mn-a se"e se"ert rtii )ema )emam m $er) $er)ar ara a )eng )engue ue D DD5 $erlanut ke )engue s%/k s-n)r%me s-n)r%me DSS5 Ni*e)ita .u"ta, 20125,
Dengue a)ala "en-akit *irus en)emik -ang mem"engarui )aera tr%"is )an su$tr%"is )i seluru )unia, In(eksi )engue )isertai )emam n%n s"esi(ik -ang meniru "en-akit *irus lainn-a, Namun6 menurut ;<= )emam )e(inisi kasus )engue D95 )i)e(inisikan se$agai "en-akit )emam akut )engan )ua atau le$i mani(estasi antara sakit ke"ala6 retr%%r$ital sakit6 mialgia6 artralgia6 ruam6 mani(estasi "er)araan )an leuk%"enia, )emam $er)ara )engue DD5 )i)e(inisikan se$agai 2 7 ari )ari "en-akit )emam akut )engan "er)araan6 tr%m$%sit%"enia )an $ukti ke$%/%ran "lasma, 'etika semua (itur DD -ang a)ir $ersama )engan kegagalan sirkulasi maka "asien )ikateg%rikan se$agai )engue s%/k s-n)r%me DSS5 Daritri Maa"atra6 20145, In(eksi *irus )engue men-e$a$kan tim$uln-a res"%n imun $aik res"%n imun -ang )i)a"at um%ral )an seluler5, >es"%n Imun $awaan meli$atkan $er$agai sel )alam sistem imun $awaan misaln-a m%n%sit6 leuk%sit6 "%lim%r(%nuklear6 natular killer /ell, >es"%n imun um%ral )i"erankan %le anti$%)i se)angkan res"%n imun seluler )i"erankan %le M< /lass II restricted D4 T /ells )an M< /lass I restricted D 8 T /ells Val?r- >i))e, 201!5, Tes
antigen
)engue6
a)ala
"emeriksaan
-ang
$ertuuan men)eteksi langsung antigen *irus )engue, Tes ini sangat $erguna untuk men)eteksi in(eksi *irus )engue "a)a (ase akut @ segera setela tera)i in(eksi, Namun )emikian6 tes antigen )engue ti)ak )a"at mem$e)akan in(eksi )engue "rimer )ari in(eksi )engue sekun)er =m Prakas, 2015,
II.
ALAT DAN BAHAN a. Aat! Pi"et tetes atau mikr%"i"et Al • Yell%w ti" •
Timer ". Ba#an! De*i/e test Dengue Ig. )an IgM test merek: SD • •
I=#IN5 Diluent • Tissue $. Sa%pe Serum atau Plasma DT&6 e"arin+/itrate5 ila ti)ak segera )i"eriksa maka serum )a"at )isim"an "a)a suu 280 sam"ai 48 am atau suu 20 0, Sam"el ti)ak )a"at )igunakan ika em%lisis6 li"emik )an k%ntaminasi $akteri5, III.
&ARA 'ER(A 1, aan )an sam"el )iletakkan )i suu ruang se$elum )igunakan 2, Test )e*i/e )i$uka )an )iletakkan )i tem"at -ang )atar serta kering 3, Serum+"lasma )i"i"et Al6 )imasukkan "a)a sam"el well $ertan)a
BSC 4, Diluent well )itam$akan 3 4 tetes )iluent ,
I).
INTERPRETASI HASIL Negati*e :
"%siti( "a)a IgM anti$%)i *irus )engue )an mengin)ikasikan •
in(eksi "rimer )engue, Ig. P%siti*e Ter)a"at garis "a)a %ntr%l line 5 )an Ig. line .5, Ini $erarti "%siti( "a)a Ig. anti$%)i *irus )engue )an mengin)ikasikan
•
in(eksi sekun)er )engue, Ig. )an IgM P%siti*e
Ter)a"at garis "a)a %ntr%l line 5 )an Ig. line .5 )an IgM line M5, Ini $erarti "%siti( "a)a Ig. )an IgM anti$%)i *irus •
)engue )an mengin)ikasikan in(eksi "rimer )an sekun)er )engue, In*ali) Ti)ak ter)a"at garis "a)a /%ntr%l atau an-a a)a garis "a)a test line saa,
).
HASIL PENGAMATAN Data Pr%$an)us : Nama I5 : 'e)e 401 enis kelamin :E Sam"el : Serum
Nama II5 enis kelamin mur Sam"el
ter)a"at
garis "a)a line GH6 G.H )an GMH :&gnes &nggita Permata Sari : Perem"uan : 1J taun : Serum : P%siti( F5 Ig. ter)a"at 2 garis "a)a line GH )anG.H
Ga%"ar !
Dilluent yang digunakan
3
Rapid test yang digunakan
Serum yang diperiksa (kode 401)
Serum yang diperiksa (Agnes Anggita) *'ode sa%pe ! +,-
Di)a"atkan asil "%siti( F5 Ig. )an IgM )imana ter)a"at 3 garis "a)a )aera %ntr%l6 . Test #ine )an M Test #ine Tem"at
sumur5
untuk
memasukkan sam"el *'ode sa%pe ! Agnes Anggita
Di)a"atkan asil "%siti( F5 Ig. )imana ter)a"at 2 garis "a)a )aera %ntr%l )an . Test #ine
Tem"at
sumur5
untuk
memasukkan sam"el
)I.
PEMBAHASAN Demam $er)ara D5 atau )emam $er)ara )engue DD5
a)ala "en-akit )emam -ang )isertai "er)araan $awa kulit6 sela"ut i)ung )an lam$ung6 -ang )itemukan )i )aera tr%"is6 )engan "en-e$aran ge%gra(is -ang miri" )engan malaria, Pen-akit ini )ise$a$kan %le em"at ser%ti"e *irus )engue DN16 DN26 DN36 DN45 )ari genus Flavivirus6 (amili Flaviviridae )engan )a-a in(eksi tinggi "a)a manusia, Setia" ser%ti"e /uku" $er$e)a seingga ti)ak a)a
"r%teksisilang
)an
wa$a
-ang
)ise$a$kan
$e$era"a
ser%ti"e
hiperendemisitas5 )a"at tera)i, Virus )engue )itularkan melalui gigitan n-amuk Aedes aegypti -ang se$elumn-a su)a menggigit %rang -ang terin(eksi )engue, Setela sese%tang )igigit n-amuk ae)es terin(eksi6 *irus )engue $ere"likasi /e"at se$elum "erkem$angan tan)atan)a )an geala, NS1 &g $ere)ar seragam )i semua ser%ti"e *irus )engue )an $ere)ar "a)a tingkat tinggi selama $e$era"a ari saat sakit, Ini meru"akan alasan untuk tingkat )eteksi tinggi NS1&g )i (ase akut "emeriksaan )ini56 setela menurun se/ara $ertaa" akan ter$entuk anti$%)i )an )a"at )i)eteksi setela 3 ari Daritri Maa"atra6 20145, In(eksi *irus )engue men-e$a$kan tim$uln-a res"%n i mun $aik res"%n imun -ang )i)a"at um%ral )an seluler5, >es"%n Imun $awaan meli$atkan $er$agai sel )alam sistem imun $awaan misaln-a m%n%sit6 leuk%sit6 "%lim%r(%nuklear6 natular killer /ell, >es"%n imun um%ral )i"erankan %le anti$%)i se)angkan res"%n imun seluler )i"erankan %le M< /lass II restricted D4 T /ells )an M< /lass I restricted D 8 T /ells Val?r- >i))e, 201!5, Dalam tu$u manusia *irus )engue $erkem$ang $iak )i)alam sel retikul%en)%telial6 kemu)ian tera)i viraemia -ang )iikuti )engan res"%n imun tera)a" *irus )engue $aik um%ral mau"un seluler, Virus $ersirkulasi )alam )ara "eri(er )i )alam sel m%n%sit6 sel lim(%sit )an sel lim(%sit T, Se$agi reaksi tera)a" in(eksi *irus6 tu$u akan mem$uat anti$%)i anti)engue6 $aik $eru"a anti netralisasi6 antiemaglutinasi )an anti k%m"lemen, Di)uga $awa ke$%/%ran *askuler "a)a DD )ise$a$kan %le "ele"asan sit%kin I#1K )an TN9L5 serta P&I %le m%n%sit )an "ele"asan I#26 I#1K serta TN9L %le lim(%sit T -ang terin(eksi %le in(eksi *irus terse$ut Val?r- >i))e, 201!5, &nti$%)i -ang mun/ul "a)a umumn-a a)ala Ig. )an IgM6 untuk In(eksi "rimer )itan)ai )engan tim$uln-a anti$%)i IgM tera)a" )engue sekitar tiga sam"ai lima ari setela tim$uln-a )emam6 meningkat taam )alam satu sam"ai tiga minggu serta )a"at )i)eteksi
sam"ai tiga $ulan, &nti$%)i Ig. tera)a" )engue )i"r%)uksi sekitar )ua minggu sesu)a in(eksi, Titer Ig. ini meningkat /e"at6 kemu)ian menurun se/ara lam$at )alam waktu -ang lama )an $iasan-a $ertaan seumur i)u", Pa)a in(eksi sekun)er tera)i reaksi anamnestik )ari "em$entukan anti$%)i6 kususn-a )ari kelas Ig. )imana "a)a ari ke)ua saa6 Ig. ini su)a )a"at meningkat taam, Pemeriksaan anti$%)i Ig. )an IgM -ang s"esi(ik ini $erguna )alam )iagn%sis in(eksi *irus )engue, 'e)ua anti$%)i ini mun/ul 7 ari setela in(eksi,
li"aemik )an lisis ti)ak )ianurkan untuk )igunakan karena )a"at menggangu "r%ses atau asil )ari "emeriksaan ini, Pa)a "raktikum "emeriksaan &nti$%)i Dengue Ig. IgM ra"i) test6 ter)a"at 3 garis -aitu /%ntr%l line BC6 IgM test line BMC6 )an Ig. test line B.C, Dimana "a)a ketiga garis terse$ut mengan)ung .%l) %nugates -aitu rek%m$inan )ari *irus )engue "r%tein g%l)/%ll%in6 "a)a garis BMC mengan)ung M%use m%n%/l%nal antiuman IgM6 "a)a garis B.C mengan)ung M%use m%n%/l%nal antiuman Ig.6 se)angkan "a)a garis k%ntr%l BC mengan)ung >a$$it antiDengue Ig., Dan untuk )iluent assa- ter)iri )ari m# $u((er (%s(at 100mM )an s%)ium ai)e 0601 O $+$5, Ter$entukn-a garis warna tera)i karena anti$%)i Ig.+IgM "a)a serum atau "lasma6 $erikatan )engan rek%m$inan *irus )engue se$agai antigen -ang melekat "a)a mem$ran stri", Seingga anti$%)i )alam serum akan terk%nugasi g%l) /%ll%i) )an $ergerak se"anang mem$ran "a)a kaset ke )aera test . )an M5 seingga tera)i reaksi mem$entuk sen-awa k%m"leks )an ter$entuk garis warna, Sisa rek%m$inan *irus )engue -ang $elum $erikatan )engan anti$%)i Ig.+IgM )an g%l) /%ll%i) akan menuu )aera k%ntr%l 5, Seingga "a)a )aera k%ntr%l 5
akan ter$entuk
sen-awa
k%m"leks -ang )itan)ai )engan
ter$entukn-a garis warna,
)II.
SIMPULAN Dari Praktikum "emeriksaan anti$%)i )engue Ig. )an IgM "a)a
sam"el "asien )engan k%)e 401 )i)a"atkan asil "%siti( F5 Ig. )an
IgM )an "a)a sam"el atas nama &gnes &nggita )i)a"atkan asil "%siti( F5 Ig.,
)III. DATAR PUSTA'A
.u"ta6 Ni*e)ita, 2012, Dengue in India, %nlineQ, Terse)ia : tt":++i/mr,ni/,in+imr+2012+se"tem$er+0J0,")( Diakses 27 Mei 201! Maa"atra6 Daritri, 2014, NS1 Antigen Capture ELISA an Eective !ethod or Diagnosis o Early Dengue Inection " #eport o an $utbrea% at Angul District& $disha& India' %nlineQ, Terse)ia : tt":++www,n/$i,nlm,ni,g%*+"m/+arti/les+PM4 1J071+ Diakses 30 Mei 201! Malli6 TauReer
%nlineQ,
tt":++www,n/$i,nlm,ni,g%*+"m/
terse)ia
:
+arti/les+PM47J30+
03 uni 201! >i))e6 Val?r-, 201!, *resence o three dengue serotypes in $uagadougou +,ur%ina Faso) research and public health implications' %nlineQ, Terse)ia : tt":++www,n/$i,nlm,ni, g%*+"m/+arti/les+PM4820J22+ Diakses 27 Mei 201!
