Productos Productos naturales- Análisis ftoquímico preliminar Parte II. Muestras para el análisis: Cada Cada volume volumen n de los extracto extractos s calcul calculados ados I, II II y III (Diagram (Diagrama a de flujo flujo 1) se evaporan evaporan en capsu capsulas las de porcelana, sobre un baño de maría y los residuos obtenidos son procesados como se indica en los diagramas y !""# $l residuo III se lleva a la mitad del volumen# ""este procedimiento puede cambiar si se u tili%a el rotaevaporador
Residuo I. Análisis preliminares de alcaloides. $l residuo I se trata con &ter de petr'leo para extraer extraer grasas y otras sustancias poco polares polares (diagrama ), se le agrega dos veces m de *Cl al +# e calienta a -./C, se agita y se deja enfriar# uego se filtra 0asta obtener un filtrado perfectamente transparente# transparent e# De esta soluci'n se toman alícuotas de 1,. m y cada una se le añaden gotas gotas de reactivo reactivos s para alcaloides alcaloides Drangerd Drangerdorf, orf, 2ayer, 2ayer, 3alser 3alser,, 4agner 4agner y c0leib c0leiber# er# $n todos todos los casos casos se obtienen precipitados de diferentes coloraciones, por ejemplo Dragendorf da una coloraci'n anaranjada5marr'n#
Residuo II. $l residuo se extrae dos veces con &ter de petr'leo ( mx) y se filtra# a soluci'n et&rea se guarda para el an6lisis de carotenoides, esteroides y triterpenoides# $l residuo se extrae dos veces con 7 m de una me%cla etanol 8agua 189 a -./C# a soluci'n etan'lica se divide en tres fracciones para el an6lisis de diferentes grupos de metabolitos y el residuo final se descarta (Diagrama ) Extracto Etanólico 1) Análisis de flavonoides a) :eacci'n de 0inoda# $n un tubo de ensayo ;ue contiene ., g de magnesio en polvo agregar ., m de soluci'n < y 6cido clor0ídrico concentrado 0asta ;ue termine el desprendimiento desprendimiento de 0idr'geno# =bservar durante 1. min y anotar el cambio de color# a formaci'n formaci'n de una coloraci'n rosada, rosada, rojo o violeta esprueba esprueba positiva para sustancias ;ue posean e sun estructura el n>cleo de α ?ben%opirano (flavonas, flavonoles, flavononas, etc) b) :eacci'n de :osen0eim# @ransferir .,ml de extracto etan'lico, a un tubo de ensayo, agregar ., m de de *Cl concentrado y colocar el tubo en el baño de maría 0irviendo durante 1. a1 min# $nfriar y extraer con .,7 ml de alco0ol amílico# Ana coloraci'n roja en la fase amílica es positiva para antocianidinas# b) :eacci'n de leucoantocianidinas# @ransferir ., ml de soluci'n etan'lica, a un tubo de ensayo, agregar 1,. m de *Cl 1.+ y colocar el tubo en el baño de maría 0irviendo durante 1. a1 min# Ana coloraci'n roja es positiva para leucoantocianidinas# 2) Análisis de taninos. a) :eacci'n de la gelatina5sal# gelatina5sal# < ., ., m de la soluci'n < adicionar adicionar un m de soluci'n gelatina5sal, gelatina5sal, y observar la formaci'n de un precipitado b) :eacci'n con tricloruro ferríco# < ., ., m de la soluci'n < adicionar adicionar una gota de BeCl! al 1+# os taninos siempre forman soluciones verdes, a%ules o negras cuando se adiciona cloruro f&rrico#
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c) :eacci'n con acetato de plomo# < ., m de la soluci'n < adicionar .,1 m de soluci'n de acetato de plomo al 1.+# =bservar la formaci'n de turbide% o de un precipitado blanco#
3) Análisis de naftouinonas !"o antrauinonas # a) :eacci'n de orntrager5rauss# $n un tubo de ensayo colocar m de la soluci'n <, agregar un m de agua oxigenada de . volumenes, un m de 6cido sulf>rico al .+# Calentar la muestra en un baño de maría 0irviendo durante 1. a 1 min#$nfriar y extraer con embudo de decantaci'n con ! m# de benceno# uego se agitan 1 m de la capa benc&nica con un m de una soluci'n de Ea=* al +, ;ue contiene + de 0idroxido de amonio# a obtenci'n de una coloraci'n ;ue va del rosado al rojo intenso indica la presencia de nafto;uinonas y8o antra;uinonas# b) Comportamiento ante 6cidos y donador de electrones# < ., m de extracto etan'lico agregar %inc en polvo y algunas gotas de 6cido clor0ídrico concentrado# =bservar la coloraci'n amarilla, :epetir la prueba con %inc en polvo y 0idroxido de sodio al 7.+# c):odamina y amoniaco# Ana gota de extracto etan'lico se me%cla com una soluci'n saturada de rodamina y otra en las mismas condiciones com amoníaco# =bservar coloraciones verde, a%ul y violeta# d) :eacci'n con 0idrosulfito de sodio# < ., m de extracto etan'lico agregar una gota de 0idr'xido de sodio E y .,1g# de 0idrosulfito de sodio# Calentar y observar coloraci'n rojo intensa #) análisis de saponinas # a) Bormaci'n de espuma# < un m de la soluci'n < agregar m de agua y calentar (tubo de ensayo) durante 1 a !. min# uego agitar vigorosamente durante minutos# a formaci'n de una espuma con apariencia de panal de abeja, estable por !. min# se considera prueba positiva# b) :osent0aler F < ., m de extracto etan'lico colocados en un tubo de ensayo agregar por las paredes 7 gotas Del reactivo de 3<=# =bservar la formaci'n de una coloraci'n a%ul violeta en la interfase# Extracto Et$reo 1) rico5cloroformo (1.1) v8v) se agita durante uno a dos minutos# a aparici'n de coloraciones rojas, rosa, p>rpura o a%ul se considera prueba positiva# ) rico# $n casos positivos se observan coloraciones cambiantes, verdes, a%ules, rosas o p>rpuras# C) Dienos 0omonucleares# < o, m de la soluci'n et&rea agregar .,1 m de una soluci'n metab'lica de 6cido tricloroac&tico al 7.+ y calentar a G./C# =bservar una coloraci'n a%ul verdosa ;ue se torna p>rpura# !) Carotenoides < .,1 ml de 6cido sulf>rico al H+ en un tubo de ensayo añadir lentamente por las paredes ., m de extracto et&reo# =bservar la formaci'n de una coloraci'n a%ul en la interfase#
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Residuo III 1) Cumarinas# a) *idroxamato f&rríco# < ., m de extracto etan'lico adicionar una gota de una soluci'n metan'lica E de clor0idrato de 0idroxilamina y una gota de 0idr'xido de potasio E en metanol# Calentar durante min# enfriar, y acidular con 6cido clor0ídrico .,E y añadir una gota de cloruro f&rrico 1+# =bservar una coloraci'n violacea# b) $rlic0# < m de extracto etan'lico añadir 1 m de reactivo de $rlic0# =bservar coloraci'n naranja# c) Bluorescencia# ml de extracto etan'lico se colocan en un tubo de ensayo y se ponen a 0ervir en un baño de maría, colocando en la boca del tubo un papel de filtro impregnado con una soluci'n de Ea=* .,1E, durante a 1. min# =bservar la fluorescencia en el papel con una l6mpara A3# ) es;uiterpenlactonas# *idroxamato ferrico# < ., m de extracto etan'lico adicionar una gota de una soluci'n metan'lica E de clor0idrato de 0idroxilamina y una gota de 0idr'xido de potasio E en metanol# Calentar durante min# $nfriar y acidular con 6cido clor0ídrico .,E y añadir una gota de cloruro f&rrico 1+# =bservar una coloraci'n viol6cea# !) lic'sidos cardiotonicos# a) aljet# < un m de extracto etan'lico agregar .,m de reactivo de aljet# =bservar coloraci'n naranja roji%a# b) @ollens# < un m de extracto etan'lico añadir cuatro gotas de reactivo de @ollens, calentar suavemente# =bservar la formaci'n de un espejo de plata# c) rico concentrado# =bservar la formaci'n de una coloraci'n violeta en la interfase# ibliografía# Domingue%, J# <# 2&todos de investigaci'n fito;uímica# 2&xico $ditorial imusa#1G9! anabria <#
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