PENGARUH PENYIMPANAN SPESIMEN PLASMA EDTA TERHADAP KADAR KOLESTEROL TOTAL PADA SUHU 2 – 8 8 ⁰C SELAMA 24 JAM, 48 JAM, 72 JAM, DAN 96 JAM KARYA TULIS ILMIAH
Diajukan sebagai salah satu syarat untuk menyelesaikan Pendidikan Diploma III Kesehatan Kesehatan Bidang Analis Kesehatan
Disusun oleh :
Miezar Hanafian Aldiansyah Putra G0C213004
PROGAM STUDI D III ANALIS KESEHATAN FAKULTAS ILMU KEPERAWATAN DAN KESEHATAN UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SEMARANG 2016
ii
iii
iv
PENGARUH PENYIMPANAN SPESIMEN PLASMA EDTA TERHADAP KADAR KOLESTEROL TOTAL PADA SUHU 2 – 8 8 ⁰C SELAMA 24 JAM, 48 JAM, 72 JAM, DAN 96 JAM
Miezar Hanafian Aldiansyah Putra1), Herlisa Anggraini2), dan Budi Santosa3) 1. Mahasiswa D III Analis Kesehatan Fakultas Ilmu Keperawatan dan Kesehatan Universitas Muhammadiyah Semarang. 2. Dosen Progam Studi Analis Kesehatan Kesehatan Fakultas Ilmu Keperawatan dan Kesehatan Universitas Muhammadiyah Semarang. 3. Dosen Progam Studi Analis Kesehatan Kesehatan Fakultas Ilmu Keperawatan dan Kesehatan Universitas Muhammadiyah Semarang. ABSTRAK
Kolesterol adalah metabolit yang mengandung lemak sterol yang ditemukan pada membran sel dan disirkulasikan dalam plasma. Transportasi dan penyimpanan spesimen yang tidak sesuai prosedur dapat menjadi sumber penyebab tidak layaknya sampel dilakukan pemeriksaan. Lama penyimpanan harus memperhatikan jenis pemeriksaan dan stabilitas stabili tas spesimen. Spesimen simpan diperlukan diperlu kan untuk pemeriksaan konfirmasi dan pengulangan terhadap terhadap hasil hasil yang diragukan. diragukan. Penelitian ini dilakukan untuk mengetahui apakah ada perbandingan kadar kolesterol total pada plasma segera, plasma simpan 24 jam, 48 jam, 72 jam, dan 96 jam menggunakan metode CHOD PAP. Jenis penelitian ini adalah penelitian analitik. Sampel diambil dari total populasi sebanyak 24 pasien Klinik Assalamah Assalamah Kaliwungu Kendal. Hasil pemeriksaan menunjukkan rerata hasil pemeriksaan kadar kolesterol total pada plasma segera 192,25 mg/dl, rerata hasil pemeriksaan pemeriksaan kadar kolesterol total pada plasma simpan 24 jam 195,29 mg/dl, rerata hasil pemeriksaan kadar kolesterol total pada plasma simpan simpan 48 jam 198,71, 198,71, rerata hasil hasil pemeriksaan pemeriksaan kadar kadar kolesterol total pada pada plasma simpan 72 jam 201,67 mg/dl, rerata hasil pemeriksaan kadar kolesterol total pada plasma simpan 96 jam 202,17 mg/dl. Hal ini menunjukkan perbedaan nilai rerata bahwa terjadi kenaikan. Uji statistik One Way Anova menunjukkan nilai kemaknaan 0,337 dengan taraf kemaknaan kemaknaan yaitu 0,337 > 0,05. Dapat disimpulkan disimpul kan bahwa tidak ada pengaruh penyimpanan penyimpanan terhadap kadar kolesterol total pada suhu 2- 8 ⁰C selama 24 jam, 48 jam, 72 jam, dan 96 jam. Kata Kunci : Plasma simpan, Kadar Kolesterol total, Suhu 2 – 2 – 8 8 ⁰C, Metode CHOD PAP
THE INFLUENCE OF PLASMA EDTA SPECIMEN STORAGE AGAINST
v
THE TOTAL CHOLESTEROL ON 2 - 8 ⁰C TEMPERATURE DURING 24 HOURS, 48 HOURS, 72 HOURS, AND 96 HOURS
Miezar Hanafian Aldiansyah Putra1), Herlisa Anggraini2), and Budi Santosa3) 1. Student of Program Study D III Health Analyst Faculty of Nursing and Health Sciences Muhammadiyah University Universit y of Semarang. 2. Lecture of Program Study Health Analyst Faculty of Nursing and Health Sciences Muhammadiyah University of Semarang. 3. Lecture of Program Study Health Analyst Faculty of Nursing and Health Sciences Muhammadiyah University of Semarang. ABSTRACT
Cholesterol is the metabolite that contain fat sterol found on the cell membrane and circulated in the plasma. plasma. Specimen storage and transport that is not according to the procedure can be the source of the cause is not just like the samples done examination. Long storage must pay attention to the type of examination examination and the t he stability of specimens. Save specimen specimen is required r equired for confirmation of examination and the repetition of the results of the doubt. This research done to know whether there is a comparison of the total cholesterol in the plasma immediately, plasma save 24 hours, 48 hours, 72 hours, 96 hours using this method CHOD PAP. Type of this research is analytically research. Samples taken from the total population of as much as 24 patients the clinic Assalamah Assalamah Kaliwungu Kendal. Examination Results show the average examination results total cholesterol in the plasma immediately 192,25 mg/dl, mg/dl, average average examination examination results results total cholesterol cholesterol on plasma plasma save 24 hours 195,29 mg/dl, average examination results total cholesterol cholesterol on plasma save 48 hours 198,71, average examination results total cholesterol on plasma save 72 hours 201,67 mg/dl, average examination results total cholesterol on plasma save 96 hours 202,17 mg/dl. This shows the difference of average that happened increase. Statistics One Way Anova test shows the value of the significance of the 0,337 with equal significance namely 0,337 > 0.05. It can be concluded that there t here is no storage influence against total cholesterol at a temperature 2- 8 ⁰C for 24 hours, 48 hours, 72 hours, 96 hours. Key Words : Store Plasma, Total Cholesterol Levels, The Temperature 2 - 8 ⁰C, CHOD PAP method.
KATA PENGANTAR
vi
Puji syukur kami panjatkan kehadirat Tuhan Yang Maha Esa, karena berkat rahmat dan karunia-Nya dan disertai usaha yang keras Karya Tulis Ilmiah yang berjudul “Pengaruh Penyimpanan Penyimpanan Spesimen Plasma EDTA Terhadap Kadar Kolesterol Total Pada Suhu 2 – 2 – 8 8 ⁰C selama 24 jam, 48 jam, 72 jam, dan 96 jam” sebagai salah satu s yarat untuk memenuhi tugas akhir Progam Pendidikan Diploma III Analis Kesehatan Universitas Muhammadiyah Semarang dapat terselesaikan. Penulis mengucapkan terima kasih kepada berbagai pihak yang telah mendukung tersusunnya Karya Tulis Ilmiah ini, diantaranya: 1. Herlisa Anggraini, SKM, M.Si. Med selaku ketua Progam Studi D3 Analis Kesehatan sekaligus selaku Dosen Pembimbing I yang telah meluangkan waktu dan memberikan bimbingan serta pengarahan dan nasihat kepada peneliti, sehingga dapat menyelesaikan karya tulis ilmiah ini. 2. Dr. Budi Santosa, SKM, M. Si.Med selaku Dosen Pembimbing II yang telah memberikan bimbingan serta pengarahan dan nasihat kepada peneliti, sehingga dapat menyelesaikan karya tulis ilmiah ini. 3. Staf dosen dan asisten serta seluruh karyawan Fakultas Ilmu Keperawatan dan Kesehatan Universitas Muhammadiyah Semarang Progam Studi DIII Analis Kesehatan, yang banyak memberikan ilmu dan bimbingan serta dukungan selama kami menempuh pendidikan. 4. Keluarga tercinta yang telah memberikan dukungan dan semangat selama menempuh pendidikan. 5. Rekan – Rekan – rekan rekan mahasiswa Progam Studi DIII Analis Kesehatan Angkatan ke23.
vii
6. Semua pihak yang telah memberikan bantuan sehingga Karya Tulis Ilmiah ini dapat terselesaikan. Semoga Karya Tulis Ilmiah dapat memberikan manfaat.
Semarang, April 2016
DAFTAR ISI
Halaman
viii
HALAMAN JUDUL .................... .......................................... ............................................ ............................................ .............................. ........ i HALAMAN PERSETUJUAN ................... .......................................... .............................................. .................................... ............. ii HALAMAN PENGESAHAN .................... ........................................... .............................................. ................................... ............ iii SURAT PERNYATAAN ................... ......................................... ............................................ ......................................... ................... ii iv ABSTRAK .................... ........................................... ............................................. ............................................ ............................................. ....................... v KATA PENGANTAR ..................... ............................................ ............................................. ............................................ ........................ vii DAFTAR ISI ..................... ........................................... ............................................ ............................................ ....................................... ................. ix DAFTAR TABEL ..................... ........................................... ............................................ ............................................ ................................ .......... xi DAFTAR GAMBAR .................... .......................................... ............................................ ............................................ ........................... ..... xii DAFTAR LAMPIRAN ................... .......................................... ............................................. ............................................ ...................... xiii BAB I PENDAHULUAN ................... ......................................... ............................................ ............................................. .......................1 A. Latar Belakang ......................................... ............................................................... ............................................. .......................1 B. Rumusan Masalah ............................................ ................................................................... ..................................... ..............3 C. Tujuan Penelitian....................... Penelitian.............................................. .............................................. ..................................... ..............3 D. Manfaat Penelitian............................. Penelitian................................................... ............................................. .............................. .......4 E. Orisinalitas ............................................ .................................................................. ............................................ .......................... ....4 BAB II TINJAUAN PUSTAKA ................... ......................................... ............................................ .................................. ............4 A. Kolesterol .......................................... ................................................................ ............................................ .............................. ........6 1. Pembentukan Kolesterol ............................................................. ................................................................. .... 7 2. Metabolisme Kolesterol ................................................... .................................................................. ...............8 3. Manfaat Khusus Kolesterol ......................................... ............................................................ ...................9 B. MetodePemeriksaan Kadar Kolesterol Total ........................................ ........................................9 1. Metode Liebermann Metode Liebermann Burchard ..................... Burchard ........................................... .................................. ............9 2. Metode Iron Metode Iron Salt Acid ................... Acid .......................................... .............................................. .........................10 3. Metode Elektrode-Based Metode Elektrode-Based Biosensor ..................... Biosensor ............................................ .........................10 4. Metode CHOD PAP ..................................... ........................................................... ................................ ..........10 C. Faktor – Faktor – Faktor Faktor Yang Dapat Mempengaruhi Kadar Kolesterol Total .......................................... ................................................................. ............................................. ................................... .............11 1. Waktu Penyimpanan Spesimen ........................................... .................................................... .........11 2. Suhu Penyimpanan Spesimen .................................. ....................................................... .....................12 3. Cara Penanganan Spesimen ......................................... .......................................................... .................12 D. Kerangka Teori ............................................ ................................................................... ....................................... ................13 E. Kerangka Konsep......................................... Konsep............................................................... ....................................... .................13 F. Hipotesis ........................................... ................................................................. ............................................ ............................ ......13 BAB III METODE PENELITIAN A. Jenis Penelitian ............................................ ................................................................... ....................................... ................14 B. Tempat dan Waktu Penelitian ............................................ ............................................................. .................14 C. Populasi dan Sampel .................................... .......................................................... ....................................... .................14 D. Variabel Penelitian............................ Penelitian.................................................. ............................................. ............................ .....14 E. Definisi Operasional ........................................... .................................................................. ................................ ......... 15 15 F. Bahan, Reagen, dan Alat ............................................ ................................................................... .........................15 G. Cara Kerja Penelitian .......................................... ................................................................. ................................ .........16 1. Cara Pengambilan Darah Vena ........................................... ..................................................... ..........16 2. Cara Pembuatan Plasma EDTA ........................................... .................................................... .........16 3. Prosedur Penyimpanan Plasma EDTA .................................... ......................................... .....16
ix
4. Teknik Pemeriksaan Kolesterol Total .......................................... ..........................................17 H. Analisis Data.................................................... .......................................................................... ................................... .............18 I. Hipotesis Statistik ............................................ ................................................................... ................................... ............18 BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN .................... .......................................... ............................................. .......................1 A. Hasil Penelitian ............................................ ................................................................... ....................................... ................19 B. Pembahasan ........................................... ................................................................. ............................................ ........................ ..20 BAB V SIMPULAN DAN SARAN .................... .......................................... ............................................. .............................. .......1 A. Simpulan ........................................... ................................................................. ............................................ ............................ ......22 B. Saran .......................................... ................................................................. ............................................. ................................... .............22 DAFTAR PUSTAKA ...................... ............................................. ............................................. ............................................ ........................ .. 23
DAFTAR TABEL
Halaman
x
Tabel 1 Tabel 2 Tabel 3 Tabel 4
Orisinalitas Penelitian Judul .......................................................... 4 Skema Pemipetan Judul ............................................................. 17 Hasil Pemeriksaan Kadar Kolesterol Total Judul ...................... 19 Nilai Signifikansi Pada Uji Shapiro Wilk Judul ......................... 20
DAFTAR GAMBAR
xi
Gambar 1
Halaman Formula KolesterolJudul KolesterolJudul ................................................................ 6
DAFTAR LAMPIRAN
xii
Lampiran 1 Lampiran 2
Halaman Data Hasil Pemeriksaan Kadar Kolesterol TotalJudul TotalJudul .................25 ................. 25 Analisa Statistika Pengaruh Penyimpanan Terhadap Kadar Kolesterol Total Pada Suhu 2 – 2 – 8 8 ⁰C Selama 24 Jam, 48 Jam, 72 Jam, dan 96 JamJudul Jam Judul ............................................................. 26
xiii
BAB I PENDAHULUAN
A. Latar Belakang
Pemeriksaan laboratorium kesehatan bidang kimia klinik merupakan hal yang sangat menentukan dalam menegakkan diagnosis, monitoring terapi, dan prognosis penyakit. Hasil pemeriksaan laboratorium yang akurat dan dapat dipercaya, diperlukan perhatian terhadap tahap pra analitik, analitik, dan pasca analitik. (Permenkes RI, 2010; Hardjono, 2007) Pemantapan mutu laboratorium kimia klinik melalui tahap pra analitik meliputi kegiatan persiapan pasien, menerima pasien, menerima spesimen, mengambil spesimen, memberi identitas spesimen, menguji mutu air, dan reagensia. Tahap analitik meliputi kegiatan pengolahan spesimen, pemeliharaan, dan kalibrasi peralatan, pelaksanaan pemeriksaan, pengawasan ketelitian, dan ketepatan pemeriksaan. Tahap pasca analitik meliputi kegiatan pencatatan hasil pemeriksaan, dan pelaporan hasil pemeriksaan. (Riyono, 2007) Tahap analitik merupakan kegiatan yang dapat dikendalikan oleh petugas laboratorium untuk mencegah kesalahan acak yang berhubungan dengan ketelitian dan kesalahan sistematik dengan hasil analisis laboratorium kimia klinik. (Riyono, 2007) Upaya untuk menjamin mutu hasil analisis laboratorium kimia klinik, telah diatur
oleh
Departemen
Kesehatan
dalam
Permenkes
RI
nomor
1792/Menkes/SK/XII/2010 tentang pedoman pemeriksaan kimia klinik yang isinya dalam rangka meningkatkan pelayanan pemeriksaan kimia klinik di laboratorium
1
2
kesehatan agar dapat terlaksana dengan efektif dan efisien, serta menghasilkan pemeriksaan yang berkualitas, tepat, cepat, dan teliti. Spesimen harus diambil secara benar dengan memperhatikan waktu, lokasi, volume, cara, peralatan, wadah spesimen,
pengawet
atau
antikoagulan
yang
sesuai
dengan
persyaratan
pengambilan spesimen. (Permenkes RI, 2010; 2010; Permenkes RI, 2013) Kondisi di lapangan, sering ditemukan pemeriksaan kadar kolesterol total dengan dilakukan penundaan terlebih dahulu terhadap spesimen yang akan diperiksa melebihi 4 jam. Perlakuan penundaan pemeriksaan terhadap spesimen untuk pemeriksaan kadar kolesterol total pada plasma darah membutuhkan perlakuan yang sesuai prosedur, sehingga kondisi spesimen tetap stabil. Spesimen yang disyaratkan pada prosedur pemeriksaan kadar kolesterol total adalah serum atau plasma. Membuat plasma antikoagulan yang dianjurkan adalah Etilen adalah Etilen Diamin Tetra Acetat (EDTA). (EDTA). Baik serum atau plasma harus segera dipisahkan dari sel – sel – sel darah dan disimpan dalam almari es agar struktur lipoprotein dan revolusi lipoprotein tidak menurun. Penyimpanan spesimen dilakukan jika pemeriksaan ditunda atau spesimen akan dikirim ke laboratorium lain. (Sukorini, 2010; Julandaeni, 2015) Transportasi dan penyimpanan spesimen yang tidak sesuai prosedur dapat menjadi sumber penyebab tidak layaknya sampel dilakukan pemeriksaan. Lama penyimpanan harus memperhatikan jenis pemeriksaan dan stabilitas spesimen. Pada prosedur dijelaskan bahwa serum atau plasma stabil sampai dengan 4 hari pada suhu 2 – 8 8 ⁰C. Spesimen simpan diperlukan untuk pemeriksaan konfirmasi
3
dan pengulangan terhadap hasil yang diragukan . (Stanbio laboratory, 2011; Tiwi, 2015)
B. Rumusan Masalah
Berdasarkan latar belakang, maka perlu dilakukan pemeriksaan terhadap kemungkinan adanya pengaruh penyimpanan terhadap perubahan kadar kolesterol total pada spesimen plasma simpan 24 jam, 48 jam, 72 jam, dan 96 jam.
C. Tujuan Penelitian
1. Tujuan Umum Mengetahui kadar kolesterol total pada plasma segera, plasma simpan 24 jam, 48 jam, 72 jam, dan 96 jam. 2. Tujuan Khusus a. Mengukur kadar kolesterol total pada plasma segera. b. Mengukur kadar kolesterol total pada plasma simpan 24 jam. c. Mengukur kadar kolesterol total pada plasma simpan 48 jam. d. Mengukur kadar kolesterol total pada plasma simpan 72 jam. e. Mengukur kadar kolesterol total pada plasma simpan 96 jam. f.
Membandingkan kadar kolesterol total pada plasma simpan s impan 24 jam, 48 jam, 72 jam, dan 96 jam.
D. Manfaat Penelitian
1. Bagi peneliti Mengembangkan ilmu yang diperoleh selama menempuh pendidikan di Universitas Muhammadiyah Semarang.
4
2. Tenaga Laboratorium Kadar
Kolesterol
yang
stabil
dalam
proses
penyimpanan
memungkinkan untuk melakukan pemeriksaan konfirmasi dalam laboratorium jika hasil pemeriksaan diragukan. 3. Bagi akademi Dapat digunakan sebagai acuan dalam kelanjutan penelitian, terutama para mahasiswa yang sedang menempuh pendidikan Ahli Madya Analis Kesehatan.
E. Orisinalitas
Tabel 1. Orisinalitas Penelitian Judul penelitian Peneliti, Tahun Hasil penelitian Perbedaan Kadar Ni Putu Dari hasil pemeriksaan didapat kadar Kolesterol Total Serum Julandaeni kolesterol total rata- rarta dengan Terhadap Suhu dan (2015) perlakuan langsung diperiksa, ditunda 30 Waktu Penyimpanan menit suhu ruang, ditunda 24 jam suhu ruang, ditunda 24 jam suhu kulkas 4⁰C berturut – berturut – turut turut adalah sebagi berikut 165,6 mg/dl, 172,1 mg/dl, 166,5 mg/dl, 164,4 mg/dl. Pengaruh Suhu dan Dwi Sulistiani Tidak ada perbedaan yang bermakna Waktu Simpan Pada (2010) antara kadar kolesterol pada pemeriksaan Serum Untuk segera, disimpan di almari es pada suhu Pemeriksaan Kolesterol 4⁰C dan disimpan di freezer selama 24 jam. Total Effects of heparin, heparin, citrate, M.Mohri, et all Kebanyakan parameter hasil pemeriksaan and EDTA on plasma (2009) tidak menunjukkan perbedaan yang biochemistry of sheep: berarti, tetapi peningkatan yang signifikan Comparison with serum. terlihat untuk konsentrasi albumin ketika heparin digunakan sebagai antikoagulan. Menggunakan EDTA sebagai antikoagulan menyebabkan perbedaan yang signifikan untuk konsentrasi dari beberapa parameter parameter yang diukur dalam plasma kecuali glukosa, GGT, kolesterol, albumin, bilirubin, dan fosfor anorganik dibandingkan dengan serum.
5
Perbedaan penelitian ini dengan penelitian sebelumnya terletak pada spesimen yang digunakan dalam pemeriksaan kadar kolesterol total menggunakan serum yang ditunda selama 30 menit pada suhu ruang, ditunda selama 24 jam pada suhu ruang, dan ditunda selama 24 jam dalam almari es pada suhu 4 ⁰C. Sedangkan spesimen yang digunakan pada penelitian yang dilakukan adalah spesimen plasma EDTA yang disimpan pada suhu 2 - 8 ⁰C selama 24 jam, 48 jam, 72 jam, dan 96 jam.
BAB II TINJAUAN PUSTAKA
A. Kolesterol
Kolesterol adalah metabolit yang mengandung lemak sterol yang ditemukan pada membran sel dan disirkulasikan dalam plasma darah. Kolesterol yang mengalir dalam darah, dalam bentuk lipoprotein yang berfungsi sebagai komponen stabilitas membran sel dan sebagai prekursor garam empedu serta hormon steroid. (Permenkes RI, 2010; Marks, 2013) Kolesterol yang formulanya ditunjukkan dalam Gambar 1, terdapat dalam diet semua orang, dan dapat diabsorbsi dengan lambat dari saluran pencernaan ke dalam
limfe
usus.
Kolesterol
yang
diperoleh
dari
makanan,
dianggap
mempengaruhi proporsi lipoprotein di dalam darah. Kolesterol terdapat dalam jumlah yang berarti di dalam produk – produk – produk produk hewani, seperti kuning telur, lemak mentega, dan daging. Kolesterol disintesis melalui jal ur yang terdapat pada hampir semua sel tubuh, terutama di sel hati dan usus. Prekursor untuk sintesis kolesterol adalah asetil KoA, yang dapat dibentuk dari glukosa, asam lemak, atau asam amino. (Guyton, 2006; Haribi, 2009; Marks, 2013)
Gambar 1: Formula Kolesterol. (Guyton, (Gu yton, 2006)
6
7
Nilai normal kadar kolesterol total di dalam dala m darah dara h adalah kurang dari 200 mg/dl. Apabila melampaui batas normal maka disebut sebagai hiperkoleste rolemia. Peningkatan kadar kolesterol dalam darah dikaitkan dengan pembentukan plak ateroklerotik yang dapat menyumbat pembuluh darah, menimbulkan serangan jantung dan stroke yang ditemukan pada penderita hipotiroidisme, DM, sirosis bilier, pankreatektomi, kehamilan trimester III, stres berat, hiperlipoproteinemi, diet tinggi kolesterol, dan sidrom nefrotik. Peningkatan kadar kolesterol juga disebabkan oleh obat pil KB, epinefrin, fenotiazin, vitamin A, D. Sulfonamid, dan fenotin. (Hardjono, 2007; Marks, 2013; Sutedjo, 2007) 1. Pembentukan Kolesterol
Prekursor untuk sintesis kolesterol adalah asetil-KoA. Asetil-KoA dihasilkan dari prekursor utama yaitu glukosa dan asam lemak atau asam amino. Pembentukan kolesterol berlangsung dalam tiga fase. Pada fase pertama, dua molekul asetil-KoA membentuk asetoasetil-KoA, yang bergabung dengan molekul asetil-KoA lainnya membentuk hidroksimetilglutaril-KoA (HMG-KoA). Reduksi HMG-KoA membentuk mefalonat. Reduksi yang dikatalis HMG-KoA reduktase merupakan penentu kecepatan pembentukan kolesterol. Fase kedua, mevalonat diubah menjadi unit – unit unit isopren 5-karbon, yaitu skualen. Fase ketiga, skualen mengalami siklinasi membentuk lanosterol, yang memiliki cincin – cincin inti steroid. Lanosterol mengalami modifikasi melalui serangkaian reaksi untuk membentuk kolesterol. (Marks, 2013) Peningkatan jumlah kolesterol yang dicerna setiap hari dapat mempengaruhi peningkatan konsentrasi plasma. Bila kolesterol dicerna, peningkatan konsentrasi
8
kolesterol menghambat enzim penting untuk pembentukan kolesterol endogen, 3hidroksi-3-metilglutaril KoA reduktase, menyediakan suatu sistem kontrol umpan balik intrinsik untuk mencegah peningkatan konsentrasi kolesterol plasma yang berlebih. Konsentrasi Konsentrasi kolesterol plasma biasanya biasanya tidak berubah baik naik atau turun lebih dari ± 15 persen dengan mengubah jumlah kolesterol dalam diet, walaupun respon individu berbeda. (Guyton, 2006)
2. Metabolisme Kolesterol
Kolesterol merupakan komponen struktural membran sel dan merupakan senyawa induk dari hormon steroid, vitamin D 3, dan garam empedu. Kolesterol disintesis secara de novo di dalam hati dan sel epitel usus dan juga dapat diperoleh di peroleh dari lemak makanan. Metabolisme kolesterol secara de novo bergantung pada jumlah kolesterol kolesterol dan trigliserida dalam lemak makanan. Kolesterol dikemas dalam kilomikron pada usus dan di dalam lipoprotein berdensitas sangat rendah (VLDL) di hati. Aliran darah, kolesterol ditranspor membentuk kompleks bersama dengan fosfolipid dan protein (aproprotein) dalam partikel yang disebut lipoprotein yang juga mengangkut triasilgliserol. Triasilgliserol pada lipoprotein darah dice rna oleh lipoprotein lipase, kilomikron diubah menjadi sisa kilomikron dan VLDL diubah menjadi lipoprotein berdensitas – berdensitas – antara antara (IDL) dan selanjutnya s elanjutnya menjadi lipoprotein berdensitas rendah (LDL). Produk – produk ini kembali ke hati lalu berikatan dengan reseptor di membran sel dan diserap melalui proses endositosis untuk dicerna oleh enzim lisosom. LDL juga diserap melalui proses endositosis untuk dicerna oleh enzim lisosom. LDL juga diserap melalui proses endositosis oleh jaringan non-hati (perifer). Kolesterol dan produk pencernaan lisosom lainnya
9
dilepaskan ke dalam depot seluler. Hati menggunakan kolesterol daur ulang ini, dan kolesterol yang disintesis dari asetil KoA, untuk membentuk VLDL, dan garam empedu. (Kuchel, 2006; Davey, 2005; Marks, 2013)
3. Manfaat Khusus Kolesterol
Kolesterol sebagian kecil dipakai oleh kelenjar adrenal untuk membentuk hormon adrenokortikal, ovarium, untuk membentuk progesteron dan este rogen, dan oleh testis untuk membentuk testosteron. Kelenjar – kelenjar ini juga dapat membentuk sterol sendiri dan kemudian membentuk hormon dari sterol tersebut. (Guyton, 2006)
B. Metode Pemeriksaan Kadar Kolesterol Total
Pemeriksaan kadar kolesterol kolesterol total
dapat dilakukan dengan beberapa
metode yaitu: 1. Metode Liebermann Metode Liebermann Burchard Prinsip dari metode ini adalah apabila kolesterol direaksikan dengan asam acetat anhidrid dan asam sulfat pekat dalam lingkungan bebas air, maka akan terbentuk warna hijau – biru yang intensitas akibat pembentukan polimer hidrokarbon tak jenuh. Reaksi warna diawali protonasi gugus hidroksi dalam kolesterol dan menyebabkan lepasnya air untuk manghasilkan ion karbonin 3,5 kolestadiena, yang selanjutnya dioksidasi oleh ion sulfit menghasilkan senyawa kromofor asam kolestaheksaena sulfonat. Warna yang terbentuk kemudian ditentukan absorbansinya dengan fotometer. Metode Liebermann Burchard yang dimodifikasi, dapat diketahui kadar kolesterol bebas atau dalam bentuk ester.
10
Metode ini menggunakan asam asetat anhidrat yang berfungsi sebagai zat pengekstrak agar kolesterol keluar dari serum darah. Sedangkan asam sulfat s ulfat pekat digunakan sebagai zat pengkomples sehingga larutan yang terbentuk memberikan warna. (Maulia, 2013) 2. Metode Iron Metode Iron Salt Acid Metode Iron Salt Acid menghasilkan kation tetra enilik, p-TSA bereaksi dengan turunan kolesterol untuk membentuk senyawa kromofor, kromofor kemudian akan memberikan serapan pada fotormeter. (Maulia, 2013) 3. Metode Elektrode-Based Metode Elektrode-Based Biosensor Prinsip pemeriksaan adalah katalis yang digabung dengan teknologi biosensor yang spesifik terhadap pengukuran kolesteterol. Strip pemeriksaan dirancang dengan cara tertentu sehingga pada saat darah diteteskan pada zona reaksi dari strip, katalisator kolesterol memicu oksidasi kolesterol dalam darah. Intensitas dari elektron yang terbentuk diukur oleh sensor dari alat dan sebanding dengan konsentrasi kolesterol dalam darah. (Suwandi, 2015) 4. Metode CHOD PAP Metode kolorimetrik enzimatik (Cholesterol ( Cholesterol Oxidase Methode/ CHOD CHOD PAP) adalah metode yang disyaratkan sesuai standar WHO/IFCC. Prinsip pemeriksaan kadar kadar kolesterol total metode kolorimetrik enzimatik adalah kolesterol ester diurai menjadi kolesterol dan asam lemak menggunakan enzim kolesterol esterase. Kolesterol yang terbentuk kemudian diubah menjadi Cholesterol-3-one dan hidrogen peroksida oleh enzim kolesterol oksidase. Hidrogen peroksida yang terbentuk beserta fenol dan 4- aminophenazone oleh peroksidase diubah menjadi
11
zat yang berwarna merah. Intensitas warna yang terbentuk sebanding dengan konsentrasi kolesterol total dan dibaca dib aca pada λ 500 500 nm. (Permenkes RI, 2010; Stanbio laboratory, 2011)
C. Faktor – Faktor Faktor Yang Dapat Mempengaruhi Kadar Kolesterol Total
Hasil pemeriksaan laboratorium yang tepat dan teliti dapat tercapai apabila di dalam proses pemeriksaan terhadap spesimen selalu memperhatikan secara terpadu beberapa hal yaitu: persiapan pasien, pengambilan spesimen pasien, proses pemeriksaan spesimen, dan pelaporan hasil pemeriksaan spesimen. Penyimpanan spesimen dilakukan apabila pemeriksaan ditunda atau spesimen dikirim ke laboratorium lain. Hal yang perlu diperhatikan dalam penyimpanan spesimen yaitu waktu penyimpanan spesimen, cara penanganan spesimen,
dan penyimpanan
spesimen. (Mulyono, 2010) 1. Waktu penyimpanan spesimen Beberapa spesimen yang tidak langsung diperiksa dapat disimpan dengan memperhatikan jenis pemeriksaan yang akan diperiksa. Penyimpanan spesimen harus sesuai dengan prosedur yang disyaratkan, sehingga diperoleh hasil pemeriksaan yang tepat. Persyaratan penyimpanan untuk beberapa pemeriksaan laboratorium harus memperhatikan jenis spesimen, antikoagulan atau pengawet, dan wadah serta stabilnya. Waktu penyimpanan disarankan untuk spesimen kolesterol total adalah selama 4 hari. (Permenkes RI, 2010; Stanbio laboratory, 2011)
2. Suhu penyimpanan spesimen
12
Spesimen yang disyaratkan pada pemeriksaan kolesterol total adalah serum atau plasma, baik plasma Heparin atau plasma EDTA. Baik serum atau plasma harus segera dipisahkan dari sel – sel – sel sel darah dan disimpan di dalam almari es pada suhu 2⁰ - 8⁰C, agar komposisi dan enzim – enzim – enzim enzim yang terkandung di dalam serum atau plasma tetap stabil. (Permenkes RI, 2010; Julandaeni, 2015) 3. Cara penanganan spesimen Penanganan terhadap spesimen yang digunakan untuk pemeriksaan diperlukan perlakuan yang benar. Penanganan spesimen yang tidak sesuai dengan prosedur dapat mempengaruhi hasil pemeriksaan. Beberapa spesimen yang tidak ti dak langsung diperiksa dapat disimpan dengan memperhatikan jenis pemeriksaan yang akan diperiksa. Beberapa cara penyimpanan spesimen, antara lain disimpan pada suhu ruang, ruang, disimpan di dalam almari es pada suhu 2 – 8 8 ⁰C, dibekukan suhu -20 ⁰
C, -70 ⁰C atau – atau – 120 120 ⁰C. (Julandaeni, 2015)
D. Kerangka teori
13
Faktor – Faktor – faktor faktor yang mempengaruhi kadar kolesterol total
Waktu penyimpanan spesimen
Suhu penyimpanan spesimen
Cara penanganan spesimen
Kadar kolesterol total
Pembentukan kolesterol
Metabolisme kolesterol
Metode pemeriksaan kolesterol
E. Kerangka konsep Waktu simpan spesimen: Plasma segera Plasma simpan 24 jam Plasma simpan 48 jam Plasma simpan 72 jam Plasma simpan 96 jam
Pemeriksaan kadar kolesterol total
F. Hipotesis
Ada pengaruh kadar kolesterol total pada plasma segera, plasma simpan 24 jam, plasma plasma simpan 48 jam, plasma simpan 72 72 jam, dan plasma simpan 96 jam pada suhu 2 – 2 – 8 8 ⁰C.
BAB III METODE PENELITIAN
A. Jenis Penelitian
Jenis penelitian ini adalah penelitian analitik.
B. Tempat dan Waktu Penelitian
1. Tempat penelitian Instalasi Laboratorium Klinik Assalamah Kaliwungu Kendal. 2. Waktu penelitian Waktu penelitian dilakukan pada bulan November November - Desember 2015.
C. Populasi dan Sampel
1. Populasi Populasi adalah pasien rawat inap dan rawat jalan pada bulan November Desember 2015 di Klinik Assalamah Kaliwungu Kendal yang melakukan pemeriksaan kadar kolesterol total. 2. Sampel. Sampel diambil dari total populasi sebanyak 24 sampel.
D. Variabel Penelitian
a. Variabel bebas Variabel bebas dalam penelitian ini adalah penyimpanan spesimen plasma EDTA selama 24 jam, 48 jam, 72 jam, dan 96 jam.
14
15
b. Variabel Terikat Variabel terikat dalam penelitian ini adalah kadar kolesterol total.
E. Definisi Operasional
1. Kadar kolesterol adalah bagian dari lemak dalam darah yang diperiksa menggunakan spesimen plasma EDTA, metode CHOD PAP dengan alat Semiauto Chemistry Analyzer Mindray BA – 88A. 88A. Nilai normal kadar kolesterol total kurang dari 200 mg/dl. 2. Waktu penyimpanan adalah lama waktu penyimpanan spesimen plasma EDTA di dalam almari es pada suhu 2 – 2 – 8 8⁰C selama 1 hari, 2 hari, 3 hari, dan 4 hari.
F. Bahan, Reagen, dan Alat
1. Bahan yang digunakan adalah plasma EDTA dari darah vena sewaktu. 2. Reagen yang digunakan adalah alkohol 70 % dan satu kit reagen kolesterol Stanbio laboratory. laboratory . 3. Alat – Alat – alat alat yang digunakan adalah Semi-auto Chemistry Chemistry Analyzer Mindray Mindray BA – 88A, 88A, mikropipet 1000 µl, mikropipet 100µl, centrifunge, rak tabung, tabung reaksi, spuit 3 cc, kapas, plester, dan tourniquet .
G. Cara Kerja Penelitian
1. Cara pengambilan sampel darah vena a. Pasien diminta untuk meluruskan lengan dan mengepalkan t angan. b. Tourniquet dipasang dipasang 2 – 2 – 3 3 inci dari tempat tusukan, dan dilakukan palpasi vena. c. Daerah tusukan didesinfeksi dengan gerakan memutar keluar.
16
d. Vena ditusuk dengan lubang jarum menghadap ke atas dengan sudut kemiringan 15 derajat. e. Darah dihisap dari ujung spuit sebanyak 3 ml, tourniquet dilepas, dan pasien diminta untuk membuka kepalan tangan. f.
Jarum ditarik dengan segera dan diletakkan kapas kering di atas bekas tusukan untuk kemudian ditekan dan diplester.
2. Cara pembuatan plasma EDTA a. Darah vena sebanyak 3 ml dialirkan ke dalam tabung berisi EDTA dari spuit tanpa jarum. b. Tabung ditutup dan dihomogenkan dihomogenkan selama 60 detik atau lebih secara seca ra perlahan. c. Plasma EDTA harus segera dipisahkan dari sel darah dalam waktu maksimal 2 jam setelah pengambilan spesimen dengan cara dicentrifuge 3000 rpm s elama 5 menit, 3. Prosedur penyimpanan plasma EDTA a. Sebanyak 5 tabung disediakan untuk diisi spesimen plasma EDTA masing – masing 200 µl dan diberi label. b. Tabung pertama diperiksa segera c. Tabung 2 diisi disimpan dalam almari es pada suhu 2 - 8 ⁰C selama 24 jam. d. Tabung 3 diisi disimpan dalam almari es pada suhu 2 - 8 ⁰C selama 48 jam. e. Tabung 4 diisi disimpan dalam almari es pada suhu 2 - 8 ⁰C selama 72 jam. f.
Tabung 5 diisi disimpan dalam almari es pada suhu 2 - 8 ⁰C selama 96 jam.
4. Teknik pemeriksaan kolesterol total
17
Metode yang digunakan yaitu metode CHOD PAP dan prinsip dari metode CHOD PAP yaitu kolesterol ester diurai menjadi kolesterol dan asam lemak menggunakan enzim kolesterol esterase. Kolesterol yang terbentuk kemudian diubah menjadi Cholesterol-3-one dan Cholesterol-3-one dan hidrogen peroksida oleh enzim kolesterol oksidase. Hidrogen peroksida yang terbentuk beserta fenol dan 4- aminophenazone oleh peroksidase diubah menjadi zat yang berwarna merah. Intensitas warna yang terbentuk sebanding dengan konsentrasi kolesterol total dan dibaca pada pada λ 500 nm. Prosedur
pemeriksaan
spesimen
dilakukan
dengan
cara
spesimen
dikeluarkan dari almari es, dan disesuaikan pada suhu ruang. Pemeriksaan dilakukan dengan alat Semi-auto Chemistry Analyzer Mindray Mindray BA – 88A. 88A. Tabel 2. Skema Pemipetan
Reagen Standard Plasma EDTA
Reagen Blanko 1000 µl
Standard 1000 µl 10 µl
Sampel 1000 µl 10 µl
Campuran dihomogenkan dan diinkubasi pada suhu ruang selama 10 menit, kemudian dibaca pada fotometer λ 500 nm Hasil nm Hasil dinyatakan dalam mg/dl dengan nilai normal normal < 200 200 mg/dl
H. Analisis Data
Data yang diperoleh berupa kadar kolesterol total pada waktu segera, simpan 24 jam, 48 jam, 72 jam, dan 96 jam yang disajikan dalam bentuk deskriptif tabel. Pengaruh – Pengaruh – pengaruh pengaruh waktu simpan dengan kadar kolesterol total dilakukan dengan uji statistik dengan cara Uji normalitas
dengan Shapiro Wilk. Wilk. Data
terdistribusi normal dilakukan uji statistik selanjutnya s elanjutnya yaitu uji One Way Anova.
18
G. Hipotesis Statistik
Nilai kemaknaan kemaknaan yang digunakan dalam hipotesis hipotesis statistik adalah adalah α 5% 5%. Jika p > 0,05 maka hipotesis nol diterima, sedangkan se dangkan jika p < 0,05 maka hipotesis nol ditolak. Hipotesis nol yaitu tidak ada pengaruh penyimpanan spesimen plasma EDTA terhadap kadar kolesterol total pada suhu 2- 8 ⁰C selama 24 jam, 48 jam, 72 jam, dan 96 jam. Hipotesis alternatif yaitu ada pengaruh penyimpanan spesimen plasma EDTA terhadap kadar kolesterol total pada suhu 2- 8 ⁰C selama 24 jam, 48 jam, 72 jam, dan 96 jam.
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN
A. Hasil Penelitian
Hasil pemeriksaan kadar kolesterol kolester ol total menggunakan metode CHOD PAP pada plasma segera, plasma simpan 24 24 jam, plasma simpan 48 jam, plasma simpan 72 jam, dan plasma simpan 96 jam dapat dilihat pada Tabel 3 dibawah ini. Tabel 3. Hasil pemeriksaan kadar kolesterol total N
Minimum
Maximum
Mean
Std. Deviation
Plasma Segera
24
147
225
192,25
22,793
Plasma Simpan 24 Jam
24
156
229
195,29
17,817
Plasma Simpan 48 Jam
24
164
232
198,71
18,131
Plasma Simpan 72 Jam
24
161
231
201,67
19,228
Plasma Simpan 96 Jam Sumber: Data Primer
24
169
237
202,17
18,327
Tabel 3 menyatakan bahwa rerata kadar kolesterol total tertinggi yang mengalami penyimpanan adalah pada plasma simpan 96 jam yaitu sebesar 202,17 mg/dl. Rerata kadar kolesterol total terendah yang mengalami penyimpanan adalah pada plasma simpan 24 jam yaitu sebesar 195,29 mg/dl.
Keseluruhan hasil
pemeriksaan kadar kolesterol total yang mengalami penyimpanan terdapat perbedaan nilai rerata bahwa terjadi kenaikan. Penentuan distribusi normalitas data menggunakan uji Saphiro Wilk didapatkan output yang dapat dilihat pada Tabel 4.
19
20
Tabel 4. Nilai signifikansi pada uji Shapiro Wilk Perlakuan Plasma segera Plasma simpan 24 jam Plasma simpan 48 jam Plasma simpan 72 jam Plasma simpan 96 jam
Nilai signifikansi 0,225 0,915 0,753 0,075 0,598
Tabel 4 dapat dilihat nilai signifikansi lebih dari 0,05 yang artinya data terdistribusi normal. Kadar kolesterol total terhadap waktu penyimpanan digunakan uji One Way Anova didapatkan Anova didapatkan hasil 0,337 dengan nilai signifikansi lebih dari 0,05, maka hipotesisis nol diterima yang artinya tidak ada pengaruh penyimpanan spesimen plasma EDTA terhadap kadar kolesterol total pada suhu 2 – 2 – 8 8 ⁰C selama 24 jam, 48 jam, 72 jam, dan 96 jam.
B. Pembahasan
Hasil uji statistika menunjukkan bahwa spesimen plasma EDTA dapat digunakan pada pemeriksaan kadar kolesterol total pada suhu 2 – 8 8 ⁰C selama 24 jam, 48 jam, 72 jam, dan 96 jam. Hal ini dapat dibuktikan bahwa terdapat kesesuaian waktu penyimpanan spesimen plasma EDTA terhadap pemeriksaan kadar kolesterol total dengan prosedur yang telah ditetapkan untuk spesimen plasma EDTA adalah selama 4 hari pada suhu suhu 2 – 2 – 8 8 ⁰C. (Stanbio laboratory, 2011) Hasil pemeriksaan kadar kolesterol total pada plasma simpan 24 jam, 48 jam, 72 jam, dan 96 jam meskipun tidak bermakna secara statistika, namun terdapat perbedaan yang bermakna secara klinis dengan spesimen plasma segera sebagai kontrol.
21
Berdasarkan penelitian yang dilakukan oleh Hankinson, 1989, penggunaan spesimen plasma EDTA pada pemeriksaan kadar kolesterol total sedikit mengalami kenaikan dari waktu ke waktu. Peranan yang mempengaruhi kadar kolesterol total yang mengalami penyimpanan seperti penggunaan antikoagulan dalam spesimen plasma EDTA dapat menganggu analisis dalam kimia klinik atau mengubah konsentrasi konstituen yang diukur. Kontaminasi antikoagulan EDTA dapat berupa kation seperti NH4+, Li+, Na+, dan K +. Kegagalan Natrium atau Kalium dalam degradasi analit, mengakibatkan kebocoran air dari plasma masuk ke dalam sel darah merah menyebabkan pembengkakan sel darah merah. Pembekakan sel darah merah dapat meningkatkan nilai hematokrit dan penurunan volume plasma yang dapat mengakibatkan peningkatan kadar kolesterol total dalam spesimen plasma EDTA. (WHO, 2002; Ungaro, 1985; Clark, 2002) Hasil yang berbeda juga bertentangan dengan apa yang bisa diharapkan dalam penelitian ini. Hasil yang berbeda dikarenakan penggunaan antikoagulan EDTA pada plasma darah akan mengakibatkan efek osmotik sehingga terjadi hemodilusi dan mengakibatkan penurunan kadar kolesterol total secara semu. (Suwandi 2015)
C. Keterbatasan Keterbatasan Penelitian
Keterbatasan penelitian ini ialah mengabaikan bias – bias yang dapat mempengaruhi stabilitas spesimen antara lain kontaminasi oleh kuman dan bahan kimia, metabolisme oleh sel – sel – sel sel hidup pada spesimen, penguapan, dan terpapar sinar matahari.
BAB V SIMPULAN DAN SARAN
A. Simpulan
Berdasarkan hasil pemeriksaan kadar kolesterol total yang dilakukan pada 24 sampel total pada pasien rawat inap dan rawat jalan Klinik Assalamah Kaliwungu Kendal dapat disimpulkan bahwa: 1. rerata hasil pemeriksaan kadar kolesterol total pada plasma segera adalah 192,25 mg/dl. 2. Rerata hasil pemeriksaan kadar kolesterol total pada plasma simpan 24 jam adalah 195,29 mg/dl. 3. Rerata hasil pemeriksaan kadar kolesterol total pada plasma simpan 48 jam adalah 198,71 mg/dl. 4. Rerata hasil pemeriksaan kadar kolesterol total pada plasma simpan 72 jam 201,67 mg/dl. 5. Rerata hasil pemeriksaan kadar kolesterol total pada plasma simpan 96 jam adalah 202,17 mg/dl. 6. Secara umum hasil yang didapatkan setelah dilakukan uji statistika, tidak ada pengaruh penyimpanan spesimen plasma EDTA terhadap kadar kolesterol total pada suhu 2 – 2 – 8 8 ⁰C selama 24 jam, 48 jam, 72 jam, dan 96 jam.
22
23
B. Saran
1. Perlu dilakukan penelitian tentang stabilitas kadar kolesterol total dalam spesimen yang dibubuhi antikoagulan yang direkomendasikan seperti Heparin. 2. Perlu dilakukan penelitian serupa dengan waktu penyimpanan spesimen lebih dari 4 hari dengan memperhatikan bias – bias bias yang diabaikan pada penelitian ini.
DAFTAR PUSTAKA
24
Clark, Sarah, et all. 2002. Stability of Plasma Analytes After Delayed Separation of Whole Blood: Implications for Epidemiological Studies. International Journal of Epidemiology. Epidemiology. 32(1): 125-130. Davey, Patrick. 2005. At 2005. At a Glace Medicine. Medicine. diterjemahkan oleh: Annisa Rahmalia, Cut Novianty. Erlangga, Jakarta. Guyton, AC.& Hall, JE. 2006. Textbook Of Medical Physiology, 9/E . diterjemahkan oleh: Irawati Setiawan, LMA. Ken AriataTengadi, Alex Santoso. EGC, Jakarta. Hamdi, Asep. 2014. MetodePenelitian Kuantitatif Aplikasi Dalam Penelitian. Deepublish, Yogyakarta. Hardjono, H. 2007. Interpretasi Hasil Tes Laboratorium Diagnostik, Bagian Dari Standar Medik. Lephas, Makasar. Haribi, Ratih. 2009. Biokimia 4 Untuk Analis Kesehatan. Fakultas Ilmu Keperawatan dan Kesehatan Universitas Muhammadiyah Semarang, Semarang. Julandaeni, Ni. 2015 Perbedaan Kadar Kolesterol Total Serum Terhadap Suhu dan Waktu Penyimpanan. Klinika Laboratory. 2(1): 45 – 53. 53. Kuchel, Philip & Ralston, Gregory B. 2006. Schaum’s Easy Outlines Biochemistry. Biochemistry . diterjemahkan oleh: Eva Laelasari. Erlangga, Jakarta. Laboratory, Stanbio. 2011. 2011 . Stanbio Cholesterol LiquiColor Procedure No. 1010 . Stanbio Laboratory, Boerne. Marks, DB., Marks, AD.& Smith, CM. 2013. Basic Medical Biochemistry: A Clinical Approach. diterjemahkan Approach. diterjemahkan oleh: Joko Suyono, Vivi Sadikin, Lydia I. Mandera. EGC, Jakarta. Maulia, Gina. 2013. Laporan Praktikum Biokimia KI-3261 Percobaan Penentuan Kadar Total Kolesterol Darah. Institut Teknologi Bandung, Bandung Menkes. 2010. Peraturan Menteri Kesehatan Republik Indonesia Nomor:1792/Menkes/SK/XII/2010 Nomor:1792/Menkes/SK/XII/2 010 Tentang Pedoman Pemeriksaan Kimia Klinik. Menteri Kesehatan Republik Indonesia, Jakarta. Menkes. 2013. Peraturan Menteri Kesehatan Republik Indonesia Nomor: 43 Tahun 2013 Tentang Cara Penyelenggaraan Laboratorium Klinik Yang Baik. Menteri Kesehatan Republik Indonesia, Jakarta. Mulyono, B. 2010. Pemantapan Mutu Internal Laboratorium. Alfa Medika, Yogyakarta.
25
Riyono. 2007. Pengendalian Mutu Laboratorium Kimia Klinik Dilihat Dari Aspek Mutu Hasil Analisis Laboratorium. Jurnal Ekonomi dan Kewirausahaan. 7(2): 172-187. Sukorini, U. 2010. Pemantapan Mutu Internal Laboratorium. Alfa Medika, Yogyakarta. Sutedjo, AY. 2007. Mengenal penyakit Melalui Hasil Pemeriksaan Laboratorium. Amara Books, Yogyakarta. Suwandi, David. 2015. Perbandingan Hasil Pemeriksaan Kadar Kolesterol Total Metode Elektrode-Based Biosensor Dengan Metode Spektrofotometri. Bandung. Ungaro, Biagio. 1985. Cholesterol Concentration in Serum-Plasma Pairs Differs Because of Water Shift Shift from Blood Cells. Clinical Clinical Chemistry. Chemistry. 31(6): 1096 – 1096 – 1097. WHO. 2002. Use Of Antikoagulants In Diagnostic Laboratory Investigations . Geneva.
Lampiran 1 Data Hasil Pemeriksaan Kadar Kolesterol Total
26
Sampel
Plasma Segera
Plasma Simpan 24 Jam
Plasma Simpan 48 Jam
Plasma Simpan 72 Jam
Plasma Simpan 96 Jam
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24
158 149 199 218 190 222 147 186 171 161 200 186 225 178 192 209 203 195 194 223 221 205 185 197
168 156 207 225 190 229 181 194 184 174 202 191 225 180 183 203 207 189 214 200 196 197 189 203
173 164 204 226 204 232 187 204 192 180 213 198 230 175 199 215 210 191 171 198 198 197 194 214
181 161 210 227 209 226 179 202 172 166 203 199 231 178 208 219 217 206 206 204 199 213 211 213
183 169 217 235 204 230 194 207 182 176 212 202 237 195 169 200 195 215 205 199 198 201 210 217
Lampiran 2 Analisa Statistika Pengaruh Penyimpnan Terhadap Kadar Kolesterol Total
27
Suhu 2 – 8 8 ⁰C selama 24 Jam, 48 Jam, 72 Jam, dan 96 Jam 1. Uji Normalitas Shap Shapi roWilk
Perlakuan C ase ase P r ocessi cessing ng Summa Summar y Perlakuan
Kadar Kolesterol Total
Valid N Percent 24 100,0%
Plasma Segera Plasma Simpan 24 Jam Plasma Simpan 48 Jam Plasma Simpan 72 Jam Plasma Simpan 96 Jam
Cases Missing N Percent 0 0,0%
Total N Percent 24 100,0%
24
100,0%
0
0,0%
24
100,0%
24
100,0%
0
0,0%
24
100,0%
24
100,0%
0
0,0%
24
100,0%
24
100,0%
0
0,0%
24
100,0%
T ests of of N or mality li ty Kolmogorov-Smirnov Kolmogorov-Smirnova
Perlakuan
Statistic
KadarKolest erolTotal
df
Sig.
Shapiro-Wilk Statistic
df
Sig.
Plasma Segar
,125
24
,200*
,946
24
,225
Plasma Simpan 24 Jam
,089
24
,200*
,981
24
,915
Plasma Simpan 48 Jam
,094
24
,200*
,973
24
,753
Plasma Simpan 72 Jam
,195
24
,019
,925
24
,075
Plasma Simpan 96 Jam
,120
24
,200*
,967
24
,598
*. This is a lower bound of the true significance. a. Lilliefors Significance Correction
Kadar Kolesterol Total Normal Q-Q Plot
28
29
30
Detrended Normal Q-Q Plot
31
32
33
2. H omogene omogeneii ty dan dan Uji One Way Anova A nova T est of of H omog enei nei ty of of V ari ances nces KadarKolesterolTotal Levene df1 Statistic ,473 4
df2
Sig.
115
,755
ANOV A NOVA A KadarKolesterolTotal Sum of Squares Between 1720,883 Groups Within Groups 43039,083 Total 44759,967
Df
Mean Square 4
430,221
115 119
374,253
F 1,150
Sig. ,337
