Macro y Microfotografía IES Antonio Machado
TEMA 4:
LA FOTOGRAFÍA EN ANATOMÍA PATOLÓGICA.
1. Introducción. La fotografía se considera una ciencia cono tal y, cada científico toma la parte específica de la fotografía que le ayuda en su trabajo. La anatomía patológica es una ciencia iconográfica que se apoya en gran cantidad de dibujos y esquemas; para esto, la fotografía ha mejorado y facilitado la elaboración de los dibujos y esquemas. En España, Santiago Ramón y Cajal ha sido el que ha introducido la fotografía en Anatomía Patológica poniendo a punto un método de fotografía en color. En todos los laboratorios de Anatomía Patológica tienen un laboratorio de fotografía o al menos las realizan, tanto en blanco y negro como en color. Si el laboratorio tiene microscopio electrónico, también realizan fotografías en microscopía electrónica. Siempre que existe laboratorio de fotografía, se realiza fotografía macroscópica y microscópica.
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2. Funciones del citotécnico. Las funciones del citotécnico en el laboratorio de fotografía son:
Colaborar en la realización de fotografías macroscópicas anteriores al tallado.
Cargar y retirar las placas de microscopía electrónica.
Revelar y positivar las fotografías de microscopía electrónica.
Organizar el archivo fotográfico.
Colaborar en la elección del fondo donde es colocada la pieza.
La organización del almacén, preparación de reactivos necesarios para la fotografía, etc...
3. Características de la fotografía en anatomía patológica. 1º.- Las piezas u órganos deben disponerse sobre fondos que sean planos, lisos, con una superficie mate y de un color diferente al del objeto a fotografiar. 2º.- Los fondos verdes son especialmente prácticos para fotografías en blanco y negro ya que da un mayor contraste entre el blanco, el negro y el gris. Para fotografía en color se utilizan los fondos blancos o negros. 3º.- Se deben eliminar los brillos y restos de sangre u otro material biológico. Para ello, la pieza debe secarse con un paño verde de quirófano o con papel de filtro. 4º.- Las piezas a fotografiar se deben colocar de forma anatómica simulando su posición en el órgano y sus relaciones anatómicas con otros órganos en el caso de que se fotografíen varios órganos a la vez. 5º.- La fotografía, debe realizarse lo más rápido posible para mantener el color del órgano lo más parecido a la realidad. La fotografía debe realizarse antes de introducir la pieza en formol. 6º.- La zona patológica a resaltar, debe colocarse en el centro de la fotografía. 7º.- Si el tejido presenta hemorragia y pus, se debe limpiar aunque no en exceso para que pueda ser identificada la causa y efecto de dicha hemorragia y/o presencia de pus. 8º.- Si la lesión solo se localiza en un órgano se realiza la fotografía de ese órgano. 9º.- A veces se debe señalizar con flechas la zona de la lesión sobre todo en las fotografías abigarradas (fotografías en las que aparecen varios órganos).
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Macro y Microfotografía IES Antonio Machado En este caso es conveniente realizar dos fotografías; una con señalización y otra sin ella para valorar después en el positivado la que más interese. 10º.- Las lesiones se deben fotografiar siempre externamente y también realizando un corte para observar la superficie de corte o sección de la lesión. 11º.- Todas las fotografías deben llevar una identificación colocada en lugar discreto de la fotografía, lejos de la lesión. En ella debe figurar el número de registro. La identificación debe realizarse con el DIMO u ordenador y en caso de que la fotografía vaya a ser publicada, debe eliminarse la identificación. 12º.- Al lado de la identificación debe ir colocada una cinta métrica en el mismo plano que la identificación y a la mitad de espesor o profundidad de la muestra. 13º.- Se debe valorar la composición estética de la fotografía para que ésta resulte armónica. Esto se suele conseguir colocando el lado de mayor longitud de la pieza en la zona inferior y de forma paralela a la cinta métrica.
4. Material y técnica. La fotografías macroscópicas se deben realizar con luz artificial, con 4 focos dirigidos hacia el plano de la fotografía con un ángulo de 45º. De esta forma se consigue una buena iluminación en intensidad y sin sombras. Existe un aparato comercial, denominado Reprovit ®, que es similar a una mesa de reproducción especialmente diseñada para macrofotografía. Los focos que se deben utilizar son focos de 250W de luz de tungsteno. En este tipo de fotografías es muy importante la PC ya que realizamos fotografías de objetos en tres dimensiones. Al realizar la fotografía con enfoque manual, el cetro de la profundidad y espesor de la pieza. En la fotografía macroscópica hay que conseguir la mayor PC con la menor AD posible. Para macrofotografía siempre utilizaremos el objetivo macro, y se trabaja normalmente en automático. En cuanto al líquido revelador, se debe utilizar un líquido para papel de grano fino del tipo Rodinal® para así, conseguir gran definición o detalle. Este reactivo se puede preparar, bien al momento de revelar o bien unos días antes del revelado. Para preparar el líquido revelador se deben seguir las instrucciones del fabricante y siempre que sea posible (si hay tiempo suficiente), se prepara la solución más diluida que recomiende el fabricante. Se suele hacer el positivado de todo el negativo aunque, a veces, puede interesar positivar solo una zona del negativo. El papel utilizado para el positivado es AGFA o 3
Macro y Microfotografía IES Antonio Machado KODAK y se debe tener en cuenta la dureza del papel dependiendo ésta del contraste del negativo, para negativo oscuro utilizar papel suave y para negativo claro papel duro. En Anatomía Patológica, es frecuente la realización de diapositivas con el fin de disponer de una imagen prestada o de utilizarlas para congresos y remitirlas a publicaciones. Existen unos aparatos para la realización de las copias de diapositivas. En el laboratorio de fotografía se pueden realizar artesanalmente poniendo una placa de microscopio electrónico. Para realizarlas, se coloca el papel y encima la placa del negativo. Ambos (placa y negativo) se juntan con la emulsión fotográfica pegada entre ellos (similar a los contactos). Después se hace incidir la luz de la ampliadora con el diafragma a una o dos posiciones de la posición de cerrado y, posteriormente, se revela y se monta en los soportes de las diapositivas. Otro material importante en Anatomía Patológica es la lupa estereoscópica. Es similar a un microscopio, solo que en lugar de un objetivo tienen una lupa (que proporciona menor aumento). Sirve para realizar macrofotografía de piezas pequeñas o de detalles de esas piezas ya que si éstas se realizaran con macrofotografía convencional, no se proporcionaría una definición adecuada. La lupa estereoscópica puede ser triocular con el fin de adaptarse a la cámara, al vídeo o al ordenador.
5. La fotografía en microscopía electrónica. Es la principal aplicación de la fotografía en B&N tanto en laboratorio de diagnóstico como en investigación. El revelado de las placas se debe realizar de forma estandarizada, es decir con los mismos reactivos, en iguales condiciones y con los mismos tiempos. Si se realiza algún cambio, se debe pedir consejo a algún profesional del laboratorio de fotografía. En el microscopio la cámara va incorporada. En el panel se encuentra el controlador de la exposición, el disparador, el exposímetro y el enfoque. El cambio de las placas se debe realizar cuando el indicador o contador marque cero. Estas placas, tanto al introducirlas como al sacarlas del microscopio electrónico se encuentran en unas cajas llamadas jaulas, que tienen unas guías y, en cada guía, se coloca una placa. Cuando se sacan las placas de las cajas no se deben tocar por la zona donde se encuentra la emulsión fotográfica. Este paso se debe realizar en total oscuridad al igual que el revelado del negativo.
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Macro y Microfotografía IES Antonio Machado El revelador que se suele utilizar es el D19 donde se introduce durante 3 minutos. Después se pasa al baño de paro durante 1 minuto. A continuación se introduce en el líquido fijador entre 5 y 10 minutos. Posteriormente se lava durante 20 minutos y, por último se seca durante 1 minuto. Las placas o películas que se suelen utilizar son de electromicrofilm que, al igual que las películas normales, en el caso de que sean pancromáticas deben procesarse en total oscuridad, como mínimo, hasta que hayan permanecido durante 1 minuto en el líquido fijador y en el caso de que sean ortocromáticas se podrán manipular con luz inactínica.
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