Combat Support Hospital Microbiología Clínica, Bagdad, Irak
Urocultivo INTRODUCCIÓN:
1.
Las infecciones del tracto urinario (ITU) se pueden clasificar como cistitis (infección de la vejiga urinaria) o pielonefritis (infección de los riñones).Los síntomas de la cistitis bacteriana no complicada incluyen frecuencia, urgencia, y el malestar suprapúbico. Los síntomas de la pielonefritis pueden pueden incluir los de la cistitis, pero también incluyen incluyen fiebre y dolor en el costado, leucocitosis, piuria y hematuria son resultados comunes de laboratorio. Ambas condiciones pueden conducir a complicaciones como la bacteriemia. Las mujeres jóvenes corren un riesgo mucho mayor para el desarrollo de la cistitis que los hombres jóvenes y la mayoría de las mujeres mujeres sufren al menos un episodio episodio en algún momento de su vida. La incidencia de infección urinaria es comparable en hombres y mujeres mayores debido a la ampliación de la próstata que impide el vaciado total del contenido de la vejiga. Además del género, un factor de riesgo común para el desarrollo de la ITU es la colocación de catéteres urinarios. La causa bacteriana más común de la cistitis y pielonefritis no complicada es la Escherichia coli. Otras causas comunes de la cistitis incluyen Staphylococcus saprophyticus, especies de Klebsiella, Proteus, y especies de Enterococcus. Relacionada con infección del tracto urinario por el catéter son más comúnmente causadas por E. coli, especies de Enterococcus, Pseudomonas aeruginosa y levaduras. Las muestras de orina se envían a cultivar de pacientes con signos y síntomas de infección del tracto urinario.El urocultivo se realiza cuantitativamente paraa distinguir los contaminantes de flora uretral y vaginal de organismos que infectan el tracto urinario. Aunque existen opiniones opiniones diversas, el nivel de bacteriuria generalmente se considera considera indicativa de infección es de 10.000 unidades formadoras de colonias por mililitro de orina.
MUESTRAS:
2.
1) 2) 3)
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3.
A. Observaciones generales Las muestras para cultivo se obtienen idealmente de la primer micción de la mañana pues la concentración de bacterias es la máxima en ese momento Forzar el fluido para obtener la muestra diluye la orina y se cuentan falsamente pocas bacterias Muestras recolectadas antes de 24 horas no son aceptadas para el cultivo B. Recolección aséptica C. Sondaje orina catéter de Foley (alojado) catéter Robinson (dentro y fuera) La orina no debe ser recogida de una bolsa de recolección de Foley D. Transporte y almacenamiento La orina debe ser transportada al laboratorio a 1 hora de la recolección Refrigerar si el proceso de transporte o de laboratorio se retrasa La orina es un buen medio de cultivo por lo que si se deja a temperatura ambiente durante largos periodos de tiempo las bacterias se multiplican dando lugar a: a. Conteo de colonias erróneo b. crecimiento excesivo de patógenos por contaminantes flora uretral y vaginal
SUMINISTROS Y EQUIPO: A. B. C. D.
Agar sangre de cordero o Columbia CNA Agar MacConkey Asa bacteriológica calibrada a 0.001ml Incubadora a 35-37 °C
CALIBRACIÓN: N / A
4.
5. CONTROL DE CALIDAD: el control de calidad de todos los medios de cultivo y asa calibrada se lleva a cabo por el fabricante
PROCEDIMIENTO
6.
A.
Inoculación del medio e incubación
1) 2)
Hacer girar suavemente el recipiente para mezclar la muestra. Sumerja a un 0.001 ml (1 ul) el asa estéril en la muestra hasta que sólo entre la parte superior del círculo del asa en la muestra. No sumerja el mango del asa en la orina ya que esto dará lugar a que más de 1 ul de la muestra se deposite en el agar (ver Figura 1).
3)
Depositar la muestra en una sola línea por el centro de la placa. Rayar en cruz la línea rayada antes con series de líneas muy cerradas como si se fuera a utilizar toda la superficie de la placa (ver Figura 2).
4)
Incubar las placas de 16 a 24 horas a 3 5-37 °C en atmósfera ambiental o incubadora de CO 2.
B. 1)
Crecimiento de las colonias
No hay crecimiento a.
Si no hay crecimiento después de 16-24 horas de incubación, desechar y emitir el informe final (véase más adelante)
b.
Si el cultivo se ha incubado menos de 16 horas, incubar 24 horas más.
2)
Crecimiento a.
Cuenta el número de colonias de cada morfotipo presente.Comparar el crecimiento en el agar sangre y agar MacConkey
b.
Cada colonia contada representa 1,000 ufc (unidad formadora de colonias) en la muestra original
c.
Continuar con los procedimientos de prueba de identificación y susceptibilidad de acuerdo a las siguientes pautas:
UNO O DOS PATÓGENOS PROBABLES, POR CADA ≥ 10.000 UFC / ML: Reportar definitiva identificación y pruebas de sensibilidad
UN PATÓGENO PROBABLE ≥ 10.000 UFC / ML Y <10.000 U FC / ML CONTAMINANTES: Realizar definitiva identificación y pruebas de susceptibilidad del patógeno probable. Reportar identificación limitada y conteo de colonias en el posible contaminante, es decir menos de 10.000 ufc ml/gram-positivas. Si más de un contaminante urogenital está presente, combine el recuento de colonias por ejemplo, <10.000 ufc / ml flora urogenital mixta.
UNO O DOS TIPOS DE COLONIAS, UFC CADA <10,000 / ML: Realizar identificación limitada limitada sin pruebas de sensibilidad. Informar características en en tinción Gram, por ejemplo, ejemplo, <10.000 UFC /ml cocos gram-positivos. Nota: Siempre identificar y reportar la presencia de estreptococos del grupo B, aun en cultivo mixto, en muestra de orina de mujeres.
TRES O MÁS TIPOS DE COLONIAS ≥ 10.00 0 UFC/ML, UN PATÓGENO PROBABLE PREDOMINANTE: Efectuar identificación definitiva y pruebas de susceptibilidad del patógeno probable predominante. Combinar el recuento de colonias de los contaminantes, por ejemplo, 30.000 ufc / ml flora urogenital mixta. Nota: Siempre identificar y reportar la presencia de estreptococos del grupo B, aun en cultivo mixto, a partir de muestra de orina de mujeres.
TRES O MÁS TIPOS DE COLONIAS ≥ 10.000 UFC/ML, NO PATÓGENO PROBABLE O NINGUNO PREDOMINANTE: Combine el recuento de colonias de los contaminantes por ejemplo, ejemplo, 30.000 ufc / ml flora urogenital mixta.
7.
CÁLCULOS: N / A
8.
INTERPRETACIÓN:
A. Estafilococos coagulasa-negativos 1) Con la excepción de S. saprophyticus, estafilococos coagulasa-negativos rara vez causan infección del tracto urinario 2) Si una cantidad significativa de especies de Staphylococcus coagulasa-negativo (catalasa +,cocos gram-positivos agrupados, Staphaurex negativo) es aislada, establecer un pánel MicroScan de gram-positivos para descartar S. saprophyticus B. Hay poca evidencia de que las especies de Lactobacillus, Streptococcus viridans no hemolíticas, estreptococos, difteroides (excepto Corynebacterium ureolyticum), o especies no patógenas de Neisseria causen infección del tracto urinario y por lo tanto se debe considerarflora normal urogenital.
9.
REPORTE DE RESULTADOS: A. Los cultivos negativos 1) No hay crecimiento después de 16-24 horas: reportar "No hay crecimiento después de 24 horas" 2) No hay crecimiento después de 48 horas: r eportar "No hay crecimiento después de 48 horas"
3)
4)
1)
2)
3)
Un solo tipo de flora normal urogenital aislado: reportar la cantidad e identificación limitada Ejemplo 1: <10.000 ufc / ml cocos gram-positivos Ejemplo 2: 20.000 ufc / ml difteroides Dos o más tipos de f lora normal urogenitale aislados: reportar "X cantidad de flora urogenital mixta" Ejemplo 1: <10.000 ufc / ml flora urogenital mixta Ejemplo 2: 35.000 ufc / ml flora urogenital mixta B. Cultivos positivos Informe preliminar a. Informe la cantidad de crecimiento y cualquier otra información descriptiva disponible b. Ejemplo: 50 000 ufc / ml bacilos sin fermentación de lactora Informe final a. Reportar la cantidad de crecimiento, el nombre completo del organismo y los resultados de la prueba de susceptibilidad b. No abrevie los nombres del organismo c. Staphylococcus sp. Coagulasa-negativos distintas a S. saprophyticus: reportar "X cantidad de especies de Staphylococcus coagulasa-negativos - no S. saprophyticus " Ejemplo: 60 000 ufc/ml coagulasa-negativo Staphylococcus sp.- no S. saprophyticus a. Levaduras: reportar "X cantidad de levaduras" Ejemplo: 25 000 ufc / ml de levadura b. Si los contaminantes están presentes, enlistar cantidad e identificación limitada (véase el Procedimiento sección anterior)
NOTAS SOBRE EL PROCEDIMIENTO:
10.
1) 2) 3) 4)
A. No cultivar: puntas de catéter de Foley sedimento de orina muestra anulada u orina cateterizada ana eróbicamente La orina de una bolsa de recolección de Foley B. La mayoría de los casos de cistitis no complicada son tratados empíricamente y no requieren de cultivo.
LIMITACIONES:
11. A.
Los síntomas de la infección del tracto urinario pueden coincidir con los de enfermedades de transmisión
sexual B. La piuria estéril puede deberse a causas no infecciosas, el tratamiento de los pacientes antes de la recogida de muestras, orina demasiado diluida, uretritis en lugar de la cistitis o infección por organismos no detectables por los métodos habituales (por ejemplo, especies de Mycobacterium) C. Cultivos falsos positivos pueden ocurrir cuando la orina no se recoge, transporta o almacena correctamente y organismos originalmente presentes en pequeñas cantidades se multiplican hasta niveles de recuento considerables.
12.
REFERENCIAS: A. B. C.
Forbes, BA, Sahm DF, COMO Weissfeld, eds. 2002. Infecciones del Tracto Urinario en Bailey y de ª Diagnóstico Scott Microbiología, 11 ed. P.927-938. Isada, CM, et al, eds. 2003. Enfermedades y Síndromes Organismos de Compensación de la enfermedad ª infecciosa Lexi Manual, 5 ed. P.329-331. https://docs.google.com/viewer?a=v&pid=explorer&chrome=true&srcid=1J5VfvxDuliDhDKgwYbzx8F9NS xqw3gb8LNw0l5MXuZx_RaLx68UxTppXRuBc&hl=en
