FACULTAD DE QUÍMICA, UNAM BIOQUÍMICA. LICENCIATURAS LICENCIATURAS DE QFB y QA. Q A. Semestre 2014-I. Grupo 6. ALUMNA: Blancas Meza Claudia Frida
Tarea de Cinética Enzimática I.- El sabor dulce de las mazorcas recién cosechadas (maíz), se debe al alto contenido de
carbohidratos presente en los granos. Sin embargo, cuando las mazorcas se almacenan (pocos días después de haber sido cosechadas) pierden ese característico sabor dulce. Esto se debe a que cerca el 50% de los carbohidratos libres son convertidos a almidón en las primeras 24 h post-cosecha. Para preservar la dulzura de las mazorcas frescas, éstas son sumergidas en un baño de agua hirviendo durante un par de minutos y posteriormente son enfriadas en un baño de agua fría. El maíz que ha sido procesado de esta manera y posteriormente se congela, sigue conservando el sabor dulce característico. ¿Cuál es la base bioquímica de este procedimiento? ¿Por qué el maíz sigue conservando el sabor dulce? R= La base bioquímica de este problema es el proceso de escaldado, es decir al calentar
y congelar (enfriar), se desnaturaliza la enzima, es por eso que se trata de impedir la polimerización de los monómeros de glucosa, para que los carbohidratos libres se conviertan en disacáridos principalmente en fructosa, y así como consecuencia no se forme el almidón y por lo tanto no disminuya el dulzor. Por lo que así seguirá conservando su sabor dulce el maíz.
II.- Un grupo de investigadores ha descubierto una enzima a la que llamaron Happyasa,
que cataliza la siguiente reacción química: HAPPY ↔ SAD
Los investigadores comenzaron a caracterizar la enzima. La cinética de esta enzima es michaeliana y aquí en la Tabla I se muestra la velocidad con que la enzima trasforma a su sustrato dependiendo de su concentración. También se presenta en la Tabla I la velocidad de la enzima en presencia de un inhibidor Y.
Tabla. 1 HAPPY (μM)
V (μmol/min)
V con inhibidor Y(μmol/min)
3 5 10 30 90
10.4 14.5 22.5 33.8 40.5
2.1 2.9 4.5 6.8 8.1
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Grafica. 1 45 40
) n i 35 m / l 30 o m25 μ ( d 20 a d i 15 c o l e 10 V
V (μmol/min) V con inhibidor Y(μmol/min)
5 0
0
20
40
60
80
100
[HAPPY] (μM)
Tabla. 2 1/HAPPY (μ)
1/V(μmol/min)
1/V con inhibidor Y(μmol/min)
0.33333333
0.09615385
0.47619048
0.2
0.06896552
0.34482759
0.1
0.04444444
0.22222222
0.03333333
0.0295858
0.14705882
0.01111111
0.02469136
0.12345679
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Grafica. 2 0.6 0.5 ) n i m / l o m μ ( d a d i c o l e V / 1
-0.3
y = 1.1084x + 0.1125 1/V(μmol/min)
0.4
1/V con inhibidor Y(μmol/min)
0.3
1/Vmax 0.2
Linear (1/V(μmol/min))
y = 0.224x + 0.0224
0.1
Linear (1/V con inhibidor Y(μmol/min))
0 -0.2
-0.1
0
0.1
0.2
0.3
0.4
-0.1
1/Vmax
-1/Km
-0.2 1/[HAPPY] (μM)
La Km (-1/Km) obtenida fue la misma para la línea con inhibidor y sin inhibidor.
4. A partir del patrón gráfico obtenido en la Gráfica 2: a) Obtenga los valores de Km en presencia y ausencia del Inhibidor Y e
INDÍQUELOS SOBRE LA GRÁFICA Presencia de inhibidor Km= Vmax (m) Km= (1/0.1125)(1.1084)=-0.1 Ausencia del inhibidor Km= Vmax (m) Km= (1/0.0224)(0.224)=-0.1 b) Obtenga los valores de Vmax en presencia y ausencia del Inhibidor Y e INDÍQUELOS SOBRE LA GRÁFICA Presencia de inhibidor b = 1/Vmax =1/0.1125 Ausencia del inhibidor b = 1/Vmax = 1/0.0224 c) De acuerdo a los anteriores valores de Km y Vmax, determine si el tipo de inhibición que ejerce el Inhibidor Y sobre HAPPY corresponde a una de las modalidades que vimos en clase. Corresponde a una Inhibición no competitiva, ya que su Km es la misma en ambos casos, lo que indica que tienen la misma afinidad por el sustrato pero a diferentes Vmax.
