Laporan Praktikum Mikrobiologi Ke 5 Jumat,11 Mei 2012
Sterilisasi dan Pembuatan Medium
Oleh: Sumarna 4443091234
Asisten Dosen Afrita Jayanti Sudiarto Adelaide MU Ida Nurlela Sari Risky Hartika
JURUSAN PERIKANAN FAKULTAS PERTANIAN UNIVERSITAS SULTAN AGENG TIRTAYASA
ABSTRAK
Untuk Untuk menumb menumbuhk uhkan an dan mengem mengemban bangbi gbiakk akkan an mikroba mikroba diperlu diperlukan kan suatu suatu substrat yang disebut dise but medium. Sedangkan medium itu sendiri sebelum digunakan
harus dalam keadaan steril artinya tidak ditumbuhi oleh mikroba lain yang tidak diharapkan. Agar mikroba dapat tumbuh dan berkembang dengan baik di dalam medium, maka diperlukan persyaratan tertentu yaitu diantaranya bahwa di dalam medium harus terkandung semua unsur hara yang diperlukan untuk pertumbuhan dan perkembangan mikroba. Fungsi dari suatu media biakan adalah memberikan tempat dan kondisi yang mendukung pertumbuhandan perkembangbiakan dari mikroorganisme yang ditumbuhkan. Kegiatan
praktikum tentanng Sterilisasi dan pembuatan medium ini dilaksanakan pada hari jumat, 11 Meii 2012. Tujuan dari sterilisasi dan pembuatan medium ini. Untuk mengetahui cara pembuatan medium pertumbuhan bakteri ektrak agar-agar dan untuk mengetahui jenis bakteri yang tumbuh pada medium yang dibuat.
Kata Kunci :
I.
Moikroba, Medium,Steril,Biakan, Substrat.
PENDAHULUAN
Fungsi dari suatu media biakan adalahmemberikan tempat dan kondisi yang mendukung pertumbuhandan perkembangbiakan dari mikroorganisme yang ditumbuhkan.
Sebelum
menumbuhkan
mikroorganisme
dengan
baik,
langkah pertama harusdapat dipahami kebutuhan dasar mikroorganisme lalu mencoba memformulasikan suatu medium yang memberikan bahan nutrisi yang digunakan
untuk
membiakan
suatu
mikroorganisme,
baik
itu
berupa
cendawan/fungi,bakteri, maupun selmakhluk hidup. Potato Dextrose Agar merupakan paduan yang sesuai untukm enumbuhkan biakan.Sebagai tambahan nutrisi bagi biakan yang baik pembuatan medium
karena mengandung cukup air, bahan nutrisi
dan dapat membuat medium semisintetik PDA( Potato
Dextrosa Agar) Untuk menumbuhkan dan mengembangbiakkan mikroba diperlukan suatu substrat yang disebut medium. Sedangkan medium itu sendiri sebelum digunakan harus dalam keadaan steril artinya tidak ditumbuhi oleh mikroba lain yang tidak diharapkan. Agar mikroba dapat tumbuh dan berkembang dengan baik di dalam medium, maka diperlukan persyaratan tertentu yaitu diantaranya bahwa di dalam
medium harus terkandung semua unsur hara yang diperlukan untuk pertumbuhan dan perkembangan mikroba. Oleh karena hal tersebut, maka diadakan praktikum ini guna menambah keterampilan dan
pengetahuan
kita mengenai cara pembuatan
medium
pertumbuhan mikroba. Sterilisasi
Sel bakteri maupun sporanya dapat dirusakkan dengan memanaskan pangan pada suhu tinggi selama beberapa jam atau lebih lama lagi. Destruksi sempurna mikroorganisme dengan panas disebut sterilisasi (Gaman dan Sherrington, 1992). Ada 3 cara utama yang umum dipakai dalam sterilisasi yaitu penggunaan panas, penggunaan bahan kimia dan penyaringan (filtrasi). Sterilisasi basah biasanya dilakukan di dalam autoklaf atau sterilisator uap yang mudah diangkut (portable) dengan menggunakan uap air jenuh bertekanan pada suhu 121 oC selama 15 menit karena naiknya titik didih air menjadi 121oC itu disebabkan oleh tekanan 1 atm pada ketinggian permukaan laut, maka daur sterilisasi sering kali juga dinyatakan sebagai 1 atm 15 menit. Panas ini mendenaturasikan atau mengkoagulasikan protein pada organisme hidup dengan demikian mematikannya (Hadioetomo, 1990). Media
Medium ialah suatu bahan yang terdiri atas campuran nutrisi yang dipakai untuk menumbuhkan mikrobia. Selain untuk menumbuhkan mikrobia, medium dapat pula digunakan untuk isolasi, memperbanyak pengujian sifat-sifat fisiologi dan perhitungan jumlah mikrobia. Supaya mikroorganisme dapat tumbuh baik dalam medium perlu diperhatikan syarat-syarat sebagai berikut: 1.
Media harus mengandung semua nutrisi yang mudah digunakan oleh mikroorganisme
2.
Harus mempunyai tekanan osmose tegangan muka dan pH yang sesuai
3.
Tidak mengandung zat-zat penghambat
4.
Harus steril (Jutono et al., 1973). Mikroorganisme dibiakkan di laboratorium pada bahan nutrien yang disebut medium. Banyak sekali media yang tersedia, macamnya yang dipakai tergantung dari banyak faktor. Salah satu di antaranya adalah macam
mikroorganisme yang akan ditumbuhkan. Bahan yang akan diinokulasikan pada medium itu disebut inokulan. Dengan menginokulasi medium agar nutrien dengan metode cairan gores atau metode cawan, tuang, sel-sel itu akan terpisah sendirisendiri setelah inkubasi. Sel-sel mikrobia individu itu memperbanyak diri sedemikian cepatnya sehingga di dalam waktu 18-24 jam terbentuklah massa sel yang dapat dilihat dan dinamakan koloni (Pelczar dan Schan, 1986). Setiap mikrobia dapat diinkubasi denganmedia tertentu sesuai dengan sifat-sifat karakteristik biosintesisnya. Media PCA (Plate Count Agar) dan NA (Nutrient Agar) biasa digunakan untuk pemupukan bakteri dan media PDA (Potato Dextrose Agar) biasa digunakan untuk pemupukan jamur (Fardiaz, 1994). Berdasarkan komposisi/susunan kimia bahan penyusunnya, media yang digunakan untuk menumbuhkan mikrobia dibagi atas 4 yaitu: 1.
Medium organik; yaitu medium yang tersusun dari bahan-bahan organik.
2.
Medium anorganik; yaitu medium yang tersusun dari bahan-bahan anorganik
3.
Medium sintetik, yaitu media yang tersusun atas senyawa yang tidak diketahui komposisi kimianya secara tepat. Media tersebut berisi garam anorganik misalnya asam amino, asam lemak, alkohol, karbohidrat atau senyawa organik serta serta vitamin-vitamin.
4.
Media nonsintetik, adalah media yang tidak diketahui komposisi kimianya secara pasti. Beberapa dari komposisi yang ditambahkan misalnya ekstak beef, ekstrak yeast, pepton, darah, serum dan casein hidrolisat. Contoh media non sintesis NA, NB, PDA.
II.
METODE
Praktikum Mikrobiologi dengan materi Sterilisasi dan pembuatan medium dilaksanakan pada hari jumat, 11 Meii 2012 mulai pukul 15.30 WIB s/d selesai yang bertempat di Laboraturium pengolahan perikanan Jurusan Perikanan Fakultas Pertanian Universitas Sultan Ageng Tirtayasa. Alat-alat yang digunakan dalam praktikum mikrobiologi mengenai sterilisasi dan pembuatan medium terdiri dari : gelas kimia, pengaduk, lemari pendingin, kompor, Panci, Gelas Ukur, Cawan Petri, Perekat, Pipet tetes, Korek api,Rak tabung, dan bahan medium agar.
Prosedur dalam sterilisasi dan pembuatan medium yaitu dengan cara yang pertama menseterilkan peralatan yang akan digunakan agar tidak terkontaminasi oleh pengaruh dari luar, bekerja secara aseptis, Cara mensterilisasi Cawan petri dan Tabung reaksi menggunakan oven adalah sebagai berikut, bungkus cawan petri tabung reaksi dengan kertas HVS polos setelah itu masukan kedalam oven dan diatur suhu oven tidak kurang dari 40°C tunggu sampai beberapa saat sebelum Cawan petri dan Tabung reaksi dikeluarkan. Cara pembuatan TSA adalah Nutrien agar disiapkan untuk pembuatan 4 gr kemudian nutrient agar di masukan kedalam eylenmeyer lalu tambahkan aquades sebanyak 100 ml lalu dipanaskan dengan hot plate stirrer dan digunakan magnetic stirrer sampai larutan jernih danl arutan tersebut masukan kedalam eylenmeyer kemudian ditutup dengan gulungan kapas. III.
KESIMPULAN
Dari percobaan diatas dapat disimpulkan bahwa: 1.) Penggunaan alat dan bahan dalam bekerja haruslah slalu terjaga dari kontaminan, 2) Media PDA (Potato Dextrosa Agar)merupakan media semisintetik, 3) Untuk menumbuhkan dan mengembangbiakkan mikroba diperlukan suatu substrat yang disebut medium. 4) Di dalam medium harus terkandung semua unsur hara yang diperlukan untuk pertumbuhan dan perkembangan mikroba. 5) Fungsi dari suatu media biakan adalahmemberikan tempat dan kondisi yang mendukung pertumbuhandan perkembangbiakan dari mikroorganisme yang ditumbuhkan. DAFTAR PUSTAKA
Hadioetomo, RS. 1993. Mikrobiologi dasar dalam praktek: Teknik dan prosedur dasar laboratorium. Gramedia pustaka utama. Jakarta. Fardiaz, S. 1992.Mikrobiologi Pangan 1. PT Gramedia Pustaka Utama. Jakarta. H a d i o e t o m o , R . S . 1 9 9 3 . M ik ro bi ol og i D as ar D al am P ra kt ek . PT.Gramedia,Jakarta. http://daniwara.word press.com/laporan-praktikum/
http// tatamoon44.multiply.com (30,April 2012)
n
