Relatório - observação microscopica de celulas da epiderme da cebola

Escola Secundária Manuel Cargaleiro Biologia e Geologia

Ana Ferreira, n.º1 Andreia Nunes, n.º 7

Fogueteiro, 22 de Fevereiro de 2006

O b bs s e e r rv v a a ç çã ã o o m i ic c r r o o s sc c ó ó p pi i c ca a d e e c é él lu u l l a as s e u uc c a a r ri i ó ó t t i ic c a a s s d e e e p pi i d d e e r r m me e d a a c e eb bo o l la a

p.p. 1. Introdução Teórica ........................................................................................................................ 2 2. Procedimento Experimental ..................................................................................................... 3 2.1. Material Utilizado ................................................................................................................... 3 2.2. Descrição da experiência ......................................................................................................3 3. Registo de Resultados .................................................................................................................. 4 4. Discussão .......................................................................................................................................... 7 5. Conclusões ........................................................................................................................................9 6. Bibliografia .................................................................................................................................... 10 7. Avaliação ....................................................................................................................................... 11

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Com este trabalho pretendemos observar e identificar as estruturas que constituem a epiderme da cebola ao M.O.C. (microscópio óptico composto), ou seja, conhecer a constituição das células eucarióticas vegetais. Visamos, ainda, verificar o modo como alguns corantes actuam sobre diferentes estruturas celulares. O nosso objecto de estudo é a epiderme da cebola, sendo esta uma película fina, constituída por uma única camada de células, que se encontra na superfície côncava de cada uma das túnicas do bolbo da cebola. A célula é a unidade básica e funcional de todos os seres vivos, existindo dois tipos distintos de células: Procaróticas – são as células mais simples, pois não têm nem sistema endomembranar, nem um núcleo onde individualizar o DNA; Eucarióticas – são as mais complexas, pois têm o DNA individualizado no núcleo e têm um sistema endomembranar bastante rico. Dividem-se em dois grupos: animais e vegetais. Embora as células vegetais tenham organelos semelhantes aos das células animais, existem diferenças. As primeiras têm parede celular, cuja função é proteger e suportar as células, contêm plastos, entre os quais os cloroplastos, e têm vacúolos que atingem grandes dimensões com a idade, sendo estes últimos responsáveis pelo armazenamento de diversos tipos de substâncias como proteínas e açúcares. No entanto, todas as células eucarióticas apresentam: Membrana celular – limita exteriormente o citoplasma, sendo responsável pelas trocas de substâncias entre o meio intracelular e extracelular. Citoplasma – espaço intracelular ocupado por uma massa semifluida, onde se encontram dispersos os vários organelos. Núcleo – organelo de grandes dimensões, onde se encontra o DNA, delimitado por uma membrana nuclear, cuja função é controlar a actividade celular. Para se conseguir observar estas estruturas ao M.O.C., foi necessário recorrer-se ao uso de corantes, neste caso concreto, utilizámos corantes vitais, que em baixas concentrações não danificam as células, como é o caso do azul de metileno que evidencia o núcleo, a água iodada que evidencia o núcleo e a parede celular e o vermelho neutro que evidencia o vacúolo. Escola Secundária Manuel Cargaleiro

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2.1. Material Utilizado M.O.C. (microscópio óptico composto); Lâminas; Lamelas; Pinça; Bisturi; Agulha de dissecação; Papel absorvente; Vermelho neutro; Azul de metileno; Água iodada; Cebola.

2.2. Descrição da Experiência Retirámos três lâminas e sobre cada uma colocámos, respectivamente, uma gota de vermelho neutro, uma gota de azul de metileno e uma gota de água iodada. Posteriormente, com a pinça, retirámos três pequenos pedaços da epiderme da parte côncava da túnica da cebola. Depositámos, com o auxílio da agulha de dissecação, cada fragmento de epiderme sobre o corante que se encontrava nas lâminas. Cobrimos, cuidadosamente, as três preparações com as lamelas. Prendemos a primeira preparação ao M.O.C., através das pinças. Regulámos a fonte de luminosidade, utilizando o espelho, o condensador e o diafragma, e focámos a preparação inicialmente com o parafuso macroscópico e finalmente com o parafuso micrométrico, sempre na objectiva de menor ampliação, ou seja, na de 5X. Observámos cada uma das preparações na objectiva de 10X, registando as observações.


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Nas páginas seguintes seguem-se os esquemas que representam as observações efectuadas pelos dois elementos do grupo. Cada folha tem três esquemas, correspondendo cada um a uma das preparações contendo um determinado corante.


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As nossas observações tiveram como objecto de estudo a epiderme da cebola, pois esta apresenta apenas uma camada de células, permitindo-nos, deste modo, observar células eucarióticas vegetais.

Fig. 1 – Esquematização de uma célula eucariótica vegetal, evidenciando os seus diversos constituintes.

Contudo, existem dois aspectos que dificultam a observação dos componentes celulares, sendo eles as pequenas dimensões das células e dos seus organelos, assim como a sua transparência e consequente falta de contraste entre as estruturas. Por este motivo, existem algumas técnicas de microscopia que facilitam a visualização das micro-estruturas biológicas como é o caso da coloração. A coloração é bastante importante em microscopia, pois permite evidenciar diversos componentes celulares, alterando o menos possível as suas características originais, proporcionando assim um trabalho mais pormenorizado e credível ao


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observador. Esta técnica baseia-se no facto de determinados constituintes celulares absorverem alguns corantes, enquanto que outras estruturas não o fazem. Foi através do conhecimento desta técnica, que utilizámos o azul de metileno, a água iodada ou solução de Lugol e o vermelho neutro, para evidenciar o núcleo, a parede celular e os vacúolos das células da epiderme da cebola. Através da utilização do azul de metileno (corante que usado em baixa concentração penetra na célula sem a matar – corante vital) através da técnica de imersão (consiste em colocar o corante na lâmina, actuando como meio de montagem, seguindo-se a colocação do material em estudo), este manteve o citoplasma e alguns organitos incolores, tendo apenas sido absorvido pelo núcleo, que ficou com uma tonalidade azul. Nesta observação, tivemos algumas dificuldades em visualizar os núcleos das células, pois este corante é bastante escuro, tornando a observação difícil. Utilizando a água iodada, que também é um corante vital, foi-nos possível observar, de forma acentuada, a parede celular e o núcleo, 150X ampliados, uma vez que só estes componentes celulares absorveram o corante, ficando com uma tonalidade amarela, permitindo-nos, assim, realçar estruturas que não contrastavam suficientemente umas em relação às outras. Por outro lado, ao utilizar o vermelho neutro, que à semelhança dos outros dois corantes utilizados também é um corante vital, este introduziu-se no vacúolo, conferindo-lhe uma cor rosada ou avermelhada. Os vacúolos observados variavam em tamanho, pois existiam alguns com dimensões bastante grandes, ocupando praticamente toda a célula, o que nos levou a concluir que se tratava de uma célula já antiga, com grande quantidade de substâncias armazenadas, uma vez que as dimensões dos vacúolos nas células eucarióticas vegetais aumenta com a idade. No entanto, sendo as células da epiderme da cebola células eucarióticas vegetais era de esperar que se observassem cloroplastos, o que não acontece, pois a cebola é um caule subterrâneo, logo não efectua a fotossíntese (processo de síntese de matéria orgânica que ocorre nas células dos produtores, envolvendo os pigmentos que se encontram nos cloroplastos) e, por isso, não tem cloroplastos, pois não precisa desses organitos.


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Com esta actividade experimental foi-nos possível ter um contacto mais próximo com a microscopia e as suas técnicas, de entre as quais se destaca a coloração, pois foi esta técnica que nos permitiu observar de forma clara as células eucarióticas vegetais assim como os seus constituintes. Podemos observar o modo como os corantes utilizados, azul de metileno, água iodada e vermelho neutro, actuaram sobre diferentes estruturas celulares, isto é, o modo como estes eram absorvidos por uns organitos e não por outros. Os resultados obtidos corresponderam exactamente ao previsto inicialmente, tendo todos os objectivos sido cumpridos.


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Nota conceptual: ________________________ Nota processual: ________________________ Nota comunicacional: ___________________

Observações:

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