UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS UNIVERSIDAD DEL PERÚ, DECÁNA DE AMERICA FACULT FACULTAD AD DE FARMACIA FARMACIA Y BIOQUÍ B IOQUÍMICA MICA E. A. P. FARMACIA FARMACIA Y BIOQUÍ B IOQUÍMICA MICA
Departamento académico de Farmacología !romatología " #o$icología #O%ICOLO&'A " (UIMICA LE&AL ) *+,-)I .R/C#ICA N0 1
2Determinaci3n de plomo4 (MÉTODO DE BAMBACH Y BURKEY) PROFESOR RESPONSABLE:
(F. 5o6é Lla78illa (8ea INTEGRANTES: • • • •
CHURA BARDALES EVELYN EVELYN LISSETH LISSE TH DE LA CRUZ LLAMOCCA SONIA INGA BAZAN CINTHY PORTALANZA FARFAN IRWIN
*+,-
INTRODUCCIÓN
El plomo es un metal tóxico cuyo uso generalizado es la causa de la importante contaminación ambiental y los problemas de salud registrados en muchos lugares del mundo. Se estima que la exposición al plomo provoca 143.000 muertes cada ao y es responsable del 0!"# de la carga de morbilidad mundial. El plomo es una sustancia tóxica que se acumula en el organismo y a$ecta a m%ltiples sistemas org&nicos! como el neurológico! el hematológico! el gastrointestinal! el cardiovascular y el renal. 'a exposición crónica com%nmente tiene e$ectos hematológicos! como anemia! o provoca trastornos neurológicos! como ce$alea! irritabilidad! letargo! convulsiones! debilidad muscular! ataxia! temblores y par&lisis. 'a exposición aguda puede provocar trastornos gastrointestinales (anorexia! n&useas! vómitos! dolor abdominal)! dao hep&tico y renal! hipertensión y trastornos neurológicos (malestar! somnolencia! ence$alopat*a) que pueden causar convulsiones y provocar la muerte. 'os nios son especialmente vulnerables a los e$ectos neurotóxicos del plomo! e incluso los ba+os niveles de exposición pueden causar dao neurológico grave y! en algunos casos! irreversible. Se calcula que la exposición al plomo provoca cada ao alrededor de "00. 000 nuevos casos de nios con de,ciencias intelectuales. El diagnóstico cl*nico de la intoxicación por plomo es di$*cil de establecer cuando no existen antecedentes claros de exposición! porque los intoxicados a veces no tienen s*ntomas y porque los signos y s*ntomas! cuando est&n presentes! son relativamente inespec*,cos. 'as investigaciones de laboratorio son la %nica v*a ,able para diagnosticar a las personas expuestas al plomo! por lo que su papel en la identi,cación y el tratamiento de la intoxicación por plomo! y en la evaluación de la exposición ocupacional o ambiental! es esencial. Existen di$erentes m-todos de laboratorio para determinar las concentraciones de plomo en la sangre. 'os m&s comunes son la espectrometr*a de absorción atómica! la voltamperometr*a de redisolución anódica y la espectrometr*a de masa con $uente de plasma de acoplamiento inductivo. dem&s! hay un dispositivo port&til! $&cil de usar! que emplea la tecnolog*a de la voltamperometr*a de redisolución anódica para realizar determinaciones de plomo en la sangre en el lugar de consulta. Estos m-todos di,eren considerablemente en t-rminos de capacidad anal*tica (l*mites de detección! precisión)! costos (costos de adquisición y mantenimiento! in$raestructura requerida en el laboratorio! reactivos e insumos) y requisitos t-cnicos (preparación de la muestra! calibración! personal capacitado). Estos $actores! +unto con las condiciones generales y los recursos del laboratorio! in/uir&n en la elección de uno u otro m-todo. El l*mite de detección requerido es un elemento importante a tomar en cuenta. En muchos pa*ses el l*mite para considerar de importancia cl*nica las concentraciones de plomo en la sangre se ha ido reduciendo progresivamente. Esto sucede porque indicios cada vez m&s numerosos sugieren que es probable que no haya un umbral de concentración de plomo en la sangre por deba+o del cual no se producen e$ectos adversos para la salud. dem&s! las medidas de salud p%blica adoptadas en algunos pa*ses han tenido -xito y logrado disminuir la media de las concentraciones de plomo en la sangre en la población. n e+emplo se observa en los Estados nidos! donde la media geom-trica de la concentración de plomo en la sangre en la población ha disminuido de 121 g5dl a mediados de la
d-cada de 160 al valor actual in$erior a 7 8g5dl. Estos dos elementos han aumentado el inter-s por detectar concentraciones cava vez m&s ba+as de plomo en la sangre y crearon la necesidad de contar con m-todos anal*ticos m&s sensibles. En situaciones en las que las concentraciones de plomo en la sangre de la población o de una subpoblación siguen siendo elevadas! podr*an seguir siendo %tiles algunas tecnolog*as m&s antiguas con l*mites de detección m&s altos.
OBJETIVOS
9eterminar la concentración de plomo en sangre usando el m-todo de cuanti,cación de :ambach y :ur;ey.
MATERIALES
ubos de lectura ?itrato de amonio 40# ?ianuro de potasio 10# @idroxilamina 70# 9itizona extractora Ao+o de $enol :uBer p@ 3.4 C@4D@ 9itizona est&ndar Solución amonio cianurada Espectro$otómetro
FUNCIÓN DE CADA REACTIVO EN LA PRÁCTICA Citrato de Amonio
Se aade para evitar que precipite hidróxidos de otros metales y as* evitar inter$erencias. Hidr!ido de Amonio NH"OH
lcaliniza el medio para que se pueda llevas a cabo la reacción de ditizona y plomo! ya que un medio alcalino es un requisito para la adecuada disolución de ditizona y la $ormación del comple+o.1 Cian#ro de $ota%io &'CN(
Aeacciona con otros cationes como g! ?u7! @g7! ?d7 para evitar la inter$erencia de estos en la reacción con 9itizona! resultando entonces una reacción espec*,ca para el plomo con una sensibilidad muy alta. Ro)o Feno*
Se utiliza como indicador de p@. p@ in$eriores a "!F! el medio vira a amarillo! a p@ superiores a F el cultivo se torna de color violeta! los p@ entre "!F y F dan tonalidades graduales de color naran+a.
Diti+ona E!tra,tora &-.m/DT01 -22mL CHC* 3( 'a ditizona es un compuesto soluble en disolventes org&nicos no polares Se emplea como acomple+ante del =b $ormando 9itizonato de =lomo. 'os comple+os met&licos se $orman cuando algunos metales remplazan a uno o a ambos hidrógenos &cidos de la ditizona. 'a coloración del comple+o sirve de $undamento para el an&lisis espectro$otom-trico.
C*oro4ormo
Se emplea para la extracción de 9itiozanato de =lomo! ya que es altamente soluble en cloro$ormo a temperatura de ambiente 7g5100m'. dem&s este medio es adecuando para la concentración del analito e incremento de sensibilidad del an&lisis y elimina inter$erencias. So*#,in 5#6er $H 37" 8
cidi,ca el medio! por la cual el plomo pasara a la misma ba+o $orma de nitrato. Entonces el plomo se encontrara en la $ase acuosa.
Diti+ona E%t9ndar &:m/DT01 -22mL CHC* 3(; Se agregó 10 m'.
Se agrega a la solución &cida que contiene el plomo una determinada concentración de 9itizona conveniente para el tenor que se espera valorarG 10ml para 0H10 microgramos y 7ml para 0H0 microgramos y 0H100 microgramos.
FUNDAMENTO;
Se basa en la $ormación de un comple+o cloreado de 9itizonato de =lomo! en medio b&sico y se cuanti,ca por espectro$otometr*a a 70 nm.
REACCIÓN DE E
CANTIDADES NORMALES DE PLOMO EN LA SAN=RE
H
dultosG
H
CiosG
'os adultos expuestos al plomo deben tener niveles de este elemento en la sangre por deba+o de 0.4 mg5'. Se recomienda tratamiento si usted tiene s*ntomas de intoxicación con plomo o si su nivel en la sangre es mayor a o." mg5'. En los nios! un nivel de plomo en la sangre superior a 0.1 mg5' requiere pruebas adicionales y monitoreo. Se debe identi,car y eliminar la $uente del plomo. n nivel de plomo superior a o.4 mg5' en la sangre de un nio generalmente indica la necesidad de tratamiento. Sin embargo! el tratamiento se puede considerar con un nivel tan ba+o hasta de 0.7 mg5'. PROCEDIMIENTO;
Aealizar la destrucción de la materia org&nica de la muestra. 'uego en una pera de decantación agregar 10ml de muestra problema gregar 1ml de citrato de amonio 40# m&s III gotas de ro+o de $enol
gregar ml de J?C
gregar 1ml de @idroxilamina ?lorhidrato 70# m&s ml de 9itizona extractora (1"mg 9>K5100ml ?@?'3) gitar por 4min y de+ar separar. 'a muestra pasa de color verde a ro+o (m&xima saturación de metales)
Lerter 1ml de 9itizona est&ndar (Fmd 9>K5100 ml ?@?'3) gregar ,nalmente ml de solución de amonio cianurada! y agitar constantemente
Extraemos la $ase cloro$órmica gregar oml de solución :uBer p@ 3.4 y agitar por 4min. El metal pasa a la $ase acuosa
Nase acuosa
Nase org&nica
Extraer la $ase org&nica! que contiene la muestra y leer al espectro$otómetro a 70nm.
RESULTADOS;
H
'a absorbancia hallada es de 0.1F1
?AL 9E ?'I:A?IMC 9E ='D
0. 0.41 0.4 0.31
bsorvancia 0.3 0.71
0.7 0.1
0.1 0
0
10
1
70
?oncentración ug =b5 0 m'
7
30
=or extrapolación de la gr&,caG ug =b50m' 0.100 [ 0.1F1 [ P 6.0 ug =b5oml
H
[ P 0.1F1 ug5ml \] 0.1F1 mg5'
=or lo tanto la cantidad de =lomo en la muestra de sangre es 0.1F1 mg5'
DISCUSION
En la determinación de plomo en la sangre! el p@ cumple un rol importante ya que si el sistema es acido la extracción no se produceO de acuerdo a di$erentes investigaciones a p@ P 6 se obtiene mayor extracción de plomo 3. 'a ditizona en exceso tambi-n $ormar color! lo cual inducir& al error en la lectrura $otom-trica. mayor concentración de plomo el color es m&s intenso. 'a concentración de plomo $ue 0.1F7 mg5'! que se encuentra dentro de los valores normales permitidos de este mineral en la sangre! ya que si el grado de exposición es elevado! ataca al cerebro y al sistema nervioso central! pudiendo provocar coma! convulsiones e incluso la muerte! raquitismo. 'os nios que sobreviven a una intoxicación grave pueden padecer diversas secuelas! como retraso mental o trastornos del comportamiento.
CONCLUSION >
sando el m-todo de cuanti,cación de :ambach y :ur;ey la concentración de plomo en la muestra de sangre $ue de 0.1F7 mg5'
REFERENCIAS BIBLIO=RÁFICAS
1) N. :urriel homson. pp. 47"H43. 7) <. Vuatelli.
