PRÁCTICA No. 5 OBSERVACIÓN DE CÉLULAS ANIMALES: CÉLULAS EPITELIALES, SANGUÍNEAS, ESPERMATOZOIDES Objetivo: El alumno observará diferentes tipos de células animales provenientes de diferentes tejidos del humano. Introducción El alumno se encargará de investigar una introducción para la presente práctica Material y reactivos necesarios Micros Microscopi copio, o, portao portaobje bjetos tos,, cubreo cubreobje bjetos tos,, 2 pip pipeta etass pasteu pasteur, r, abatel abatelengu enguas, as, soluci solución ón salina salina,, lancetas, azul de metileno, giemsa, metanol 95%. Nota Nota:: calcu calcule le el ma mate teri rial al de acue acuerdo rdo al nú núme mero ro de inte integr grant antes es del del equi equipo po y deber deberáá organizarse para optimizar tiempos y alcanzar a realizar cada procedimiento. Mues Muestra tra qu quee de debe ben n tra traer: er: lí líqui quido do se semi mina nall en un rec recipi ipien ente te de bo boca ca an ancha cha co con n tap tapa a (muestra reciente, 1 hora anticipación), el resto de las muestras las tomaremos a la hora de la práctica.
Procedimiento OBSERVACIÓN DE CÉLULAS EPITELIALES 1. Toma Toma de mu mues estr tra: a: Pon una gota de solución salina en el portaobjetos (hazlo por duplicado).Con un abatelenguas o un palillo de dientes frota la cara interna de tu mejilla. Las células se desprenden fácilmente, no es necesario rascar. Introduce el extremo del abatelenguas o palillo en la gota de solución salina y mézclalo, tratando de hacer un frotis, extendiéndolo. 2. Fija Fijaci ción ón y tin tinci ción ón:: Dejar secar los frotis frotis al aire. Una vez secos, añada una gota de azul de metileno y déjalo déjalo actuar tres minutos. Retire el colorante en el lavabo inclinando cada portaobjetos y agregue agua destilada por 30 segundos para quitar el exceso de colorante. Seque la preparación al aire. 3. Obse Observ rvac acio ione nes: s: Lleve las preparaciones al microscopio y obsérvelas iniciando con las condiciones basales del microscopio. Una vez que localice una célula entera, obsérvela con mayor aumento. Esquematice sus observaciones
ELABORACIÓN DE UN FROTIS DE SANGRE 1. Toma de muestra: Lávese y séquese bien las manos. La muestra de sangre puede obtenerse de dos maneras: por punción capilar o punción venosa. Punción capilar: Desinfectar, con ayuda de una torunda con alcohol, la yema de un dedo de la mano, lóbulo de la oreja ó talón del pie, masajeando suavemente. Dejar secar, sin soplar. Presionar levemente y puncionar la zona desinfectada con una lanceta estéril, desechar la primera gota y colocar la segunda gota en un extremo del portaobjetos y continuar con el procedimiento de Frotis sanguíneo. 2. Frotis sanguíneo: Es importante, para la realización de un buen frotis sanguíneo, utilizar portaobjetos y/o cubreobjetos perfectamente limpios, libres de grasa, de preferencia nuevos. Además de un portaobjetos con bordes lisos para utilizarlo en la extensión de la gota de sangre. Depositar una pequeña gota de sangre en un extremo de un portaobjetos Colocar otro portaobjetos de borde liso, frente a la gota de sangre que se depositó en el primer portaobjetos, formando un ángulo de 45º, presionar ligeramente y jalar hacia la derecha, de manera que fluya la sangre a lo largo del borde Extienda ahora hacia la izquierda rápidamente, sin detenerse, ni despegarlo, sin presionarlo, conservando el ángulo, de manera que la gota de sangre quede como una capa fina sobre el primer portaobjetos Dejar secar al aire. • •
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3. Tinción de Giemsa: Realizar el procedimiento en la parrilla para tinción en el lavabo. Fijar: Cubra el frotis seco, con metanol al 95%, deje actuar durante 2 minutos y retire el exceso. Teñir: Cubra el frotis con colorante de Giemsa y deje actuar 15min. •
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el colorante Giemsa está concentrado, para realizar la tinción debe diluirse en proporción de 3 gotas de colorante por cada mililitro de agua destilada, sabiendo que por cada frotis se preparan 3.5ml de colorante diluido. Nota:
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Lavar: con agua destilada evitando que caiga directamente el chorro de agua sobre la preparación Secar al aire.
4. Observar al microscopio: Acomode el portaobjetos en la platina del microscopio (sin cubreobjetos). Observe la preparación iniciando con las condiciones basales del microscopio siguiendo indicaciones de enfoque hasta 100x.
Elabore un esquema de lo observado. ¿Qué célula observó en mayor cantidad? PREPARACIÓN PARA OBSERVACIÓN DE ESPERMATOZOIDES 1. En fresco: Coloque una gota de la muestra entre porta y cubre. Observe la preparación iniciando con las condiciones basales del microscopio siguiendo indicaciones de enfoque hasta 40x. Anote sus observaciones.
Cuestionario 1. Identifica los diferentes tipos de tejido que constituyen al organismo humano y la función de cada uno. ¿Qué tipo de células posee cada uno de ellos? Incluye gráficos o dibujos de cada tipo de tejido. 2. Describa el papel biológico (función) de cada uno de los componentes de la sangre y los valores normales de cada uno de ellos: a)
Plasma b) Eritrocitos c) Leucocitos d) Plaquetas
3. Dibuje diferentes células de cada tipo señalado, consideradas anormales que se presentan en determinadas patologías y que se pueden observar en un frotis de sangre periférica 4. Dibuje o incluya foto de un espermatozoide indicando cada una de sus partes estructurales. 5. Especifique diferentes formas anormales de espermatozoides
