PENGUKURAN AKTIVITAS AKTIVITAS ASETILKOLINESTERASE DI JARINGAN TUJUAN PRAKTIKUM Membandingkan aktivitas enzim asetilkolinesterase di jaringan otak dan otot tikus wistar. Aktivitas enzim : banyaknya enzim yang berikatan dengan substrat untuk menghasilkan produk per satuan waktu. Asetil kolinesterase : enzim untuk menghidrolisis neurotransmiter asetilkolin. Reaksi : asetilkolin → asetil + kolin Nb: pada praktikum ini kita hanya mengukur aktivitas enzimnya, bukan kadar asetilkolinesterasenya. Jika ingin mengukur asetilkolinesterasenya menggunakan metode !"#A. DASAR TEORI Jaringan otak dan otot mengandung enzim asetilkolinesterase yang akan mengubah asetilkolin menjadi asetil dan kolin yang dapat diba$a pada serapan tertentu. CARA KERJA %&& '! () + * '! sample diamkan menit, tambahkan ditambah (% & '!, ba$a pada serapan *& nm % menit dan menit b : agar larutan uji dapat dapat diba$a pada serapan serapan tersebut, maka larutan larutan uji tersebut haruslah sesuai dengan jumlah kadar inial pada alat uji. /leh sebab sebab itu masing0mmasing larutan larutan uji di kalikan lima. (umus aktivitas enzim : −Δ
! Konstanta "#$%$&&'
1eterangan: A) 2 absorbansi pada % menit A% 2 absorbansi pada menit Δ 2 menit 3 % menit 2 4 menit 5asil dinyatakan dalam 67! pada absorbansi menit produk yang dihasilkan lebih banyak8ari hasil pemba$aan serapan tersebut kita dapat mengetahui perubahan jumlah produk per satuan waktu menit-, besarnya jumlah produk yang dihasilkan dapat dipengaruhi oleh suhu, kadarr p5 ataupun jumlah enzim yang berperan. 8ari praktikum ini substrat yang sama terdapat jumlah produk yang berbeda, sehingga dapat diketahui bahwa bahwa terdapat perbedaan perbedaan jumlah enzim yang akti9 suhu tetap, p5 tetapKeteran(an ) () merupakan bu99er. u99er digunakan supaya enzim dapat bekerja dengan baik karena enzim bekerja optimal pada p5 tertentu. u99er sendiri ber9ungsi sebagai larutan yang dapat mempertahankan p5. (% merupakan substrat, yaitu butyril0$oline. #ampel yang digunakan adalah homogenat jaringan otak dan otot dari tikus wistar.
Tentir Neurosains 2013/2014 – Praktikum
;
PEM*A+ASAN 8ari hasil praktikum yang kami dapatkan dan sumber yang kami pelajari maka kami dari departemen biokimia memutuskan:
