Nama : Ni Komang Setyaningsih NIM
: P07134016 013
PEMERIKSAAN PEMERIKSAAN RPR (RAPI (RAPI D PLASMA PLASMA REAGI N)
I. TUJUAN PEMERIKSAAN DAN DIAGNOSA a. TUJUAN PEMERIKSAAN
Untuk mendeteksi adanya antibody non-treponemal pada serum manusia b. TUJUAN KLINIS
Untuk menunjang diagnosis adanya penyakit sifilis pada serum probandus. II. METODE
Metode yang digunakan dalam uji RPR ini adalah metode flokulasi atau gumpalan secara kualitatif dan semi-kuantitatif. III. PRINSIP
Reaksi flokulasi secara imunologis terjadi antara antibodi non-treponemal ( antibodi yang terdapat dalam serum dengan antigen lipoid yang terdapat dalam reagen RPR). Antigen RPR adalah antigen modifikasi dari antigen VDRL yang mengandung micro partikel karbon. IV. DASAR TEORI
Rapid Plasma Reagin (RPR) adalah salah
satu pemeriksaan non
troponemal untuk sifilis untuk mendeteksi non-spesifik antibodi antibodi (reagin) dalam darah pasien. Pemeriksaan Rapid Plasma Reagin dilakukan dengan menggunakan metode immunoasai. Pada metode immunoasai ini dilakukan secara aglutinasi
yaitu ikatan antigen dan antibodi pada serum penderita (Larsen et al., n.d.; Lee, Lim, Lee, & Kim, 2014). Analisis
serologis
non
treponemal
tes
reagin,
seperti
Venereal
Laboratorium Penelitian Penyakit (VDRL), Rapid plasma reagin (RPR) dan tes treponemal seperti Treponema pallidum haemagglutination assay (TPHA), Treponema pallidum uji partikel aglutinasi (TPPA), fluoresen tes penyerapan antibodi treponemal, dan tes antibodi Treponema-spesifik, digunakan untuk mendiagnosis dan memantau infeksi sifilis (Larsen et al., n.d.; Lee, Lim, Lee, & Kim, 2014). Pusat
Pengendalian
dan
Pencegahan
Penyakit
(CDC)
masih
merekomendasikan bahwa tes reagin non-treponemal digunakan sebagai pendekatan diagnostik lini pertama. Dua jenis nontreponemal tes telah banyak digunakan: VDRL dan RPR. RPR adalah tes non-treponemal baris pertama yang paling umum digunakan untuk mendeteksi infeksi sifilis (Manuscript, 2014). V. ALAT & BAHAN a. Alat
1. Slide test 2. Yellow tip 3. Mikropipet ( 50 – 100 µL) 4. Gelas b. Spesimen Pemeriksaan
Spesimen serum c. Bahan
1. Reagen RPR 2. Control positif dan kontrol negatif 3. NaCl 0,85%
VI. CARA KERJA
Adapun cara kerja dari praktikum pemeriksaan RPR, antara lain : A. Kualitatif test
1. Disiapkan alat dan bahan yang akan digunakan 2. Dipipet sampel serum, control positif dan kontrol negatif dengan volume 50 µL pada slide yang berbeda. 3. Dipasang jarum pada botol reagen RPR carbon. 4. Dihomogenkan reagen RPR kemudian diberikan 1 tetes reagen RPR pada slide yang berisi sampel . 5. Dihomogenkan hingga memenuhi lingkara slide lingkaran dengan menggunakan lidi yang berbeda pada tiap slide. 6. Slide test digoyangkan ke depan dan ke belakang secara perlahan selama 8 menit. 7. Diamati flokulasi yang terbentuk dan hasil positif dilanjutkan pada uji semi kuantitatif. B. Uji Semi-Kuantitatif
1. Disiapkan alat dan bahan yang akan digunakan. 2. Dipipet sebanyak 50 µL , dan diteteskan pada slide 1 – 5. 3. Dipipet sampel serum sebanyak 50 µL pada slide pertama 4. Dihomogenkan campuran pada slide pertama kemudian dipipet 50 µL dan dipindahkan ke slide ke dua. 5. Diulangi langkah tersebut hingga slide ke-5 6. Campuran dari slide ke-5 dipipet 50 µL kemudian dibuang.
7. Diteteskan sebanyak 1 tetes reagen RPR pada slide pertama hingga slide kelima kemudian dihomogenkan. 8. Slide test dimiringkan dan digoyangkan ke depan dan ke belakang secara perlahan selama 8 menit. 9. Diamati flokulasi yang terbentuk. VII. INTERPRETASI HASIL
-
Reaktif kuat
: bila tampak gumpalan sedang atau besar ditengah
dan dipinggir lingkaran -
Reaktif lemah
: bila tampak gumpalan kecil halus dipinggir
lingkaran -
Non reaktif
: tidak tampak flokulasi atau gumpalan
VIII. HASIL PENGAMATAN
-
Probandus 1 Nama Probandus : Dwi Manda Sari
-
Umur
: 19 tahun
Jenis kelamin
: Perempuan
Hasil
: Non reaktif pada uji kualitatif
Probandus 2 Nama Probandus : Edy M Umur
: 30 tahun
Jenis kelamin
: Laki-laki
Hasil
: Reaktif pada uji kualitatif dan reaktif lemah pada
uji semi kuantitatif sampai pengenceran ½
IX. PEMBAHASAN
Tes Kartu RPR Makro-Vue (Becton Dickinson BD Sistem Mikrobiologi) menggunakan antigen cardiolipin dengan partikel karbon untuk mendeteksi reagin. Reagin mengikat antigen, yang terdiri dari cardiolipin-lecithin-kolesterol
partikel, menyebabkan flokulasi makroskopik. Kontrol dilakukan untuk setiap tes untuk mengkonfirmasi reaktivitas optimal antigen. Prosedur uji diikuti menurut instruksi pabrik (Manuscript, 2014). Tes RPR secara Otomatis telah diperkenalkan, tetapi bervariasi Hasilnya dilaporkan ketika tes otomatis dibandingkan dengan tes kartu RPR konvensional. Uji Otomatis RPR memiliki beberapa kelebihan dibanding yang konvensional Tes kartu RPR, seperti kapasitas yang lebih besar untuk sejumlah sampel yang banyak, variasi orang-ke-orang minimal, dan prosedur otomatis dan sederhana ( Marra, Maxwell, Tantalo, Sahi, & Sheila, 2009). Uji RPR manual telah digunakan selama beberapa dekade, tetapi baru-baru ini tes RPR otomatis diluncurkan dan telah digunakan karena kenyamanannya dalam pengaturan klinis. Namun, ada kebutuhan untuk pemeriksaan menyeluruh dan perbandingan hasil tes otomatis baru ini dengan tes RPR manual konvensional dalam diagnostic pendekatan. Hasil tes treponemal tidak akan berubah bahkan setelah perawatan, dan pasien hidup dengan positif hasil untuk sisa hidup mereka tanpa perawatan atau aktivitas penyakit. Tes treponemal tidak dapat membedakan antara infeksi masa lalu, penyakit aktif, pasien yang diobati dan pasien yang tidak diobati. Sebaliknya, non-treponemal tes dapat membedakan antara pasien yang pernah dirawat selama tahap primer atau sekunder dari penyakit. Saat tahap primer atau sekunder yang pertama Infeksi T. pallidum diobati, tes non-treponemal titer harus menunjukkan penurunan pengenceran dua kali lipat setelah perawatan, biasanya dalam 6 bulan. Oleh karena itu, nontreponemal Tes penting untuk mengelola infeksi sifilis pasien ( Marra, Maxwell, Tantalo, Sahi, & Sheila, 2010). Deteksi sifilis dipersulit oleh kesalahan positif yang sering terjadi pada tes skrining pasien dengan gangguan inflamasi. Rapid Plasma Reagin (RPR) adalah yang paling umum Tes skrining yang digunakan untuk tes darah, sedangkan Laboratorium Penelitian Penyakit Sereal (VDRL) adalah digunakan untuk menyaring spesimen darah dan cairan serebrospinal (CSF). Kedua tes mendeteksi antibodi nonspesifik untuk host antigen kardiolipin, dan dengan demikian disebut sebagai nontreponemal tes. Hasil RPR dan VDRL positif dikonfirmasi dengan
lebih spesifik treponemal assay, seperti T. pallidum hemagglutination (TPHA) atau fluorescent tes antibodi-absorpsi treponemal (FTA-ABS), yang mengukur antibodi spesifik untuk antigen treponemal dan membedakan benar dari RPR positif palsu atau VDRL. RPR atau VDRL untuk memperkirakan aktivitas dan keparahan penyakit ( Montoya et al., 2010). Tes non-treponemal untuk infeksi sifilis seperti RPR untuk mendeteksi antibodi nonspesifik cardiolipin. Antibodi ini dianggap diproduksi sebagai respons terhadap berbagai lipoidal antigen dilepaskan dari sel inang yang rusak tetapi juga hadir di T. pallidum. Antigen-antigen ini tidak asing untuk sifilis, dan tes RPR positif dapat terjadi pada autoimun gangguan, infeksi virus tertentu, setelah imunisasi, atau dalam kehamilan (Sahi & Jones, 2013).
X. KESIMPULAN Berdasarkan praktikum yang telah dilakukan mengenai pemeriksaan RPR (Rapid Plasma Reagin) pada probandus I atas nama Dwi Manda Sari (perempuan, 19 tahun) didapatkan hasil non reaktif pada uji kualitatif, ini berarti tidak terdapat antibodi non treponema pada serumnya. Dan pada probandus II atas nama Edy M (Laki-laki, 30 tahun) didapatkan hasil yang reaktif pada uji kualitatif dan reaktif lemah pada uji semi kuantitatif, ini berarti dalam serum probandus terdapat antibodi non treponema.
DAFTAR PUSTAKA
Larsen, S. A., Creighton, E. T., Principles, T., Collection, S., Control, Q., Controls, D., … Limitations, T. (n.d.). Chapter 10 RAPID PLASMA REAGIN ( RPR ) 18-MM CIRCLE CARD TEST. Lee, J., Lim, C. S., Lee, M., & Kim, H. (2014). Comparison of an automated rapid plasma reagin ( RPR ) test with the conventional RPR card test in syphilis testing, 1 – 6. https://doi.org/10.1136/bmjopen-2014-005664 Manuscript,
A.
(2014).
NIH
Public
Access,
12(3),
268 – 273.
https://doi.org/10.1016/j.tmaid.2013.10.010.False-positive Marra, C. M., Maxwell, C. L., Tantalo, L. C., Sahi, S. K., & Sheila, A. (2010). after
Treatment
of
Neurosyphilis,
47 (7),
893 – 899.
https://doi.org/10.1086/591534.Normalization Montoya, P. J., Lukehart, S. A., Brentlinger, P. E., Blanco, A. J., Floriano, F., Sairosse, J., & Gloyd, S. (2010). Comparison of the diagnostic accuracy of a rapid immunochromatographic test and the rapid plasma reagin test for antenatal syphilis screening in Mozambique, 18663(4), 97 – 104. Sahi, S. K., & Jones, T. (2013). NIH Public Access, https://doi.org/10.1097/OLQ.0b013e31824b1cde.The
39(6),
453 – 457.
