MÉTODOS DE ANÁLISIS DE ZOOPLANCTON
Fijación La fijación y preservación de las muestras m uestras zooplanctónicas se realiza utilizando productos químicos que cumplen esta función. Entre los mas utilizados tenemos el formol y el alcohol. Debido a que el formol puro es un gas, se utiliza su forma acuosa que constituye el formaldehido.
Fijación El formaldehido puro se encuentra en una concentración de 38 ± 40 %. Para obtener una fijación de la muestra al 4 %, diluimos una parte de formaldehido puro en diez partes del volumen de la muestra.
Fijación, pH Teniendo en cuenta que el formol es ligeramente ácido, y que un pH alto puede dañar a los organismos, es necesario reducir el la acidez hasta obtener un pH de aproximadamente 7,5.
Narcotización Algunos organismos se estresan al entrar en contacto con el fijador, se contraen y su identificación se hace difícil. Para resolver esta situación se los narcotiza con: Formaldehido en baja concentación, soda, alcohol, Sulfato fe magnesio o temperatura, previo a su fijación definitiva.
Tinción Para identificar algunos organismos zooplanctónicos, particularmente aquellos transparentes o traslúcidos, se utiliza productos como rosa de bengala, azul de metileno o verde de malaquita.
Separación Muchas veces es necesario o deseable separar unos taxones de otros para realizar un análisis determinado. La separación de organismos de una muestra en función de su tamaño puede realizarse pasando la muestra por tamices o mallas de diferente porosidad. Primero se lo hace usando la de mayor porosidad hasta la más fina deseada.
Separación Muchas veces es necesario o deseable separar unos taxones de otros para realizar un análisis determinado. La separación de organismos de una muestra en función de su tamaño puede realizarse pasando la muestra por tamices o mallas de diferente porosidad. Primero se lo hace usando la de mayor porosidad hasta la más fina deseada.
Diferentes taxones del zooplancton tienen mayor peso que otros; en este caso se puede utilizar un sistema consistente en un cilindro largo de vidrio que posee varias salidas que pueden ser abiertas por medio de pinzas que estrangulan una manguera. El cilindro se llena casi en su totalidad con agua a la cual se aumenta de densidad ya sea con cloruro de sodio o sulfato de magnesio hasta alcanzar una densidad entre 1,1 y 1,2 gr/cm3. Luego, desde la parte superior, se agrega la muestra y los organismos irán descendiendo lentamente en función de su peso.
A continuación se abren las salidas inferiores obteniendo, de esta manera, diferentes grupos de organismos.
Análisis cualitativo . Dependiendo del tipo de organismo, se emplean claves taxonómicas correspondientes a los diferentes grupos. Como herramientas se utilizan el estereoestereo microscopio y el microscopio compuesto. En ciertos casos es necesario recurrir a procedimientos de tinción y disección.
Análisis cuantitativo . El contaje de animales pertenecientes al zooplancton se realiza generalmente con la utilización de un estereoestereo -microscopio o microscopio de disección colocando las muestras (o una alícuota) en una cámara de contaje. La más utilizada en nuestro medio es la cámara de Bogorov (1959).
Con la finalidad de acelerar los procesos de contaje, Priegerl (1970), construyó una bandeja circular con un canal que contiene el zooplancton.
Otra
cámara de contaje es aquella diseñada por Lindenberg, por medio de la cual se hace pasar la muestra con organismos de un recipiente a otro por medio de una banda accionada manualmente; a través de un canal pasan los organismos que son contados con un estereoestereo microscopio.
Bajo la inspiración del trabajo de Bossanyi (1959), se diseñó un sistema que permite contar y separar organismos zooplanctónicos vivos.
Biomasa
zooplanctónica
La determinación determinación de la biomasa zooplanctónica puede ser realizada por diferentes métodos. El más preciso consiste en el contaje e identificación de los organismos. Esto implica que se debe conocer el volumen y peso de cada uno de ellos en sus diferentes estadíos de desarrollo, lo que es algo casi imposible. Por otra parte existen dos métodos para determinación de su biomasa: el volumétrico y el gravimétrico.
El método volumétrico puede ser realizado por sedimentación o por desplazamiento. El método de sedimentación consiste en colocar la muestra en una probeta graduada y luego de un tiempo determinado, observar el volumen ocupado por los organismos. Este método es muy impreciso debido a que el volumen ocupado depende del tipo, tamaño y forma de los organismos que componen la muestra.
El volumen por desplazamiento se determina utilizando la cámara de Sutcliffe (1957) que tiene la ventaja de determinar el volumen en ausencia del agua intersticial entre los organismos. Consiste de un cilindro de vidrio con la parte inferior roscada a la cual se pega una malla de la porosidad deseada. Este cilindro se enrosca en una base con cierre hermético. En la parte superior posee un tornillo graduable y una perforación para el ingreso de agua.
Con el sistema cerrado, se introduce una cantidad conocida de agua y se ajusta la aguja hasta que haga contacto con el agua, fijando la aguja en ese punto. Para operar el sistema, se retira el cilindro de la base, se retira la tapa y se introduce la muestra (o submuestra) de zooplancton; se la deja descansar en una superficie de material absorbente para eliminar el agua intersticial. A continuación, por el orificio de la tapa, utilizando una bureta, se introduce agua hasta que esta haga contacto con la punta de la aguja. Determinando cuánta agua fue utilizada, por diferencia, se determina el volumen de plancton.
Los métodos gravimétricos (peso) puede comprender peso húmedo, peso seco y, si se desea conocer la cantidad de materia orgánica, se reduce la muestra a cenizas.
Peso húmedo: Se filtra la muestra a través de una malla previamente pesada, se extrae el agua intersticial y se determina el peso utilizando una balanza de precisión. Peso seco: La muestra se coloca en una estufa a una temperatura de 60 o hasta obtener peso constante y se determina su peso.
Materia orgánica: Se coloca la muestra en una mufla a una temperatura de 350 400º C durante tres horas para quemar toda la materia orgánica y obteniendo como resultado las cenizas. Por diferencia entre el peso seco y las cenizas, se obtiene el valor de la materia orgánica de la muestra. La desventaja de los métodos de peso seco y materia orgánica es que resultan destructivos para los organismos.
Evasión
Muchos organismos zooplanctónicos presentan la reacción de escape cuando sienten vibraciones frente a ellos. Es por esto que los sistemas de muestreo que poseen menos estructuras frente a su boca de entrada son más eficientes que aquellos que poseen cuerdas, flujómetros o sistemas de apertura y cierre.
Enquistamiento
Como ocurre con los dinoflagelados, ciertos organismos del zooplancton tienen la capacidad de enquistarse o entrar en estado de latencia cuando las condiciones ambientales (por ejemplo desecación de cuerpos de agua) no son favorables. Sars (1901), describe un significante número de cladóceros, ostrácodos y copépodos dulceacuícolas provenientes de sedimentos secos de Sudamérica.
