Metode Kirby Bauer

Metode Kirby Bauer

Adalah uji sensitivitas menggunakan diffusi agar menggunakan teknik disc diffusion, dalam uji sensitivitas metode Kirby bauer menggunakan media selektif yaitu media Muller Hintin Agar.

I.

Tujuan Penent Penentuan uan keekaan keekaan bakteri bakteri atoge atogen n terhada terhada antimikro antimikroba ba daat daat

dilaku dilakukan kan

dengan salah satu dari dua metode okok yakni dilusi atau difusi. Metode yang aling sering digunakan adalah metode difusi agar. uji sensitivitas dengan metode difusi agar  menggunakan teknik disc diffusion adalah metode Kirby !auer. "ila "ilaku kukan kanny nyaa uji uji kee keeka kaan an antim antimik ikro roba ba adala adalah h untu untuk k mend menda aat atka kan n agen agen antimikroba yang teat untuk engobatan ada infeksi tertentu.

I I.

Alat # !ahan Isolat biakan murni bakteri yang ingin di teliti • Media agar $MHA% • Antibiotik  • &arutan standar Mc 'arland • Kertas cakram kirby(bauer. • Alatnya adalah ) Inkubator  • *a+an etri • Kertas coklat • arum ose • angka sorong • !unsen • Mikroiet • Piet kertas • Kertas label • Tisu dan lastik. •

I I I.

*ara Kerja Pengujian aktivitas antibakteri dilakukan dengan metode Kirby(!auer yang dikenal dengan sebutan metode cakram kertas)

-. Tia(tia cakram kertas kosong sebelumnya dianaskan dalam oven dengan suhu /0* selama -1 menit, kemudian kertas cakram dicelukan ke dalam larutan uji. 2. *akram yang telah berisi suernatan, kemudian didiamkan selama -1 menit sebelum diletakkan ada media uji. 3. Kemudian secara asetik, setelah kertas cakram menyera suernatan tersebut, masing(masing diletakkan ada ermukaan medium yang telah berisi mikroba uji. 4. umlah cakram kertas yang diletakkan tersebut kira(kira dalam satu ca+an etri  berisi 5( buah, dan masing(masing jarak antara cakram diatur suaya tidak terlalu dekat. !iasanya, samai -2 disk daat dialikasikan ada elat berdiameter -1/ mm atau samai 1 "isk ada ca+an etri berukuran -// mm. Tekan setia disk ke  ba+ah dengan benar untuk memastikan tingkatan kontak dengan agar semurna.

Menanamkan disk menggunakan disenser 

Memastikan disk tertanam dengan benar  1. 6ebagai kontrol ositif digunakan cakram Amisilin -/ 7g dan untuk kontrol negatif digunakan cakram kosong steril. 5. Pengujian dilakukan dengan tiga ulangan. . 6etelah inkubasi ada suhu 30* selama -8(24 jam, dilakukan engukuran diameter 9ona hambat, yaitu 9ona bening yang terbentuk di sekitar cakram, dengan menggunakan enggaris milimeter. :ji 6ensitivitas Antibiotik ) a. Isolasi bakteri serta alat dan bahan yang dierlukan.  b. Isolasi diambil dengan iet ukur sebanyak /,- m& dan diletakan di ca+an  etri serta di ratakan dengan cara sread late. c. Antibiotik yang sudah disiakan diletakan ada ca+an etri yang sebelumnya sudah di beri isolat ada temat yang sudah di sediakan d. *a+an etri di bungkus dengan kertas coklat dan di inkubasi selama 24 jam  ada suhu 3o*. e. &akukan engukuran diameter 9ona hambat yang dihasilkan

Sterilisasi peralatan

Peralatan yang digunakan sebelumya disterilkan terlebih dahulu. Media  ertumbuhan bakteri disterilakan dalam autoclaf ada suhu -2- derajat celcius selama -1 menit, alat alat disterilkan dalam oven ada susu -8/ derajat celcius selama - jam,  jarum ose dan inset disterilkan dengan embakaran langsung dengan menggunakan nyala ai busen. I;.

Hasil dan Pembahasan 6etelah 24 jam inkubasi, dilakukan engukuran diameter 9ona hambat. &ihat 9ona hambatnya $jernih% dan diukur dengan menggunakan jangka sorong. Amati 9ona ertumbuhan bakteri di sekitar disc dan ukur diameter 9ona hambatnya, tentukan bakteri uji sensitive atau resisten terhada antibiotic Metode disk(difusi $Kirby(!auer% lebih cocok untuk engujian rutin di laboratorium klinis di mana sejumlah besar isolat yang diuji untuk kerentanan terhada berbagai antibiotik. 6ebuah late agar secara seragam diinokulasi dengan organisme uji dan disk  kertas diresai dengan konsentrasi teta antibiotik ditematkan ada ermukaan agar(agar. Pertumbuhan organisme dan difusi dimulai antibiotik secara bersamaan menghasilkan 9ona hambatan melingkar di mana jumlah antibiotik melebihi konsentrasi enghambatan. "iameter 9ona hambat adalah fungsi dari jumlah obat dalam disk dan kerentanan mikroorganisme. Interretasikan ukuran 9ona dengan mengacu ada rodusen yang diberikan meja standar dan melaorkan organisme yang akan baik rentan, menengah, atau resisten. angan bandingkan ukuran 9ona dua antibiotik yang berbeda dan menilai efektivitas mereka sesuai.

A.
!.
=eflected light untuk mengukur 9ona dibelakang ca+an etri =eflected light digunakan untuk Enterobacteriaceae, seerti as E. coli, basil gram negative lain, stahylococci, and enterococci $kecuali o>acillin and vancomycin ).

Zona Hambat Pertumbuhan

Zona Pertumbuhan Bakteri

Disk Antibiotik

Interretasi
Tabel 6tandar Tes 6ustebilitas "isk "iffusi Antimikroba

"aftar Pustaka • •

"+idjoseutro, ". 2//1. Dasar-Dasar Mikrobiologi. akarta) "jambatan 'arida, engaruh eresaan bakteri stahylococcus aureus dalam media agar  terhada diameter 9ona hambat antibiotik @anstamisin Metode *akram Kirby( !auer. Mataram) Poltekes Kemenkes Mataram. 2/--.

•

Hartini. :ji Aktivitas !akteri Menggunakan Metode *akram "isk $Kirby  

•

!auer%. Politeknik Kesehatan Kemenkes !anjarmasin. 2/- Marie !. *oyle. B**&6 Manual of Antimicrobial 6uscetibility Test. American 6ociety 'or Microbiology. 2//1