Manual Prácticas Citología 1ra Parte NLIM

UNIVERSIDAD DE LOS ANDES UNIVERSIDAD DE LOS ANDES FACULTAD DE FARMACIA Y BIOANÁLISIS ESCUELA DE BIOANÁLISIS FACULTAD DE FARMACIA Y BIOANÁLISIS CÁTEDRA DE CITOLOGÍA _____________________________________________________ _________________________ ____________________________________________________________ _______________________ CÁTEDRA DE _______________________________________________________ CITOLOGÍA MANUAL DE PRÁCTICA DE CITOLOGÍA. 2013

PROFESORAS: Guillen Ferraro, Morella López de Sánchez, Mercedes Moreno Barrios, María María Carolina Toro de Méndez, Morelva VERSIÓN 4 MÉRIDA-VENEZUELA 1 2013

UNIVERSIDAD DE LOS ANDES FACULTAD DE FARMACIA Y BIOANÁLISIS ESCUELA DE BIOANÁLISIS CÁTEDRA DE CITOLOGÍA _____________________________________________________ _________________________ ____________________________________________________________ _______________________________________________________ _______________________ MANUAL DE PRÁCTICA DE CITOLOGÍA. 2013

NORMATIVA INTERNA DE LA ASIGNATURA “CITOLOGIA EXFOLIATIVA”

De las clases teóricas: * Los estudiantes regulares deben asistir a las clases teóricas y a las sesiones de laboratorio en el horario correspondiente a la sección asignada. a signada. El inicio de las clases es a las 8:00 a.m. * La programación de la asignatura, las calificaciones, el cronograma de evaluaciones y cualquier información de interés para el estudiante se publicará en la cartelera de la cátedra de citología. * Al inicio del curso y antes de iniciar las sesiones de laboratorio, cada estudiante deberá completar una planilla de identificación, anexar una fotografía y consignar una carpeta marrón tamaño oficio, en la cual se archivaran exámenes, justificativos, justificativos, constancias, informes, etc. El estudiante que no cumpla con esta norma, no se le publicará calificación. De los Laboratorios: * Es indispensable el uso de la bata durante las sesiones de práctica. * Es obligatorio traer a cada sesión de laboratorio el Manual de Prácticas de Citología. * Cada estudiante es responsable del laminario y del microscopio que se le asigne al inicio del curso. En caso de cualquier irregularidad apreciada en el material o en el microscopio, el estudiante debe notificarlo al profesor de inmediato. * Las sesiones de laboratorio comienzan a las 8:00 a.m. a.m. Los primeros 15 minutos se dedicaran a una evaluación corta, obligatoria, seguido de la sesión de práctica microscópica. La evaluación tendrá validez siempre y cuando el estudiante asista a la práctica, de lo contrario, se considerará como ausente y se anula la evaluación o viceversa. * Es obligatorio la asistencia a las prácticas. Aquel estudiante que tenga 25% o más de inasistencias no justificadas, perderá la materia sin derecho a reparación. * Los justificativos de las inasistencias deberán ser consignados a los profesores de la asignatura y en un lapso no mayor a las 72 horas luego de la falta. No se aceptaran justificativos justificativos fuera de este lapso de tiempo. tiempo. * El estudiante que pierda una sesión de laboratorio NO podrá recuperar dicha práctica. Solo se justificará la inasistencia, en aquellos casos en que se presenten constancias validas que expliquen la causa de la ausencia a la actividad. “Las notas de las evaluaciones rápidas de práctica no se recuperan”

De las evaluaciones: *La fecha de los exámenes parciales será publicada en cartelera junto con la programación. Cualquier modificación de fechas será publicada en cartelera con suficiente antelación, por lo que se recomienda consultar la cartelera externa CONSTANTEMENTE. * Las evaluaciones realizadas durante la sesión de laboratorio representan representan el 30% de la nota global de la asignatura. * Queda terminantemente prohibido el uso de celulares, cartucheras, reglas u otro material que no sea debidamente autorizado por las profesoras, durante las evaluaciones Del examen diferido: *El Estudiante tendrá derecho a realizar un (1) examen DIFERIDO, el cual se hará al final del curso, evaluándose el contenido programático diferido . Para ello deberá consignar a un profesor de la asignatura, el justificativo, debidamente sustentado, de su inasistencia, en un plazo máximo de 5 días hábiles posterior a la fecha de la evaluación que no fue presentada (Resolución del Consejo de Facultad de Farmacia y Bioanálisis de fecha 9/3/2012). El estudiante que no presente una justificación válida, perderá el derecho a presentar el examen diferido. .

Cátedra de Citología. Última actualización: febrero de 2013.

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NORMATIVA INTERNA DE LA ASIGNATURA “CITOLOGIA EXFOLIATIVA”

De las clases teóricas: * Los estudiantes regulares deben asistir a las clases teóricas y a las sesiones de laboratorio en el horario correspondiente a la sección asignada. a signada. El inicio de las clases es a las 8:00 a.m. * La programación de la asignatura, las calificaciones, el cronograma de evaluaciones y cualquier información de interés para el estudiante se publicará en la cartelera de la cátedra de citología. * Al inicio del curso y antes de iniciar las sesiones de laboratorio, cada estudiante deberá completar una planilla de identificación, anexar una fotografía y consignar una carpeta marrón tamaño oficio, en la cual se archivaran exámenes, justificativos, justificativos, constancias, informes, etc. El estudiante que no cumpla con esta norma, no se le publicará calificación. De los Laboratorios: * Es indispensable el uso de la bata durante las sesiones de práctica. * Es obligatorio traer a cada sesión de laboratorio el Manual de Prácticas de Citología. * Cada estudiante es responsable del laminario y del microscopio que se le asigne al inicio del curso. En caso de cualquier irregularidad apreciada en el material o en el microscopio, el estudiante debe notificarlo al profesor de inmediato. * Las sesiones de laboratorio comienzan a las 8:00 a.m. a.m. Los primeros 15 minutos se dedicaran a una evaluación corta, obligatoria, seguido de la sesión de práctica microscópica. La evaluación tendrá validez siempre y cuando el estudiante asista a la práctica, de lo contrario, se considerará como ausente y se anula la evaluación o viceversa. * Es obligatorio la asistencia a las prácticas. Aquel estudiante que tenga 25% o más de inasistencias no justificadas, perderá la materia sin derecho a reparación. * Los justificativos de las inasistencias deberán ser consignados a los profesores de la asignatura y en un lapso no mayor a las 72 horas luego de la falta. No se aceptaran justificativos justificativos fuera de este lapso de tiempo. tiempo. * El estudiante que pierda una sesión de laboratorio NO podrá recuperar dicha práctica. Solo se justificará la inasistencia, en aquellos casos en que se presenten constancias validas que expliquen la causa de la ausencia a la actividad. “Las notas de las evaluaciones rápidas de práctica no se recuperan”

De las evaluaciones: *La fecha de los exámenes parciales será publicada en cartelera junto con la programación. Cualquier modificación de fechas será publicada en cartelera con suficiente antelación, por lo que se recomienda consultar la cartelera externa CONSTANTEMENTE. * Las evaluaciones realizadas durante la sesión de laboratorio representan representan el 30% de la nota global de la asignatura. * Queda terminantemente prohibido el uso de celulares, cartucheras, reglas u otro material que no sea debidamente autorizado por las profesoras, durante las evaluaciones Del examen diferido: *El Estudiante tendrá derecho a realizar un (1) examen DIFERIDO, el cual se hará al final del curso, evaluándose el contenido programático diferido . Para ello deberá consignar a un profesor de la asignatura, el justificativo, debidamente sustentado, de su inasistencia, en un plazo máximo de 5 días hábiles posterior a la fecha de la evaluación que no fue presentada (Resolución del Consejo de Facultad de Farmacia y Bioanálisis de fecha 9/3/2012). El estudiante que no presente una justificación válida, perderá el derecho a presentar el examen diferido. .

Cátedra de Citología. Última actualización: febrero de 2013.

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EL SISTEMA BETHESDA 2001 CALIDAD DE LA MUESTRA  Satisfactoria Satisfactoria para evaluación: • Presencia o ausencia de componente celular endocervical y/o zona de transformación. transformación. Indicador de calidad: parcialmente obscurecido por sangre, inflamación, etc. •  Insatisfactoria Insatisfactoria para evaluación... (especificar la razón). CATEGORIZACIÓN GENERAL (opcional) • Negativo para lesión intraepitelial o malignidad. Anormalidad de células epiteliales (especificar si es en células escamosas o glandulares). • • Otro: células endometriales en mujeres de 40 años o más. INTERPRETACIÓN/RESULTADO Negativa para Lesión Intraepitelial o Malignidad  No existe evidencia celular de neoplasia.  Organismos: • Trichomonas vaginalis • Elementos micóticos de características características morfológicas compatibles con Candida. • Cambios de la flora vaginal sugestivos de vaginosis bacteriana. características morfológicamente compatibles con Actinomyces. • Bacterias de características • Cambios celulares compatibles con herpes simple.  Otros hallazgos no neoplásicos: • Cambios celulares reactivos reactivos asociados a: inflamación, radiación, dispositivo intrauterino. intrauterino. Células glandulares en mujeres con histerectomía. histerectomía. • • Atrofia Anormalidad en células epiteliales Células escamosas  Células escamosas atípicas Células escamosas con atipias de significado indeterminado indeterminado (ASC-US). (ASC -US). • • Células escamosas con atipias que no excluyen una lesión de alto grado (ASC-H).  Lesión intraepitelial escamosa escamosa de bajo grado (LSIL): VPH / NIC 1 / displasia leve. • Lesión intraepitelial escamosa escamosa de alto grado (HSIL):  • NIC 2-3 / CIS / displasia moderada y severa.  Carcinoma de células escamosas. Células glandulares: Células glandulares atípicas  • Endocervicales, endometriales, endometriales, glandulares (cuando (cuando no se puede precisar origen).  Células glandulares con atipias a favor neoplasia.  Adenocarcinoma endocervical in situ.  Adenocarcinoma • Endocervical, endometrial, extrauterino. Sin especificar. •  Otras neoplasias malignas (especificar) Otro  Células endometriales en mujeres de 40 años de edad o más (especificar si es negativa para lesión intraepitelial escamosa).

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PRUEBAS AUXILIARES Se considera útil proponer recomendaciones para pruebas adicionales que pueden ser complementarias para citología. Sugerencias para la detección del ADN del virus del papiloma humano es un ejemplo de prueba adicional que puede ser complementaria complementaria de citología. EVALUACIÓN AUTOMATIZADA Si la evaluación fue automatizada, especificar cuál fue el equipo utilizado y el resultado. NOTAS EDUCATIVAS Y SUGERENCIAS (OPCIONAL): Las sugerencias deben ser concisas y consistentes con los lineamientos de seguimiento publicados por las organizaciones internacionales (pueden incluirse referencias de publicaciones relevantes). Tomado de: Solomon D, Nayar R. El Sistema Bethesda para informar la citología cervical. Definiciones, criterios y notas aclaratorias. 2006. 2006. Edición en español. 2 nd edition. Springer-Verlang New York.

Nota: Dentro de la categoría Negativa para Lesión Intraepitelial o Malignidad se incorporan otros hallazgos no neoplásicos, no incluidos en la terminología del sistema Bethesda 2001: Células de hiperqueratosis y paraqueratosis. Células de metaplasia escamosa.

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PRÁCTICA Nº 1. TÉCNICAS CITOLÓGICAS OBJETIVOS: 1.- Describir las diferentes técnicas de toma de muestra para estudio citológico: vaginal, cervical y endometrial. 2.- Describir el proceso de fijación. 3.- Explicar el proceso de recepción, registro y coloración de las muestras citológicas con la técnica de Papanicolaou. 4.- Reconocer las partes de un microscopio de luz y su función respectiva. 5.- Utilizar correctamente un microscopio de luz. 1. TOMA DE MUESTRA PARA ESTUDIO CITOLÓGICO EN GINECOLOGÍA 1-1. Identifique en la figura 1, los diferentes sitios anatómicos de tomas de muestra para estudio citológico en el sistema reproductor femenino 1.2 Indique la utilidad de cada una de las técnicas de toma de muestra

UTILIDAD: Vaginal: ___________________________________________ ___________________________________________ ___________________________________________ ___________________________________________ ___________________________________________ ___________________________________________ ___________________________________________ Cervical: ___________________________________________ ___________________________________________ ___________________________________________ ___________________________________________ ___________________________________________ ___________________________________________

Figura 1. Ubicación anátomica de los diferentes sitios de toma de muestra para evaluación citológica en ginecología. Tomado de http://www.sciencephoto.com/image/ http://www.sciencephoto.com/image/91638/530wm/ 91638/530wm/C0027393C0027393_female_genitalia,_drawing_-SPL.jpg

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Endometrial: ___________________________________________ ___________________________________________ ___________________________________________ ___________________________________________ ___________________________________________ ___________________________________________

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http://info.cancerresearchuk.org/cancerstats/types/cervix/screening/briefhistory/a-brief-history-of-the-nhs-cervical-screening-programme

Figura 2. Ubicación anatómica de la región escamocolumnar: exocérvix (epitelio escamoso) y endocérvix (epitelio endocervical).

1.2 INSTRUMENTOS Y MATERIAL NECESARIO PARA LA TOMA DE MUESTRA GENITAL Identifique en la figura 3, los instrumentos y material necesario para la toma de muestra

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Figura 3. Instrumentos y material necesario para toma de muestra ginecológica.

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1.3. TÉCNICA DE TOMA DE MUESTRA PARA CITOLOGIA CONVENCIONAL: VAGINAL, CERVICAL Y ENDOMETRIAL Describa cada una de las técnicas de toma de muestra 1.3.1 Muestra vaginal. A. Pared lateral de la vagina: _____________________________________________________________ _____________________________________________________________ _____________________________________________________________ _____________________________________________________________ _____________________________________________________________ _____________________________________________________________ _____________________________________________________________ _____________________________________________________________ B. Fondo de saco vaginal: _____________________________________________________________ _____________________________________________________________ _____________________________________________________________ _____________________________________________________________ _____________________________________________________________ _____________________________________________________________ _____________________________________________________________ _____________________________________________________________

A

Figura 4. Toma de muestra vaginal. A: Pared lateral. B: fondo de saco. Tomado de Jimenez Ayala, 1985.

1.3.2. Muestra cervical (Exo-Endo).

1 2 3 Figura 5. Pasos para la toma de muestra de exo-endocérvix

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Tomado de: www.brooksidepress.org/Products/Military_OBGY...

Apoyandose en la figura 5, describa el proceso de la toma de muestra cervical (exo-endo): ________________________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________________________

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1.3.3 Muestra endometrial. .

___________________________________________ ___________________________________________ ___________________________________________ ___________________________________________ ___________________________________________ ___________________________________________ ___________________________________________ ___________________________________________ Figura 6. Toma de muestra endometrial Tomado de: http://www.fertilityindia.com/infertility_an_overview.php

2. FIJACIÓN 2.1. Explique el fundamento del proceso de fijación ________________________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________ 2.2. Tipos de fijadores ____________________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________ 2.3 Técnica de la fijación

Figura7. Fijación con aerosol: Se rocía generosamente el fijador sobre la lámina, aproximadamente a unos 15 a 20 cm de distancia. Se deja secar el extendido y se envía al laboratorio

Figura 8. Fijación en alcohol: Se sumergen las laminas en alcohol etílico al 98% inmediatamente despues de tomada la muestra, por un tiempo mínimo de 15 minutos o hasta ser coloreadas

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3. TÉCNICA DE COLORACIÓN DE PAPANICOLAOU 3.1.Colorantes y soluciones utilizados : _________________________________________________________________________________________________ _________________________________________________________________________________________________ _________________________________________________________________________________________________ _____________________________________________________________________________________________

Figura 9. Coloración de Papanicolaou.

3.2. Pasos para la Coloración de Papanicolaou Rellene el esquema que se presenta a continuación en la figura 10 con los colorantes y soluciones que se utilizan en la técnica de coloración de Papanicoloau, así como los tiempos empleados.

Figura 10. Pasos de la técnica de coloración de Papanicolaou.

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USO DEL MICROSCOPIO DE LUZ INTRODUCCIÓN Una de las herramientas básicas de un laboratorio es un microscopio de luz. Este tipo de microscopio recibe este nombre ya que permite el paso de luz no alterada a través de un sistema de lentes de manera de producir un campo brillante donde se pueden observar y estudiar células provenientes de tejidos diversos, microorganismos como bacterias, hongos, parásitos, etc. El microscopio debe estar provisto de un sistema óptico, mecánico y de iluminación, usado para amplificar y resolver detalles finos de un objeto microscópico Del microscopio es sumamente importante conocer:  Sus partes y la función de cada una de ellas.  Cómo manipular el sistema óptico para obtener el mayor aumento y resolución.  Cómo manipular el sistema de iluminación ya que la resolución de la imagen a su máximo aumento, depende de su adecuado manejo.  Cuidados y almacenamiento. PARTES DEL MICROSCOPIO El microscopio está compuesto de diferentes partes: mecánica, óptica y de iluminación. A) PARTE MECÁNICA 1. Base o pie: sirve de soporte al microscopio y suele tener el peso suficiente para darle estabilidad al aparato. 2. Columna: une la platina a la base y sostiene al condensador y al diafragma. 3. Tubo: sostiene al ocular y al objetivo y los mantiene separados por la distancia de trabajo correcta. 4. Brazo: continuación de la base o pie que permite movilizar al microscopio con la mano. 5. Platina: sostiene las láminas con la muestra colocadas sobre una perforación central que deja pasar la luz que viene del condensador. 6. Pinzas: sostienen a la lámina portaobjeto con firmeza sobre la platina. 7. Revólver: permite colocar en posición de trabajo, Figura 11. Partes del microscopio óptico. alternativamente, los objetivos que posee el microscopio. 8. Tornillo macrométrico: mueve la platina hacia arriba o hacia abajo, acercando o alejando rápidamente el objetivo a la distancia de trabajo aproximada con respecto a la muestra. 9. Tornillo micrométrico: permite mover lentamente y con precisión el tubo hacia la platina o viceversa. B) PARTE ÓPTICA 1. Oculares: compuestos por lentes que multiplican el aumento del objetivo. Están ubicados en la parte superior del tubo. Un buen ocular (10x) puede permitir un aumento total de 1000x. 2. Objetivos: compuesto por lentes de diferente aumento. Se encuentran ubicados en la parte inferior del tubo (sistema de revolver). Normalmente un microscopio de luz dispone de 4 lentes objetivo: 5X, 10X, 40X y 100X, independientes e intercambiables. Cada uno de ellos tiene un aumento dado, y su propósito es magnificar el objeto para producir una imagen real que se proyecta hasta el plano focal del ocular. Esta imagen, a su vez, es magnificada por el ocular para producir la imagen virtual, que es vista por el ojo de observador. El objetivo de 5X es el más corto de los cuatro, le sigue el de 10X, luego el de aumento de 40X. El más largo de todos es el objetivo de inmersión que tiene un aumento de 100X. El número del aumento lo tienen inscrito en su parte lateral. C) SISTEMA DE ILUMINACIÓN 1. Fuente de luz: se utiliza una lámpara que se inserta en la base o pie del microscopio. 2. Condensador: concentra el haz luminoso en la muestra. 3. Diafragma: regula la cantidad de luz que pasará a través de la muestra.

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EJERCICIO Señale en la figura 12 las partes del microscopio arriba mencionadas.

USO DEL MICROSCOPIO Figura 12. Partes de un microscopio óptico Para el buen uso del microscopio en el Laboratorio de Citología se deben tener en cuenta los siguientes aspectos. La posición del observador ante el microscopio debe ser cómoda y a una altura correcta. El mesón de trabajo debe estar limpio y libre de objetos. Cuando se transfiera el microscopio al mesón de trabajo, se debe sujetar fuertemente el brazo del microscopio con la mano derecha y se coloca la mano izquierda por debajo del instrumento. Si no se realiza de esta manera, las probabilidades de golpear contra el mesón o dejarlo caer se elevan. Bajo ninguna circunstancia se debe tomar el microscopio con una sola mano. Una vez finalizada la práctica, se limpian las lentes y se guarda siguiendo las mismas instrucciones de transporte.

Demostración. Observe con el microscopio de luz la muestra citológica que le suministre el profesor utilizando el objetivo adecuado. Para ello se procede de la siguiente manera: 1. Colocar el objetivo de menor aumento en posición de empleo y bajar la platina completamente. Si el microscopio se recogió correctamente en el uso anterior, ya debería estar en esas condiciones. 2. Colocar la muestra sobre la platina sujetándola con las pinzas metálicas. 3. Comenzar la observación con el objetivo de 10X 4. Para realizar el enfoque: a) Acercar al máximo el objetivo 10X a la preparación, empleando el tornillo macrométrico. Esto debe hacerse mirando directamente el objetivo y no a través del ocular, ya que se corre el riesgo de incrustar el objetivo en la preparación pudiéndose dañar alguno de ellos o ambos. b) Observando a través de los oculares, ir separando lentamente el objetivo de la preparación con el macrométrico y, cuando se observe nítido la muestra, girar el micrométrico hasta obtener un enfoque fino. Pasar al objetivo de 40X La imagen debería estar ya casi enfocada y suele ser suficiente con mover un poco el micrométrico para lograr el enfoque fino. Si al cambiar de objetivo se perdió por completo la imagen, es preferible volver a enfocar con el objetivo anterior y repetir la operación desde el paso 3. El objetivo de 40X enfoca a muy poca distancia de la preparación, por ello es fácil

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que se pueda incrustar en la muestra si se descuidan las precauciones anteriores. Si no se logra el enfoque verificar si la lámina está colocada correctamente

Figura 13. Recorrido sistemático al leer un extendido citológico MANTENIMIENTO Y PRECAUCIONES 1. Al finalizar el trabajo, se debe dejar el objetivo de menor aumento en posición de observación, asegurarse de que la parte mecánica de la platina no sobresale del borde de la misma. No dejar la lámina puesta sobre la platina y asegurarse de cubrirlo con la funda protectora para evitar que se ensucien y dañen las lentes. 2. Nunca hay que tocar las lentes con las manos. Si se ensucian, limpiarlas muy suavemente con gasa o, mejor con un papel de óptica. 3. No forzar nunca los tornillos giratorios del microscopio (macrométrico, micrométrico, platina, revólver y condensador). 4. El cambio de objetivo se hace girando el revólver y dirigiendo siempre la mirada a la preparación para prevenir el roce de los objetivos con la muestra. 5. Es conveniente limpiar y revisar siempre los microscopios al finalizar la sesión práctica y colocar el microscopio en su sitio, tomando con una mano el brazo del microscopio y la base con la otra.

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PRÁCTICA Nº 2. ELEMENTOS CELULARES DE ORIGEN EPITELIAL OBJETIVOS:  Describir las características histológicas y citológicas de la mucosa cervical normal.  Reconocer al microscopio las células que descaman de los epitelios que recubren la mucosa cervical normal: exocérvix y endocérvix.  Describir características histológicas y citológicas de la mucosa endometrial normal.  Reconocer al microscopio las células que descaman del epitelio endometrial  Conocer la importancia y localización de la región escamocolumnar A.- CARACTERÍSTICAS HISTOLÓGICAS DE LA MUCOSA CERVICAL NORMAL Está recubierta por dos epitelios: 1- Epitelio estratificado plano o escamoso no queratinizante 2- Epitelio glandular o monoestratificado cilíndrico Estos epitelios descansan sobre una membrana basal que los separa del tejido conjuntivo subyacente. 1. EPITELIO ESTRATIFICADO PLANO (ESCAMOSO) NO QUERATINIZANTE : recubre parte de la vulva, vagina, exocérvix y descansa sobre la membrana basal que lo separa del tejido conjuntivo subyacente. La función de este epitelio es protectora.

HISTOLOGÍA

CITOLOGÍA

Epitelio plano no queratinizante

Membrana basal Tejido conjuntivo

Figura 1. Corte histológico y representación esquemática de la histología y citología del epitelio estratificado plano no queratinizante. htt ://escuela.med. uc.cl/ a inas/Cursos/tercero/ atolo ia/fotos

Describa las características histológicas del epitelio estratificado plano o escamoso no queratinizante : ________________________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________________________

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Describa las características morfológicas de cada una de las células que descaman del epitelio estratificado plano Células superficiales: __________________________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ ________________________________________________ Células superficiales normales. 40X. Células intermedias: __________________________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ __________________________________________________________ _________________________________________________ Células intermedias normales. 40X.

Células profundas. 40X

Sincicio de células profunda. 10X

Células profundas aisladas: ___________________________________________ ___________________________________________ ___________________________________________ ___________________________________________ ___________________________________________ ___________________________________________ ___________________________________________ ___________________________________________ ___________________________________________

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Células profundas agrupadas en sincicios: ___________________________________________ ___________________________________________ ___________________________________________ ___________________________________________ ___________________________________________ ___________________________________________ ___________________________________________ ___________________________________________ ___________________________________________


Luego de revisar las láminas que le han sido suministradas, selecciona los campos donde puedas identifica las células superficiales, intermedias y profundas, dibújalas y coloréalas.

Células intermedias

Células superficiales

Células profundas aisladas

Sincicios de células profundas

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2. EPITELIO GLANDULAR MONOESTRATIFICADO CILINDRICO: recubre el canal endocervical y es llamado epitelio endocervical. Histológicamente está compuesto por una monocapa de células cilíndricas, que se encuentra separada del tejido conjuntivo (estroma) a través de la membrana basal. Inmediatamente por debajo de las células endocervicales encontramos las células de reserva. La función de este epitelio es secretora.

Figura 2. Corte histológico de la mucosa endocervical. Tomado de: http://escuela.med.puc.cl/paginas/cursos/tercero/anatomiapatologica/imagenes_ap/fotos1019-1027/1020.jpg

CARACTERÍSTICAS MORFOLÓGICAS DE LAS CÉLULAS DEL EPITELIO GLANDULAR a. Describa las células endocervicales dispuestas en panal: _______________________________________________ ________________________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________________________ _____________________________________________________________________________________________

Células endocervicales. Disposición en panal. 40X.

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b. Describa las células endocervicales dispuestas en empalizada: __________________________________________ ________________________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________

Células endocervicales dispuestas en empalizada. 40X

Luego de revisar las láminas que le han sido suministradas, selecciona los campos donde puedas identificar las células endocervicales dispuestas en panal y empalizada, dibújalas y coloréalas

Células endocervicales disposición en panal

Células endocervicales disposición en empalizada

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REGIÓN ESCAMOCOLUMNAR Definición e importancia ________________________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________________________ ______________________________________________________________________________________________

ENDOMETRIO Figura 3: Región escamocolumnar Tomado de: http://gabinetemedico.blogspot.com/2007_03_01_archive.html

B.-CARACTERÍSTICAS HISTOLÓGICAS DE LA MUCOSA ENDOMETRIAL. La cavidad uterina está recubierta por un epitelio glandular monoestratificado cúbico y se conoce como epitelio endometrial. Histológicamente está constituido por una monocapa de células cúbicas que se encuentra separada del tejido conjuntivo o estroma por la membrana basal. La función de este epitelio es secretora.

CARACTERÍSTICAS MORFOLÓGICAS DE LAS CÉLULAS DEL EPITELIO ENDOMETRIAL Describa las células endometriales: ________________________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________

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Células endometriales. 10X

Células endometriales. 40X

Luego de revisar las láminas que le han sido suministradas, selecciona los campos donde puedas identificar las células endometriales, dibújalas y coloréalas

Células endometriales

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En la siguiente figura dibuje los diferentes tipos celulares y complete las características morfológicas y tintoriales de cada una de las células

Profundas

Intermedias

Superficiales

Dibujo

Citoplasma: Forma

Cantidad

Tinción

Núcleo: Forma

Membrana

Cromatina

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Endocervicales

Endometriales


EJERCICIO En cada una de las imágenes identifique los tipos celulares señalados.

.

.

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PRÁCTICA Nº 3 ELEMENTOS DE ORIGEN NO EPITELIAL

OBJETIVOS: 1. Reconocer en los frotis cervicovaginales los diferentes elementos de origen no epitelial. 2. Establecer las situaciones fisiológicas y patológicas en las que podemos observar los diferentes elementos de origen no epitelial. ACTIVIDADES. ELABORAR UN ESQUEMA DE LOS ELEMENTOS DE ORIGEN NO EPITELIAL QUE SE PUEDEN ENCONTRAR EN LOS FROTIS CITOLÓGICOS DE CUELLO UTERINO

ELEMENTOS DE ORIGEN NO EPITELIAL Sangre: 1.Características morfológicas de los eritrocitos o sangre fresca: ____________________________________________________________________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________ 2. Características de la fibrina: ____________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________________________

________________________________________________________________________________

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Eritrocitos (círculos). 40X.

Fibrina en el fondo del frotis. 20X

Luego de revisar las láminas que le han sido suministradas, selecciona los campos donde puedas identificar los eritrocitos y la fibrina, dibújalos y coloréalos.

Células escamosas y eritrocitos

Células escamosas y fibrina

Leucocitos 3. Características morfológicas de los leucocitos polimorfonucleares (PMN): __________________________________ _____________________________________________________________ ___________________________________ ____________________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________________________ 4. Características morfológicas de los linfocitos: ______________________________________________________ ________________________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________

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Luego de revisar las láminas que le han sido suministradas, selecciona los campos donde puedas identificar los leucocitos, entonces dibújalos y coloréalos.

Leucocitos: PMN (círculos). Linfocitos (cuadrado). 40X

Células epiteliales y leucocitos

Histiocitos Características morfológicas de los histiocitos mononucleados: _________________________________________________ ___________________________________________ ________________________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________ Características morfológicas de los histiocitos multinucleados: ________________________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________

A (40X)

B (20X)

Histiocitos mononucleados (cuadrado). Histiocito binucleado (circulo). Histiocito con tres núcleos (hexágono). Histiocito gigante 24en el centro de la imagen B.


Luego de revisar las láminas que le han sido suministradas, selecciona los campos donde puedas identificar histiocitos, dibújalos y coloréalos.

Células epiteliales e histiocitos mononucleados

Células epiteliales e histiocitos multinucleados

Fibroblastos/fibrocitos Características morfológicas de los fibroblastos: ____________________________________________________ ____________________________________________________ ____________________________________________________ ____________________________________________________ ____________________________________________________ ____________________________________________________ ____________________________________________________ ______________________________________________ Fibroblastos/fibrocitos (flechas). 20X.

Espermatozoides. Características morfológicas de los espermatozoides: ____________________________________________________ ____________________________________________________ ____________________________________________________ ____________________________________________________ ____________________________________________________ ____________________________________________________ ____________________________________________________ ____________________________________________________

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Espermatozoides (circulos). 40X

los


Moco cervical Características morfológicas del moco cervical: ____________________________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________________________

Moco cervical (asteriscos). 10X.

Luego de revisar las láminas que le han sido suministradas, selecciona los campos donde puedas identificar los espermatozoides y el moco cervical dibújalos y coloréalos.

Células epiteliales y espermatozoides

Células endocervicales y moco cervical

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Organismos. Bacterias no patógenas: Lactobacilos o bacilos de Döderlein. Características morfológicas de los lactobacilos/bacilos de Döderlein: ________________________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________

Lactobacilos/Bacilos de Döderlein (círculos). 40X

Citólisis. Características citológicas de la citólisis:_______________________________________________________________ ________________________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________ Luego de revisar las láminas que le han sido suministradas, selecciona los campos donde puedas identificar adecuadamente los lactobacilos así como, las características de la citólisis, dibújala y coloréala.

Citólisis. Núcleo suelto de célula intermedia (circulo). Restos de citoplasmas de células intermedias (cuadrado). Lactobacilos en el fondo del frotis. 40X

Lactobacilos y citólisis.

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Leptothrix. Características morfológicas de los leptothrix:_______________________________________________________________________________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________ Luego de revisar las láminas que le han sido suministradas, selecciona los campos donde puedas identificar los lactobacilos, dibújalos y coloréalos.

Células epiteliales. Leptothrix.

Leptothrix en el fondo del frotis. 40X

Bacterias patógenas: Flora bacteriana. Características morfológicas de la flora bacteriana cocácea y flora bacteriana mixta: ________________________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________

Flora bacteriana mixta en el fondo del frotis. 100X

Flora bacteriana cocácea (fondo de frotis). 100X

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Luego de revisar las láminas que le han sido suministradas, selecciona los campos donde puedas identificar la flora bacteriana cocácea y mixta, dibújalas y coloréalas.

Células epiteliales. Flora bacteriana cocácea

Células epiteliales. Flora bacteriana mixta

Actinomyces sp.

Características morfológicas de Actinomyces sp: ________________________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________ Luego de revisar las láminas que le han sido suministradas, selecciona los campos donde puedas identificar Actinomyces sp, dibújalo y coloréalo.

Actinomyces sp (flecha). 20X.

Células epiteliales. Actinomyces sp.

Chlamydia trachomatis .

Describir los cambios celulares producidos por Chlamydia trachomatis: ________________________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________

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Luego de revisar las láminas que le han sido suministradas, selecciona los campos donde puedas identificar la vacuola de membrana reforzada sugestiva de infección por Chlamydia trachomatis, dibújala y coloréala.

Células epiteliales. Vacuola de membrana reforzada.

Vacuola de membrana reforzada (círculo) en célula metaplásica sugestiva de infección por Chlamydia trachomatis. 40X

Parásitos. Características morfológicas de Trichomonas vaginalis. ________________________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________ Luego de revisar las láminas que le han sido suministradas, selecciona los campos donde puedas identificar las características de Trichomonas vaginalis, dibújalas y coloréalas.

Células epiteliales. Trichomonas vaginalis.

Trichomonas vaginalis (círculos). 40X

Hongos. Características morfológicas de las hifas:___________________________________________________________________________________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________

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Características morfológicas de las levaduras:_____________________________________________________________________________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________

Hifas (flechas). Levaduras (círculos). 40 X Luego de revisar las láminas que le han sido suministradas, selecciona los campos donde puedas identificar las hifas y levaduras, dibújalas y coloréalas.

Células epiteliales. Hifas

Células escamosas. Levaduras

Virus: Características del virus del Herpes Simple tipo 2. ________________________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________________________ ______________________________________________________________________________________________

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Efecto citopático producido por el virus del Herpes Simple tipo 2 (Célula epitelial con multinucleación). 40X.

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EJERCICIO En cada una de las imágenes, identifique las células epiteliales y elementos no epiteliales señalados. ade las

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EJERCICIO En el siguiente cuadro, especifique las situaciones fisiológicas y patológicas en las que se pueden encontrar los diferentes elementos de origen no epitelial indicados: Elemento de origen no epitelial

Situación fisiológica

Eritrocitos

Leucocitos

Histiocitos

Fibroblastos/ fibrocitos

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Situación patológica


PRÁCTICA Nº 4 HALLAZGOS NO NEOPLÁSICOS. OBJETIVOS: 1. Mencionar los extendidos citológicos incluidos dentro de los hallazgos no neoplásicos. 2. Identificar al microscopio los cambios celulares reactivos a nivel nuclear asociados a la inflamación: megalocariosis discreta, picnosis, cariolisis, cariorrexis, binucleación, multinucleación, anisocariosis. 3. Identificar al microscopio los cambios celulares reactivos citoplasmáticos asociados a la inflamación: pseudoeosinofilia, queratinización en células escamosas o pseudoqueratinización, megalocitosis, vacuolización (halos perinucleares difusos, vacuolas de membrana reforzada, vacuolización difusa) 4. Describir los cambios celulares asociados a: reparación, radiación y por uso del dispositivo intrauterino (DIU) 5. Identificar al microscopio los hallazgos no neoplásicos asociados a atrofia: cariolisis, cariorrexis, picnosis, pseudoeosinofilia, vacuolización, autolisis. 6. Describir e identificar al microscopio otros hallazgos no neoplásicos no contemplados en el sistema Bethesda 2001: células de hiperqueratosis, células de paraqueratosis y células de metaplasia escamosa.

A. CAMBIOS CELULARES REACTIVOS ASOCIADOS A INFLAMACIÓN. Cambios nucleares. Megalocariosis discreta:____________________________________________________________________________ Picnosis: ____________________________________________________________________________________ Cariolisis: ___________________________________________________________________________________ Cariorrexis: __________________________________________________________________________________ Binucleación: ________________________________________________________________________________ Multinucleación: _____________________________________________________________________________ Anisocariosis: ________________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________________________

Células intermedias con megalocariosis discreta (flecha). 40x.

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Células profundas con cariorrexis (cuadrado) y picnosis (circulo). 20X.

Células escamosas con binucleación (círculos). 40X.

Célula intermedia con multinucleación. 40X.

Cambios citoplasmáticos. Pseudoeosinofilia: _____________________________________________________________________________ Queratinización en células escamosas o pseudoqueratinización: ___________________________________________ Megalocitosis: ________________________________________________________________________________ Halos perinucleares difusos: _____________________________________________________________________ Vacuolas de membrana reforzada: ________________________________________________________________

Célula intermedia con megalocitosis (flecha). 20X.

Células intermedias con pseudoeosinofilia. 40X.

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Célula metaplásica con vacuola membrana reforzada circulo . 20X.

Célula intermedia con halo perinuclear y pseudoeosinofilia (flecha). 40X.

de

Luego de revisar las láminas que le han sido suministradas, selecciona los campos donde puedas identificar los cambios nucleares y citoplasmáticos asociados a inflamación, dibújelos y coloréelos

Megalocariosis y binucleación en células escamosas.

Cariolisis, cariorrexis, picnosis en células profundas.

Células escamosas con megalocitosis.

Células escamosas con pseudoeosinofilia.

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Células epiteliales con vacuolización citoplasmática.

Células escamosas con halo perinuclear.

DESCRIBA: B. CAMBIOS CELULARES ASOCIADOS A REPARACIÓN. ________________________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________________________ C. CAMBIOS CELULARES ASOCIADOS A RADIACIÓN. ________________________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________________________ ______________________________________________________________________________________________ D. CAMBIOS CELULARES ASOCIADAS AL USO DEL DIU. ________________________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________________________

E. CAMBIOS CELULARES ASOCIADOS A ATROFIA. ________________________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________________________

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Luego de revisar las láminas que le han sido suministradas, selecciona los campos donde puedas identificar los cambios asociados a atrofia, dibújalos y posteriormente coloréalos.

Cambios celulares asociados a atrofia

Vaginitis atrófica

OTROS HALLAZGOS NO NEOPLÁSICOS NO INCLUÍDOS EN LA TERMINOLOGÍA DEL SISTEMA BETHESDA 2001: HIPERQUERATOSIS, PARAQUERATOSIS Y METAPLASIA ESCAMOSA. Describa las características morfológicas de: Células de hiperqueratosis: _______________________________________________________ _______________________________________________________ _______________________________________________________ _______________________________________________________ _______________________________________________________ _______________________________________________________ Células de hiperqueratosis (círculos). 20X.

º Células de paraqueratosis: _______________________________________________________ _______________________________________________________ _______________________________________________________ _______________________________________________________ _______________________________________________________ _______________________________________________________

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Célula de paraqueratosis (círculo). 20X


Células metaplásicas maduras: ________________________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________________________ Células metaplásicas inmaduras: ________________________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________________________

Células metaplásicas inmaduras. 20X.

Células metaplásicas maduras. 20X.

Luego de revisar las láminas que le han sido suministradas, selecciona los campos donde puedas identificar las células de hiperqueratosis, paraqueratosis y metaplasia escamosa, entonces dibújalas y coloréalas.

Células escamosas y células de paraqueratosis

Células intermedias, superficiales y células de hiperqueratosis

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Células escamosas y células metaplásicas

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EJERCICIO En cada una de las imágenes, identifique los tipos de células así como los cambios celulares reactivos señalados.

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PRÁCTICA N° 5: ORGANISMOS OBJETIVOS: 1. Mencionar los organismos involucrados en las infecciones genitales. 2. Describir y reconocer al microscopio los cuadros citológicos de las infecciones genitales en frotis coloreados con Papanicolaou: tricomoniásis, micosis, infección de origen bacteriano, vaginosis bacteriana, actinomicosis, cervicitis herpética y clamidiásica. Mencionar los organismos que ocasionan infecciones genitales: ________________________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________________________ _____________________________________________________________________________________________ Citología de las infecciones genitales. Características citológicas de la infección tricomoniásica : ________________________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________________________ _____________________________________________________________________________________________

Trichomonas vaginalis (círculo) y células intermedias con pseudoeosinofilia. 40X.

Imágenes en perdigón (círculos). 20X.

Célula intermedia con pseudoeosinofilia y halo perinuclear. 40X.

Flora bacteriana cocácea (imagen de vidrio molido en el fondo de frotis). 40X.

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Luego de revisar las láminas que le han sido suministradas, selecciona los campos donde puedas identificar las características citológicas que indican infección tricomoniásica, dibújalas y coloréalas

Células escamosas. Trichomonas vaginalis.

Células escamosas. Signos indirectos de tricomoniásis.

Características citológicas de la infección micótica ________________________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________

Hifas (flecha). 20X.

Levaduras (círculos). 40X.

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Luego de revisar las láminas que le han sido suministradas, selecciona los campos donde puedas identificar las características citológicas que indican infección micótica, dibújalas y coloréalas

Células escamosas. Hifas.

Células escamosas. Levaduras.

Cambios en la flora vaginal sugestivos de vaginosis bacteriana: Características citológicas de la vaginosis bacteriana ______________________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________

Flora cocácea en el fondo y ausencia de elementos inflamatorios. 20X.

Célula clave (flecha). 40X.

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Luego de revisar las láminas que le han sido suministradas, selecciona los campos donde puedas identificar las características citológicas que indican vaginosis bacteriana, dibújalas y coloréalas.

Células escamosas. Células claves.

Células escamosas. Cambios en la flora vaginal sugestivos de vaginosis bacteriana.

Bacterias morfológicamente consistentes con Actinomyces sp Características citológicas de la infección actinomicótica: ________________________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________________________ _____________________________________________________________________________________________

Actinomyces spp (flecha).

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Cambios celulares consistentes con virus del herpes simple 2 (VHS): Características citológicas de la infección herpética: ________________________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________

Cambios celulares consistentes con virus del herpes simple 2

OTROS ORGANISMOS: Chlamydia trachomatis: Cuadro citológico de la infección clamidiásica: ________________________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________ Luego de revisar las láminas que le han sido suministradas, selecciona los campos donde puedas identificar las características citológicas de la infección clamidiásica, dibújalas y coloréalas.

Cambios celulares ocasionados por Chlamydia trachomatis (Vacuola de membrana reforzada)

Células metaplásicas con vacuolas de membrana reforzada sugestiva de infección por Chlamydia trachomatis.

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Infecciones bacterianas: Cuadro citológico de las infecciones bacterianas: ________________________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________________________ _____________________________________________________________________________________________

Flora bacteriana cocácea en el fondo de frotis. 100X.

Flora bacteriana mixta en el fondo de frotis. 100X.

Luego de revisar las láminas que le han sido suministradas, selecciona los campos donde puedas identificar las características citológicas de la infección bacteriana, dibújalas y coloréalas.

Células escamosas. Flora bacteriana cocácea

Células escamosas. Flora bacteriana mixta

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Manual Prácticas Citología 1ra Parte NLIM

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