Guía de Cultivo Cultivo para los asistentes al Taller del Dr. Hippie’s << Versión Virtual >> Lo que normalmente se conoce como Hongo es Hongo es en realidad el órgano reproductor reproductor del mismo: la Seta. Seta. En el curso hemos hablado que los seres pertenecientes pertenecientes al denominado Reino Fungi carecen de clorofila y pueden vivir vivi r sobre materia orgánica orgánica en descomposición. Los hongos en general son organismos Eucariotas, Eucariotas , es decir que sus células poseen material genético. Están formados por filamentos celulares llamados Hifas que Hifas que al agruparse forman el Micelio y Micelio y el mismo a su vez desarrolla desarrolla el cuerpo fructífero o Carpóforo, Carpóforo, más conocido como Seta. Luego la seta desarrollará Esporas que Esporas que se propagarán propagarán para reproducir otra vez el ciclo del hongo, las esporas se encuentran en el sombrero de la seta y en general cuando las condiciones ambientales son las correctas las esporas germinan formando células alargadas llamadas Hifas anteriormente mencionadas, las cuales ramifican formando una masa algodonosa de color blanco puro el cual conocemos como Micelio (al que debemos proteger de bacterias y otros microorganismos) microorganismos) correspondiente a la fase la fase vegetativa vegetativa del cultivo. Cuando las condiciones sigan siendo las adecuadas el micelio miceli o formará los Primordios Primordios (seta pequeña, fase pequeña, fase reproductiva) reproductiva) los cuales están envueltos envueltos por un velo universal; universal; cuando éste éste se desarrolla, la membrana se rompe dando lugar al pie de la seta o volva. volva. La parte fértil de la seta (donde se encuentran almacenadas sus esporas) es su sombrero, sombrero , el mismo se encuentra cubierto también por un velo que se rompe dando lugar al anillo. anillo. Cuando la seta está madura, dispersa Esporas y muere. Esa es la estructura morfológica de un ejemplar de Cubensis.
Guía de Cultivo Cultivo para los asistentes al Taller del Dr. Hippie’s << Versión Virtual >> Lo que normalmente se conoce como Hongo es Hongo es en realidad el órgano reproductor reproductor del mismo: la Seta. Seta. En el curso hemos hablado que los seres pertenecientes pertenecientes al denominado Reino Fungi carecen de clorofila y pueden vivir vivi r sobre materia orgánica orgánica en descomposición. Los hongos en general son organismos Eucariotas, Eucariotas , es decir que sus células poseen material genético. Están formados por filamentos celulares llamados Hifas que Hifas que al agruparse forman el Micelio y Micelio y el mismo a su vez desarrolla desarrolla el cuerpo fructífero o Carpóforo, Carpóforo, más conocido como Seta. Luego la seta desarrollará Esporas que Esporas que se propagarán propagarán para reproducir otra vez el ciclo del hongo, las esporas se encuentran en el sombrero de la seta y en general cuando las condiciones ambientales son las correctas las esporas germinan formando células alargadas llamadas Hifas anteriormente mencionadas, las cuales ramifican formando una masa algodonosa de color blanco puro el cual conocemos como Micelio (al que debemos proteger de bacterias y otros microorganismos) microorganismos) correspondiente a la fase la fase vegetativa vegetativa del cultivo. Cuando las condiciones sigan siendo las adecuadas el micelio miceli o formará los Primordios Primordios (seta pequeña, fase pequeña, fase reproductiva) reproductiva) los cuales están envueltos envueltos por un velo universal; universal; cuando éste éste se desarrolla, la membrana se rompe dando lugar al pie de la seta o volva. volva. La parte fértil de la seta (donde se encuentran almacenadas sus esporas) es su sombrero, sombrero , el mismo se encuentra cubierto también por un velo que se rompe dando lugar al anillo. anillo. Cuando la seta está madura, dispersa Esporas y muere. Esa es la estructura morfológica de un ejemplar de Cubensis.
En esta guía veremos la estructura: estructura: Cultivo de Interior
ESPORAS
MICELIO
SETAS condiciones ambientales
Jeringas
TRANSFERENCIA DE GRANO COLONIZADO
MICELIO
SETAS
Etapa de incubación
Etapa de Fructificación
(fase vegetativa)
(fase reproductiva)
Teniendo en cuenta que de Esporas de Psilocybe Cubensis podemos obtener nuestro propio micelio, para ello (a partir de frascos que contengan Grano esterilizado en Olla a presión) presión) respetando respetando las determinadas condiciones ambientales ambientales que hacen al cultivo, antes de insertar el hongo en el grano, grano, no olviden que las esporas deben estar estar siempre hidratadas en un medio liquido antes liquido antes de ser introducidas en dicho grano: a dicha acción le decimos Inoculación. Inoculación. Obtendremos así nuestro micelio nuestro micelio –color –color blanco inmaculado- en la Etapa de Incubación (luego de haber introducido las esporas germinadas e hidratadas en el grano esterilizado o de
haber transferido grano colonizado). Finalmente en la Etapa de Fructificación mezclaremos Fructificación mezclaremos el micelio proveniente del grano colonizado coloni zado obtenido en la fase anterior, anterior, con con un nutritivo nutriti vo sustrato determinado (vermiculita pasteurizado); haciendo nuevamente nuevamente esterilizada y estiércol de caballo/ humus de lombriz pasteurizado); hincapié en las condiciones ambientales (temperatura (temperatura- humedad- luz-ventilación) agregando luz para luz para estimular la orientación del crecimiento de la seta y ventilando a ventilando a tiempo de forma recurrente, recurrente, en muy pocos días cosecharemos nuestros hongos mágicos . De los cuales obtendremos obtendremos esporas para reproducir nuevamente y conservar la genética. Dependiendo de la ingesta del usuario se puede optar por setas frescas o secas (secado, proceso final) Dichoso éste tipo de cultivo de ciclo extremadamente Corto el cual se caracteriza principalmente principalmente por ser muy Productor por lo que hablaremos de como conservarlos. Usted debe saber antes de sembrar sus honguitos que este tipo de cultivo pone a prueba el ingenio del cultivador principalmente, la manera aquí transmitida es tan solo una de las tantas tant as formas que existen de cultivar setas en casa. Usted no debe frustrarse por los resultados fallidos sino más bien perseverar para obtener óptimos resultados. Existen distintas variedades dentro variedades dentro de la familia de los P. Cubensis que se diferencian entre ellas en ciertos aspectos ya que proceden de distintos puntos geográficos o geográficos o de cruces realizados en laboratorios. laboratorios. Destacando las distintas apariencias morfológicas que morfológicas que los caracteriza caracteriza entre sí. Muchos de nosotros tenemos en cuenta al momento de elegir una fungigenética los efectos energéticos, energéticos, mentales, corporales y visuales que ésta ha de producirnos en el momento momento de la sesión y eso es muy importante importante pero lo ideal sería clasificarlas por su nivel de dificultad de cultivo. Siendo así, estimaremos obtener obtener un micelio rápido en cuanto a poder de colonización y resistente a las fluctuaciones que generen contaminaciones (en ambas etapas). Otras opiniones podrían ser: la l a productividad que rinda la variedad y la cantidad de fluyes, fl uyes, el tamaño de los sombreros según el ejemplar va a variar el tamaño de los sellos (prints) obtenidos. La Potencia Potencia de la seta s eta en general al momento de la sesión y la ingesta de de la seta en grs. secos. secos. Su Doctor les recomienda ser prolijos ser prolijos al momento de clasificar las variedades variedades,, sugerimos siempre etiquetar todo con nombres nombres y fechas eso les le s va ayudar a mantener y estudiar cierta genética ganando experiencia y criterio de cultivo. Teniendo en cuenta el tiempo del proceso a corto plazo siempre optaremos por una variedad rápida en fuerza de colonizado. Podríamos colonizado. Podríamos decir que las mismas ayudan a los lo s principiantes ya que los mismos pueden intentarlo intentarlo una y otra otra vez y descartar los frascos los frascos contaminados contaminados que que no tardan en aparecer, aparecer, desechándolos … pero si los iniciados i niciados perseveran aseguramos aseguramos que por estadística, estadística, siempre y cuando se respete lo básico del procedimiento , obtendrán al menos un frasco 100% colonizado. Pueden comenzar observando la cepa B+, B+akm , Thai Pink Buffalo y Cambodian.
Materiales que se consideran útiles para el cultivo de setas en casa: * Sello de Esporas (print) o vial con Honey Tek. * Glovebox o C.A.I * Olla a Presión (elemento indispensable para el cultivo óptimo de Setas hogareñas). * Jeringas. * Cinta hipoalergénica o microporosa. * Frascos de vidrio con tapa. * Papel Aluminio. * Calentador de Pecera. * Grano (Arroz Integral, Trigo Orgánico, Maíz, Centeno, Cebada, Avena, etc.) Tengan en cuenta que granos con más de 3cm de espesor no agarra (porotos de soja no sirve). * Guantes estériles descartables, cofia, barbijo. * Alcohol, Lavandina, desinfectante antibacterial en aerosol y productos que permitan tener nuestra zona de trabajo completamente limpia. * Bandejas de aluminio o tuppers rectangulares. * Vermiculita. * Bosta de Caballo o Humus de Lombriz (opcional). * Algunos tuppers grandes o tachos de pintura o cualquier tiesto que nos sirva para improvisar una Incubadora/ Fructificadora. * Luz bajo consumo. *Coolers de pc (si optamos por ventilación automática). Nota: Primero nos preocuparemos por conseguir todos los materiales y elementos necesarios para iniciar nuestro cultivo, al menos los indispensables para llevar a cabo la primer etapa. Eso nos ayudará a no desperdiciar ni echar a perder materiales a futuro y a obtener resultados óptimos. Pueden ingeniarse reemplazando materiales y elementos aquí mencionados por otros que tengan en sus hogares si es que con ellos obtienen el mismo resultado. En el caso de la Olla a presión recomendamos no prescindir de ella.
Para cultivar Setas necesitamos tener las Esporas correspondientes (esporas de Psilocybes Cubensis). Así como una planta nace de una semilla, las setas surgen de las Esporas, las mismas están en el sombrero de los honguitos mágicos. Así como una semilla debe de ser germinada antes de ser plantada en la tierra las esporas deben de si o si hidratarse siempre en un medio liquido antes. Y el formato en el que vienen dichas Esporas es por lo general en un Sello, también conocido como Print. Lo particular de esto es que, los Sellos de Esporas se Contaminan! por lo que recomendamos
que si alguno de ustedes obtiene uno para iniciarse en el cultivo, no lo abran porque sí porque no podemos identificar un sello contaminado a simple vista y de suceder esto de seguro la contaminación va aparecer en el proceso de cultivo. Tampoco olviden que las esporas son microscópicas y que tan solo basta con que germine una para generar micelio, por lo que nuestras posibilidades son muchas. E s o ra s v is ta s d es de un mi cr os co i o.
Sel lo de e s or as Pr int
Honey Tek Dijimos que las Esporas siempre deben de ser hidratadas en un medio liquido previamente, bueno el Honey al ser una mezcla nutritiva (agua con miel orgánica) permite que las esporas germinen y crezcan obteniendo ventajas por sobre las Esporas que sean hidratadas en cualquier otro medio liquido valga la redundancia, como por ejemplo la solución fisiológica. Por qué? bueno porque las esporas que se encuentren ya germinadas en agua miel, se convirtieron en "Micelio liquido". El micelio aparece en el grano 48hs después de plantar el honey tek , mientras qe desde Esporas tarda mucho más.
V ia le s c on H on e T ek
La Caja de Aire Inmóvil (CAI) es una de las herramientas más útiles para un cultivo exitoso. Se trata de una caja de plástico o vidrio con dos aberturas por donde pueden pasar los brazos. Esto nos provee de un espacio cerrado, protegido de partículas y corrientes de aire, aumentando la higiene en los distintos procesos del cultivo. La Glovebox, por otro lado, es una versión avanzada de la CAI, a la que se le agregan guantes en las aberturas, consiguiendo un espacio totalmente cerrado.
La CAI y la Glovebox son los lugares más seguros para hacer sellos de esporas, jeringas cargadas con las mismas, inoculaciones, transferencias de micelio y cualquier procedimiento que requiera higiene.
Olla a Presión La Esterilización es un proceso a través del que se puede lograr la destrucción total de los microorganismos viables presentes en un determinado material. Este procedimiento es de gran utilidad para el acondicionamiento de instrumental (para las agujas de las jeringas por ejemplo), preparación de medios de cultivo para diferentes propósitos, entre otros del campo farmacéutico. Existen diversos métodos de esterilización. La selección del método aplicar en cada caso está determinada por el tipo de producto a esterilizar. Por ahora nos centramos en los más accesibles a nosotros ya que disponemos de estos materiales o herramientas hogareñas. El calor es considerado como el método de esterilización por excelencia siempre y cuando el material a esterilizar soporte altas temperaturas sin sufrir ningún tipo de daño. Esterilización con Olla a Presión (elemento único e indispensable para el cultivo óptimo de Setas, la experiencia nos dice que sin olla a presión a la larga o la corta falla, es decir que cultivar sin olla a presión para el criterio del Doctor, va en suerte). Detenernos aquí es importante. La olla a presión es nuestra herramienta imprescindible para
el cultivo de setas en casa. Paso a explicarles las características principales de la Olla a Presión para que lo tengan en cuenta al momento de adquirir una o para que verifiquen que su olla a presión esté en condiciones adecuadas. - Les recomiendo conseguir una Olla a Presión de marca Nacional, para conseguir fácilmente los repuestos en caso de ser necesario. Como por ejemplo la marca "Marmicoc" (Argentina). - Lo más importante de la olla es la goma que cubre la circunferencia de la tapa, esa goma negra debe estar NUEVA. Si está machucadita o lo que sea la tienen que cambiar. - Otra pieza sumamente importante es la válvula de presión, por ahí sale el vapor de la olla. Sin ella, la olla a presión no sería a presión. - También tengan en cuenta el puntito rojo que ven en la tapa, esa es la válvula de seguridad. Cuando la Olla a Presión está en funcionamiento parece que va a explotar, pero pierdan cuidado ésta puntito rojo evita cualquier accidente doméstico. - Por último para el cultivo de setas esterilizamos frascos de vidrio y es de SUMA importancia tener una base para la olla, para que no revienten los frascos. Puede ser el complemento de la olla como las imágenes o pueden remplazarla por alguna base metálica o trapos.
Imágenes de Olla a Presión
Cómo preparar una Jeringa de ESPORAS desde Sello de Esporas:
Las jeringas nos permiten mantener nuestras esporas hidratadas y listas para ser inoculadas. Para hacerlas debemos, utilizando una hoja de bisturí o cuchara lavada con alcohol, raspar alrededor de 1/4 de sello dentro de un frasco estéril de plástico (todo se consigue en la farmacia), llenarlo con 100ml de solución fisiológica y mezclar absorbiendo y expulsando la solución con la jeringa varias veces. Luego preparar tantas jeringa como solución de esporas tengamos disponible y guardarlas en la heladera. (100ml = 10 jeringas, en la heladera duran 1 año). Se recomienda hacer las jeringas dentro de una CAI o Glovebox.
Desde Vial de Honey Tek:
TURBOTARROS Los Turbotarros son los frascos óptimos para nuestro cultivo. Si bien se puede generar micelio también en bolsas para horno de muy buena calidad, el Doctor prefiere los tarros de vidrio con sus respectivas tapas. Los Turbotarros poseen dos orificios (el segundo es opcional). Una perforación principal del tamaño de una moneda pequeña en el centro de la tapa (a ésta perforación la llamamos Puerto de Intercambio Gaseoso) y otra perforación mucho más chica adjunta (la cual lleva el nombre de Puerto de Inoculación). Puerto de Intercambio de gases: (vamos a rellenar dicho orificio con un material que se llama vellón que es el relleno de los ositos de peluche, No es algodón) pero también podemos optar por simplemente cubrir dicha perforación con un pedazo de cinta hipoalergénica o microporosa. Este puerto es de suma importancia ya que por el mismo ingresará el oxígeno que el micelio necesita para crecer.
Puerto de Inoculación: (vamos a sellar dicha perforación con un poco de silicona de alta temperatura o fastix ). Éste puerto es opcional ya que podemos inocular por el orificio central . Recuerden que una vez que tengamos nuestros Turbotarros listos (antes de inocular, es decir insertarles las Esporas) vamos a proceder a llenarlos con el grano seleccionado y dichos frascos van a ir a esterilizarse en la olla a presión pero antes vamos a cubrir sus tapas con
Papel Aluminio para que no se mojen ninguno de los puertos con el agua de la olla.
PREPARACIÓN DEL GRANO El primer sustrato que vamos a preparar va a ser nuestro grano ( Arroz Integral Orgánico , Trigo Orgánico , Maíz , Centeno, Cebada, Avena, etc.) Tengan en cuenta que granos con más de 3cm de espesor no agarra (porotos de soja no sirve). Sea cual sea el que escojan sepan que cada uno tiene una forma de cocción particular, determinada para el cultivo de Cubensis. El grano estará en remojo varias horas para hidratarse, luego será librado de pesticidades y bacterias para finalmente ser cocido en agua a fuego directo; una vez que llegue a su punto de cocción determinado (generalmente al dente) pasaremos a colarlo y dejarlo enfriar controlando su humedad interna (extendido sobre una fuente o cartón). Una vez que tengamos listo el grano (es realmente muy importante que no se pegotee y esté con la
humedad en su justa medida) procederemos a llenar nuestros turbotarros y los llevaremos a esterilizar para luego inocularlos. La preparación del grano como sustrato principal es una de las partes más importante del proceso de cultivo. Receta Arroz Integral Orgánico (Yamaní) Llenar media olla de agua y calentar a fuego fuerte hasta el hervor. Meter el arroz y esperar a que el agua vuelva a hervir. Luego bajar el fuego a mínimo y dejar cocinar el arroz 10 minutos. Debe quedar al dente. Una vez cumplidos los 10 minutos, colamos el arroz y lo enfriamos con agua para cortar la cocción. Después lo esparcimos en una bandeja o pizzera y lo dejamos reposar 24hs sobre la mesa, sin cubrirlo. Una vez finalizado el último paso, el arroz está listo para ser esterilizado.
Esterilización del Arroz en Olla a Presión: 1hs (contando a partir del primer pitido de la olla).
Receta Trigo Orgánico La ventaja del Trigo es que es un grano que se agita muy fácilmente a diferencia del arroz y es un grano que para el criterio del Doctor coloniza mucho más rápido. Una vez que se inocule el trigo recomiendo que se agite el tarro sobre sí mismo y en forma Circular. Calcular cuánto grano vamos a necesitar primero. 6 tarros tamaño tipo mermelada = 500grs aprox. Y seleccionarlo: Verter el grano en seco dentro de un recipiente, llenarlo de agua y Retirar TODO lo que flote, principalmente los granos que hayan quedado en la superficie, esos No nos servirán.
Limpiar los granos. Lavarlos y cambiar el agua, repetir la operación varias veces hasta que el agua quede cristalina.
Una vez limpios los granos, ponerlos en remojo llenando el recipiente con agua muy caliente (esto es para matar al grano, muchas veces sucede que llegan a germinar en el agua, transcurridas varias horas). Se tapa el recipiente con algo para que no se le salga el calor del agua caliente. Se deja hidratar el grano de trigo de 18 a 24hs y hasta 48hs.
Después de estar 24hs remojándose, el agua estará infectada de bacterias; (lo más probable es que esa agua huela a fermentado esto es muy bueno ya que han germinado todas las esporas y levaduras que nos podrían estropear el cultivo) así que vamos a tirar esa agua y lavar los granos de nuevo, hasta que el agua quede cristalina nuevamente (Éste paso es muy importante. Por favor no usen el agua infectada de bacterias por razones lógicas, la esterilización no es completa, siempre quedan bacterias termófilas resistentes al calor, esterilizamos el trigo un poco más de tiempo en la olla a presión ya que es un grano más duro (a diferencia del arroz) para aturdir/ debilitar esas bacterias y “abrir” una nueva ventana de tiempo para que nuestro micelio colonice el medio antes que ellas puedan establecerse, entre menos bacterias introduzcamos a nuestros tarros de grano mejor.
Con los granos limpios y lavados procedemos a ponelos en una olla con agua del grifo y que el agua cubra los granos de trigo 1cm aprox. por encima de éstos. Hervir los granos a fuego alto, una vez que rompa hervor bajar el fuego y contar 7minutos.
Una vez cocidos los granos, ponerlos en un colador, escurrirlos bien y Extenderlos ¡¡PERO NO LOS ENFRÍES CON AGUA FRÍA!! (no es necesario lavar en éste paso ya que el Trigo no suelta almidón como el arroz) Al extenderlos se secan más rápido. (Nosotros queremos secar los granos por fuera porque la humedad que nos interesa ya está dentro de los granos, así que vamos a secar el exterior de los granos extendiéndolos… como están calientes (porque previamente los hervimos 10minutos) la humedad del exterior de los granos se evapora rápido). Es importante ir controlando la humedad del grano en éste paso, por lo que dejaremos los granos de trigo extendidos durante 2horas aprox.
NOTA : “Truco de la Servilleta de Papel para verificar la Humedad del grano”:
tomar un puñado de granos y ponerlos dentro de una servilleta de papel, envolviéndolos tipo bollito. Apretar ligeramente con las manos. Abrir la servilleta y si está mojada es que todavía
le falta. Al cabo de un tiempo, repetir la operación y en cuanto la servilleta se muestre seca el grano ya está listo.
Por último procederemos a llenar los frascos hasta sus 3/4 partes de capacidad con los granos de trigo listos para ser esterilizados. Esterilización del Trigo en Olla a Presión: 1hs20min (contando a partir del primer pitido de la olla).
Receta Maíz El maíz es también otra alternativa de grano, destacado por ser un poco más duro que los dos anteriormente mencionados. La ventaja que tiene es que no absorbe la humedad que exuda ni tampoco sustenta mucha humedad extra, y al ser un grano de mayor diámetro también es muy fácil de agitar y no se apelmaza como sí podría suceder con el Arroz. El procedimiento de preparado es muy similar al del trigo. Primero debemos de hidratar el grano, en un recipiente colocamos el maíz le tiramos agua muy caliente y lo dejamos en reposo durante 24hs. (hidratación de endoesporas y fermentación de bacterias, no se preocupen que el olor a fermentación es normal). Transcurrido ese tiempo procederemos a colarlo y lavarlo muy bien tantas veces sea necesario hasta que el agua salga cristalina.
Luego debemos cocinarlo. Colocando el maíz previamente hidratado en una cacerola con un mínimo de agua, la suficiente como para que alcance a sumergir el grano. Lo dejaremos cocinar a fuego máximo durante 30minutos y agregaremos agua caliente durante la cocción si ha de ser necesario.
Una vez que apagamos el fuego (en este paso para el maíz es indistinto el chorro de agua fría post cocción), lo pasamos a un colador y le escurrimos muy bien toda el agua. Por último tenemos que enfriarlo y extenderlo sobre una plancha de cartón para que ayude con la absorción de humedad sobrante. Como mencionamos anteriormente es sumamente importante controlar la humedad interna del grano, tengan en cuenta que el grano tiene que estar frio y relativamente seco antes de llenar los frascos porque mientras esté esterilizándose en la olla a presión el mismo va a desprender líquido y ese líquido finalmente quedará atrapado en nuestro frasco generando exceso de condensación, que es precisamente lo que no queremos. (el exceso de condensación genera una pronta contaminación llamada vinagreta). Reposo: poco más de dos horas extendido serán suficientes para éste grano.
Transcurrido ese tiempo el grano de maíz ya está listo para ser esterilizado. Esterilización del Maiz en Olla a Presión: 1hs15min contando a artir del rimer itido de la olla .
NOTA/ Tips: Existen aditivos nutricionales que pueden ser agregados en el grano al momento de su preparación, cada uno adicione lo que crea necesario si así lo desea. Como aditivos tenemos las bebidas isotónicas, cerveza sin alcohol para agregarle algo de malta (preferible el extracto de malta puro), miel (una cucharadita al momento de la cocción del grano) o yeso (desolidificado) el cual se recomienda colocar en el momento del macerado, cuando el grano está en remojo (25grs de yeso de ferretería desolidificado por cada kilo de grano). Es importante que tan solo opten por una de las alternativas en aditivos. Todos los aditivos aquí mencionados confieren en algún punto seguramente y es aporte nutritivo para el grano. (*) yeso desolidificado: conseguimos yeso en cualquier ferretería, le agregamos agua y lo
hacemos sólido, una vez seco nos encargamos de romper ese cascote de yeso hasta obtener un polvillo del mismo. Eso es yeso desolidificado, si no lo usamos así nos puede ocasionar
muchos grumos al momento del macerado del grano. Se recomienda utilizar el yeso desgranado cuando el grano está hidratándose durante esas 24hs de remojo.
TURBOTARROS: Procederemos a llenarlos hasta ¾ partes de Capacidad (ya que eso nos ayudará para que a futuro podamos agitar los frascos como corresponde, y a su vez observar la superficie del grano y el crecimiento del micelio). También vamos a procurar tapar las tapas de los mismos con papel aluminio y alguna cinta o banda elástica, antes de ser esterilizados para que el agua de la olla no moje los filtros de las tapas.
ESTERILIZACIÓN Para Esterilizar nuestros frascos en la Olla a Presión vamos a tener en cuenta algunas sugerencias. Primero, antes de meter los frascos dentro de la Olla tenemos que ponerle a la misma una base metálica (puede ser el complemento de la olla o algún posa pava metálico) para evitar que los frascos - al tocar el vidrio el calor directo- revienten. También pueden usar trapos o toallas de base pero la desventaja de la tela es que te quita espacio en la olla (si utilizan tela que no tenga ninguna impresión ni tinta porque puede desteñir y mancharles toda la olla). Después tenemos que acomodar los frascos dentro, por ejemplo en una Olla de 9Lts entran 8 frascos de vidrio tamaño mermelada, teniendo en cuenta que 7 van a estar parados y uno acostado (no se preocupen el tarro que está arriba acostado se va a esterilizar igual de bien que los otros) entonces, en una olla de menor capacidad entran menos frascos. Respecto a estos frascos no olviden que es de suma importancia que la turbotapa este protegida. ¿Cuánta agua le pongo a la Olla? con que cubras tres dedos de los frascos está bien, o por la mitad. Siguiendo el ejemplo de la olla de 9lts la misma lleva alrededor de 1litro por esterilización. No necesitamos mucha agua para esterilizar pero tengan en cuenta que si el agua se termina mientras están esterilizando pueden tener un problema. Cerramos correctamente la tapa y llevamos a fuego. ¿Cuánto Tiempo debo de esterilizar los frascos? eso va a depender del grano que utilicen. Lo que debemos tener en cuenta es que el tiempo de esterilización empieza a correr luego de que la olla haya pitado gracias al vapor (justo en ese momento bajamos el fuego a mínimo). Transcurrido el tiempo correspondiente, apagamos el fuego y DEJAMOS ENFRIAR LA OLLA. NO SE ABRE. Una vez que la olla esté fría, sugiero abrirla y sacar los frascos en el momento que vayan a inocular o transferir grano, antes no. Si no saben el momento exacto en que van a trabajar es conveniente que los frascos sigan permaneciendo en la olla cerrada (si pasan muchos días quizás sea conveniente darles una segunda esterilización de menor tiempo, pero cuidado con que se explote el grano por sobre cocinarse en el proceso de esterilización).
Inoculación Inoculación en biología es ubicar algo que crecerá y se reproducirá. Introducir un organismo en un medio. Una vez que tenemos nuestra jeringa de esporas o honey tek y los frascos esterilizados, es momento de inocular. Para hacerlo debemos tomar un pedazo de algodón y humedecerlo con alcohol, luego, usando un encendedor, calentar la aguja de nuestra jeringa al rojo vivo, y enfriarla con el algodón mojado en alcohol. Clavamos la aguja a través del puerto de inoculación (agitar la jeringa primero) e inyectamos de 1 a 2ml de solución de esporas (va a depender de la cantidad de humedad del frasco y de la cantidad de esporas que contenga la jeringa); es indistinto en dónde pinchemos. Procuramos no agitar ni inclinar mucho los frascos luego de realizar dicha acción (si utilizaron grano de Trigo para sus frascos, luego de inocularlos pueden sí moverlos de manera circular sobre sí mismo muy suavemente). Trabajamos dentro de la glovebox o C.A.I para Inocular, pero NO prendan fuego dentro de las cajas de higiene.
Repaso General
Preparación del Micelio: - Jeringas de Esporas o Honey Tek - Preparado de Grano - Preparado de Turbotarros - Esterilización de Frascos en Olla a Presión -Inoculación o Transferencia de Grano - Incubación
ETAPA DE INCUBACIÓN La incubación consiste en mantener nuestros frascos inoculados en determinadas condiciones que permiten el desarrollo del micelio. Para esto, los frascos deben mantenerse a una temperatura de 28 grados constantes (para poder controlar dicha temperatura necesitaremos un termómetro) con un nivel de alrededor del 90% de humedad dentro de los frascos. También vamos a tratar de mantener los frascos a oscuras preferentemente. Para la etapa de incubación recomendamos improvisen alguna manera de mantener sus frascos a la temperatura anteriormente mencionada, para ello recomendamos que dos o tres días antes de inocular o transferir grano en sus frascos, tengan chequeada y en perfecto funcionamiento su Incubadora (teniendo en cuenta que pueden optar por calor seco o húmedo). Fabricación de incubadora: Para fabricar una incubadora vamos a necesitar un calentador de pecera de 50-100w y un tupper o balde con tapa de al menos 20lt preferentemente transparente (ejemplo de calor húmedo).
La temperatura del agua debe ser de alrededor de 30 para que el aire sobre la superficie llegue a 28 (no nos vamos a olvidar de ponerle un chorro de lavandina o cloro al agua). No se puede prescindir de termómetro para medir la temperatura de nuestra incubadora. º
º
Es muy importante que el termómetro se encuentre dentro del tiesto en el que se encuentran nuestros frascos incubándose. Si las condiciones ambientales dentro de nuestra incubadora son óptimas entonces a los pocos días aparece en forma visible nuestro tan ansiado Micelio.
Termómetro
Desde Honey Tek el micelio visible blanco aparece a las 48hs de ser inoculado el grano esterilizado.
Luego dependiendo la variedad entre 12 y 20 días aprox. obtendrán sus frascos colonizados al 100%.
TRANSFERENCIA DE GRANO COLONIZADO (Micelio) Técnica G2G (G2G-grain to grain) significa grano a grano transferencias. Otra forma efectiva, práctica y rápida de generar Micelio a partir de una pequeña muestra de grano colonizado (micelio). Lo primero que deben adquirir es una pequeña muestra de micelio (con unos pocos granos colonizados es más que suficiente). El método consiste en preparar frascos nuevos con grano ya esterilizado, tal como lo haríamos para inocular a través de una jeringa de esporas o honey tek (Turbo Tarros con grano, esterilizados). Excepto que, en lugar de inocular los frascos esterilizados con una jeringa, lo que vamos hacer es transferir el grano de un tarro colonizado (micelio) a otro nuevo. El procedimiento es sencillo y sólo requiere sentido común, un mínimo de preparación y la higiene máxima que se pueda reunir. Se recomienda hacer el proceso de Transferencia de Grano Colonizado preferentemente dentro de la Glovebox o C.A.I. 1- Desinfectar la Glovebox o la Caja de Aire Inmóvil con alcohol e introducir en ella una cuchara , nuestra muestra de micelio y la cantidad de frascos con grano esterilizado que queramos reproducir. También vamos a necesitar gasas estériles o algún paño limpio y
alcohol para limpiar los frascos, principalmente las tapas de éstos. 2- Una vez que tengamos todos los elementos necesarios dentro de nuestra Glovebox, vamos a proceder a limpiar muy bien todo el frasco con alcohol principalmente la tapa y vamos a desenroscar la tapa para que sea fácil abrirla más adelante, realizan la misma operación pero con el frasco que contenga el micelio. Procedemos a esterilizar la cuchara y extraemos una pequeña porción de micelio (y tardando alrededor de 30segundos) introducir el grano colonizado en el frasco que contiene el grano esterilizado . Cerrar rápidamente las tapas. 3- Agitar cuidadosa y energéticamente el frasco con el grano esterilizado (al cual le introdujimos el micelio) sobre sí mismo para que ambos granos se mezclen bien, el micelio se hidrate con la humedad del tarro y pueda así colonizar nuestro turbotarro. Para finalizar llevaremos los frascos una vez agitados a 28grados en nuestra incubadora. Ésta Técnica tiene ventajas por encima de la Inoculación, dado a que los frascos colonizan mucho más rápido.
Dependiendo la cantidad de micelio que le introduzcamos a los tarros con grano esterilizado, pueden llegar a obtener frascos colonizados al 100% nuevamente en cuatro días.
CONTAMINACIONES El micelio en crecimiento debe ser de color blanco, si durante la incubación aparecen manchas verdes, rosas o de otro color, significa que el grano está contaminado y debe ser descartado. Ocasionalmente pueden aparecer gotas de un líquido color ámbar, esto no debe ser confundido con contaminaciones, ya que se trata de una sustancia producida por el mismo micelio.
A continuación algunas contaminaciones muy comunes en el cultivo de setas, se recomienda que se informen mucho sobre Contaminaciones buscando información extra ya que el tema es muy interesante y extenso, si bien puede ser frustrante obtener frascos contaminados pueden adquirir mucha experiencia de cultivo con los mismos. Identificar una contaminación me ayuda a informarme sobre ésta, aprendiendo de algún error de parámetro ambiental o bien tomar conciencia de la importancia de prevención de otros factores. Tengan cuidado respecto a los frascos contaminados utilicen siempre protección para no tener contacto directo con los mismos, tal como guantes y barbijos. Nunca respiren cerca de una contaminación puede ser peligroso para su salud. Muchas bacterias pueden traernos consecuencias al organismo humano. Bacillus En vasos de grano es común encontrar Bacillus, que algunas veces sobreviven al proceso de esterilización mediante endoesporas resistentes al calor. Una especie de moco gris opaco de color marrón caracterizado por un mal olor descrito como olor a manzanas podridas, calcetines sucios o tocino quemado. Los Bacillus hacen que los granos colonizados parezcan excesivamente húmedos. Ante condiciones ambientales adversas, especialmente el calor, se forman endosporas bacterianas capaces de sobrevivir a altas temperaturas durante un tiempo prolongado. El método más práctico para la eliminación de las endosporas bacterianas consiste en sumergir el grano a temperatura ambiente durante 12 a 24 horas antes de la esterilización. Las endosporas, si son viables, germinarán en ese periodo de tiempo volviéndose susceptibles a los procedimientos de
esterilización estándar. Además, al haber humedad dentro del vaso no se formarán nuevas endosporas. Moho negro o Doratomyces Produce esporas con forma de polvo negro como el humo cuando se les molesta. Este hongo indica la presencia de algunos carbohidratos en el compost. Los aspergillus, penicillum y doratomyces producen una abundante cantidad de esporas y pueden provocar problemas respiratorios (irritación de garganta y nariz, congestión del pecho, dificultad respiratoria, etc.).
Trichoderma Bueno este es nuestro peor enemigo, y el que más se da, tanto en la fase de fructificación, como colonización, ya sea de sustrato o de colonización de la cobertura...está causada por Trichoderma harzianum, comienza por un moho, parecido al micelio, pero más brillante, que, cuando suelta las esporas se vuelve verde, es muy rápido, te puede contaminar todo el pan en cuestión de días, y es muy difícil de combatir, se podría decir que si te sale trichoderma, el porcentaje de que tu cultivo sea descartado, está en un 95% de aborto y pudiendote costar tus otros cultivos en la fructificadora, por ello, recomendable, que a la mínima manchita verde, fuera el pan, y limpieza de fructificadora, ya que al ser hongos, suelta esporas, que probablemente se queden por tu fructificadora esperando el momento... se da, por una mala pasteurilizaicon de la cobertura, bulk etc... de una mala esterilización del sustrato, suciedad o exceso de Co2 y humedad... aun así, si quisieras combatirlo... cortar la zona infectada con un buen margen, el h2o2 parará su crecimiento pero no lo matará, tranquilo, al micelio no lo afecta, subir el ph con una cucharada de bicarbonato sódico.
Cobweb Una infeccion que si eres novato, la verdad, te lo puedes pasar por alto sin darte cuenta hasta que tu pan este totalmente colonizado por él, se suele dar en la fase de colonización de la cobertura y está causado por el Dactylium Mildew. Tiene un color algo más grisáceo que el micelio y puede cubrir la superficie de un pan en un par de días. Puede llegar a recubrir el cuerpo entero de un hongo. Suele darse en ambientes muy cargados de Co2, y con un sobre exceso de humedad..., para prevenirlo, no tener una humedad muy alta y favorecer el intercambio gaseoso, ya sea aireándolo más, o metiendo más tiempo a la bomba..... Al observarlo con lupa o microscopio, vemos en las puntas d sus hifas bolitas negras, sus esporas... La espesa "telaraña" de cobweb es visible encima del pan y el micelio.
Overlay Parece micelio, pero más algodonoso, de no detenerse, colonizará el pan, incluso desbordándose por los lados, se debe a una humedad muy baja y temperaturas altas, de estar avanzada, tendrá que hacerse una “scratching” , que viene siendo quitar el overlay con un cuchillo previamente esterilizado y sprayando a continuación una disolución de o2+h2o2 1/10, con eso bastará...
Penicillium Tiene un aspecto azul -verdoso, sus esporas se reproducen por encima del pan, en la cobertura, se parece al aspergillus tanto de aspecto como de nivel destructivo, ambos colonizan la cobertura en horas... parte de hidratos simples, la celulosa, el almidón etc., es como en la fase de colonización del grano y en culturas de agar, y suele ser uno de los contaminantes comunes, muy difícil de combatir, con este, no experimentar, tirar directamente... Cuando adquiere este color es a veces confundido con Aspergillus.
Aspergillus Más frecuente que se dé en agar, o debido a malas pasteurizaciones... se da en coberturas más bien con ph alcalino, las variaciones en cuanto al color de este contaminante pasan de amarillo a verde y este a negro: Aspergillus níger, como su nombre lo indica, es negro; Aspergillus flavus es amarillo; Aspergillus clavatus es de color azul verdoso; el Aspergillus fumigatus es verde grisáceo, y Aspergillus veriscolor exhibe una variedad de colores (verde a amarillento a rosado). Estos mohos, como muchos otros, el cambio en el color y la apariencia de acuerdo con el medio en el que se producen. Varias especies son termófilas. Queda decir, que el Aspergillus en general, ya sea la variedad que sea son TOXICAS y por lo tanto, nocivas para nuestro organismo, por lo que al menor aparecimiento, lo aconsejable es retirar el grano/ placa con una cascarilla y rociar con lejía la placa, y tirarla... no agamos experimentos con estos contaminantes por favor...
Acaros A los ácaros les encantan los lugares calentitos y muy húmedos. De hecho son capaces de reproducirse en el agua. Podemos pensar que tirando el cultivo y limpiando bien, con cloro y jabón nuestra fructificadora puede ser suficiente, pero no es así. Estos bichos ponen huevos. Unos huevos que se adhieren fuertemente a las superficies donde son puestos y que son difíciles de destruir. Agua muy caliente o mejor vapor a presión usados muy insistentemente, son el único modo de destruir los huevos.
ETAPA DE FRUCTIFICACIÓN Rez Effect El rez effect es una de las técnicas más simples y efectivas para la preparación de bandejas que luego serán fructificadas; consiste en mezclar partes iguales (50%-50%) de micelio y vermiculita esterilizada. Para esto debemos sacar el micelio de los frascos con una cuchara previamente lavada con alcohol, luego debemos desmenuzarlo con las manos, utilizando guantes, para luego mezclarlo dentro de una bandeja limpia con la vermiculita esterilizada.
Una vez hecho esto, cubrimos la bandeja con film de cocina o papel aluminio, al que se le debe realizar varios agujeros con un alfiler para permitir el intercambio de aire, y luego lo ponemos en la incubadora a 28º durante aproximadamente 4 días, hasta que el micelio vuelva a cubrir la superficie. Cuando esto sucede, la bandeja ya está lista para pasar a la fructificadora.
VERMICULITA Esterilizada Llenar un frasco con tapa común con ¾ partes de vermiculita, luego llenarlo completamente de agua, cerrar la tapa y esterilizar durante 1:10hs. Una vez que la olla se enfríe, retirar el frasco, aflojar la tapa, y sin sacarla escurrir bien el agua. Después de esto, la vermiculita está lista para ser utilizada
También podemos optar por realizarle un orificio de 1cm de diámetro al centro de la tapa, lo cubrimos con cinta. Luego irá protegido con papel aluminio a esterilizarse la olla. Transcurridas unas cuantas horas, quitar la protección y la cinta y dar vuelta el frasco. Escurrir toda el agua de los frascos hasta que deje de gotear. Ese es el punto justo de humedad para la vermiculita.
Fructificación La fructificación es la etapa del cultivo en la cual el micelio va a producir las setas que luego cosecharemos. Para que esto suceda, debemos exponer el micelio a determinadas condiciones ambientales: 24º de temperatura. Humedad cercana a 95%.
Luz: El hongo no tiene fotoperiodo, utiliza la luz para la orientación de las setas. Con una lámpara de bajo consumo blanca de 20w es suficiente, se recomienda un ciclo de 12 horas de luz y 12 de oscuridad. La luz de color azul estimula la seta.
Ventilación: El oxígeno es sumamente importante para el crecimiento de las setas, por lo que,
a partir de la aparición de los primordios, debemos ventilar para renovar el aire. Para hacerlo podemos optar por colocar un cooler en la fructificadora, programado con un timer digital para encenderse durante un minuto, 5 veces al día cada 5 horas. (de 00:00 a 00:01, lo mismo a las 5, 10, 15 y 20hs). Si no disponemos de un timer o cooler, podemos ventilar manualmente abanicando aire hacia adentro durante 30 segundos: el primer día de formación de primordios ventilamos una vez, el segundo dos veces, y así hasta llegar a las 5 veces por día. La razón de que con el timer se ventile 5 veces desde el primer día es que estos aparatos normalmente no se pueden programar para un ciclo correcto.
Para fructificar el micelio podemos usar la misma incubadora, a la que debemos sacar el tupper interno y reemplazarlo por una malla de plástico, la cual debe estar sobre el nivel del agua (en la imagen usamos cuatro frascos de vidrio).
La fructificación dura aproximadamente entre 15y 20 días, a partir de que el micelio es expuesto a las condiciones anteriormente detalladas. Alrededor del décimo día (pueden ser menos dependiendo la variedad) vamos a observar la aparición de los primordios; se trata de las setas en su primer etapa. Los cuales van a crecer durante los siguientes 5-7 días hasta alcanzar la madurez, momento en que rompen el velo y desprenden esporas.
COSECHA
Para cosechar nuestras setas, tan solo debemos agarrarlas por el pie, moverlas suavemente, girar y tirar con cuidado hasta que se desprenda del pan. Intentando sacar la menor cantidad de micelio posible.
FLUSH
Le llamamos “flush” a cada cosecha que nos dé nuestro Pan de setas. Ya que luego de recolectar la primer tanda/cosecha de setas basta con volver a hidratar con agua nuestro pan miceliado y ponerlo en las condiciones ambientales necesarias para que vuelva a fructificar. Un pan de setas pude llegar a dar hasta cuatro flush dependiendo la variedad cultivada y el estado saludable del pan/bandeja. A medida que pasan los flush la seta va perdiendo potencia pero pueden aprovechar la producción para sacar muchos sellos de esporas (prints).
SELLOS DE ESPORAS (Print)
Luego de cosechar, podemos usar las setas que hayan roto el velo para hacer un sello de esporas y así conservarlas para futuros cultivos.
Para hacer nuestro print debemos cortar el sombrero de la seta con un cutter o un cuchillo limpio (dentro de la glovebox). Luego lo colocamos sobre un rectángulo de papel aluminio o papel fotográfico.
Una vez hecho esto, cubrimos el sombrero con un vaso de vidrio y lo dejamos asi durante 24hs.
Pasado ese tiempo retiramos el sombrero y doblamos nuestro sello.
Debemos conservarlo dentro de un tupper o una bolsa ziploc. A oscuras, preferentemente en un lugar fresco. SECADO Y ALMACENAMIENTO
Una vez que cosechamos las setas, debemos secarlas. Para esto podemos ponerlas sobre una
bandeja o colador y exponerlas a una corriente de aire. Tardarán aproximadamente tres días en secarse. Si desean conservarlos en la heladera para consumirlos frescos, en la misma no duran más de cinco días.
Una vez que estan secas, debemos almacenarlas en bolsas ziploc preferentemente al vacío y guardarlas en el frezeer (en el mismo se conserva un año) o en un lugar seco y oscuro.
