/María $osé Día2 Latas /Constan2a #i3uelme *scudero Fecha de entrega: 456756478
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INTRODUCCIÓN
+i bien se sabe 3ue las células son estructuras increíblemente pe3ue9as: estas constitu;en la unidad borma permite 3ue se adapten para cumplir esta >unción 11 *stas >unciones se llevan a cabo gracias a di>erentes componentes 3uímicos ubicados ; distribuidos de di>erente manera seg?n el tipo celular1 *sta variedad se debe a la alta especi>icidad de cada una de ellas1 @idratos de carbono: proteínas: sales minerales: entre otros: son algunas de las diversas moléculas 3ue encontramos dentro de estas >ascinantes estructuras1 Muc0as de estas moléculas interaccionan entre ellas1 *ste es el caso del AD': 3uien posee una estrec0a relación con proteínas llamadas 0istonas: las cuales: gracias a las cargas positivas de sus grupos aminos: interaccionan con los grupos >os>atos de estos icar la presencia de estas moléculas en di>erentes tipos de muestras1 racias a los diversos tipos de reactivos empleados: podremos identi>icar una variedad de biomoléculas1 %or eemplo: se reconocericación no solo de monosac
OBJETIVOS 1 Comprobar la presencia de monosacorma cualitativa: la presencia de proteínas en las muestras: a través del reactivo Biuret ; la intensidad de la reacción1 !1 Corroborar la solubilidad e insolubilidad de lípidos en solventes orgicar la eistencia de distintas sales minerales en la misma solución: a través de la agregación de distintas sustancias1 E1 Determinar la incidencia del >actor "( en la actividad en2im
MATERIALES Y MÉTODOS 2
%ara la actividad '( A se rotularon E tubos de ensa;o del al E1 A cada uno se le a9adió ml del reactivo de +omog;i unto con ml de una de las muestra: 3ue eran) agua destilada: solución de glucosa al : solución de almidón al : lec0e ; solución 'aCl al 1 *stas se a9adieron a los tubos : 4: !: : E respectivamente1 Luego se agitó cada tubo: se colocaron en una gradilla ; se llevaron al ba9o termoregulado: a G7(C por ! minutos1 "ranscurrido el tiempo: >ueron etraídos: deados en>riar ; se procedió a observar la reacción de cada uno1 *l obetivo de esta actividad: >ue identi>icar la presencia de monosacue reconocer la presencia de polisacue reconocer la presencia de proteínas en las muestras: utili2ando el reactivo de Biuret1 *n la actividad 'H! se ocuparon 4 tubos de ensa;o: rotulados como ; 41 Al '( se le a9adió ml de agua: mientras 3ue al '(4 se le agregó ml de .ter1 Acto seguido: se a9adió ml de aceite a cada uno1 %osteriormente se agitó con >uer2a cada tubo ; se deó reposar: para >inalmente proceder a observar la reacción1 *l obetivo >ue reconocer la presencia de lípidos a través de la técnica de solubilidad1 *n la actividad 'H se tomaron 4 tubos de ensa;o: rotulados como ; 4 ; se a9adió ml de solución de 'itrato de %lata al tubo '( ; ml de solución de Oalato de Amonio al '(41 A cada uno se le agregó ml de Cloruro de Calcio1 *l obetivo >ue reconocer la presencia de sales minerales: especí>icamente Cloruros en el tubo '( ; Calcio en el '(41 Finalmente en la actividad 'HE se utili2aron dos tubos de ensa;os: rotulados con los '( ; 41 *n el tubo '( se colocó un tro2o de 0ígado de Gallus gallus domesticus ; se a9adió ml de agua oigenada1 *n el tubo '(4 se agregó otro tro2o de 0ígado de Gallus gallus domesticus: unto con ml de agua destilada1 %osteriormente: este tubo de ensa;o >ue llevado al ba9o termoregulado a G7(C: durante !7 minutos1 Al etraer el tubo '(4: se procedió a retirar el eceso de agua ; se agregó ml de agua oigenada1 *l obetivo era determinar la presencia de Catalasa activa e inactiva: mediante la reacción con peróido de 0idrógeno: m
RESULTADOS 3
ACTIVIDAD Nº1: #econocimiento de @idratos de Carbono1 A) Identi>icación de monosac
mL
Agua destilada1 mL
/J
KJKJKJ
4
mL
+olución de glucosa 1 mL
!
mL
+olución de almidón 1 mL
/J
mL
Lec0e1 mL
KJKJ
E
mL
+olución de 'aCl 1 mL
/J
S'bl*-a:
Ob$"+(a&',# 'o ocurren cambios en el color de la muestra permanece como a2ul claro: 3ue es el color del reactivoJ1 +e observa un cambio de coloración de la muestra: pasando desde un a2ul claro a un roo ladrillo1 Ademerior del tubo de ensa;o: se visuali2a un precipitado del mismo color1 'o ocurren cambios en el color de la muestra permanece como a2ul claro: 3ue es el color del reactivoJ1 +e observa un cambio de coloración en la muestra: de un a2ul claro a un narana de tonalidades pastel ; lec0oso1 *n la parte in>erior se visuali2a un precipitado del mismo color1 'o ocurren cambios en el color de la muestra permanece como a2ul claro: 3ue es el color del reactivoJ1
*n los tubos de ensa;o n?mero agua destiladaJ : n?mero ! solución de almidón J ; n?mero E solución de 'aCl J no se observó ning?n cambio véase Tabla IJ: permaneciendo el tono a2ul claro otrogado por el reactivo de +omog;i1 "ampoco se observó la >ormación de algun tipo de precipitado1 %or otro lado: los tubos de ensa;o n?mero 4 solución de glucosa J ; n?mero lec0eJ presentaron un cambio en su coloración1 *l tubo 3ue contiene la solución de glucosa reaccionó con el reactivo de +omog;i: cambiando drormación de un precipitado de partículas del mismo color en la parte in>erior del tubo de ensa;o1 *n el tubo n?mero : 3ue contenía lec0e: también se pudo observar un cambio en su coloración: pasando de un a2ul blan3uecino a un narano en tonalidades pastel: de aspecto lec0oso debido al tipo de muestraJ1 %or ?ltimo la >ormación de precipitado en este tubo de ensa;o >ue min?scula en comparación a la >ormada en el tubo n?mero 4 3ue contenía glucosa véase Tabla IJ1
R"('$" la "$t+u&tu+a u-'&a !" l$ #$a&/+'!$ .A u4 &a+a&t"+-$t'&a $" !"b" $u &a0a&'!a! +"!u&t+a La capacidad reductora de los monosacormando así óido cuproso Cu4OJ1 *ste óido cuproso es el responsable del color roo ladrillo característico de la reacción 21
B) Identi>icación de polisac
Nº tub !" "#$a%
R"a&t'( Lu*l
Mu"$t+a
R"a&&',#
mL
Agua destilada: mL
/J
4
mL
+olución glucosa : mL
/J
!
mL
+olución almidón : mL
KJKJKJ
mL
Lec0e: mL
/J
mL
+olución de 'aCl : mL
/J
E
Tabla II: #eacción de las muestras con reactivo Lugol1
Ob$"+(a&',# La muestra adopta una coloración amarillo mosta2a: debido al color del reactivo1 La muestra adopta una coloración amarillo mosta2a: debido al color del reactivo1 La muestra presenta un cambio radical de coloración: torn
Tabla III: #eacción de las muestras con reactivo de Biuret1 Nº tub R"a&t'( !" !" "#$a% B'u+"t Mu"$t+a R"a&&',#
mL
Agua destilada1 mL
/J
4
mL
+olución de licina 1 mL
KJKJ
!
mL
Clara de 0uevo mL
KJKJKJ
mL
Lec0e1 mL
KJ
E
mL
+olución de 'aCl 1 mL
/J
Ob$"+(a&',# 'o ocurren cambios en el color de la muestra permanece celeste transparente: 3ue es el color del reactivoJ1 +e observa un cambio de coloración de la muestra: 3uedando color a2ul transparente 0omogéneo suave1 +e observa un cambio de coloración en la muestra: torn
(-): Reacción negativa S'bl*-a: (+):Reacción positiva leve (+)(+):Reacción positiva intermedia
*l reactivo de Biuret contiene +ul>ato de Cobre Cu+OJ 3ue en solución acuosa alcalina de 'aO@ o O@J reacciona generando un compuesto de color violeta intenso: ;a 3ue se >orma un compleo de coordinación entre los iones Cu4K ; los pares de electrones no compartidos del nitrógeno 3ue >orma parte de los enlaces peptídicos de las proteínas 81 *s importante destacar: 3ue esta reacción la producen los péptidos ; las proteínas: pero no así los aminoue la 3ue >ormó la reacción mormó reacciones menos intensas: al tener menor proporción de proteínas1 %or ?ltimo: la solución con el amino
ACTIVIDAD Nº3: #econocimiento de Lípidos1 Tabla IV: #eacción de aceite con éter ; agua destilada1 8
Nº tub !" "#$a%
A&"'t"
R"a&t'(
Slub'l'!a !
mL
Agua destilada1 mL
/J
4
mL
.ter1 mL
KJ
Ob$"+(a&',# Al agitar se >orman micelas gotitasJ: ; al dear en reposo se observa la división del aceite ; el agua en >ases: 3uedando el aceite sobre el nivel del agua1 +e observa la >ormación de una solución 0omogénea ; transparente1 +e >orma una emulsión: con gotitas en la paredes1
ACTIVIDAD Nº5: #econocimiento de +ales Minerales1 Tabla V: #eacción de Cloruro de Calcio con 'itrato de %lata ; Oalato de Amonio1 Nº 9
tub !" Cl+u+ "#$a% !" Cal&'
mL
R"a&t'(
Ob$"+(a&',#
'itrato de %lata1 ml
Oalato de Amonio1 ml 4
mL
+e >orma una solución blanca >ina: 0omogénea: opaca: de aspecto lec0oso: con un precipitado 3ue decanta al >ondo del tubo1 Al agitar se mantiene el precipitado ; no se vuelve 0omogéneo1 +e observa la >ormación de una solución blanca cristalina: 3ue en reposo se separa en >ases blancas: siendo mondo como precipitado1 Al agitar se vuelve 0omogénea la muestra1
ACTIVIDAD Nº8: #econocimientos de en2imas1 Tabla VI: #eacción de 0ígado de Gallus gallus domesticus con peróido de 0idrógeno @4O4J1 !
Nº tub !" "#$a%
Mu"$t+a
T+ata'"#t
@ígado de Gallus +in tratamiento gallus domesticus
4
S'bl*-a:
+ometido a ba9o @ígado de Gallus termoregulado a gallus domesticus G7(C por !7 minutos
Ob$"+(a&'#"$ Al entrar en contacto con el peróido de 0idrógeno se genera un >uerte burbueo: notando una pe3ue9a liberación de calor durante este proceso: acompa9ado de espuma de color blanco1 Al entrar en contacto con el peróido de 0idrógeno: no se visuali2a ning?n tipo de reacción1
DISCUSION ACTIVIDAD Nº1: #econocimiento de @idratos de Carbono1 A) Identi>icación de monosac
Al someter las muestras a un reconocimiento de 0idratos de carbono: con reactivo de +omog;i: los tubos de ensa;o n?mero agua destiladaJ: ! solución de almidón J ; E solución de 'aCl J: no presentaron cambios en su coloración1 *sta reacción negativa se debe a la ausencia de monosacormado por glucosa monosac
B) Identi>icación de polisac
ACTIVIDAD Nº2: #econocimiento de %roteínas1 Al someter muestras de agua destilada: solución de glicina : clara de 0uevo: lec0e: ; solución de 'aCl : a un reconocimiento de proteínas con reactivo Biuret: se observó 3ue el agua destilada ; la solución de 'aCl no reaccionaron: permaneciendo del color del reactivo celesteJ: puesto 3ue no eisten enlaces de carormando una solución de color a2ul >uerte: ;a 3ue el 0uevo est< con>ormado por variadas proteínas: como la ovoalb?mina: ovomucina ; liso2ima 1 La coloración a2ul intensa: se debe a 3ue el reactivo de Biuret: >ormado por sul>ato de Cobre Cu+OJ ; tartrato doble de sodio ; potasio C@'aO8 @4OJ: en un medio de carue menos intensa: ;a 3ue esta es proporcional a la cantidad de enlaces peptídicos 3ue posee la muestra ;" %or ?ltimo: la solución con licina al : 3ue es un amino
ACTIVIDAD Nº3: #econocimiento de Lípidos1 Al someter dos muestras de aceite: una con agua destilada tubo n(J ; otra con éter tubo n(4J: para el posterior reconocimiento de lípidos: se observó 3ue al agitar el tubo n( se >ormaban micelas gotitasJ en la muestra ; al reposar la solución: se generaba la separación en dos >ases: 3uedando el aceite en la parte superior debido a su menor densidad 1>1 *n el tubo n(4: se pudo apreciar la >ormación de una me2cla 0omogénea al agitar: debido a 3ue las sustancias son solubles en medios de polaridad $emeante 11 1 *n este caso: el aceite ; el éter poseen polaridades semeantes: por lo 3ue este es capa2 de disolver la muestra1
ACTIVIDAD Nº5: #econocimiento de +ales Minerales1 Al someter muestras de cloruro de calcio en dos tubos de ensa;os distintos: se observó 3ue en el tubo : al agregar ml de una solución de nitrato de plata : se >ormó un precipitado de color blanco lec0oso: debido a una reacción de doble reempla2o para la >ormación de nitrato de sodio ; cloruro de plata: tras la disociación de iones 121 Considerando 3ue el cloruro de plata no es soluble en agua: éste se Nprecipita >ormando el color blanco1 *l nitrato de sodio: 3ue es soluble en agua: permanece en la parte baa del tubo de ensa;o1 %recipitación de Calcio con 'itrato de %lata) CaCl4K4Ag'O! a3J P 4AgCl sJKCa'O!J4 a3J Al tubo 4 se le agregó oalato de amonio al : donde se pudo apreciar claramente un precipitado blanco: debido a la misma reacción de doble reempla2o ;a mencionada: con la di>erencia 3ue se >orma oalato de calcio 3ue es insoluble en agua: por lo 3ue se precipita: ; cloruro de amonio 3ue es soluble en agua: >ormando un color gris claro en la muestra 131 %recipitación del Calcio con Oalato de Amonio) CaCl4 K '@J4C4O P 4'@Cl K CaC4O
ACTIVIDAD Nº8: #econocimiento de en2imas1 Como se puede apreciar en la Tabla VI: eistían dos tubos de ensa;o: con n?meros ; 41 *l tubo n( contenía 0ígado crudo de Gallus gallus domesticus: mientras 3ue el n(4 contenía 0ígado cocido de Gallus gallus domesticus: pues 0abía sido sometido al ba9o termoregulado a G7(C por !7 minutos1 Al reali2ar un contraste comparativo: se desprende 3ue la Catalasa: encargada de la descomposición del peróido de 0idrogeno @4O4J en agua @4OJ ; oígeno O4J 2: se encontraba presente ; >uncional en el 0ígado crudo ubicado en el tubo n( : pues esta no 0abía sido sometida a condiciones anómalas 3ue a>ectaran su estructura: permitiendo la correcta unión del sustrato @47J al sitio activo de la Catalasa ; su posterior degradación a sustancias mas inocuas para la célula1 %or el contrario: la Catalasa presente en el 0ígado del tubo n( 4: perdió su >unción biológica1 *sta perdida se debió a la temperatura a la cual >ue epuesta G7(C por !7 minutosJ: la cual no es la acostumbrada: generando la perdida de la estructura terciaria unto a su sitio activo: conllevando a la desnaturali2ación en2iminali2ar el presente prorme) 3
1 +e comprobó la presencia de monosacerentes muestras: seg?n el reactivo de +omog;i ; Lugol respectivamente1 Cabe destacar en este punto 3ue se corroboró la capacidad del reactivo de +omog;i para detectar no solo monosacorma cualitativa: la presencia de proteínas en las muestras: a través del reactivo Biuret ; la intensidad de su reacción1 !1 +e rati>icó la solubilidad de los lípidos en solventes orgicó la eistencia de distintas sales minerales en la misma solución: Cloruros ; Calcio: a través de la agregación de distintas sustancias1 E1 +e determinó la incidencia del >actor "( en la actividad en2imicación de las principales biomoléculas: 0idratos de carbono: proteínas: lípidos ; sales minerales: los cuales constitu;eron el obeto de estudio del presente pr
BIBLIO?RA@A 1
*milio Fernicación de proteínas1 Departamento de Bio3uímica ; Biología Molecular: Campus Universitario de #abanales: *di>icio +evero Oc0oa: 75/Córdoba1
A1C1 BA##O*"A1 *l 0uevo ; sus componentes como alimento >uncional1 Departament de CiTncia Animal i dels Aliments1 Universitat Autnoma de Barcelona1 7QG! Bellaterra: Barcelona1
;
LA L*C@* @UMA'A: COM%O+ICIO': B*'*FICIO+ V COM%A#ACIW' CO' LA L*C@* D* XACA *traído ; adaptado de Manual de Lactancia para %ro>esionales de la +alud1 Comisión de Lactancia MI'+AL: U'IC*F1 *ditoras C +0ell0orn: X Xaldés1 Ministerio de +alud: U'IC*F: C0ile GGE1
