TEKNIK PEWARNAAN GRAM Anisa Ayu Widiaswara Widiaswara M0414010
ABSTRACT
Coloring method is a method used in Microbiology to collored the microbes in order to see the shape or structure of the cell. In coloring method performed several stages of sterilization, fixation, and coloring. This coloring method used in some kinds of dyes include crystal violet, iodine, alcohol 96% and safranine. Acquired gram-negative and gram-positive bacteria. Which is gram-negative bacteria bacilli shaped with pink color, and gram-positive bacteria bacilli shaped with purple color. Gram-positive bacteria are bacteria that can maintain the color purple while gram-negative bacter ia is not.
Mempelajari berbagai teknik pewarnaan untuk pengamatan mikroorganisme B. Landasan teori
Bakteri gram dibedakan menjadi dua macam, yaitu bakteri gram-positive dan bakteri gramnegative. Kedua bakteri ini dibedakan berdasarkan struktur dinding sel mereka. Bakteri grampositive adalah bakteri yang dapat mempertahakan zat warna metil ungu sewaktu proses pewarnaan. Sedangkan bakteri gram-negative adala bakteri yang tidak dapat mempertahankan zat warna metil ungu sewaktu pewarnaan(Hadioetomo, 1993). Macam-macam pewarnaan gram antara lain (Pelezar, 2007): -Pewarnaan negative -Pewarnaan sederhana -Pewarnaan gram -Pewarnaan khusus Bakteri gram-positive ada yang dapat membentuk endospora, salah satu contohnya adalah Bacillus. Endospora Bacillus oval dibagian sentral sel dan memungkinkan bakteri bertahan hidup
pada suhu dan kondisi lingkungan yang ek strem(Putra dan Giyanto, 2014). C. Metode
a.
Alat
b. Bahan
1. Mikroskop
1 buah
1. Alcohol 96%
1 tetes
2. Gelas penutup
1 buah
2. Alkohol 70%
secukupnya
3. Gelas benda
1 buah
3. Biakan bakteri gram 2 cawan
4. Pipet tetes
1 buah
4. NaCl 0,9%
1 tetes
5. Bunsen burner
1 buah
5. Kristal violet
1 tetes
6. Cawan petri
1 buah
6. Iodine
1 tetes
7. Tusuk gigi
1 buah
7. Safranine
1 tetes
8. Tissue
1 buah
8. Aquades
secukupnya
9. Stop watch
1 buah
c.
Cara kerja 1. NaCl diteteskan pada kaca benda
2. Bakteri dioleskan pada kaca benda
3. Bakteri difiksasi
4. Diteteskan kristal violet (1 menit)
5. Dicuci dengan aquades selama 2 detik
6. Diteteskan larutan Iodine (1 menit)
7. Dicuci dengan aquades (2 detik)
8. Ditetesi Alkohol 96% (30 detik)
9. Dicuci dengan aquades (2 detik)
10. Ditetesi dengan pewarna tandingan Safranin (30 detik)
11. Dicuci dengan aquades (2 detik)
12. Gelas benda dilewatkan pada bunsen
D. Hasil pengamatan
No.
Sumber isolat
1.
Bakteri A
2.
Bakteri B
Gram (+/-)
Foto
+
-
E. Pembahasan
Hasil yang diperoleh pada pengamatan kali ini adalah bakteri gram-positive dan bakteri gram-negative. Pada bakteri gram-positive diperoleh hasil yaitu bakteri berwarna ungu dengan bentuk basil dan dalam jumlah yang sangat banyak. Sedangkan untuk bakteri gram-negative didapatkan hasil dengan warna bakteri adalah pink atau merah muda dengan bentuk basil dan dalam jumlah banyak. Beberapa factor yang dapat mempengaruhi pewarnaan antara lain(Sutedjo,1991): a. Fiksasi b. Peluntur zat warna c.
Substrata
d. Intensifikasi warna e. Zat warna penutup atau zat warna lain Perbedaan bakteri gram-positive dan bakteri gram-negative: Sifat
Bakteri gram-positive (+)
Bakteri gram-negative (-)
Komposisi dinding sel
Kandungan lipid rendah
Kandungan lipid tinggi
Ketahanan terhadap penisilin
Lebih sensitif
Lebih tahan
Penghambatan oleh pewarna basa
Lebih dihambat
Kurang dihambat
Kebutuhan nutrisi
Relatif kompleks
Relative sederhana
Ketahanan terhadap perlakuan fisik
Lebih tahan
Kurang tahan
F.
Kesimpulan
1. Bakteri gram-positive adalah bakteri yang dapat mempertahankan zat warna methyl ungu sehingga apabila diwarnai, bakteri gram-positive akan berwarna ungu. 2. Bakteri gram-negative adalah bakteri yang tidak dapat mempertahankan zat warna m ethyl ungu sehingga apabila diwarnai, bakteri gram-negative akan berwarna merah muda at au pink.
Daftar pustaka: Hadioetomo, R.S.1993.Mikrobiologi dasar dalam Praktik .Jakarta:Gramedia Pelezar,M.J.2007.Dasar-Dasar Mikrobiologi .Jakarta:UI Press. Putra, Candra dan Giyanto.2014.Kompatibilitas Bacillus sp dan Aktinomiset sebagai Agens Hayati Xanthomonas oryzae pv. Oryzae dan Pemacu Pertumbuhan Padi.Jurnal Fitopatologi
