AKADEMI KEBIDANAN MUHAMMADIY MUHAMMAD IYA AH KOTIM
PEMERIKSAAN BAKTERI Oleh : dr. Chinda Liaska Indah
INDIKATOR • Mahasiswa dapat menjelaskan pemeriksaan jenis bakteri • Mahasiswa dapat menjelaskan alat yang diperlukan dan cara pewarnaan.
&engertian Bakteri Bakteri merupakan organisme yang sangat keil. Itu !erarti !ah"a #asad renik ini tipis sekali sehingga tem!us ahaya. Aki!atnya$ !akteri ini akan sangat sulit untuk dilihat dengan teliti di!a"ah mikroskop. Oleh karena itu$ agar dapat dilihat dengn #elas maka !akteri terse!ut haruslah di"arnai%dilakukan pe"arnaan terle!ih dahulu.
Dasar 'engapa Bakteri (arus di"arnai) 'ikroorganisme sulit dilihat dengan 'ikroskop Cahaya$ karena tidak mengadsor!si ataupun mem!iaskan ahaya.
&*+ARNAAN ,RA'
6e#arah &e"arnaan ,ram 'etode &e"arnaan Bakteri seara ,ram pertama kali ditemukan oleh salah satu ilmu"an dari Denmark !ernama (ans Christian ,ram -/01231/4 yang mengem!angkan teknik ini pada tahun //5 untuk mem!edakan antara pneumokokus dan !akteri Kle!siella pneumoniae.
&engertian &e"arnaan ,ram &e"arnaan ,ram atau metode ,ram adalah suatu metode empiris untuk mem!edakan spesies !akteri men#adi dua kelompok !esar$ gram2positi7 dan gram2negati7$ !erdasarkan si7at kimia dan 8sik dinding sel mereka.
Tu#uan &e"arnaan ,ram . 9ntuk memahami ara identi8kasi !akteri seara ,ram. . 'em!agi Bakteri men#adi !akteri ,ram Negati7 -24 dan Bakteri ,ram &ositi7 -;4
Bagan Ker#a
Alat dan Bahan Alat
Bahan
• Kaa alas datar% kaa o!yek • Lampu !unsen • Ose
• 6pesimen !akteri dalam suspensi • Larutan kristal
• &ipet • Kaa penutup • 'ikroskop
• Larutan lugol • Larutan alkohol • Larutan kar!ol 7uhsin • Air
Kaca alas datar dibersihkan dengan kapas + alkohol 70%
Disiapkan untuk di letakkan spesimen pemeriksaan
Dikeringkan
Suspensi Bakteri
Ose
Membuat ulasan Proses fiksasi di lampu bunsen
Diteteskan kristal iolet !"# tetes selama #0 detik
Diberi lugol # tetes selama #0 detik
Dibilas dengan air suling
Dibilas dengan air suling
Dicuci dengan aseton alkohol selama $0 detik
Diteteskan at &arna karbol fuchsin ! tetes selama #0 detik
Dibilas dengan air suling sampai tetes terakhir 'ernih
Ditetesi $ tetes min(ak imersi kemudian ditutup dgn kaca penutup
Dikeringkan dengan kertas saring
Diamati pada mikroskop perbesaran $000)
INT*R&R*TA6I (asil pe"arnaan : • Bakteri ,ram positi7 : ungu • Bakteri ,ram negati7 : merah
Kele!ihan dan kekurangan pe"arnaan ,ram Kelebihan : • &e"arnaan ,ram penting se!agai pedoman a"al untuk memutuskan terapi anti!iotik$ se!elum tersedia !ukti de8niti7 !akteri penye!a! in7eksi -kultur dan tes kepekaan !akteri terhadap anti!iotik4. (al ini karena !akteri ,ram positi7 dan negati7 mempunyai kepekaan yang !er!eda terhadap !er!agai #enis anti!iotika. • Kadang2kadang mor7ologi !akteri yang telah di"arnai ,ram mempunyai makna diagnostik. 'isalnya pada pemeriksaan ,ram ditemukan ,ram negati7 diplooi intraseluler dari spesimen pus -nana4 uretral$ maka mem!erikan presumptive diagnosis untuk penyakit in7eksi gonore.
Kekurangan : • &e"arnaan ,ram memerlukan mikroorganisme dalam #umlah !anyak yakni le!ih dari =5 per ml. 6ampel yang air dengan #umlah keil mikroorganisme misalnya airan sere!rospinal$ memerlukan prosedur sentri7uge dulu untuk mengkonsentrasikan mikroorganisme terse!ut. &ellet -endapan hasil sentri7uge4 kemudian dilakukan pengeatan untuk diperiksa seara mikroskopis.
Macam- macam bakteri pewarnaan gram
Bakteri gram positi7
Bakteri gram negati7
&engertia n 'or7olo gi Dinding sel
&engertian Bakteri ,ram &ositi7 Bakteri gram positi7 adalah sekelompok !akteri yang mempertahankan senya"a iodin kompleks saat proses penuian dengan dekolori>er karena mempunyai dinding peptidoglikan yang te!al.
&engertian Bakteri ,ram Negati7 Bakteri gram2negati7 adalah sekelompok !akteri yang melepaskan senya"a iodin kompleks saat proses penuian dengan deolori>er karena mempunyai dinding peptidoglikan yang tipis$ tetapi mengikat >at "arna lain yaitu kar!ol7uhsin.
'or7ologi 6el Bakteri memiliki !entuk yang sangat !er
Bentuk sel menun#ukkan karakteristik spesies !akteri terse!ut$ tetapi dapat !er
Dinding sel ?ungsi dinding sel pada prokaryot$ adalah melindungi sel dari tekanan dari lingkungan di luarnya. Dinding sel !akteri mengandung peptidoglikan yang terletak di luar mem!ran sitoplasmik. &eptidoglikan !erperan dalam kekerasan dan mem!erikan !entuk sel. Ada dua tipe utama !akteri !erdasarkan kandungan peptidoglikan dinding selnya yaitu ,ram positi7 dan ,ram negati7.
Dinding sel ,ram &ositi7 Karakteristik utamanya adalah te!alnya lapisan peptidoglikan pada dinding sel. Aki!atnya$ pada saat prosedur pe"arnaan ,ram$ meninggalkan "arna ungu. Dinding sel ,ram positi7 !iasa ditemukan pada Atino!ateria dan ?irmiutes.
Dinding sel ,ram Negati7 Tidak seperti dinding sel ,ram positi7$ dinding sel ,ram negati7 memiliki lapisan peptidoglikan yang tipis. (al ini menye!a!kan lunturnya "arna ungu saat disiram etanol.
&*+ARNAAN BAKT*RI TA(AN A6A' -@I*(L2N**L6*N4
&engertian &e"arnaan Bakteri Tahan Asam &e"arnaan @N atau pe"arnaan !akteri tahan asam adalah suatu metode empiris untuk mem!edakan spesies !akteri men#adi dua kelompok !esar$ !akteri tahan asam dan tidak tahan asam$ !erdasarkan si7at kimia dan 8sik dinding sel mereka.
Tu#uan &e"arnaan Bakteri Tahan Asam -BTA4 . 9ntuk memahami ara identi8kasi !akteri seara pe"arnaan tahan asam. . 'em!agi Bakteri men#adi !akteri tahan asam dan Bakteri tidak tahan asam
Alat dan Bahan Alat • Kaa alas datar% kaa o!yek • Lampu !unsen • Ose • &ipet • Kaa penutup • 'ikroskop
Bahan
• 6pesimen !akteri dalam suspensi • Larutan kar!ol 7uhsin • Larutan alkohol • Larutan methylen !lue • Air
Kaca alas datar dibersihkan dengan kapas + alkohol 70%
Disiapkan untuk di letakkan spesimen pemeriksaan
Dikeringkan
Suspensi Bakteri
Ose
Dibilas dengan air suling sampai tetes terakhir 'ernih
Ditetesi $ tetes min(ak imersi kemudian ditutup dgn kaca penutup
Dikeringkan dengan kertas saring
Diamati pada mikroskop perbesaran $000)
INT*R&R*TA6I
INT*R&R*TA6I