Facultad de Ciencias Químicas, Orizaba Veracruz
PERFIL DE DISOLUCION EN ACIDO ACETILSALICILICO Rafael Galán Manuel Laboratorio de Biofarmacia RESUMEN: Dentro de la regulación de los medicamentos en México, se rige la manufacturación de estos mediantes pruebas físicas, químicas y biológicas (uniformidad de la dosis, perfil de disolución y) por la NORMA Oficial Mexicana NOM-177-SSA1-1998 , Que establece las pruebas y procedimientos para demostrar que un medicamento es intercambiable. intercambiable. Requisitos a que deben sujetarse los terceros autorizados que realicen las pruebas.
INTRODUCCIÓN Un perfil de disoluci ón es la determinaci ón experimental de la velocidad con la que el principio activo se disuelve en u n intervalo de tiempo, bajo condiciones experimentales controladas a partir de la forma farmacéutica. Es necesario llevar a cabo dicha prueba para medir la capacidad que tiene tanto el f ármaco puro como el que esta contenido en una forma farmacéutica sólida, en el tiempo que tarda en disolverse en un medio determinado. Los resultados obtenidos nos permitirán establecer si el fármaco en cuestión cumple con los requisitos de la NOM-177-SSA1.1998, al igual que su principio activo.
De esta forma se demuestra si el fármaco en cuestión es igual o equivalente al producto innovador. Otras pruebas realizadas fueron el p erfil de disolución y la validación del método analítico para poder observar si la forma genérica cumple con las expectativas. OBJETIVO Comprobar si una forma farmacéutica (tabletas de AAS) demuestra ser intercambiable en base a la forma farmacéutica de patente.
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METODOLOGIA Para la realizaci ón de la intercambiabilidad del medicamento se consulto la NOM -177 SSA1-1998 en la cual se muestr an las pruebas y procedimientos a seguir. La forma farmacéutica de patente fueron tabletas de AAS Bayer de 500 mg. El genérico utilizado fue AAS Alpharma de 500 mg. Antes que nada se debe la correcta introducción del método analítico, el cual es el desarrollo experimental de un principio físico o fisicoquímico, que ha probado ser útil para proporcionar información cuantitativa y/o cualitativa o adaptación de una técnica para la obtención de resultados específicos específicos para la resolución de un problema. Cualquier método analítico que se utilice debe incluir un protocolo es decir, un conjunto de instrucciones (escritas) minuciosamente detalladas y que deben seguir al pie de la letra –sin excepcionesexcepciones- para que que los resultados analíticos sean aceptados en un propósito especifico. Seguido de esas características se demostrara si el medicamento a analizar (GI) cumple con la NORMA Oficial Mexicana NOM-164-SSA1-1998 , Buenas prácticas de fabricación para fármacos. Y la NORMA Oficial Mexicana NOM-177-SSA1-1998 , Que establece las pruebas y procedimientos para demostrar que un medicamento es intercambiable. Requisitos a que deben sujetarse los terceros autorizados que realicen las pruebas.
Se realizaron dos pruebas; uniformidad de dosis y valoraci ón del método analítico con el objetivo de
Los resultados arrogados durante la prueba de uniformidad de dosis y validación del método analítico para la determinación de ASS en perfiles de disolución son los siguientes. siguientes. Uniformidad de dosis
Se evaluaron algunas caracter í sticas sticas biofarmacéuticas como peso de tabletas, promedio, DE y CV de un medicamento; AAS ( ácido acetilsalicí lico) lico) en dos presentaciones (genérico y paten te). Valoración del método analítico Se realizaron curvas de calibraci ón utilizando un espectrofotómetro evaluando linealidad, precisión, exactitud y reproducibilidad de las tabletas del AAS. Perfil de disolución Para la realización de esta prueba el equipo utilizado cumplió con las especificaciones descritas en el método general de análisis FEUM. Para medir las lecturas de absorbancia se utilizó el espectrofotómetro con celdas de cuarzo de 1cm de peso. Para ajustar el pH de algunas sustancias se utilizo un potenciómetro equipado con un electrodo de membrana de vidrio.
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RESULTADOS Al realizar los cálculos previos al perfi l de disolución observamos que los resultados obtenidos nos indican que los medicamentos obtenidos no cumplen con los requisitos establecidos de acuerdo a la FEUM. Tabla 1. Uniformidad de Dosis
Patente
Genérico
Parámetro
Resultado Especificación Cumple (Si/no)
Valoración
92.12%
Uniformidad de masa
92.12%
valoración
51.03
Uniformidad de masa
51.03
95-105%
No Si
85-115% 95-105% 85-115%
No No
Tabla no. 2: validaci ón del método analítico para la determinación de ASS en perfiles de disolución Cumple Parámetro Criterio Resultado (Sí /No) /No) r>0.99 0.996 S í Linealidad Sy/x≤2.0% 2.089 No Precisión
CV≤2.0%
86.82 %
No
Antes que nada se debe la correcta introducción del método analítico, el cual es el desarrollo experimental de un principio físico o fisicoquímico, que ha probado ser útil para proporcionar información cuantitativa y/o cualitativa o adaptación de una técnica para la obtención de resultados específicos para la resolución de un problema. Cualquier método analítico que se utilice debe incluir un protocolo es decir, un conjunto de instrucciones instrucciones (escritas) minuciosamente minuciosamente detalladas detalladas y que deben seguir al pie de la letra –sin excepcionesexcepciones- para que que los resultados analíticos sean aceptados en un propósito especifico. Seguido de esas características se demostrara si el medicamento a analizar (GI) cumple con la NORMA Oficial Mexicana NOM-164-SSA1-1998 , Buenas prácticas de fabricación para fármacos. Y la NORMA Oficial Mexicana NOM-177-SSA1-1998 , Que establece las pruebas y procedimientos para demostrar que un medicamento es intercambiable. Requisitos a que deben sujetarse los terceros autorizados que realicen las pruebas. Los resultados arrogados durante la validación del método anualito para la determinación de ASS en perfiles de disolución son los siguientes:
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TABL A 2. L INEALIDAD Y PRECISIÓN PRECISIÓN DEL SISTEMA Concentración (µg/mL)
Absor bancia
= 265 nm
Factor de respuest a = Absorción/concentración
CURVA 1
CURVA 2
CURVA 1
CURVA 2
350
20
0.057
0.081
2.85 x10-03
4.05 4.05 x10-03
300
40
0.122
0.124
3.05 x10-03
3.1 x10-03
100
0.247
0.272
2.47 x10-03
2.72 x10-03
200 300
0.727 0.751
0.584 0.950
3.635 x10-03 2.503 x10-03
2.92 x10-03 3.166 x10-03
200
Ordenada al origen (b)
0.0197
0.007
Media (n=10)
0.4676
100
Pendiente Pendiente (m)
0.002734
3.1x10-03 3.1x10-03
DE (n=10)
0.406
Correlación Correlación
0.9586
0.9969
CV (n=10)
86.82
ERR (%)
28.8229
8.1910
400
y = 0.0031x 0.0031x - 0.007 R² = 0.9939 y = 0.0027x + 0.0198 R² = 0.9191
250
CURVA 1 CURVA 2 Lineal (CURVA 1)
150
Lineal (CURVA 2)
50 0 0
100
200
300
400
TABL A 3. L INEALIDAD Y PRECISIÓN PRECISIÓN DEL MÉTODO (PATENTE) Concentración (µg/mL)
Abso rbanci a
= 265 nm
Medi a
DE
CV(%)
CURVA 1
CURVA 2
CURVA 3
2.040 2.040
0.027
1.324 1.324
20
2.020
2.071
2.030
2.114
0.068
3.246
40
2.036
2.159
2.148
2.179
0.143
6.574
100
2.045
2.162
2.330
2.395
0.287
11.996
200 300
2.096 2.154
2.421 2.663
2.669 2.672
2.496
0.296
11.877
3 y = 0.0012x + 2.0472 R² = 0.9755
2.5
y = 0.0009x + 2.0506 R² = 0.9119
CURVA 1
2 y = 0.0005x + 2.0551 R² = 0.9801
1.5
2.008
2.024
Pendiente (m)
0.004
0.002
0.002
Correlación ®
0.996
0.986
0.048
ERR (%)
0.426
2.22
4.56
CURVA 3 Lineal (CURVA 1)
1
Ordenada al origen (b)
CURVA 2
Lineal (CURVA 1)
2.055
Lineal (CURVA 3)
0.5 0 0
100
200
300
400
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TABL A 4. LINEALIDAD Y PRECISIÓN PRECISIÓN DEL MÉTODO (GENERICO) (GENERICO) Concentrac ión (µ (µg/mL)
Abso rbanci a
= 265 nm
Medi a
DE
CV(%)
CURVA 1
CURVA 2
CURVA 3
2.052 2.052
0.026 0.026
1.27 1.27
20
2.073
2.023
2.061
2.097
0.017
0.834
40
2.080
2.115
2.098
2.153
0.051
2.390
100
2.096
2.170
2.195
2.208
0.051
2.340
200 300
2.154 2.222
2.213 2.311
2.257 2.422
2.318
0.100
4.343
Ordenada al origen (b)
2.055
2.056
2.047
Pendiente (m) Correlación ® ERR (%)
0.0005
0.0008
0.0001
0.990
0.954
0.987
0.479
1.70
1.177
3 y = 0.0024x + 2.0551 R² = 0.8989 2.5
y = 0.002x + 2.0252 R² = 0.966 CURVA 1
2
CURVA 2
y = 0.0005x + 2.0087 R² = 0.9807
1.5
CURVA 3 Lineal (CURVA 1)
1
Lineal (CURVA 2) Lineal (CURVA 3)
0.5 0 0
100
200
300
400
TABL A 5. REPRODUCTI REPRODUCTIBILIDAD BILIDAD DEL MÉTODO MÉTODO (PATENTE) 400
Concentración (µg/mL)
Abso rbanci a CURVA 1
20
18.75
= 265 nm
CURVA 2 30.30
CURVA 3
Medi a
DE
CV(%)
0.6933 0.6933
26.962 26.962
38.88 38.88
350
y = 1.0556x - 9.894 9.8941 1 R² = 0.9033
300
y = 1.0026x + 0.0179 R² = 0.9935 CURVA 1 y = 1.0103x - 0.001 0.0016 6 R² = 0.9945
13.63
35.153
5.1627
14.686
250 200
CURVA 3
150
Lineal (CURVA 1)
100
Lineal (CURVA 2)
40
40.41
30.09
34.96
116.14
20.057
17.269
100
45.69
135.78
116.96
219.49
22..32 22.. 32
10.174
200 300
216.80 295.13
234.05 268.58
198.63 297.63
287.11
16.108
5.6078
Lineal (CURVA 3)
50 0 -50
CURVA 2
0
100
200
300
400
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TABL A 6. REPRODUCTIBILIDAD REPRODUCTIBILIDAD DEL MÉTODO MÉTODO (GENERICO) (GENERICO) Concentración (µg/mL)
Abso rbanci a
= 265 nm
Medi a
DE
CV(%)
400
CURVA 1
CURVA 2
CURVA 3
16.576 16.576
8.9896 8.9896
50.000 50.000
350
20
23.37
7.33
19.03
234.41
22.517
89.595
300
40
32.62
0.178
43.45
110.61
27.178
24.571
100
97.68
141.89
92.31
276.25
25.307
11.185
200 300
214.36 241.95
255.32 255.32
209.09 296.1 296. 1
281.12
22.442
7.981
y = 1x - 0.004 0.0046 6 R² = 0.9969 CURVA 1
y = 1x - 0.003 0.0036 6 R² = 0.9938
250
y = 1x - 0.000 0.0007 7 R² = 0.8652
200
CURVA 2 CURVA 3 Lineal (CURVA 1)
150
Lineal (CURVA 2)
100
Lineal (CURVA 3)
50 0 -50
TABL A 7. EXACTITUD DEL PRODUCTO PRODUCTO (PATENTE) Concentración (µg/mL)
Absor bancia
= 265 nm
Media
0
100
200
400 %DE
CURVA 1
CURVA 2
CURVA 3
27.916 27.916
-39.58 -39. 58
20
36
33.75
14
60.75
-51.87 -51.87
40
80
81.25
51
126.68
-26.66 -26.66
100
82
150
148
203.91
-1.958 -1.958
200
198
203.75
210
329.1
-09.08
300
332
326.25
375
y = 1.2078x + 0.1706 R² = 0.9755
350
300
400
y = 1.0566x + 0.1341 R² = 0.9801
300 CURVA 1 250
y = 0.9586x + 32.46 R² = 0.9738
200
CURVA 2 CURVA 3 Lineal (CURVA 1)
150
Lineal (CURVA 2)
100
Lineal (CURVA 3) 50 0 -50
0
100
200
300
400
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TABLA 8. EXACTITUD DEL PRODUCTO (GENERICO) Concentración (µg/mL)
Abso rbanci a
= 265 nm
Medi a
%DE
400
13.606 13.606
31.67 31.67
350 300
CURVA 1
CURVA 2
CURVA 3
20
30
23.5
-12.5
60.5
-51.25
40
67.5
67.5
465
99.666
0.334
100
92.5
69
137.5
241.63 -20.91
200 300
220 365
198.5 319.5
307 308.5
333
-10.33 -10.33
y = 1.1616x + 1.6655 R² = 0.9807
y = 1.0227x + 0.6079 R² = 0.966
y = 1.1922x + 0.0343 R² = 0.8989
250
CURVA 1 CURVA 2
200
CURVA 3
150
Lineal (CURVA 1) Lineal (CURVA 2)
100
Lineal (CURVA 3)
50 0 -50
0
100
200
300
400
TABL A 9. ESPECIFICIDAD ESPECIFICIDAD Absorbancia Ab Absorba rbancia a la lon longitu itud de onda máxima ( Ab Absorba rbancia a la lon longitu itud de onda minim inima ( Rel A maxRef/ maxStd Rel maxP axPba/ ba/ maxS axStd Rel Rel maxPba/A axPba/A mdaxRe daxReff Rel A maxRef/ maxStd Rel maxP axPba/ ba/ maxS axStd Rel maxP axPba/ ba/ maxR axRed
Solución estándar ASS Solución producto referencia Sol. Producto de Prueba en 100 µg/mL en 100 µg/mL en 100 µg/mL max= 350) 0.02 .023 0.01 .014 0.17 .17 max= 200) 0.15 .151 0.16 .163 0.23 .230 0.60 .608 0.73 0.739 9 1.214 1.214 1.07 .079 1.52 1.523 3 1.41 1.411 1
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RESULTADOS Parámetro Parámetro
Criterio de aceptación
Resultados
Dictamen
Linealidad del sistema Precisión del sistema Linealidad del método Precisión del método, método, Repetit Repetitivi ividad dad Precisión del método, método, Reproducibili Reproducibilidad dad Exactitud Exactitud del método
Valor de r superior a 0.99 Sy/x al ≤ 2.0 % CV ≤ al 2.0 % Valor de r superior a 0.99 Sy/x ≤ al 3.0 % CV ≤ al 3.0 % CV ≤ al 3.0% DEA ≤ al 3.0 %
0.9586 2.882 Referencia Genérico Referencia Genérico Referencia Genérico Referencia Genérico
NO CUMPLE NO CUMPLE NO CUMPLE NO CUMPLE NO CUMPLE NO CUMPLE NO CUMPLE NO CUMPLE NO CUMPLE NO CUMPLE
CRITERIOS DE ACEPTACIÓN Paráme Parámetro tro Linealidad del sistema Precisión del sistema Linealidad del método Precisión del método, método, Repetibi Repetibililidad dad Precisión del método, método, Reproducibili Reproducibilidad dad Exactitud Exactitud del método.
Además de que la realización de un método analítico proporciona resultados fiables y adecuados siempre y cuando se valore la “validac vali dación del método ” para el propósito requerido, permitiendo nos tomar una decisión basada en la información obtenida. Queda determinada la resolución acerca de la intercambiabilidad de un medicamento “ Genérico” con uno de “ Patente” y los resultados muestran que no cumple con las pruebas y procedimientos, en este caso perfil de disolución.
Criterio Criterio de acep ación Valor de r superior a 0.99 Sy/x ≤ al 2.0 % CV ≤ al 2.0 % Valor de r superior a 0.99 Sy/x ≤ al 3.0 % CV ≤ al 3.0 % CV ≤ al 3.0 % DEA ≤ al 3.0 %
De acuerdo a los resultados obtenidos para este método, no se obtuvo éxito. Por lo tanto no cumple con los requisitos establecidos.
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Tablas 3. Validaci ón del método
P a t e n t e
G e n é r i c o
Q
Q%
(R T –T)2
T
ABS.
10
0.128
39.5650
7.912
4565.70.49 4565.70.4 9
15 20
0.310 0.363
106.11 125.4915
21.22 25.09
238.0849 273.2409
30
0.139
43.5876
8.716
1507.30.29 1507.30.2 9
45
0.206
68.0857
13.610
481.3636 481 .3636
60
0.163
52.3630
10.472
4322.0105 4322. 0105
10
1.052
377.4191
75.48
4565.7049
15 20 30
0.521 0.589 0.670
183.2630 208.1267 237.7437
36.65 41.62 47.54
238.0849 273.2409 1507.3029
45
0.506
177.7784
35.55
481.3636
60
1.062
381.0750 76.214 11387.7077
Ʃ
Para verificar el estudio se pudo realizar la prueba de intercambiabilidad mediante la fórmula:
4322.0105
Sustituyendo los resultados en la formula se obtuvo el factor de intercambiabilidad, el cual mostro un valor de:
=
Tabla 4. Perfil de disolución 120 o 100 t l e u s i 80 d d o 60 c a ) m r ( % 40 á f e d 20 d a d i 0 t n a C
Para el perfil de disolución, que es el procedimiento final para verificar la intercambiabilidad de un medicamento patente con un genérico, el resultado obtenido nos indica que no cumple con los parámetros que se piden. Por lo tanto el medicamento no es intercambiable.
F2=18.0410 DISCUSION Y CONCLUSION
5
Patente Genérico
1 0
20
Tiempo (min.)
30
De acuerdo a la NOM-177-SSA-1998 nos indica que para un medicamento genérico sea intercambiable con un medicamento patente nos tiene que arrojar un valor para F2 entre 50 y 100. Como se observa en el resultado se obtuvo un valor de 18.0410 y por lo tanto es menor a 50, esto quiere decir que de acuerdo a la norma el medicamento genérico no es intercambiable con el patente.
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BIBLIOGRAFIA -FEUM (2004) (8ª edición) 1369-1370 pp.; 384-397pp -Gennaro, R. Alfons; Marderosian, Der H. Ara; Hanson, R. Glen; Medwick, Thomas; Popovich, G. Nicholas; Schnare, L. Roger; S; Schwartz, B. Joseph; White, H. Steve. (2000) Remington Farmacia (20ª edición). Tomo 1. México: Editorial Medica P anamericana.
