Laporan Praktikum Teknik Teknik Dasar Laboratorium Laboratorium Biomedik Biomedik
BAB I PENDAHULUAN
1.1 Teori
Spek Spektr trof ofot otom omet etri ri
adal adalah ah suat suatu u
meto metode de anal analis isis is
yang ang
berd berdas asar arka kan n
pada pada
pengukuran serapan sinar monokromatis oleh suatu lajur larutan berwarna pada panjang gelombang yang spesifik dengan menggunakan monokromator prisma atau kisi difraksi dan detector vacuum phototube atau tabung foton hampa. Alat yang digunakan adalah spektrofotometer, yaitu sutu alat yang digunakan untuk menentukan suatu senyawa baik secara kuantitatif maupun kualitatif dengan mengukur transmitan ataupun absorban dari suatu cuplikan sebagai fungsi dari konsentrasi. Spektrometer menghasilkan sinar dari spectrum dengan panjang gelombang tertentu dan fotometer adalah alat pengukur intensitas cahaya yang ditransmisikan atau diabsorbsi (Harjadi, 1!". Spektrofotometer adalah alat untuk mengukur transmitan atau absorban suatu sampel sebagai sebagai fungsi fungsi panjang panjang gelombang gelombang.. Sedangkan Sedangkan pengukura pengukuran n menggunak menggunakan an spektrofotometer ini, metoda yang digunakan sering disebut dengan spektrofotometri (#asset, 1$". Spektrometri %&'&is adalah salah satu metoda analisis yang berdasarkan pada penurunan intensitas cahaya yang diserap oleh suatu media. #erdasarkan penurunan intensitas cahaya yang diserap oleh suatu media tergantung pada tebal tipisnya media dan konsentrasi warna spesies yang ada pada media tersebut. Spektrometri visible umumnya disebut kalori, oleh karena itu pembentukan warna pada metoda ini sangat menentukan ketelitian hasil yang diperoleh. embentukan warna dilakukan dengan cara cara pena penamb mbah ahan an peng pengom ompl plek ekss yang yang selek selekti tiff terh terhad adap ap unsu unsurr yang yang dite ditent ntuk ukan an ()atimah, *!!+". Spektrofot Spektrofotometri ometri menyiratkan menyiratkan pengukuran pengukuran jauhnya jauhnya penyerapan penyerapan energi energi cahaya cahaya oleh suatu sistem kimia itu sebagai suatu fungsi dari panjang gelombang radiasi, demik demikia ian n pula pula peng penguk ukur uran an peny penyera erapa pan n yang yang meny menyend endiri iri pada pada suatu suatu panj panjan ang g gelombang tertentu (%nderwood, 1-".
1
Sonata Daniatiek 04112681620045
Laporan Praktikum Teknik Teknik Dasar Laboratorium Laboratorium Biomedik Biomedik
Spektrofotometri ini hanya terjadi bila terjadi perpindahan elektron dari tingkat energi yang rendah ke tingkat energi yang lebih tinggi. erpindahan elektron tidak diikuti oleh perubahan arah spin, hal ini dikenal dengan sebutan tereksitasi singlet (hopkar, 1!". Spektrofotometer adalah alat untuk mengukur transmitan atau absorban suatu sampel sebagai sebagai fungsi fungsi panjang panjang gelombang gelombang.. Sedangkan Sedangkan pengukura pengukuran n menggunak menggunakan an spektrofotometer ini, metoda yang digunakan sering disebut dengan spektrofotometri. Spektrofotometri dapat dianggap sebagai perluasan suatu pemeriksaan visual dengan studi yang lebih mendalam dari absorbsi energi. Absorbsi radiasi oleh suatu sampel diukur diukur pada pada berbag berbagai ai panjan panjang g gelomb gelombang angdan dan dialir dialirkan kan oleh oleh suatu suatu perkam perkam untuk untuk menghasilkan menghasilkan spektrum tertentu yang khas untuk komponen komponen yang berbeda berbeda (Saputra, (Saputra, *!!". Sala Salah h
satu satu cont contoh oh inst instru rume ment ntas asii
anal analis isis is yang yang lebi lebih h
kom komplek plekss
adal adalah ah
spektrofotometer %&'&is. Alat ini banyak bermanfaat untuk penentuan konsentrasi senyawa'senyawa yang dapat menyerap radiasi pada daerah ultraviolet (*!! / $!! nm" atau daerah sinar tampak ($!! / !! nm". Analisis ini dapat digunakan yakni dengan penentuan absorbansi dari larutan la rutan sampel yang diukur. rinsip penentuan spektrofotometer %&'&is %&'&is adalah aplikasi dari Hukum 0ambert' #eer, yaitu A 2 / log 3 2 / log 4 t 5 4! 2 6 . b . 7 8imana A 2 Absorbansi dari sampel yang akan diukur 3 2 3ransmitansi 4! 2 4ntensitas sinar masuk 4t 2 4ntensitas sinar yang diteruskan 6 2 Serapan molar b 2 3ebal 3ebal kuvet yang digunakan digunakan
2
Sonata Daniatiek 04112681620045
Laporan Praktikum Teknik Teknik Dasar Laboratorium Laboratorium Biomedik Biomedik
7 2 onsentrasi dari sampel (3ahir, *!!". 8ari persamaan di atas dapat diketahui bahwa serapan (A" tidak memiliki satuan dan biasanya dinyatakan dengan unit absorbansi. Serapan molar pada persamaan di atas adalah karakteristik suatu 9at yang menginformasikan berapa banyak cahaya yang diserap oleh molekul 9at tersebut pada panjang gelombang tertentu. Semakin besar nilai serapan molar suatu 9at maka semakin banyak cahaya yang diabsorbsi olehnya, atau dengan kata lain nilai serapan (A" akan semakin besar. Hukum 0ambert'#eer di atas berlaku pada larutan dengan konsentrasi kurang dari sama dengan !.!1 : untuk sebagian besar 9at. ;amun, pada larutan dengan konsentrasi pekat maka satu molekul terlarut dapat memengaruhi molekul terlarut lain sebag sebagai ai akib akibat at dari dari kede kedeka katan tan masi masing ng'm 'masi asing ng molek molekul ul pada pada laru larutan tan deng dengan an konsentrasi yang pekat tersebut. etika satu molekul dekat dengan molekul yang lain maka nilai serapan molar dari satu molekul itu akan berubah atau terpengaruh. Secara keseluruhan, keseluruhan, nilai absorbansi absorbansi yang dihasilkan dihasilkan pun ikut terpengaruh, terpengaruh, sehingga sehingga secara kuantitatif nilai yang ditunjukkan tidak mencerminkan jumlah molekul yang diukur di dalam larutan uji. Adapun instrument dari spektrofotometri %&'vis %&'vis yaitu 1. Sumber radiasi Sumber radiasi pada spektrofotometer harus memiliki panacaran radiasi yang stabil dan intensitasnya tinggi. Sumber Sumber radiasi pada spektrofotometer %&'& %&'&is is ada tiga macam A. Sumber radiasi 3ungsten 3ungsten (
Sonata Daniatiek 04112681620045
Laporan Praktikum Teknik Teknik Dasar Laboratorium Laboratorium Biomedik Biomedik
7. Sumber radiasi merkuri. Sumber radiasi ini memiliki panjang gelombang =-+ nm. *. :onokromator :ono :onokr kro omato matorr
adal adalah ah
alat alat
yang ang
akan akan
mem memecah ecah
cah cahaya aya
polik likroma romati tiss
menjad menjadii cahaya cahaya tungga tunggall (monok (monokrom romatis atis"" dengan dengan kompon komponen en panjang panjang gelomb gelombang ang tertentu. #agian'bagian monokromator, yaitu A. risma risma risma akan akan mendisp mendispersi ersikan kan radiasi radiasi elektro elektromag magnet netik ik sebesar sebesar mungk mungkin in supaya supaya di dapatkan resolusi yang baik dari radiasi polikromatis. #. >rating (kisi difraksi" isi difraksi memberi keuntungan lebih bagi proses spektroskopi. 8ispersi sinar akan disebarkan merata, dengan pendispersi yang sama, hasil dispersi akan lebih baik. Selain itu kisi difraksi dapat digunakan dalam seluruh jangkauan spektrum. 7. 7elah optis 7elah ini digunakan untuk mengarahkan sinar monokromatis yang diharapkan dari sumber sumber radiasi radiasi.. Apabi Apabila la celah celah berada berada pada pada posisi posisi yang yang tepat, tepat, maka maka radiasi radiasi akan akan dirotasikan melalui prisma, sehingga diperoleh panjang gelombang yang diharapkan. 8. )ilter #erfungsi untuk menyerap warna komplementer sehingga cahaya yang diteruskan merupakan cahaya berwarna yang sesuai s esuai dengan panjang gelombang yang dipilih. =. Sel kuvet ebanyakan ebanyakan spektrofotom spektrofotometri etri melibatkan melibatkan larutan larutan dan karenanya karenanya kebanyakan kebanyakan kuvet adalah sel untuk menaruh cairan ke dalam berkas cahaya spektrofotometer. Sel itu haruslah meneruskan energi cahaya dalam daerah spektra yang diminati, jadi sel kaca melayani daerah tampak, sel kuarsa atau kaca silica tinggi istimewa untuk daerah ultravi ultraviole olet. t. 8alam 8alam instrum instrument, ent, tabung tabung reaksi reaksi silindr silindris is kadang kadang'kad 'kadang ang diguna digunakan kan 4
Sonata Daniatiek 04112681620045
Laporan Praktikum Teknik Teknik Dasar Laboratorium Laboratorium Biomedik Biomedik
sebagai wadah sampel. enting bahwa tabung'tabung semacam itu diletakkan secara reprodusibel dengan membubuhkan tanda pada salah satu sisi tabung dan tanda itu selalu selalu tetap tetap arahnya arahnya tiap tiap kali kali ditaru ditaruh h dalam dalam instrum instrument. ent. Sel'sel Sel'sel lebih lebih baik baik bila bila permukaan optisnya datar. Sel'sel harus diisi sede mikian rupa sehingga berkas cahaya menembus larutan. %mumnya sel'sel ditahan pada posisinya dengan desain kinematik dari dari pemega pemegangn ngnya ya atau dengan dengan jepitan jepitan berpeg berpegas as yang yang memasti memastikan kan bahwa bahwa posisi posisi tabung dalam ruang sel dari instrument itu reprodusibel. $. 8etektor 8etektor akan menangkap sinar yang diteruskan oleh larutan. Sinar kemudian diubah diubah menjad menjadii sinyal sinyal listri listrik k oleh oleh amplif amplifier ier dan dalam dalam rekord rekorder er dan ditamp ditampilk ilkan an dalam dalam bentuk bentuk angka'a angka'angk ngkaa pada pada reader reader (komp (komputer uter". ". 8etekto 8etektorr dapat dapat member memberika ikan n respon terhadap radiasi pada berbagai panjang gelombang Ada beberapa cara untuk mendeteksi substansi yang telah melewati kolom. :etode umum yang mudah dipakai untuk menjelaskan yaitu penggunaan serapan ultra'violet. #anyak senyawa'senyawa organik menyerap sinar %& dari beberapa panjang gelombang. ?ika anda menyinarkan sinar %& pada larutan yang keluar melalui kolom dan sebuah detektor pada sisi yang berlawanan, anda akan mendapatkan pembacaan langsung berapa besar sinar yang diserap. diserap. ?umlah cahaya yang diserap akan bergantun bergantung g pada jumlah senyawa tertentu tertentu yang melewati melalui berkas pada waktu itu. Anda akan heran mengapa pelarut yang diguna digunakan kan tidak tidak mengab mengabsor sorbsi bsi sinar sinar %&. %&. elaru elarutt menyer menyerapny apnya, a, tetapi tetapi senyawa' senyawa' seny senyawa akan akan meny menyera erap p deng dengan an sang sangat at kuat kuat bagi bagian an'b 'bag agian ian yang yang berb berbed edaa dari dari specktrum %&. :isalnya metanol, menyerap pada panjang gelombang dibawah *!+ nm dan air pada gelombang dibawah 1! nm. ?ika anda menggunakan campuran metanol'air metanol'air sebagai sebagai pelarut, pelarut, anda sebaiknya sebaiknya menggunak menggunakan an panjang panjang gelombang gelombang yang lebih besar dari *!+ nm untuk mencegah pembacaan yang salah dari pelarut. +. @ekorder )ungsi rekorder mengubah panjang gelombang hasil deteksi dari detektor yang diperkuat oleh amplifier menjadi radiasi yang ditangkap detektor kemudian diubah menjadi sinyal'sinyal listrik dalam bentuk spektrum. Spektrum tersebut selanjutnya diba dibawa wa ke moni monito torr sehin sehingg ggaa dapa dapatt diba dibaca ca dalam dalam bent bentuk uk transm transmit itan an maup maupun un absorbansi. 5
Sonata Daniatiek 04112681620045
Laporan Praktikum Teknik Teknik Dasar Laboratorium Laboratorium Biomedik Biomedik
:ekanisme kerja alat spektrofotometer %&'&is adalah sinar dari sumber sinar dilewatkan melalui celah masuk, kemudian sinar dikumpulkankan agar sampai ke prisma untuk didifraksikan menjadi sinar'sinar dengan panjang gelombang tertentu. Selanjutnya sinar dilewatkan ke monokromator untuk menyeleksi panjang gelombang yang yang diingi diinginka nkan. n. Sinar Sinar monokr monokroma omatis tis melewa melewati ti sampel sampel dan akan akan ada sinar sinar yang yang diserap dan diteruskan. Sinar yang diteruskan akan dideteksi oleh detektor. @adiasi yang diterima oleh detektor diubah menjadi sinar listrik yang kemudian terbaca dalam bentuk transmitansi.
BAB II METODE
2.1 Pelaksanaan Praktikum Praktikum Isolasi D! ini dilakukan pada " #ari$Tan%%al" &abu$ 21 'ktober 2016 Tempat Tempat
" Laboratorium Biomolekular Biomolekular (akultas (akultas )edokteran )edokteran
*am
" 15+00 s$d selesai selesai 6
Sonata Daniatiek 04112681620045
Laporan Praktikum Teknik Teknik Dasar Laboratorium Laboratorium Biomedik Biomedik
2.2
Alat dan Bahan
2.2.1 Alat !lat -an% diperlukan untuk praktikum spektro.otometer adala/ " •
Spektrofotometer %&'vis %&'vis 1 set
•
>elas kimia 1!! ml1 buah
•
uvet spektrofotpmeter
$ buah
•
Spatula
1 buah
•
#atang pengaduk
1 buah
•
ipet tetes
$ buah
•
>elas ukur
1 buah
•
7orong
1 buah
•
Tissue
,
Sonata Daniatiek 04112681620045
Laporan Praktikum Teknik Teknik Dasar Laboratorium Laboratorium Biomedik Biomedik
Alat "#ektro$oto%eter U& ' &is
2.2.2 Bahan Ba/an -an% diperlukan " a+ Standar den%an konsentrasi 2 5 8 dan b+ Larutan standar + !uadest
2.3 Cara er!a
1. :asing'masing larutan standar dimasukkan dalam kuvet sebanyak 1! ml. *. :asukkan larutan sample *, 5 8 dan masin%masin% ke dalam kuet
8
Sonata Daniatiek 04112681620045
Laporan Praktikum Teknik Teknik Dasar Laboratorium Laboratorium Biomedik Biomedik
"tand
2(
)(
*(
+(
=. 1!! kan transmitan dengan menggunakan blanko, bentuk spektrum lurus. $. 3entukan 3entukan absorbansi masing'masing larutan standar s tandar serta absorbansi sampel pada panjang gelombang $+! nm, +!! nm dan ++! ++! nm +. 3entukan 3entukan panjang gelombang maBimum masing'masing larutan s ample dengan mengamati absorbansi pada panjang gelombang $+! nm, +!! nm dan ++! nm -. 8ari panjang gelombang maBimum yang didapatkan, tentukan absorbansi masing'masing larutan standar dan sampel pada panjang gelombang tersebut. C. Hitung konsentrasi sample B dengan kurva standar dan absorbansi yang telah di ketahui dengan pengukuran sample pada panjang gelombang yang telah ditentukan.
BAB III HA"IL DAN DI"U"I
3. 1 Hasil Dari Praktikum -an% tela/ dilakukan didapatkan /asil seba%ai berikut " 7
Sonata Daniatiek 04112681620045
Laporan Praktikum Teknik Teknik Dasar Laboratorium Laboratorium Biomedik Biomedik
A. Penent,an Pan!an- -elo%an- %aksi%,%
anjang >elombang :aks 2 +!! nm
Absorban Sample pada +!! nm 2 !, *!1
10
Sonata Daniatiek 04112681620045
Laporan Praktikum Teknik Teknik Dasar Laboratorium Laboratorium Biomedik Biomedik
B. ,r/a standar konsentrasi 2(0 )( dan *(
C. 9 17 : ; 008 & 9 0 ,5
Perhit,n-an "a%#le an- tidak diketah,i kadarna
9 17 : ; 008
0201
9 17 : ; 008
:
9 0063
:
96
3.2 Disk,si
rak rakti tiku kum m kali kali ini ini tenta tentang ng pene penent ntuan uan kons konsen entra trasi si dalam dalam sampe sampell deng dengan an menggunakan metode spektrofotometri %&'vis dan menentukan panjang gelombang maksim maksimum. um. ada ada awal percob percobaan, aan, terlebi terlebih h dahulu dahulu dibuat dibuat larutan larutan standar standar sebagai sebagai blanko. #lanko yang digunakan pada percobaan ini adalah sirup marjan. %ntuk menentukan menentukan konsentrasi sample, praktikan praktikan harus menentukan menentukan panjang gelombang gelombang maBimum terlebih dahulu, dengan mengamati nilai absorbansi yang didapatkan pada panjang gelombang tertentu. engukuran sample dilakukan pada panjang gelombang $+! nm, +!! nm dan ++! nm. ada panjang gelombang maBimum, nilai absorbansi merupakan yang paling besar, yang berarti kapasitas sinar radiasi yang diserap paling banyak pada panjang gelombang tersebut. ;amun sebelum itu, nilai transmitan di1!! di1!!kan kan terlebi terlebih h dahulu dahulu dengan dengan menggu menggunak nakan an blanko blanko aDuades aDuades.. Spektr Spektrum um dari blanko tersebut berbentuk garis lurus hori9ontal, yang menandakan blanko tersebut tidak mengandung sampel, namun nyatanya spektrum dari blanko tidak berbentuk garis lurus hori9ontal, ini disebabkan karena blanko telah terkontaminasi oleh 9at lain karena praktikum kami ini menggunakan sample praktikum sesi pertama, sehingga 11
Sonata Daniatiek 04112681620045
Laporan Praktikum Teknik Teknik Dasar Laboratorium Laboratorium Biomedik Biomedik
kami tidak mendapatkan kurva dengan garis lurus dimana seharusnya kurva yang bagus itu dengan @ 2 !, sedangkan kami mendapatkan dengan @ 2 !, C+ :asing'masin :asing'masing g larutan standar diukur diukur absorbansiny absorbansinyaa pada panjang panjang gelombang gelombang tertentu, untuk menentukan panjang gelombang maBimum dari masing'masing larutan standar tersebut. 0arutan standar menunjukkan penjang gelombang maBimum +!! nm dengan dengan absorbansi absorbansi !,*+1. !,*+1. ada masing'masing masing'masing panjang panjang gelombang gelombang maBimum ini ditentukan ditentukan absorbansi absorbansi larutan standar dan absorbansi absorbansi larutan sampel. sampel. 8imana 8imana pada panjang gelombang maBimum +!! nm, absorbansi larutan sampel !,*!1. ;ilai absobansi pada masing'masing panjang gelombang maBimum ini digunakan untuk mene menent ntuk ukan an kons konsen entra trasi si sampl samplee melal melalui ui perh perhitu itung ngan an.. ada ada hasil hasil perco percobaa baan n ini, ini, konsentrasi sampel yang didapatkan adalah - pada panjang gelombang +!! nm. percobaan ini kurang akurat, yang disebabkan karena terjadinya kesalahan pada percobaan. esalahan yang mungkin terjadi terja di pada percobaan ini yaitu kekurangtelitian dalam dalam pembua pembuatan tan larutan larutan serta serta pengen pengencera ceran n yang yang kurang kurang sempur sempurna, na, terjadi terjadiny nyaa serapan radiasi oleh sidik jari pada kuvet, sensitivitas alat, kuvet yang kurang bersih, adanya serapan oleh pelarut, kuvet tergores, adanya gelembung udara atau gas dalam lintasan lintasan radiasi radiasi panjan panjang g gelomb gelombang ang,, ataupun ataupun kekura kekurangt ngtelit elitian ian prakti praktikan kan dalam dalam pengamatan karena terlihat dari kurva standar yang dihasilkan dengan @ 2 !,C+ (Seharusnya @ 2 !,".
12
Sonata Daniatiek 04112681620045
Laporan Praktikum Teknik Teknik Dasar Laboratorium Laboratorium Biomedik Biomedik
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN 5.1 Kesimpulan
8ari raktikum Spektrofotometer ini dapat disimpulkan bahwa 1. Spek Spektr trof ofot otom omet etri ri
%&' %&'vis
adal adalah ah
tek teknik nik
anal analis isis is
spek spektr tros osko kopi pi
yang ang
menggunak menggunakan an sumber sumber radiasi elektromegnetik elektromegnetik ultraviolet ultraviolet dan sinar tampak dengan menggunakan instrumen spektrofotometer. *. rinsi rinsip p kerja kerja spektrofo spektrofotom tometer eter %&'v %&'vis is adalah adalah interaks interaksii yang yang terjad terjadii antara antara energi yang berupa sinar monokromatis dari sumber sinar dengan materi yang berupa molekul =. ada ada percob percobaan aan,, didapa didapatka tkan n panjang panjang gelomban gelombang g maksim maksimum um sebesar sebesar +!! nm dengan absorban !,*+1 dimana absorban bekisar !,* ' !, $. onsen onsentras trasii sampel sampel yang yang didapat didapatkan kan pada pada adalah adalah -
5.2 Saran
ada ada prakti praktikum kum ini disaran disarankan kan agar agar prakti praktikan kan selanju selanjutny tnyaa berhati berhati'ha 'hati ti dalam dalam memip memipet et agar agar memi meminim nimali alisi sirr kesal kesalah ahan an kare karena na abso absorb rban an yang yang teruk terukur ur akan akan mempengaruhi kadar yang akan di hitung dan akan mempengaruhi kurva standar yang didapatkan.
13
Sonata Daniatiek 04112681620045
Laporan Praktikum Teknik Teknik Dasar Laboratorium Laboratorium Biomedik Biomedik
DAFTAR PUSTAKA
)atimah, S, Eanlinastuti dan Eoskasih. *!!+. Kualifikasi *!!+. Kualifikasi Alat Spektrometer Spektrometer UVvis Untuk Penentuan Uranium dan Besi dalam-U30. dalam-U30 . Hasil enelitian Harjadi. 1!. Ilmu 1!. Ilmu Kimia Analitik Dasar . ?akarta 3. >ramedia. >ramedia. hopkar, S. :. *!!=. Konsep *!!=. Konsep Dasar Kimia Analitik. Analitik. ?akarta %niversitas 4ndonesia. Saputra, E.F. *!!. Spektrofotometri. Spektrofotometri. http55www.chem'is'try.org . diakses tanggal 1= 8esember *!!. #asset, ?. 1$. Kimia 1$. Kimia Analisis Kuantitatif Anorgan Anorganik ik . ?akarta F>7. %nderwood, A. 0. 1!. 1! . Analisis Kimia Kiantitatif disi ke nam. nam . ?akarta Frlangga.
14
Sonata Daniatiek 04112681620045
Laporan Praktikum Teknik Teknik Dasar Laboratorium Laboratorium Biomedik Biomedik
TUA" P4ATIUM "PET4O5OTOMETE4
1+ *elaskan prinsip dan ara ker
aban " 1+ !+ !+ rinsip rinsip kerja spektrofot spektrofotometer ometer adalah bila cahaya cahaya (monokro (monokromatik matik maupun maupun
campur campuran" an" jatuh jatuh pada pada suatu suatu medium medium homoge homogen, n, sebagia sebagian n dari dari sinar sinar masuk masuk akan akan dipantulka dipantulkan, n, sebagian sebagian diserap dalam medium itu, dan sisanya sisanya diteruskan. diteruskan. ;ilai yang keluar dari cahaya yang diteruskan dinyatakan dalam nilai absorbansi karena memiliki hubungan dengan konsentrasi sampel. Spektrofotometri uv'vis mengacu pada hukum 0ambert'#eer. Apabila cahaya monokromatik melalui suatu media (larutan", maka sebagian cahaya tersebut akan diserap, sebagian dipantulkan dan sebagian lagi akan dipancarkan. B+ ?ara ker
7ahaya yang berasal dari lampu deuterium maupun wolfram yang bersifat polikromatis
di
teruskan
melalui
lensa
menuju
ke
monokromator
pada
spektrofotom spektrofotometer eter dan filter cahaya cahaya pada fotometer. fotometer. :onokromato :onokromatorr kemudian kemudian akan mengubah mengubah cahaya polikromatis polikromatis menjadi menjadi cahaya monokromatis monokromatis (tunggal". (tunggal". #erkas' berkas cahaya dengan panjang tertentu kemudian akan dilewatkan pada sampel s ampel yang mengandung suatu 9at dalam konsentrasi tertentu. Gleh karena itu, terdapat cahaya yang diserap (diabsorbsi" dan ada pula yang dilewatkan. 7ahaya yang dilewatkan ini kemudian di terima oleh detector. 8etector kemudian akan menghitung cahaya yang diterim diterimaa dan menget mengetahu ahuii cahaya cahaya yang yang disera diserap p oleh oleh sampel sampel.. 7ahaya 7ahaya yang yang diserap diserap sebandi sebanding ng dengan dengan konsent konsentrasi rasi 9at yang yang terkan terkandun dung g dalam dalam sampel sampel sehing sehingga ga akan akan diketahui konsentrasi 9at dalam sampel secara kuantitatif. Atau dengan cara 15
Sonata Daniatiek 04112681620045
Laporan Praktikum Teknik Teknik Dasar Laboratorium Laboratorium Biomedik Biomedik
3empat empatka kan n larut larutan an pemb pemban andi ding ng,, misal misalny nyaa blan blangk gko o dalam dalam sel pert pertama ama sedangkan larutan yang akan dianalisis pada sel kedua. emudian pilih foto sel yang cocok *!!nm'-+!nm (-+!nm'11!!nm" agar daerah yang diperlukan dapat terliputi. 8engan ruang foto sel dalam keadaan tertutup InolJ galvanometer didapat dengan meng menggu guna naka kan n tombo tomboll dark-!urrent . ilih ilih h yang yang diin diingin ginka kan, n, buka buka foto fotosel sel dan dan lewatka lewatkan n berkas berkas cahaya cahaya pada pada blangk blangko o dan InolJ InolJ galvan galvanome ometer ter didapa didapatt dengan dengan memutar tombol sensitivitas. 8engan menggunakan tombol transmitansi, kemudian atur besarnya pada 1!!. 0ewatkan berkas cahaya pada larutan sampel yang akan dianalisis. Skala absorbansi menunjukkan absorbansi larutan sampel . Eang harus dihindari adanya cahaya yang masuk ke dalam alat, biasanya pada saat menutup tenpat kuvet, karena bila ada cahaya lain otomatis jumlah cahaya yang diukur menjadi bertambah.
1. Sumb Sumber er cahay cahayaa poli polikr krom omati atiss masu masuk k ke dalam dalam mono monokr krom omato atorr (disi (disini ni terjad terjadii penyebaran cahaya" *. 8ari monokromator kemudian keluar menuju ke sel sampel, pada sel sampel ini terjadi proses penyerapan cahaya oleh 9at yang ada dalam sel sampel (dimana cahaya yang masuk lebih terang dibandingkan cahaya setelah keluar" =. Selanjutnya cahaya ditangkap oleh detektor dan mengubahnya menjadi arus listrik *. 3ujuan pemanasan alat spektrofotometer sebelum digunakan adalah agar intensitas cahaya cahaya stabil dan maksimal, maksimal, pada prinsipnya prinsipnya mekanisme mekanisme kerja alat spektrofot spektrofotometer ometer adalah pengukuran serapan cahaya yang berinteraksi antara larutan sample dan cahaya sehingga pemanasan spektro sebelum digunakan bertujuan untuk menyempurnakan pendispersian cahaya oleh sumber cahaya polikromatis, dalam hal ini adalah lampu deutrium yang merupakan sumber cahaya %& ' &is &is dalam spektrofotometer.
16
Sonata Daniatiek 04112681620045