FARMACOGNOSIA Y FITOQUIMICA •
•
•
•
•
•
•
•
ESTUDIO ETNOBOTÁNICO Y ETNOFARMACOLÓGICO UBIC UBICAC ACIÓ IÓN N Y RECO RECOLE LECC CCIÓ IÓN N CLASIFICA CLASIFICACIÓN CIÓN TAXONÓMI TAXONÓMICA CA PREP REPARA ARACIÓN CIÓN DE LA MUESTR ESTRA A MÉTODOS Y TÉCNICAS DE EXTRACCIÓN DE METABOLI METABOLITOS TOS SECUNDARI SECUNDARIOS OS ENSA ENSAYO YOS S DE SOLU SOLUBI BILI LIDA DAD D MARCH MARCHA A FITOQ FITOQUÍM UÍMICA ICA CROM CROMAT ATOG OGRA RAF FÍA EN CAP CAPA FINA INA ANAL ANALÍT ÍTIC ICA A Mg. Q.F. María I. Palacios Palacios
•
Las plantas medicinales deben su efecto terapéutico al contenido de metabolitos primarios (azúcares y aminoácidos) y/o metabolitos secundarios o productos naturales (alc (alcal aloi oide des, s, flav flavon onoi oide des, s, terp terpen enoi oide des, s, este estero roid ides es,, quinonas, etc.), que se generan por rutas biog biogen enét étic icas as det determ erminad inadas as,, llam llamad ados os Prin Princi cipi pios os Activo voss de los los Vegetal etalees.
•
Para estudiar científicamente plantas medicinales, necesitamos la contribución multidisciplinaria de botánicos, agrónomos, químicos, farmacólogos, médicos, patólogos, toxicólogos, microbiólogos, antropólogos, sociólogos, etc.
ESTUDIO FITOQUÍMICO DE PLANTAS MEDICINALES •
Estudio Etnobotáni co y Etnofarmacológico
•
Ubicación y recolección
•
Clasificación Taxonómica
•
Prepar ación de la muestra –
Selección de ór ganos
–
Estabilización y E standarización
–
M oli enda y Almacenami ento
RECOLECCIÓN •
Para cada planta medicinal existe un momento adecuado para realizar su recolección. La determinación de los principios activos permite establecer con exactitud el tiempo correcto de la recolección. Sin embargo, para las plantas cuyos principios activos todavía no se conocen, pueden aplicarse algunas reglas generales.
•
Las cortezas deben ser recogidas en la Primavera, en el inicio del verano o en el otoño. La atmósfera húmeda facilita la separación de la corteza. Las cortezas deben ser retiradas cuidadosamente y deben ser cortadas en segmentos verticales. Se debe tener cuidado para no hacer en la corteza cortes horizontales alrededor del tronco, ya que este procedimiento impide la circulación de la savia y produce la muerte de la planta.
•
•
Los órganos subterráneos: las raíces, los tubérculos y los bulbos deben ser recogidos durante el invierno, en el período de reposo vegetativo, cuando el contenido de principios activos alcanza su grado máximo es estos órganos. Las plantas herbáceas y las hojas deben recolectarse cuando se inicia la floración. Algunas plantas permiten más de un corte. A veces, cuando hay períodos secos y lluviosos muy definidos, la recolección de hojas se hace durante el período seco, lo que permite que la planta se regenere durante el período de las lluvias.
•
•
Las sumidades floridas son recogidas durante su floración y antes de la formación de sus semillas. Las flores deben ser cortadas antes de que se abran completamente, aunque en ciertas ocasiones son recolectadas las inflorescencias abiertas. Las frutas se recolectarán antes de alcanzar su estado maduro. Las semillas son recolectadas después de estar maduras; si éstas provienen de frutos carnosos deben estar limpias de los restos de la pulpa que las envuelve y deben estar secas.
•
•
Los períodos de sequía y de lluvia influyen en el contenido de los principios activos. Por ejemplo, el contenido de los alcaloides disminuye después de las lluvias y el de los aceites esenciales aumenta. El contenido de aceites esenciales disminuye después de la época seca. El contenido de los principios activos varía según el período del día. En general los glicósidos alcanzan su mayor concentración en la tarde, mientras que los aceites esenciales alcanzan su máxima concentración alrededor del medio día, a excepción de la manzanilla que alcanza durante la noche la máxima concentración y una calidad mejor de su aceite esencial.
MOLIENDA •
•
•
Objetivo disminución del tamaño de partículas para adecuarla al proceso de extracción. Selección del equipo, está en función de la naturaleza de la droga vegetal y del tamaño de partícula del polvo que se pretende obtener. Los molinos de cuchilla son los más indicados para la mayoría de las drogas vegetales: hojas, tallos, cortezas y raíces.
ALMACENAMIENTO •
•
•
Período recomendado para almacenar hojas y sumidades floridas es de 12 a 18 meses. Para las raíces de 12 a 36 meses. El material debe ser guardados en sacos de fique o en fardos prensados.No saco de plástico. Debe etiquetarse y en la etiqueta debe estar el nombre científico, la parte usada, fecha de recolección, origen, nombre del colector. No expuesto a la luz solar.
NATURALEZA DEL SOLVENTE •
•
•
El solvente extrae selectivamente o no cierta clase de compuestos. Los solventes más utilizados son alcoholes alifáticos o mezcla de estos con agua, logran extraer la gran mayoría de sustancias naturales de interés como los alcaloides, flavonoides, glicósidos cardiotónicos, terpenos. Mezcla alcohol/agua 7:3 o 8:2 para las partes leñosas,raíces y semillas. La proporción 1:1para hojas y partes aéreas verdes.
TIEMPO DE EXTRACCIÓN •
•
Se determina experimentalmente en función del solvente y del equipo seleccionado. El tiempo debe ser suficiente para permitir la separación de los compuestos de interés, aunque se debe tener cuidado para que no sea excesivo.
PROCESOS DE EXTRACCIÓN Se
pueden dividir en dos grupos: Procesos que dan como resultado un equilibrio de la concentración entre el soluto y el residuo (maceración y maceración dinámica). Procesos que agotan completamente la droga (percolación y la extracción en contra corriente )
ESTUDIO FITOQUÍMICO DE PLANTAS MEDICINALES •
Métodos y Técnicas de extracción de Metabolitos Secundarios: –
–
–
–
–
–
–
•
•
Infusión Cocimiento Maceración hidroalcohólica Percolación Extracción continua por Soxhlet Extracción a Reflujo Extracción por Arrastre de Vapor, etc.
Ensayos de Solubilidad Screening fitoquímico
SOLUBILIDAD •
Cuando al droga seca se pone en contacto con el solvente se inicia el proceso extractivo. La penetración del solvente en la célula induce un momento dipolar en las moléculas de los compuestos que van a ser extraídos. La capacidad de asociación puede expresarse en términos de constante dieléctrica.Compuestos polares se disuelven solventes polares, compuestos apolares se disuelven en solventes Apolares.
SOLVENTES •
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
Hexano Tetracloruro de Carbono Benceno Éter etílico Cloroformo Acetato de etilo Butanol Acetona Etanol Metanol Agua
MARCHA DE SOLUBILIDAD 30 mg de Extracto
10 mL Et-O-Et
10 mL n-Hex
10 mL CHCl3
10 mL 10 mL 10 mL Butanol Etanol Metanol
10 mL H2O
Q.F. M ARIA I SABEL PAL ACI OS PAL ACI OS
ESQUEMA GENERAL DE EXTRACCIÓN 100 g MP en polvo Maceración alcohólica x 7 días
Solución Etanólica Concentrar
Extracto Etanólico
Marcha de Solubilidad
Solventes de Polaridad Creciente
Marcha Fitoquímica
Ensayos Biológicos
Metabolitos Secundarios
Técnicas Cromatográficas
Cantidad y tipo de Metabolitos Secundarios
Elucidación Estructural
Ensayos Clínicos
-visible, UV IR 1 13 RMN -H , RMN-C , -EMS CG
Q.F. M ARIA I SABEL PAL ACI OS PAL ACI OS
5 m g d e E x t r a c to + V g o t a s d e r e a c t iv o para: R x . d e la G e la t in a
M A R C H A
F I T O Q U Í M I C A
Taninos
R x . d e l a N i n h i d r in a
A m i n o á c id o s R x . d e l T r i c lo r u r o d e H i e r r o
C o m p u e s t o s f e n ó l ic o s
R x . d e N i t ra t o d e C e r io A m o n ia c al Alcoholes
R x. de Shinoda
F l a v o n o i d e s t í p ic o s R x . d e M a y er
A l c a lo i d e s
R x. de Dragendorff
A l c a lo i d e s R x. de B orntranger
Antraquinonas R x . d e M o l is h
H e t e r ó si d o s
R x . d e V a i n i l li n a - H 2 S O 4
H e t e r ó si d o s Rx. de Aurona
H e t e r ó si d o s
R x . d e l a H i d r o x i la m i n a
C o m p u e s t o s c a r b o n í li c o s
R x . d e la s H i d r a z in a s
C o m p u e s t o s c a r b o n í li c o s R x. de la Prueba d e la e sp u m a
R x . d e L ie b e rm a n
E s t e r o i d e s y /o t e r p e n o i d e s
CROMATOGRAFÍA EN CAPA FINA Está técnica orienta a la separación, identificación y cuantificación de los componentes químicos en una droga vegetal Ventajas: - Se necesita equipo simple y de bajo costo. - Es fácil su comprensión y ejecución - Rapidez, reproducibilidad y versatilidad. - Utiliza pequeña cantidad de solvente y muestra. •
•
CROMATOGRAFÍA EN CAPA FINA - Posibilidad de analizar varias muestras en una sola placa. - Revelas las placas con agentes cromogénicos, lo que hace posible detectar sustancias que absorben en la región UV. - Efectuar separaciones en escala semi preparativa.
Desarrollo del cromatograma
Visualización de Producto
SI QUIERES SER FELIZ PARA 3 HORAS 3 DÍAS 3 MESES TODA TU VIDA
(dicho chino)
TOMA CERVEZA MATA A UN CHANCHO CÁSATE CULTIVA HIERBAS MEDICINALES
GRACIAS
