EXTRACCIÓN DE ÁCIDO NUCLEICOS DE VEGETALES

-Fundamentación teórica: La extracción de ADN requiere una serie de etapas básicas. En primer lugar  tienen que romperse la pared celular y la membrana plasmática para poder  acceder al núcleo de la célula. A continuación debe romperse también la membrana nuclear para dejar libre el ADN. Por último hay que proteger el ADN de enzimas que puedan degradarlo y para aislarlo hay que hacer que  precipite en alcohol.

-Materiales y equipos:      

Una cebolla Jugo concentrado de papaya Sal Agua destilada Alcohol de 96º Lavavajillas

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Papel de filtro para pasar café Vaso Vaso de vidrio alto refrigerado Bureta Cuchillo Licuadora

-Procedimiento: A. Problematización Extraer ADN no es una labor complicada. Solo requiere el seguimiento de ciertos pasos básicos. Algunas técnicas para extraer ADN se usan en la industria, sin embargo, en todas los principios son los mismos. B. Experimentación 1. Corten la zona central de la cebolla en cuadraditos. 2. Echen agua en el vaso y añadan tres cucharadas del detergente y una de sal. Completen el contenido del vaso con agua destilada hasta el tope. Introduzcan en la solución los trozos de cebolla.

3. Licúen la mezcla a máxima velocidad durante 30 segundos. Luego, hagan pasar el licuado a través del filtro. 4. Llenen hasta la mitad el vaso de vidrio alto con la solución filtrada y añadan tres cucharadas del jugo concentrado de papaya. Remuevan la solución. Luego, agreguen cuidadosamente un volumen de alcohol equivalente al del filtrado. El alcohol debe caer por las paredes del vaso  para separar las dos fases. 5. Dejen reposa durante 3 minutos hasta que se forme una zona turbia entre las dos fases. A continuación, introduzcan la bureta y extraigan las fibras  blancas. C. Resultados Describan lo observado en cada paso del experimento. 

Cuando licuaron la cebolla con el detergente.

Se genero mucha espuma y la mezcla se torna de un color más claro. 

Cuando filtraron lo licuado

Pasa más el líquido y se queda la espuma. 

Cuando añadieron alcohol a lo filtrado

La pequeña espuma que había quedado desapareció. D. Análisis de resultados ¿Qué es lo que se forma en la interfase luego de añadir alcohol al vaso de cristal? ¿Qué son las fibras blancas que se extrajeron? Desaparece la pequeña espuma que quedaba después de fíltralo. Después de dos minutos aparecieron fibras blancas las cuales eran el ácido nucleico de la cebolla. ¿Para qué se ha utilizado el detergente en esta experiencia? ¿En donde actúa? Para ayudar romper la pared celular, la membrana nuclear, y la membrana  plasmática.

¿Qué sentido tiene usar jugo de papaya durante el experimento si vamos a extraer ácidos nucleicos de cebolla? El jugo de papaya ayuda a eliminar las proteínas que pueden contaminar el ADN de la cebolla. ¿Para qué hemos utilizado el alcohol en este experimento? ¿Cómo actúa en el proceso de extracción? Para que se formen 2 fases en donde los ácidos nucleicos se elevaran ya que son menos densos que el alcohol.

-Conclusiones: La solución de lavavajillas y sal, con la ayuda de la licuadora, es capaz de romper la pared celular y las membranas plasmática y nuclear. Los zumos de piña y papaya contienen un enzima, la papaína, que contribuye a eliminar las proteínas que puedan contaminar o degradar el ADN. El alcohol se utiliza para concentrar el ADN, ya que éste es soluble en agua, pero cuando se encuentra en alcohol, se desenrolla y precipita en la interface entre el alcohol y el agua.