DETERMINACIÓN DE PROTEÍNAS TOTALES EN SANGRE INTRODUCCIÓN La sangre está constituida por un 5-7% de moléculas proteicas, llamadas proteínas plasmáticas, las cuales están suspendidas en el plasma sanguíneo. Las proteínas están presentes en todas las células y en los distintos líquidos corporales: suero o plasma (66-83g/L), orina (100-200 mg/L), líquido cefalorraquídeo (15-45 mg/dL) Las proteínas son compuestos orgánicos macromoleculares compuestos por carbono, hidrógeno, oxígeno y nitrógeno, la mayoría también contienen azufre y fósforo, están ampliamente distribuidos en el organismo y esenciales para la vida.. Están formadas por la unión de varios aminoácidos, unidos mediante enlaces peptídicos. El orden y disposición de los aminoácidos en una proteína depende del código genético, ADN, de la persona. Actúan como elementos estructurales y de transporte y aparecen bajo la forma de enzimas, hormonas, anticuerpos, factores de coagulación, etc. En el plasma, las proteínas contribuyen a mantener el volumen del fluido circulante, transportan sustancias relativamente insolubles y actúan en la inactivación de compuestos tóxicos y en la defensa contra agentes invasores. La determinación de proteínas totales es útil para el monitoreo de cambios ocasionados por diversos estados de enfermedad. En condiciones patológicas como pérdidas renales, desnutrición, infecciones prolongadas, etc., suelen presentarse hipoproteinemias, mientras que en otras como mieloma múltiple, endocarditis bacteriana y hemoconcentración de diversos orígenes, (ej.: deshidratación) se observan hiperproteinemias. En este informe se dará a conocer sobre la determinación de proteínas totales en sangre usando el reactivo Biuret, la cual es una medición aproximada de todas las proteínas encontradas en la porción líquida de la sangre para identificar el estado de salud de la persona.
OBJETIVO Determinar cuantitativamente la concentración de proteínas totales en una muestra de sangre humana. Determinar proteína sérica en muestra de sangre para
MARCO TEORICO Proteínas Las proteínas son compuestos orgánicos macromoleculares, ampliamente distribuidos en el organismo y esenciales para la vida. Actúan como elementos estructurales y de transporte y aparecen bajo la forma de enzimas, hormonas, anticuerpos, factores de coagulación, etc. Son constituyentes importantes de todas las células y los tejidos y están constituidas por aminoácidos. Las proteínas son introducidas en el organismo a través de los alimentos, donde se dividen en aminoácidos para formar posteriormente las nuevas proteínas a través del proceso conocido como síntesis de proteínas. Las proteínas realizan multitud de funciones en nuestro organismo para su correcto funcionamiento.
Ejemplos de clases de proteínas Enzimas, algunas hormonas, la hemoglobina que transporta al oxígeno, la LDL que transporta al colesterol, el fibrinógeno utilizado en la coagulación sanguínea, el colágeno que interviene en la estructura del hueso y del cartílago y las inmunoglobulinas (anticuerpos).
Proteínas totales en suero Las proteínas totales de nuestro organismo son un conjunto de compuestos orgánicos macromoleculares, de un peso molecular elevado, que están formadas por moléculas llamadas aminoácidos que se unen entre sí por enlaces peptídicos. La secuencia con la que estos aminoácidos se encadenan y el número de cadenas de aminoácidos, determinan cuál es la estructura primaria de las proteínas. Las proteínas totales son el resultado de sumar los distintos componentes proteicos presentes en el organismo tales como: Alfa1, alfa2 , beta gamma globulina y albúmina. Las proteínas fraccionadas, al contrario de las proteínas totales, miden la cantidad específica de cada proteína. Ambas pruebas, proteínas totales y fraccionadas, son útiles a la hora de determinar estados anormales y enfermedades que pueden afectar a nuestro organismo. Cuando se hace referencia a las proteínas totales en suero, se trata de una medición aproximada de todas las proteínas presentes en la parte líquida de la sangre. La prueba que determina las proteínas totales en sangre, examina específicamente la cantidad total de dos tipos de proteínas: globulinas y albúmina. Este examen a menudo se hace para diagnosticar problemas nutricionales, enfermedad renal o enfermedad hepática. Si los niveles de proteínas
totales son anormales, por ejemplo en caso de que el paciente presente proteínas totales bajas, es necesario realizar exámenes adicionales con el fin de identificar el problema específico.
Propiedades
Solubilidad Las proteínas son solubles en agua cuando adoptan una conformación globular.
Capacidad amortiguadora Las proteínas tienen un comportamiento anfótero y ésto las hace capaces de neutralizar las variaciones de pH del medio, ya que pueden comportarse como un ácido o una base y por tanto liberar o retirar protones (H+) del medio donde se encuentra
Especificidad Se refiere a que cada una de las especies de seres vivos es capaz de fabricar sus propias proteínas (diferentes de las de otras especies).
Valores normales de proteínas totales El rango normal de proteínas totales es de 6.0 a 8.3 gm/dl (gramos por decilitro). La cantidad considerada como valor normal de proteínas totales puede variar ligeramente entre pruebas realizadas por distintos laboratorios.
Método de Biuret Se basa en que los enlaces peptídicos de las proteínas y de los péptidos con dos o más enlaces de este tipo reaccionan en solución alcalina con iones cúpricos formando un complejo de color violeta o lila. La
intensidad del color obtenido es proporcional a la cantidad de proteína en la muestra.
Reacción del Biuret. En medio alcalino regulado, los enlaces peptídicos de las proteínas reaccionan con los iones cúpricos del reactivo, dando un complejo de color azul- violáceo cuya intensidad medida fotométricamente a 540 nm, es proporcional a la concentración de proteínas totales de la muestra.
MATERIALES Agua destilada
RESULTADOS CONCLUSIONES 1. En esta práctica se determinó proteínas totales en un suero, las proteínas son esenciales para la vida ya que pueden aparecer en forma de enzimas, hormonas, factores de coagulación. Es importante este estudio ya que se puede reflejar el estado nutricional del paciente. 2. A través del método colorímetro de Biuret se cuantifica las proteínas totales presentes en la muestra, en la que mientras más oscura la coloración de la muestra mayor la concentración de proteínas. 3. La centrifugación y el baño de maría sirven de “catalizadores” de la reacción.
4. Las proteínas se necesitan para la mayoría de las funciones normales del cuerpo, como el mantenimiento, crecimiento, reproducción, lactación y producción de pelo. El déficit de proteína en la dieta reduce las reservas en sangre, hígado y músculos y predisponen a los animales a padecer una variedad de enfermedades graves o incluso fatales. 5. El plasma está constituido por una serie de proteínas que desempeñan funciones vitales en el organismo.
RECOMENDACIONES 1. Tener en cuenta que los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro". 2. Es recomendable tener conocimiento sobre los reactivos provistos, ya que son corrosivos. Provocan irritaci o n cuta nea y ocular, quemaduras ́ ́ graves en la piel y lesiones oculares graves. 3. Evitar el contacto con los ojos, la piel o la ropa 4. En caso de contacto con los ojos: Enjuagar cuidadosamente con agua durante varios minutos. 5. En caso de contacto con la piel: Lavar con agua y jabo n abundantes. ́ 6. Llevar guantes/prendas/gafas/ma scara de proteccio n y utilizar los ́ ́ reactivos guardando las precauciones habituales de trabajo en el laboratorio. 7. Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de acuerdo a la normativa local vigente
BIBLIOGRAFIA 1. https://quizlet.com/167542844/determinacion-de-proteinas-totales-ensuero-mediante-el-metodo-de-biuret-flash-cards/ 2. http://www4.ujaen.es/~esiles/TEMA3PROTEINASalumno.pdf 3. http://www.wienerlab.com.ar/VademecumDocumentos/Vademecum%20espanol/proteinas _totales_aa_sp.pdf 4. http://trabajosmedicos.blogspot.pe/2012/07/determinacion-de-proteinastotales.html 5. https://proteinas.org.es/proteinas-totales 6. https://es.scribd.com/doc/44104775/Determinacion-de-Proteinas-y-de Albumina-3 7. https://es.slideshare.net/lesteryahh/bioquimica-lab-2
