PEMERIKSAAN 3 : PEMERIKSAAN TPHA I. JUDUL II. TANGGAL PRAKTIKUM : III. METODE : TPHA dan Rapid test : Tes hemaglutinasi untuk menentukan Antibodi terhadap Treponema pallidum secara kualitatif dan kuantitatif. : Tes STL (Syphilis TPHA Liquid) menggunakan metode Hemaglutinasi tidak langsung (indirect hemagglutination) untuk mendeteksi antibody spesifik terhadap Treponema Pallidum.. Pallidum VI. DASAR TEORI Sipilis merupakan penyakit menular berbahaya. Penyebabnya kuman Treponema Palledum. Penyebaran paling banyak melalui hubungan seksual. Perkembangan penyakit di dalam tubuh melalui beberapa tahapan: Sipilis Primer (berlangsung antara 4-6 minggu) Sipilis Sekunder Sipilis Laten, biasanya tanpa gejala. Penderita biasanya merasakan bahwa tubuhnya sudah sehat/sembuh. Padahal kuman masih ada dalam darah Sipilis Stadium Lanjut (setelah bertahun-tahun) Sipilis stadium lanjut dapat menginfeksi syaraf. Biasanya terjadi setelah 2-20 bulan sejak tertular. Selain syaraf, kuman juga menginfeksi pembuluh darah. Biasanya terjadi setelah 7 tahun sejak tertular. Jadi jangan kaget, sipilis juga menjadi salah satu penyebab stroke. Terjadi setelah 20 tahun sejak terserang. Untuk mengetahui apakah Anda tertular sipilis atau tidak, Anda harus melakukan Test TPHA (Treponema Palledum Hemaglutination ). Tindakan ini untuk mengetahui secara spesifik apakah ada reaksi antibodi terhadap kuman treponema. Jika di dalam tubuh ditemukan adanya kuman ini, maka hasil tes positif. Pasien dinyatakan positif tertular .
Selain Test TPHA dilakukan juga test VDRL (Venereal Desease Research Laboratory) . Test VDRL dilakukan juga sebagai tindakan skrining awal. Di laboratorium petugas akan mengambil sampel cairan dari tubuh Anda. Kuman TREPONEMA PALLEDUM ini awalnya berkembang biak di tempat masuknya. Bisa dari saluran kencing atau luka infeksi. Kemudian sebagian kuman akan masuk menyerang kelenjar getah bening yang berdekatan dan peredaran darah. Maka biasanya pemeriksaan dilakukan dengan mengambil cairan jaringan dari lesi, kelainan kulit dan darah. Jika positif dokter biasanya memberikan antibiotik. Setelah selesai pengobatan terhadap sifilis maka kembali dilakukan test VDRL yang biasanya menjadi negatif setelah setahun sembuh. VDRL biasanya dipakai untuk menilai hasil efektifitas pengobatan. Jadi seseorang yang terjena sipilis, selama pengobatan harus melakukan VDRL berulang. Tes ini akan menjadi negatif setelah 6-24 bulan setelah pengobatan. Walau pun banyak juga yang tidak berhasil sembuh setelah pengobatan. Bahayanya lagi, sipilis sering juga disertai dengan
penyakit menular seksual (PMS) lainnya. Seperti Gonoerhoe (kencing nanah). Untuk melakukan 2 test ini Anda tinggal mendatangi laboratorium klinik di kota Anda. (http://digilib.unimus.ac.id http://digilib.unimus.ac.id))
Treponema Pallidum Hemagglutination (TPHA TPHA)) merupakan suatu pemeriksaan serologi untuk sipilis dan kurang sensitif bila digunakan sebagai skrining (tahap awal/primer) sipilis. Manfaat Pemeriksaan Pemeriksaan konfirmasi untuk penyakit sipilis dan mendeteksi respon serologis spesifik untuk Treponema pallidum pada tahap lanjut/akhir sipilis. (http://prodia.co.id/imuno-serologi/tpha http://prodia.co.id/imuno-serologi/tpha)) Sifilis yang mempunyai nama lain Great pox, lues venereum, dan morbus gallicus merupakan suatu penyakit kronik dan bersifat sistemik yang disebabkan oleh Treponema pallidum.. Pada perjalanannya dapat menyerang hampir semua alat tubuh, dapat menyerupai pallidum banyak penyakit, mempunyai masa laten, dapat ditularkan melalui kontak seksual dan dari ibu ke janin. Penyakit ini juga mempunyai stadium remisi dan eksaserbasi. Di Indonesia insidensinya 0,61% dengan penderita terbanyak adalah stadium laten, disusul stadium 1 yang jarang, dan yang langka adalah sifilis stadium II. Sifilis dibagi menjadi sifilis kongenital dan akuisita (dapatan). Sifilis kongenital dibagi menjadi sifilis dini (sebelum 2 tahun), lanjut (setelah 2 tahun), dan stigmata. Sifilis akuisita dapat dibagi menurut 2 cara, yaitu secara klinis dan epidemiologik. Menurut klinis sifilis dibagi menjadi 3 stadium: Stadium I, stadium II, dan stadium III. Secara epidemiologik menurut WHO dibagi menjadi: Stadium dini menular (dalam dua tahun sejak infeksi), terdiri atas stadium I (9-90 hari), stadium II (6 minggu-6 bulan atau 4-6 bulan setelah muncul lesi primer, dan stadium laten dini (dalam 2 tahun infeksi). Stadium lanjut tak menular (setelah dua tahun sejak infeksi), terdiri atas stadium laten lanjut (lebih dari 2 tahun), dan stadium III (3-20 tahun). (http://www.djamilah-najmuddin.com/sifilis-pada-wanita http://www.djamilah-najmuddin.com/sifilis-pada-wanita))
VII. PRA ANALITIK A. Persiapan pasien : Tidak ada persiapan khusus Persiapan sampel : Serum B. ALAT 1. Mikropipet (25 µl, 75 µl, 100 µl). 2. Rak tabung. 3. Sentrifugasi. 4. Spoid. 5. Sumur TPHA. 6. Tabung K3. 7. Tourniqutte. C. BAHAN 1. Kapas alkohol. 2. Rapid test. 3. Reagen TPHA (control cell, test cell, buffer conjugate). 4. Sampel darah(serum atau plasma).
VIII.
ANALITIK Dengan cara Kualitatif :
2.
1. 2.
IX. Posisitif : Negatif :
1. Disiapkan sumur A, B, dan C Ditambahkan 190 чL larutan diluent, dihomogenkan. Lalu ditambahkan 10 чL sampel 3. Dipipet kesumur B dan C sebanyak 75 чL 4. Ditambahkan reagen test disumur B sebanyak 75 чL 5. Dan ditambahkan reagen kontrol di sumur C sebanyak 75 чL 6. Dicampur, dihomogenkan dan diinkubasi selama 45-60 menit Dengan cara Kuantitatif : Dipipet sebanyak 25 чL dari sumur B pada uji kualitatif kedalam sumur A dan B Kemudian dipipet 25 чL larutan diluent disumur B dicampur dihomogenkan, lalu Diambil sebanyak 25µl dari lubang B, campur lalu pindahkan ke C sebanyak 25 µl, begitu seterusnya hingga ke lubang H dan 25 µl terakhir disisihkan. 3. Ditambahkan reagen test pada sumur B – B – H H sebanyak 75 чL. 4. Dicampur, dihomogenkan lalu di inkubasi 45-60 menit.
INTERPRETASI HASIL INTERPRETASI Terjadi Aglutinasi kemudian dilanjutkan untuk tingkatan titer yang lebih besar Tidak terjadi aglutinas
X.
HASIL : I Wayan Agus Sutrimo ELAMIN : Laki-Laki : 20 thn : Negatif (tidak terjadi aglutinasi) XI.
PEMBAHASAN Sipilis merupakan penyakit menular berbahaya. Penyebabnya kuman Treponema Palledum. Penyebaran paling banyak melalui hubungan seksual. Secara garis besar pemeriksaan serologis Treponema palidum dibagi menjadi 2, yaitu pemeriksaan non treponema (uji Wassermann, Rapid Plasma Reagin, Venereal Disease Research laboratory) dan pemeriksaan treponema ( TPPA, FTA-Abs, MHA-TP / TPHA, EIA, uji Western Blot). Pemeriksaan non treponema t reponema yaitu uji yang dilakukan dengan menggunakan suspensi dari sisa jaringan yang telah terinfeksi oleh Bakteri Treponema
palidum sebelumnya. Sementara untuk uji Treponama yaitu uji yang menggunakan suspense langsung bakteri Treponema plidum. Uji non-treponema adalah uji yang mendeteksi antibodi IgG dan IgM terhadap materi-materi lipid yang dilepaskan dari sel-sel rusak dan terhadap antigen-mirip-lipid (lipoidal like antigen) Treponema pallidum. Karena uji ini tidak langsung mendeteksi terhadap keberadaan Treponema pallidum itu sendiri, maka uji ini bersifat non-spesifik. Uji ini akan menjadi negatif 1-4 minggu setelah pertama kali memberi hasil positif (seiring dengan pengobatan atau menyembuhnya lesi), sehingga hanya digunakan untuk melihat keberhasilan pengobatan terhadap penyakit sifilis. Uji non-treponemal meliputi VDRL (Venereal disease research laboratory ), USR (unheated serum reagin), RPR (rapid plasma reagin), dan TRUST (toluidine red unheated serum test ).
Pada praktikum kali ini dilakukan uji Treponema terhadap pasien, dan di perolah hasil negative yang ditandai dengan tidak terbentuknya aglutinasi.
XII.
KESIMPULAN pemeriksaan serologis Treponema palidum dibagi menjadi 2, yaitu pemeriksaan non treponema (uji Wassermann, Rapid Plasma Reagin, Venereal Disease Research laboratory) dan pemeriksaan treponema (TPPA, FTA-Abs, MHA-TP / TPHA, EIA, uji Western Blot). Pada pemeriksaan yang di lakukan diperolah hasil negative karena tidak terjadi aglutina pada sumur uji.
antiseptik dan desinfektan
MIKROBIOLOGI (koefisien fenol) tujuan Menentukan daya hambat suatu sediaan yang berpotensi sebagai antiseptikaatau desinfektan, dengan membandingka n terhadap standar fenol (koefisien fenol) Prinsip pengenceran bertingkat Dengan mengurangi konsentrasi zat sebanyak setengah dari konsentrasi awaldengan volume yang sama V1N1= V2N2 Hasil kali konsen trasi dengan volume sen yawa yang semula dig unakan adalahsama dengan hasil kali konsentrasi senyawa tersebut dalam volume setelahpengenceran Menentukan takaran dengan melihat kekeruhan yang terjadi setelahpercobaan dilakukan TEORI Antiseptik ialah obat yang dapat meniadakan atau mencegah keadaan sepsis.Antiseptik ialah zat yang digunakan untuk membunuh atau mencegah pertumbuhanmikrooranisme, biasanya merupakan sediaan yang digunakan pada ja ring an hidu p(Paul & Batzing,1987). Desinfektan ialah zat yang digunakan untuk mencegah infeksi denganmematikan mikroba, misalnya sterilisasi alat kedokteran. Sterilisasi ditujukan untukmembunuh semua mikroorganisme. Obat ini dapat bersifat bakterisid ataubakteriostatik. Berdasarkan sifat kimia, antiseptik digolongkan dalam golongan fenol,alkohol, aldehid asam, halogen, peroksidan dan l ogam berat(Paul & Batzing,1987 Penyiapan media pertumbuhan mikroorganisme harus mengandung nutrisiyang dibutuhkan bakteri supaya dapat tumbuh membentuk koloni dan harus sterilsehingga tidak ada kontaminan dari lingkungan. Media pertumbuhan dasar untukbakteri adalah Nutrient Broth (NB), Nutrient Agar (NA), Tryptic Soy Broth (TSB), danTryptic Soy Agar (TSA) (August,2001).Cara Kerja Antimikroba,antara lain:a)MerusakDNA.Sejumlah unsur anti mikroba b ekerja denga n merusak DNA. Unsur inimeliputi radiasi pengion (ionisasi), sinar ultraungu, dan zat-zat kimia reaktif DNA.Pada kategori yang terakhir ini terdapat zat-zat alkilasi dan zat lain yang bereaksisecara kovalen dengan basa purin dan pirimidin sehingga bergabung dengan DNAatau membentuk ikatan silang antar untai. Penyinaran merusak DNA melaluibeberapa cara, misalnya sinar ultraungu menyebabkan penyilangan diantarapirimidin yang berdekatan pada salah satu untai yang sama dari dua untaipolinukleotida, membentuk dimer pirmidin. Radiasi pengion memecahkan untaiantunggal atau ganda. Kerusakan DNA yang ditimbulkan karena penyinaran atausecara kimiawi akan mematikan sel terutama karena mengganggu replikasi DNA(J aw et zet. al., 1996).b) Denaturasi protein.Protein terdapat dalam keadaan tiga dimensi, terlipat, yan g dit en tu kan ol ehpertautan disulfida kovalen intramolekul dan sejumlah pertautan nonkovalenseperti ikatan ion, ikatan hidrofob, dan ikatan hidrogen. Keadaan ini dinamakanstruktur tersier protein; struktur ini mudah terganggu oleh sejumlah unsur fisikatau kimiawi, sehingga protein tidak dapat berfungsi lagi. Kerusakan strukturtersier ini dinamakan denaturasi protein (Jawetzet. al., 1996).c)
Gangguan selaput atau dinding sel.Selaput sel berguna sebagai penghalang yang selektif, meloloskan beberapazat terlarut dan menahan zat lainnya. Beberapa zat diangkut secara aktif melaluiselaput, sehingga konsentrasinya dalam sel tinggi. Selaput sel juga merupakantempat bagi banyak enzim yang terlibat dalam biosintesis berbagai komponenpembungkus sel. Zat-zat yang terkonsentrasi pada permukaan sel mungkin mengubah sifat-sifat fisik normalnya dan dengan demikian membunuh ataume ng ha mb at sel. Dinding sel ber laku s ebagai struktur pemberi bentuk pada sel, melindungi sel terhadap lisis osmotik. Dengan demikian, zat yang merusak dinding sel(misalnya lisozim) atau menghalangi sintesis normalnya (misalnyapenisilin) akanmenyebabkan lisis sel (Jawetzet. al., 1996).a. Pembuangan gugus sulfhidril bebas.Berbagai protein enzim yang mengandung sistein memiliki rantai sampingyang berakhir dalam gugus sulfhidril. Selain itu, paling kurang satu koenzim utma(koenzim A, diperlukan untuk transfer gugus asil) mengandung suau gugussulfhidril bebas. Enzimdan koenzim ini tidak dapat berfungsi kecuali gugussulfhidril tetap bebas dan dalam keadaan tereduksi. Zat pengoksidai mengganggumetabolisme dengan mengkat sulfhidril yang berdekatan dengan ikatan sulfida.Banyak logam, misalnya ion merkuri mengganggu pula dengan bergabungbersama sulfhidril. Ada banyak enzim sulfhidril dalam sel. Karena itu, zatpengoksida dan logam berat dapat menimbulkan kerusakan besar (Jawetzet. al.,1996).b. Antagonisme kimiawi. Gangguan suatu unsur kimia terhadap reaksi normal antar enzim khususdengan substratnya dikenal sebagai antagonisme kimiawi . Zat antagonis inibekerja dengan bergabung pada suatu bagian dari holoenzim (salah satu dariapoenzim protein aktivator logam, atau koenzim), dan dengan demikianmencegah penempelan substrat normal.Suatu antagonis bergabung dengan suatu enzim karena mamiliki afinitastehadap tepat penting pada enzim itu. Enzim melaksanakan fungsi katalisisnyaberdasarkan afinitas terhadap substrat alamiahnya. Karena itu, setiap zat yangstrukturnya mnyerupai suatu substrat pada bagian yang penting, akan me mi li ki pula afinitas terhadap enzim tersebut. Bila afinitas ini cukup besar, analog akanmenggantikan substrat normal dan menghalangi reaksi yang biasa berlangsung(Jawetzet. al., 1996).Faktor-faktor yang mempengaruhi kegiatan antiseptik atau desinfekt an yangdig unakan untu k menghambat atau membunuh mikroorganisme adalah: 1.Jenis organisme yang digunakan. 2.Jumlah mikroorganisme yang digunakan 3.Umur dan sejarah dari mikroorganisme. 4.Jaringan atau unsur-unsur yang ada dalam mikrorganisme. a.Efek-efek dari zat kimia terhadap jaringan b.Efek-efek dari jaringan terhadap zat kimia. 5.Jenis racun dari zat kimia (jika diambil secara internal). 6.Waktu bagi zat kimia untuk bekerja dan konsentrasi yang dipakai. 7.Temperatur pada zat kimia dan pada jaringan atau unsur-unsur yang ter lib at( Sar les et. al., 1956).
Ciri-ciri suatu desinfektan yang ideal adalah memenuhi hal -hal berikut : 1.Aktivitas antimikrobial, pada konsentrasi rendah harus mempunyai aktivitasantimikrobial dengan spektrum luas. 2.Kelarutan, harus dapat larut dalam air atau pelarut lain sampai taraf yan gdiperlu kan unt uk da pat di guna kan sec ar a ef ek tif . 3.Stabilitas, perubahan yang terjadi pada substansi bila dibiarkan beberapahari harus seminimal mungkin dan tidak boleh menghilangkan sifatantimikrobialnya secar nyata. 4.Tidak bersifat racun 5.Homogen 6.Tidak bergabung dengan bahan organik 7.Aktivitas antimikrobial pada suhu kamar 8.Tidak menimbulkan karat dan warna 9.Kemampuan menghilangkan bau yang kurang sedap 10.Memiliki kemampuan sebagai deterjen atau pembersihTersedia dalam jumlah yang besar dengan harga yang pantas (Eka,2006).Yang termasuk golongan fenol adalah fenol, timol, resolsinol danheksaklorofen. Fenol merupakan zat pembaku daya antiseptik obat la in sehinggaday a antiseptik diny atakan dengan koefisi en fenol. Obat ini bukan antiseptik yangkuat. Banyak obat lain yang mempunyai daya antiseptik lebih kuat. Dalam kadar0,01-1%, fenol bersifat bakteriostatik. Larutan 1,6% bersifat bakterisid, yang dapatmengadakan koagulasi protein. Ikatan fenol denga protein mudah lepas, sehingga ALAT DAN BAHAN ALAT : 1 Inkubator 2 Labu ukur 100 mL 3 Lampu spirtus 4 Mortir dan stamper 5 Ose 6 Rak tabung 7Stopwat 8Tabung reaksi besar 9Tabung reaksi kecil 10 Volu me pipet 1 BAHAN : 1Aquades 2Fenol 3NutrienBroth ( NB) 4 sediaan uji 5Sediaan uji (lisol) 6Ssesi bakteri
PROSEDUR
Dibuat larutan sediaan uji dengan konsentrasi 2,5% v/v. Direncanakanpengenceran dan dihitung konsentrasi larutan pada masing-masing tabung besar. Dibuat 6 pengenceran bertingkat larutan sediaan uji dan larutan standar fenoldengan air suling steril dalam tabung tabung reaksi besar, sebagai berikut : Diisi 36 tabung reaksi kecil dengan 1 ml NB. Disusun tabung tabung besardan kecil dalam rak tabung. Baris pertama terdiri dari 6 tabung besar yang berisi hasilpengenceran, diberi tanda A, B, C, D, E, dan F. Baris kedua berisi 6 tabung kecil berisiNB, diberi tanda a1,b1,c1,d1,e1,dan f 1 Bari s keti ga sampa i keen am masi ng masi ngberisi 6 tabung kecil berisi NB, diberi tanda a2,b2,c2,d2,e2,dan f 2sa mp ai a6,b6,c6,d6,e6,dan f 6 Dibuat susunan ini untuk sediaan uji dan standar fenol. Dim as uk ka n 0, 2 m Lsuspensi bakteri uji pada masing masing tabung besar secara berurut, denganrentang waktu 30 detik. Dimasukkan masing masing 1 ose larutan dari tabung Asecara berurut ke tabung a1,a2,a3,a4,a5,a6 secara b erurut, de ngan selang waktu 30 detik. Dilakukan juga untuk tabung tabung B, C,D, E, dan F
Sediaanpembanding :Fenol(2,5 %)keterangan : ( - ) bening( + ) keruh VII. PERHITUNGAN Koefisienfenol = (konsentrasi bening pertama + konsentrasi bening terakhir ) sediaan uji(konsentra si bening pertama konsentrasi bening terakhir ) standar fenol=70/140/190/150/1 =0393,0031,0 =0,788 VIII. PEMBAHASAN Percobaan diawali dengan pengenceran desinfektan menjadi beberapamacam konsentrasi. Pengenceran dilakukan secara bertingkat hingga akhirnyadiperoleh konsentrasi tabung A = 1/40; tabung B = 1/50; tabung C = 1/60; tabung D=1/70; tabung E = 1/80; dan tabung F = 1/90. Tabung yang telah berisi desinfektandengan kadar yang berbeda-beda tersebut kemudian ditambahkan suspensi ba kt eriBacill ussubtilli s sebanyak 0,2 ml. Pada saat menambahkan suspensi bakteri,digunakan mikropipet agar volume suspensi bakteri yang diambil benarbenarakurat dan dilakukan dalam keadaan aseptis untuk menghindari terjadinyakontaminas
DAFTAR PUSTAKA August. 2001.Nut r ient Agar nutrien http://www.austin.cc.tx.us/microbugz/01mediaprep.html(diakses : 3 Mei 2010)Byrne. 2004. Heksaklorofen. http://medicastore.com (diakses : 3 Mei 2010)Eka. 2006 . Desinfektan dan Antiseptik http://www.medicastore.com(diakses : 3 Mei 2010)Fontana, Roberta. 2000. �%&(p ; �@ @ ottom: 0px; margin-left: 0px; padding-top: 0px; padding-right: 0px; paddingbottom: 0px; padding-left: 0px; display: block; white-space: nowrap; border-top-style: none; border-right-style: none; border-bottom-style: none; border-left-style: none; border-width: initial; border-color: initial; border-image: initial; line-height: 1; color: rgb(0, 0, 0); font-family: arial,
'helvetica neue', helvetica, Trebuchet, sans-serif; font-style: normal; font-variant: normal; fontweight: normal; letter-spacing: normal; orphans: 2; text-align: center; text-indent: 0px; texttransform: none; widows: 2; word-spacing: 0px; -webkit-text-size-adjust: auto; -webkit-text-strokewidth: 0px; background-color: rgb(255, 255, 255); font-size: 66px; ">
farmasi.poltekesTNI AU cimbuleuit bdg
PEMERIKSAAN VDRL
I.
Tujuan Pemeriksaan Untuk mendeteksi adanya antibody non-treponema (Reagin)
II.
Prinsip pemeriksaan Pada penderita sifilis akan terbentuk antibody yang terjadi sebagai reaksi terhadap bahanbahan yang dilepaskan karena kerusakan sel-sel antibody tersebut disebut regain Regain dalam serum penderita akan berflokulasi bila ditambahkan kardiolipin yaitu antigen yang berasal dari ekstraksi hati sapi.
III.
Alat dan Bahan Pemeriksaan Alat: -
Objek glass
-
Mikropipet 10 µl, 20 µl, 40 µl
-
Pipet ukur 10 ml
-
Mikroskop
-
Penangas air Bahan:
-
Serum darah dan cairan otak
-
Antigen VDRL
-
Larutan garam buffer
IV.
Larutan garam fisiologis (0,9%) Metode
V.
Slide Prosedur pemeriksaan VDRL pada serum Persiapan sampel
-
Serum yang jernih dipanaskan dulu dalam penangas air pada suhu 56 °C selama 30 menit, jangan memakai serum yang keruh atau hemolisis.
-
Pemanasan serum perlu diulang pada 56 °C selama 10 menit bila pemeriksaan dilakukan lebih dari 4 jam setelah pemanasan yang pertama.
-
Pemeriksaan dilakukan bila suhu serum sudah sama dengan suhu kamar (23-29 °C). Reagen
-
Antigen harus tidak berwarna merupakan larutan dalam alcohol yang mengandung 0,03% kardiolipin, 0,9% kolesterol dan leucithin murni (0,21%). Antigen harus disimpan dalam ruangan gelap pada suhu 6-8 °C. bilamana terjadi presipitat, maka larutan antigen tersebut tidak dapat dipergunakan lagi dan harus dibuang. Suspense antigen baru harus dibandingkan terlebih dahulu terhadap larutan antigen yang reaktivitasnya sudah diketahui sebelum dipergunakan dalam pemeriksaan rutin.
-
Larutan garam buffer VDRL dengan pH 6,0+0,1 terdapat komersial atau dapat dibuat dengan komposisi sebagai berikut: Formaldehyde netral : 0,5 ml Na2HPO4
: 0,037 gr
KH2PH2PO4
: 0,170 gr
NaCl Aquadest ad -
: 10.0 gr : 1000 ml
Larutan garam fisiologis (0,9 % NaCl) Persiapan Suspensi Antigen
-
Terlebih dahulu simpan botol antigen dan larutan garam buffer VDRL pada suhu kamar selama 15 menit.
-
Pipet 400 µl larutan garam buffer, masukkan kedalam botol reagen ukuran 30 ml. kemudian ditambahkan 500 µl antigen tetes demi tetes langsung diatas larutan garam buffer sambil menggerakkan botol tersebut dengan gerakan memutar pada bidang yang rata.
-
Lanjutkan gerakan memutar botol selama 10 detik.
-
Tambahkan 4100 µl larutan garam buffer. Kocok 30 kali dalam 10 detik.
-
Suspense antigen siap untuk dipakai dan hanya tahan selama 1 hari.
Prosedur pemeriksaan kualitatif -
Simpan semua alat pemeriksaan, serum dan suspense antigen pada suhu kamar (23°C – 29°C).pemeriksaan yang dilakukan di bawah suhu kamar memberikan reaktivitas yang lebih rendah, sebaliknya bila di atas suhu kamar reaktivitasnya meningkat.
-
Pipet 50 µl serum yang sudah dipanaskan ke atas permukaan slide
-
Pipet 50 µl suspense antigen dan teteskan diatas setiap tetes serum dengan posisi vertical.
-
Slide disimpan di atas rotator dan rotator dihidupkan selama 4 menit. Bila pemeriksaan dilakukan pada udara yang kering dan panas. Sebaiknya slide disimpan di dalam kotak yang berisi tissue/kapas basah untuk menghindari adanya penguapan yang berlebihan.
-
Pembacaan dilakukan segera setelah rotator berhenti dengan menggunakan mikroskop pembessaran 100x.
Pembacaan Hasil Laporan hasil cukup dengan menyebutkan non-reaktif, reaktif lemah atau reaktif REAKTIF REAKTIF LEMAH NON REAKTIF
: Bila tampak gumpalan sedang atau besar : Bila tampak gumpalan kecil-kecil : Bila tidak tampak flokulasi/gumpalan.
Prosedur pemeriksaan kuantitatif -
Letakkan serum sampel pada baris terdepan rak dan baris kedua berisi tabung dengan 700 µl larutan garam fisiologis
-
Buat pengenceran 1:8 dengan menambahkan 100 mikro serum ke dalam 0,7 ml larutan garam fisiologis.
-
Campur hingga homogen.
-
Letakkan 40 mikro. 20 mikro dan 10 mikro serum yang sudah diencerkan pada lingkaran ke 4. 5 dan 6 dari slide keramik.
-
Buang sisa serum yang sudah diencerkan tadi kedalam tabung pengenceran.
-
Dengan menggunakan pipet yang sama, letakkan 40 mikro, 20 mikro dan 10 mikro serum yang tidak diencerkan pada lingkaran pertama, kedua dan ketiga.
-
Tambahkan 20 mikro larutan garam fisiologis pada lingkaran ke 2 dan 5.
-
Tambahkan 30 mikro larutan garam fisiologis pada lingkaran ke 3 dan 6
-
Slide digoyang perlahan-lahan dengan menggunakan kedua belah tangan selama kurang lebih 15 detik untuk memperoleh campuran yang homogen.
-
Tambahkan 10 mikro suspense antigen pada tiap lingkaran.
-
Tahap selanjutnya dilakukan seperti pemeriksaan VDRL kualitatif.
-
Hasil dilaporkan dengan menyebutkan pengenceran serum tertinggi yang masih memberikan hasil reaktif.
CONTOH:
VI.
Pengenceran serum
Laporan hasil
hasil
1:1
Reaktif (+)
Reaktif pada pengenceran
1:2
Reaktif
1:8
1:4
Reaktif
Atau
1:8
Reaktif
Reaktif pada pengenceran
1:16
Non reaktif
8 kali
1:32
Non reaktif
PEMERIKSAAN VDRL PADA CAIRAN OTAK Persiapan sampel Cairan otak disentrfifus dengan kecepatan 300-500 g selama 10 menit kemudian dituangkan kedalam tabung yang bersih. Cairan tersebut siap untuk diperiksa dan tidak perlu pemanasan terlebih dahulu. Cairan otak yang jelas terkontaminasi atau banyak mengandung eritrosit memberikan hasil yang tidak memuaskan.
Persiapan Reagen
-
Antigen, larutan buffer VDRL dan larutan garam fisiologis seperti yag disebutkan pada pemeriksaan VDRL serum.
-
Larutan NaCl 10%
Persiapan suspense antigen -
Buat suspense antigen VDRL seperti yang dilakukan pada pemeriksaan serum
-
Tambahkan 1 bagian dari 10% larutan NaCl pada 1 bagian suspense antigen VDRL.
-
Campur hingga homogen dengan gerakan memutar dan diamkan selama 5 menit. Suspense ini harus segar dan tidak boleh dipakai lebih dari 2 jam sejak penambahan larutan NaCl.
Prosedur Pemeriksaan Kualitatif -
Pipet 50 mikron cairan otak ke dalam bagian cekung dari slide
-
Tambahkan 10 mikro suspense antigenpada tiap sampel cairan otak dengan menggunakan pipet mikro.
-
Slide disimpan di atas rotator dan putar selama 8 menit.
-
Pembacaan dan pelaporan hasil seperti pada pemeriksaan serum kualitatif.
Prosedur pemeriksaan kuantitatif -
Pemeriksaan VDRL kuantitatif pada cairan otak dilakukan bila pada pemeriksaan VDRL kualitatif menunjukkan hasil reaktif
-
Lakukan pengenceran cairan otak sebagai berikut: -pipet 200 mikro larutan garam fisiologis (0,9%) ke dalam 5 buah tabung atau lebih -tambahkan 200 mikro cairan otak ke dalam tabung yang pertama. Campur hingga homogeny dan pindahkan 200 mikro ke dalam tabung nomor 2. -campur hingga homogeny. Kemudian pindahkan 200 mikro cairan dari tabung nomor 2 ke dalam tabung no 3 dan seterusnya, pada tabung terakhir campuran dibuang sebanyak 200 mikro. Sehingga diperoleh pengenceran 1:2. 1:4. 1:8. 1:16 dan seterusnya. - tabung selanjutnya dilakukan seperti pemeriksaan VDRL cairan otak kualitatif tahap 1 sampai dengan 3 -
Pembacaan dan pelaporan hasil dilakukan seperti pemeriksaan serum kuantitatif.
24 FEBRUARI 2011
koefisien fenol Tujuan dari praktikum uji koefisien fenol adalah untuk mengevaluasi daya anti mikroba suatu desinfektan dengan memperkirakan potensi dan efektifitas desinfektan berdasarkan konsentrasi dan lamanya kontak terhadap kuman dan membandingkannya terhadap fenol standard yang disebut koefisien fenol.
Teori Dasar Pengawasan terhadap mikroorganisme penyebab penyakit telah menjadi pemikiran para ahli semenjak penyakit penyakit mulai dikenal. Berbagai macam substansi telah dicoba untuk memilih yang paling tepat guna menghilangkan pencemaran oleh jasad renik terhadap benda-benda baik hidup ataupun mati. Bahan anti mikroba yang ditemukan memiliki keefektifan yang bermacam-macam, dan pengunaannya pun ditujukan terhadap hal-hal yang berbeda-beda pula. Salah satu jenis anti mikroba dikenal sebagai disinfektan, merupakan suatu zat (biasanya kimia) yang dipakai untuk maksud disinfeksi pada bahan-bahan tak bernyawa. Fenol adalah salah satu contoh disinfektan yang efektif dalam membunuh kuman. Pada konsentrasi rendah, daya bunuhnya disebabkan karena fenol mempresipitasikan protein secara aktif, dan selain itu juga merusak membran sel dengan menurunkan tegangan permukaannya. Dengan persetujuan para ahli d an peneliti, fenol dijadikan standar pembanding untuk menentukan aktivitas sesuatu disinfektan. Zat-zat antimikroba yang dipergunakan untuk disinfeksi harus diuji keefektifannua. Cara menentukan daya sterilisasi zat-zat tersebut adalah dengan melakukan tes koefisien fenol. Uji ini dilakukan untuk membandingkan aktivitas suatu produk (desinfektan) dengan daya bunuh fenol dalam kondisi tes yang sama. Berbagai pengenceran fenol dan produk yang dicoba dicampur dengan suatu volume tertentu biakan Salmonella thyphosa atau Staphylococcus aureus.
Prinsip Kerja Pertumbuhan bakteri uji pada media yang sesuai setelah bakteri tersebut kontak dengan disinfektan dalam waktu 5, 10, dan 15 menit. Alat dan Bahan Alat: * Tabung reaksi * Ose/sengkelit * Pencatat waktu (stopwatch) * Mc Farland III (109 kuman/ml) * Vortex * Stiker label * Spiritus Bahan: * Kaldu nutrisi (Nutrient Broth) * Air suling steril * Staphylococcus aureus ATCC 25953 dalam agar nutrisi (Gram +) * Salmonella thyphosa ATCC 6539 dalam agar nutrisi (Gram -) * Larutan NaCl fisiologis 0,9% * Fenol standar
* Desinfektan uji
Prosedur Kerja 1. Pembuatan media Media kaldu nutrisi (Nutrient Broth) dimasukkan dalam 12 tabung reaksi ukuran 20 x 150 mm, volume masingmasing dibuat 5 ml. Komposisi perliter terdiri dari pepton 10 g, ekstrak daging 5 g, dan NaCl 5 g; pH akhir 6,8.
Pembuatan Inokulum
Bakteri Salmonella thyphosa atau Staphylococcus aureus sebelumnya telah ditanam pada agar nutrisi (Nutrient Agar) miring dan diinkubasi pada suhu 37°C selama 24-48 jam. Tahap pengenceran bakteri uji adalah sebagai berikut: 1. Siapkan tabung reaksi berisi 2 ml NaCl fisiologis 0,9% 2. Pindahkan biakan S. thyphosa atau S. aureus tersebut (pilih salah satu) ke dalam larutan NaCl dengan ose, dan setarakan kekeruhannya dengan larutan Mc Farland III (109 kuman/ml) 3. Suspensi kuman tersebut kini diperkirakan berisi 109 kuman/ml 4. Siapkan 3 buah tabung reaksi masing-masing berisi 4,5 ml NaCl fisiologis 0,9% 5. Pipet 0,5 ml dari suspensi kuman sebelumnya (109 kuman/ml), pindahkan ke salah satu tabung reaksi berisi 4,5 ml NaCl. Suspensi kuman kini berkonsentrasi 108 kuman/ml 6. Lakukan pengenceran kedua dengan mengambil 0,5 ml dari suspensi kuman 108 dan meminda hkannya ke dalam tabung berisi 4,5 NaCl yang kedua. Suspensi kuman kini berkonsentrasi 107 kuman/ml 7. Pengenceran terakhir dilakukan dengan memindahkan 0,5 ml dari suspensi kuman 107 ke dalam tabung terakhir NaCl. Suspensi kuman telah setara dengan 106 kuman/ml. Suspensi bakteri dengan konsentrasi inilah yang akan digunakan untuk melakukan uji praktikum ini.
Pembuatan Larutan Baku Fenol
Dibuat larutan persediaan baku fenol 5% dengan cara menimbang 2,5 g fenol dalam 50 ml air suling steril. Kemudian dilakukan pengenceran konsentrasi menjadi 1:80 dengan mempipet 12,5 ml larutan fenol 5% ditambahkan dengan 37,5 ml air suling steril pada tabung steril ukuran 25 x 150 mm.
Pembuatan Larutan Disinfektan
Pengenceran larutan desinfektan dilakukan pada tabung steril berukuran 25 x 150 mm. Tahapannya adalah sebagai berikut: 1. Siapkan 4 buah tabung steril berisi aquades dengan volume yang berbeda-beda d i dalamnya yaitu 9 ml, 7 ml, 4,5 ml, dan 7 ml, secara berurutan 2. Lakukan pengenceran pertama dengan mempipet 1 ml larutan desinfektan ke dalam 9 ml air suling sehingga konsentrasi menjadi 1:10 3. Pengenceran selanjutnya adalah dengan memindahkan 1 ml desinfektan 1:10 ke dalam tabung berisi 7 ml air suling. Konsentrasi desinfektan pada tabung ini adalah 1:80 4. Pindahkan 0,5 ml desinfektan 1:80 ke d alam 4,5 ml aquades sehingga konsentrasi kini 1:100 5. Pipet 0,5 ml desinfektan 1:100 ke d alam tabung berisi 7 ml air suling sehingga konsen trasi pada tabung ini adalah 1:150 6. Desinfektan yang akan dipakai selanjutnya adalah yang konsentrasinya 1:80, 1:100, dan 1:150. Oleh karena itu, samakan volumenya masing-masing menjadi 5 ml Media, bakteri uji, larutan fenol, dan desinfektan telah disiapkan. Dengan demikian kita dapat melakukan inokulasi kuman uji dalam desinfektan dan fenol dengan memperhitungkan waktu kontak 5, 10, dan 15 menit secara akurat. Label 12 tabung berisi Nutrient both den gan menandai F5’, F10’, F15’, DES 1:80 5’, DES 1 :80 10’, DES 1:80 15’, DES 1:100 5’, DES 1:100 10’, DES 1:100 15’, DES 1:150 5’, DES 1:150 10’, DES 1:150 15’. * Uji Fenol Pipet inokulum berkonsentrasi 106 kuman/ml sebanyak 0,5 ml ke dalam larutan fenol 1:80. Tunggu sampai 5 menit,
ambil 1 ose dari campuran tersebut ke dalam tabung berlabel F5’. Lima menit kemudian, ambil lagi 1 ose dari campuran tersebut ke dalam tabung F10’. Setelah lima menit kemudian, ambil 1 ose dari campuran tersebut ke dalam tabung F15’. * Uji I 1:80 Pipet inokulum berkonsentrasi 106 kuman/ml sebanyak 0,5 ml ke dalam desinfektan 1:80. Tunggu sampai 5 menit, ambil 1 ose dari campuran tersebut ke d alam tabung berlabel DES 1:80 5’. Lima menit kemudian, ambil lagi 1 ose dari campuran tersebut ke dalam tabung DES 1 :80 10’. Setelah lima menit kemudian, ambil 1 ose dari campuran tersebut ke dalam tabung DES 1:80 15’. * Uji II 1:100 Pipet inokulum berkonsentrasi 106 kuman/ml sebanyak 0,5 ml ke dalam desinfektan 1:100. Tunggu sampai 5 menit, ambil 1 ose dari campuran tersebut ke d alam tabung berlabel DES 1:100 5’. Lima menit kemudian, ambil lagi 1 ose dari campuran tersebut ke dalam tabung DES 1:100 10’. Setelah lima menit kemudian, ambil 1 ose dari campuran tersebut ke dalam tabung DES 1:100 15’. * Uji III 1:150 Pipet inokulum berkonsentrasi 106 kuman/ml sebanyak 0,5 ml ke dalam desinfektan 1:150. Tunggu sampai 5 me nit, ambil 1 ose dari campuran tersebut ke d alam tabung berlabel DES 1:150 5’. Lima menit kemudian, ambil lagi 1 ose dari campuran tersebut ke dalam tabung DES 1:150 10’. Setelah lima menit kemudian, ambil 1 ose dari campuran tersebut ke dalam tabung DES 1:150 15’. Tabung-tabung reaksi uji kemudian dieramkan di dalam inkubator pada suhu 37°C selama 24-48 jam. Diamati ada tidaknya pertumbuhan bakteri pada setiap tabung Pengamatan cara inokulasi kuman ke dalam disinfectan :
(+) keruh : ada pertumbuhan (-) jernih : tidak ada pertumbuhan
Hasil pengamatan
Setelah tabung reaksi diinkubasi padsa suhu 37°C selama 24 - 48 jam, maka didapatkan hasil sebagai berikut:
Perhitungan
Koefisien fenol adalah hasil bagi dari faktor p engenceran tertinggi desinfektan dengan faktor pengenceran tertinggi baku fenol yang masing-masing dapat membunuh bakteri uji dalam jangka waktu 10 menit, tetapi tidak membunuh dalam jangka waktu 5 menit.
Pembahasan
Dari pengamatan praktikum kali ini didapatkan hasil tes fenol 1:80, suatu desinfektan dengan konsentrasi 1:80, 1:100, dan 1:150. Tes fenol dengan pengenceran 1:80 pada tabel di atas menunjukkan bahwa kuman masih hidup sampai menit ke-10 namun setelah 15 menit, kuman tersebut mati. Hal ini cukup rasional oleh kare na semakin lama fenol tersebut bekerja, semakin efektif pula daya disinfeksinya. Pada pengenceran suatu desinfektan 1:80, tidak terdapat kuman sama sekali dari menit ke-5 sampai menit ke-15. Dengan hasil tersebut, asumsi kami adalah desinfektan ini memiliki kefektifitasan yang cukup bagus sehingga dap at langsung membunuh kuman dengan cepat. Sementara pada pengenceran 1:100, tabung reaksi juga tidak menampakkan kekeruhan dan disimpulkan bahwa tidak ada bakteri yang hidup. Namun pada pengenceran desinfektan yang terakhir, yaitu 1:150, terdapat kekeruhan di menit ke-5 tetapi tidak pada menit ke-10 dan ke-15. Kekeruhan pada pengenceran terakhir ini menimbulkan keraguan pada hasil dari pengenceran 1:100, atau pada pengenceran 1:150 ini. Oleh karena kesalahan yang kami lakukan pada p raktikum ini, kita tidak dapat melakukan perhitungan koefisien fenol.Terjadinya hal ini dapat diakibatkan oleh berbagai faktor kemungkinan. Faktor-faktor kemungkinan penyebab terjadinya kesalahan kami antara lain adalah: * Pengerjaan praktikum secara paralel Kegagalan yang terjadi dalam praktikum ini mungkin ju ga disebabkan oleh pengerjaan tabung Uji Disinfektan secara paralel yang saat itu dimaksudkan untuk mempersingkat waktu pengerjaan. Pengerjaan secara paralel tersebut telah mengakibatkan ketidakakuratan dan ketidaktelitian perhitungan waktu yang diperlukan. * Ketidakakuratan dalam pengambilan kuman menggunakan ose Dalam menginokulasi kuman uji terhadap desinfektan, kami memindahkan kuman tersebut hanya dengan 1 ose. Dengan penggunaan ose, terdapat kemungkinan kuman tidak terangkat sesuai dengan konsentrasi yang diinginkan. Sebab pada percobaan kami, banyak kuman yang mati. Pengambilan kuman dengan 2 ose mungkin dapat lebih akurat. * Penggunaan spiritus yang berlebihan
Banyaknya kuman yang mati juga dapat disebabkan terlalu seringnya dilakukan flambir pada pembuatan inokulum dan pada penginokulasian kuman uji terhadap desinfektan. Kuman S. aureus dan S. thyphosa tumbuh optimum pada suhu 37°C, oleh karena itu tidak diperlukan suhu panas yang berlebihan. * Pengenceran desinfektan yang tidak akurat Pada percobaan kali ini, kami mungkin juga melakukan kesalahan ketika melakukan pengenceran desinfektan ke dalam 1:80, 1:100, 1:150. Pengenceran yang dilakukan tidak akurat, yaitu terlalu banyak desinfektan yang terkandung dalam 1:80 atau 1:100, sehingga desinfektan terlalu pekat dan tidak sebanding dengan jumlah kuman yang dibiakkan. Kesimpulan
Dari percobaan yang kami lakukan tidak dapat d iambil kesimpulan karena tidak ditemukan hasil yang sesuai. sumber : http://pharzone.com/blog/50-mikrobiologi/108-uji-koefisien-fenol.html
diterbitkan oleh wadhy
Pemeriksaan Syphilis RPR Test
Web page design
Rotators
Antibody
Download Software
Pallidum Virus protection software
Free Software
Antigens Download Antibodi terhadap Sifilis mulai terbentuk pada akhir stadium pertama, tetapi kadarnya amat rendah dan seringkali memberi hasil yang negative pada uji serologis. Biasanya IgM terbentuk lebih dahulu, baru diikuti oleh IgG.
Titer antibody ini terus meningkat dan mencapai puncaknya pada stadium kedua untuk selanjutnya
menurun
sedikitdemi sedikit pada stadium laten dan menunjukkan titer yang agak rendah (tetapi masih positif) pada sifilis stadium lanjut (laten sifilis). Pada stadium lanjut ini, IgM telah menurun, bahkan kadangkala menghilang dan hanya IgG yang masih terus
bertahan>
Keadaaan
semacam
Pemberian antibiotika (Penicilline)
akan
ini
tentunya
menurunkan
hanya
terjadi
pada
titer antibody tersebut
penderita Sifilis yang setelah
waktu
tidak tertentu
diobati. yang
tergantungdari stadium penyakitnya. Dalam hal ini antibodi nonspesifik (VDRL) dan IgM spesifik dapat menurun sampai menghilang (negative) dalam waktu tertentu setelah pengobatan sedangkan IgG-spesifik akan bertahan terus selama hayat dikandung badan walaupun telah mendapatkan pengobatan yang intensif dan berhasil.
Dari segi imunoassai, suatu infeksi dengan T.pallida yang dikenal sebagai pengobatan dari Sifilis akan menimbulkan 2 jenis antibody sebai berikut :
Antibodi nontreponemal atau regain sebagai akibat dari sifilis atau penyakit infeksi yang lain. Antibodi ini baru terbentuk setelah penyakit menyebar kekelenjar limfe regional dan menyebabkan kerusakan jaringan. Antibodi
ini
membrikan
reaksi
silang
dengan
beberapa antigen dari jaringan
lain
seperti
misalnya
denganantigen lipoid dari ekstrak otot jantung.
Antibodi treponemal yang bereaksi dengan T.pallida dan closely relat ed Strains. Dalam golongan antibody ini dapat dibedakan 2 jenis antibody yaitu: Group Treponemal antibody, yaitu antibody terhadap antigen somatic yang dimiliki oleh semua Treponemal. Antibodi terponemal yang spesifik, yaitu antibody terhadap antigen spesifik dari T.pallidum.
Pemeriksaan : Syphilis RPR Test
“Tes Cepat untuk menentukan antibodi regin dalam serum atau plasma secara kualitatif dan kuantitatif”
Prinsip
Tes SRPR adalah sebuah tes yang berdasarkan atas reaksi flokulasi non treponemal yang digunakan untuk mendeteksi antibody regain yang timbul pada penyakit Sypilis. Antigen RPR yang digunakan dalam Kit ini adalah modifikasi dari antigen VDRL dimana mengandung partikel arang khusus untuk memperbesar perbedaan antara hasil positif dengan negatif secara Visual.
Isi Kit.
AGS 1 atau 5 x 1,6 ml Suspensi Antigen RPR (tutup merah) Suspensi Cardiolipin, mengandung Mikro arang khusus 0,3%, Na.Azide 0,095% PC 0,5 atau 1 ml Kontrol serum positif (penetes merah) Reaktif terhadap Antigen RPR (manusia), Na.Azide 0,095% NC 1 ml Kontrol serum negatif (Penetes Hijau)
Tidak reaktif terhadap antigen RPR. Na.Azide 0,095%
Alat Yang Digunakan
- Kertas dengan 10 petakan - Jarum untuk AGS (16ul) - Botol dispensi
Spesimen/Sampel
- Plasma, serum (dipanaskan atau tidak), Bebas hemolisis dan kontaminasi - Srum segar bisa disimpan selama 5 hari pada suhu 2-80C atau 4 minggu pada suhu – 20oC
Prosedur
Tes Kualitatif Bawa AGS,PC,NC dan sampel kesuhu ruangan. AGS campur dengan baik, suspensi harus benar-benar homogen sebelum digunakan. Letakkan pada petak-petak berpisah pada kertas menggunakan penetes atau penyalur serum dan lebarkan cairan hingga memenuhi area : Sampel 1 tetes (50 ul) PC 1 tetes NC 1 tetes AGS Masing-masing 1 tetes Miringkan kartu tes dengan lambat selama 8 menit atau letakkan diatas rotator 100 rpm selama 8 menit.
Interpretasi Hasil
- Reaktif®gumpalan besar - Reaktif sangat lemah®Gumpalan kecil - Non reaktif®Tidak ada gumpalan atau sangat halus
Tes Semikuantitatif
Encerkan sampel dengan NaCl 0,9% berturut-turut 1:2, 1:4, 1:8, 1:16, 1:32, Kemudian lanjutkan seperti pada tes kualitatif. Interpretasi Hasil Pengenceran terakhir yang masih positif.
« Cara Menghitung Sel-sel Darah MAKALAH IMUNOLGI »
13
AGU
IMUNOLOGI dan SEROLOGI OLEH IWAN ANALIS PADA AGUSTUS 13, 2012 skip to main | skip to sidebar IMUNOLOGI dan SEROLOGI 1. UJI CRP Tujuan : untuk mendeteksi adanya infeksi kerusakan jaringan, inflamasi Metode : kualitatif Prinsip : aglutinasi pasif terbalik dimana latex dilapisi antibodi CRP dan yang dideteksi adalah antigen CRP dalam serum dengan kadar tinggi, aglutinasi terlihat dalam waktu 2 menit Alat Pemeriksaan : kaca obyek, transferpet + tip, pengaduk Bahan : serum Reagen : Latex (suspensi polysterin latex) Cara Kerja : masukkan 50 mikroL serum dalam test slide, tambahkan satu tetes suspensi, campurkan suspensi dengan cara digoyang. Putar test slide selama dua menit lihat aglutinasi yang terjadi. Interpretasi Hasil : hasil positif = aglitunasi kasar ; positif lemah = aglutinasi halus ; hasil negatif = tidak ada aglutinasi
2. UJI ASO/ASTO Tujuan : mengetahui arah Stertolysin O dalam serum secara kualitatif dimurnikan. Prinsip : suspensi latex dicampur dengan serum dengan kadar meningkat, aglutinasi terjadi dalam waktu 2 menit Alat pemeriksaan : pengaduk, slide test, mikropipet Bahan : serum Reagen : kontrol (+) = mengandung antibodi ASO ; kontrol ( –) = tidak mengandung antibodi ASO ; reagen latex = suspensi partikel latex polysiterin yang dilapisi Streptolysin O Cara Kerja : reagen dan seum diinkubasi dalam suhu kamar, teteskan 50 mikroL serum pasien ke dalam lubang slide. Kocok reagen latex, kemudian teteskan ke dalam lubang dengan penetes yang disediakan. campur tetesan menggunakan alat disposable untuk memastikan seluruh lubang test tercampur. putar test slide, selama 2 menit lihat aglutinasi yang terjadi.
3. PENGUJIAN RF Tujuan : mengetahui Rheumatoid Factor dalam serum secara kualitatif. Metode : Aglutinasi Latex Prinsip : Partikel latex yang dilapisi gamma globulin manusia yang telah dimurnikan, ketika suspensi latex dicampur dengan serum yang kadar RF nya meningkat, aglutinasi jelas terlihat dalam waktu 2 menit. Alat Pemeriksaan : pengaduk, test slide, mikropipet. Bahan : serum Reagen : kontrol (+) = mengandung antibodi RF ; kontrol ( –) = bebas antibodi RF ; latex = suspensi latex polyesterin dilapisi fraksi FC termodifikasi dari IgG dalam buffer stabil. Cara Kerja :reagen dan seum diinkubasi dalam suhu kamar, teteskan 50 mikroL serum pasien ke dalam lubang slide. Kocok reagen latex, kemudian teteskan ke dalam lubang dengan penetes yang disediakan. campur tetesan menggunakan alat disposable untuk memastikan seluruh lubang test tercampur. putar test slide, selama 2 menit lihat aglutinasi yang terjadi.
4. PEMERIKSAAN RPR
Tujuan : digunakan untuk test flokulasi non treponemal untuk penentuan adanya reagen antibodi dalam serum Metode : Slide Test Prinsip : pencampuran terjadi antara kolesterol/cardiolipin/tetrasiklin dalam reagen yang juga terdapat partikel karbon dengan reagen antibodi dalam serum, hasil dapat dilihat secara mikrokopis dalam bentuk gumpalan hitam. Alat Pemeriksaan : pipet serologi, test slide, pengaduk Bahan : serum Reagen : RPR Ag, Kontrol (+), kontrol ( –) Cara Kerja : reagen dan seum diinkubasi dalam suhu kamar, teteskan 50 mikroL serum pasien ke dalam lubang slide. tambahkan 1 tetes reagen antigen pada test spesimen, putar pada 100 Rpm selama 8 menit.
Nilai Normal Laboratorium Patologi Klinik PRIA Hematologi Jenis Spesimen : darah Darah Lengkap Eritrosit : 4.5 – 5.9 (4.5 – 5.5) (juta/ul) Haemoglobin (Hb) : 13.5 – 17.5 (13 – 16) (g/dl) Hematokrit (Ht) : 41.0 – 53.0 (40 – 54) (%) Trombo sit : 150.000 – 440.000 (150.000 – 400.000) (/ul) Leukosit : 4.000 – 11.000 (5.000 – 10.000) (/ul) Laju Endap Darah (LED) : 0 – 10 (mm/jam) Diff count / Hitung Jenis Leukosit Basofil : 0 – 1 (%) Eosinofil : 1 – 3 (%) Batang : 2 – 6 (%)
Segmen : 50 – 70 (%) Limfosit : 20 – 40 (%) Monosit : 2 – 8 (%) Urinalisa Jenis Spesimen : urine midstream / porsi tengah Urine Lengkap Warna : kuning Kejernihan : jernih Glukosa : negatif Bilirubin : negatif Keton : negatif Berat jenis : 1.005 – 1.030 (1.003 – 1.030) Darah samar : negatif pH : 4.5 – 8.0 (5 – 8) Protein : negatif Urobilinogen : 0.1 – 1.0 (EU/dl) Nitrit : negatif Esterase leukosit : negatif Sedimen Leukosit : 0 – 5 (0 – 3) (/LPB) Eritrosit : 0 – 1 (/LPB) Silinder : negatif (/LPK) Epitel : +1 Kristal : negatif Lain-lain : negatif Kimia Darah Glukosa N : 80 – 100 (mg/dl) Glukosa PP : 100 – 120 (mg/dl) Glukosa S : < 150 (mg/dl) Kolesterol total : < 200 (mg/dl) Trigliserida : < 150 (mg/dl) HDL – Kolesterol : > 55 (mg/dl) LDL – kolesterol : < 150 (mg/dl) Ureum : 15 – 40 (mg/dl) Kreatinin : 0.5 – 1.5 (mg/dl) Asam urat : 3.4 – 7.0 (mg/dl)
Bilirubin total : 0.2 – 1 (mg %) Bilirubin direk : 0 – 0.2 (mg %) Bilirubin indirek : 0.2 – 0.8 (mg %) SGOT : 5 – 40 (u/l) SGPT : 5 – 41 (u/l) Alkali Fosfatase : 45 – 190 (iu/l) Gamma GT : 6 – 28 (mu/ml) Protein total : 6.1 – 8.2 (gr %) Albumin : 3.8 – 5.0 (gr %) Globulin : 2.3 – 3.2 (gr %) Imunologi dan Serologi Widal Salmonella typhy Salmonella paratyphy A Salmonella paratyphy B Salmonella paratyphy C VDRL : negatif HbSAg Anti Hbs RF : < 8 (lu/dl) CRP : < 0.8 (Mg/dl) ASTO : < 200 (lu/dl) Wanita Hematologi Jenis Spesimen : darah Darah Lengkap Eritrosit : 4 – 5 (juta/ul) Haemoglobin (Hb) : 12 – 15 (g/dl) Hematokrit (Ht) : 36 – 47 (%) Trombo sit : 150.000 – 400.000(/ul) Leukosit : 5.000 – 10.000(/ul) Laju Endap Darah (LED) : < 15 (mm/jam) Diff count / Hitung Jenis Leukosit Basofil : 0 – 1 (%) Eosinofil : 1 – 3 (%) Batang : 2 – 6 (%) Segmen : 50 – 70 (%)
Limfosit : 20 – 40 (%) Monosit : 2 – 8 (%) Urinalisa Jenis Spesimen : urine midstream / porsi tengah Urine Lengkap Warna : kuning Kejernihan : jernih Glukosa : negatif Bilirubin : negatif Keton : negatif Berat jenis : 1.003 – 1.030 Darah samar : negatif pH : 5 – 8 Protein : negatif Urobilinogen : 0.1 – 1.0 (EU/dl) Nitrit : negatif Esterase leukosit : negatif Sedimen Leukosit : 0 – 3 (/LPB) Eritrosit : 0 – 1 (/LPB) Silinder : negatif (/LPK) Epitel : +1 Kristal : negatif Lain-lain : negatif Kimia Darah Glukosa N : 80 – 100 (mg/dl) Glukosa PP : 100 – 120 (mg/dl) Glukosa S : < 150 (mg/dl) Kolesterol total : < 200 (mg/dl) Trigliserida : < 150 (mg/dl) HDL – Kolesterol : > 65 (mg/dl) LDL – kolesterol : < 150 (mg/dl) Ureum : 15 – 40 (mg/dl) Kreatinin : 0.5 – 1.5 (mg/dl) Asam urat : 2.4 – 5.7 (mg/dl) Bilirubin total : 0.2 – 1 (mg %) Bilirubin direk : 0 – 0.2 (mg %) Bilirubin indirek : 0.2 – 0.8 (mg %)
SGOT : 5 – 40 (u/l) SGPT : 5 – 41 (u/l) Alkali Fosfatase : 45 – 190 (iu/l) Gamma GT : 4 – 18 (mu/ml) Protein total : 6.1 – 8.2 (gr %) Albumin : 3.8 – 5.0 (gr %) Globulin : 2.3 – 3.2 (gr %) Imunologi dan Serologi Widal Salmonella typhy Salmonella paratyphy A Salmonella paratyphy B Salmonella paratyphy C VDRL : negatif HbSAg Anti Hbs RF : < 8 (lu/dl) CRP : < 0.8 (Mg/dl) ASTO : < 200 (lu/dl)
Pemeriksaan CRP (C-reaktif protein) dan RF (rheumatoid factor)
Download Software
Virus protection software
Software Downloads Free antivirus download
Rheumatoid Factor
Free Software
Blog Design
Pemeriksaan CRP (C-reaktif protein) dan RF (rheumatoid factor)
Prinsipnya : terjadinya koagulasi Alat : slide hitam,mikropipet,reagen lateks Menggunakan slide hitam karena reagen lateks berwarna putih sehingga membutuhkan latarbelakang hitam.
Cara kerjanya: Kualitatif
a. Masukkan 20μl sampel dan 20 μl reagen ASTO lateks b. Lebarkan menggunakan lidi sampai bundaran slide hitam penuh c. Goyangkan dan lakukan pengamatan aglutinasi didepan cahaya dal am waktu 2 menit dengan menyalakan stopwacth,jika hasil positif maka l akukan pemeriksaan kwantitatif... Jika hasil negatif maka t idak perlu pemeriksaan lanjut. Kuantitatif
Slide 1
Kualitatif
Slide2 pengenceran ½ x
Slide 3 Pengenceran ¼ x
a.
Masukkan 20 μl sampel + 20 μl NaCl
a.
Masukkan 20 μl sampel + 20 μl NaCl
b.
Campur menggunakan mikropipe
b.
Campur menggunakan mikropipe
c.
Ambil 20 ul taruh dalam slide3
c.
Ambil 20 ul taruh dalam slide4
d.
Tambahkan reagen lateks
d.
Tambahkan reagen lateks
e. Lebarkan menggunakan lidi sampai bundaran slide hitam penuh
e. Lebarkan menggunakan lidi sampai bundaran slide hitam penuh
f. Goyangkan dan lakukan pengamatan aglutinasi didepan cahaya dalam waktu 2 menit dengan menyalakan stopwatch
f. Goyangkan dan lakukan pengamatan aglutinasi didepan cahaya dalam waktu 2 menit dengan menyalakan stopwatch
Lakukan sampai slide keempat,jika pada slide kedua tidak terjadi aglutinasi maka tidak perlu dilanjutkan. Hasil CRP: positif dengan titer 1/8 Hasil RF : positif
Fungsi dan Analisa Berbagai Pemeriksaan Laboratorium Posted on Maret 9, 2012by GrowUp Clinic
Fungsi dan Analisa Berbagai Pemeriksaan Laboratorium
Hematologi Rutin (CBC) Penilaian dasar komponen sel darah yang dilakukan dengan menentukan jumlah sel darah dan trombosit, persentase dari setiap jenis sel darah putih dan kandungan hemoglobin (Hb). Hematologi rutin meliputi pemeriksaan Hb, eritrosit, leukosit, trombosit, hematokrit, dan nilai-nilai MC. Manfaat pemeriksaan untuk mengevaluasi anemia, leukemia, reaksi inflamasi dan infeksi, karakteristik sel darah perifer, tingkat hidrasi dan dehidrasi, polisitemia, penyakit hemolitik pada bayi baru lahir, dan menentukan perlu atau tidaknya kemoterapi.
Elektrolit Di dalam tubuh manusia, kesetimbangan antara air (H2O) -elektrolit diatur secara ketat agar sel-sel dan organ tubuh dapat berfungsi dengan baik. Pada tubuh manusia, elektrolit-elektrolit ini akan memiliki fungsi antara lain dalam menjaga tekanan osmotik tubuh, mengatur pendistribusian cairan ke dalam kompartemen badan air (body’s fluid compartement), menjaga pH tubuh dan juga akan terlibat dalam setiap reaksi oksidasi dan reduksi serta dan ikut berperan dalam setiap proses metabolisme. KALIUM ( K )
Kalium (K) mempengaruhi beberapa organ tubuh utama, termasuk jantung.
Kadar kalium yang tidak normal berhubungan dengan fungsi ginjal (gagal ginjal), muntah atau diare.
NATRIUM ( Na)
Natrium (Na) menunjukkan keseimbangan gula dan air.
Natrium juga menunjukkan baik-buruknya kerja ginjal dan kelenjar adrenal.
Kadar natrium yang tidak normal dalam darah juga menunjukkan volume darah yang terlalu rendah, misalnya akibat dehidrasi (muntah, diare).
Keadaan ini juga bisa terjadi jika jantung tidak memompa darah sebagaimana mestinya.
CALSIUM (Ca)
Kalsium (Ca), adalah bagian utama dari tulang dan gigi.
Kalsium juga dibutuhkan agar saraf dan otot bekerja dengan baik, serta untuk reaksi kimia dalam sel.
Tubuh kita mengatur jumlah kalsium dalam darah.
Namun tingkat protein dalam darah dapat mempengaruhi hasil tes kalsium.
Nilai apapun di luar rentang normal, tinggi atau rendah, memerlukan evaluasi medis.
Glukosa darah
Ini adalah uji untuk mengetahui tingkat/kadar gula dalam darah.
Beberapa pemeriksaan glukosa darah, yaitu
1. glukosa sewaktu (random) 2. glukosa puasa 3. glukosa 2 jam post prandial (setelah makan).
Glukosa sewaktu (random) adalah uji glukosa darah yang dapat dilakukan sewaktu waktu tanpa harus puasa terlebih dulu.
Tes glukosa puasa dilakukan setelah puasa selama 8-10 jam, glukosa 2 jam PP dilakukan dua jam setelah makan.
Uji glukosa puasa dan 2 jam pp merupakan uji untuk menegakkan diagnosis diabetes mellitus (DM).
Kadar glukosa darah sewaktu (tanpa puasa) normalnya berkisar 80 – 140 mg/dL (milligram per desiliter).
Peningkatan kadar gula terjadi setelah makan dan mengalami penurunan pada pagi hari bangun tidur.
Seseorang dikatakan mengalami hyperglycemia apabila kadar glukosa dalam darahnya berada jauh di atas nilai normal.
Sebaliknya, dikatakan hypoglycemia apabila terjadi penurunan kadar glukosa darah dibawah normal.
Kadar glukosa darah puasa normalnya berkisar 70 – 120 mg/dl dan glukosa 2 jam setelah makan normalnya berkisar 80 – 140 mg/dl.
Seseorang dikatakan diabetes jika hasil pemeriksaan pada saat puasa 126 mg/dl atau lebih, dan hasil pemeriksaan 2 jam setelah makan (post prandial) 180 mg/dl atau lebih.
Hasil glukosa darah sewaktu pada diabetes mencapai 140 – 200 mg/dl atau lebih. OK
PEMERIKSAAN LABORATORIUM BERKAITAN DENGAN PENYAKIT GINJAL BUN
Blood Urea Nitrogen (BUN) adalah produk limbah yang dihasilkan dalam hati dan dikeluarkan oleh ginjal.
Nilai tinggi dapat berarti bahwa ginjal tidak bekerja seperti yang diharapkan.
Blood Urea Nitrogen (BUN) juga dipengaruhi oleh diet tinggi protein dan/atau latihan (exercise) yang keras atau kehamilan.
CREATININ
Creatinine merupakan produk limbah dari sebagian besar kerusakan otot.
Tingginya level BUN dan kreatinin dapat menunjukkan masalah pada ginjal.
ASAM URAT
Asam urat (uric acid ) biasanya dikeluarkan bersama air seni. Tingginya level asam urat biasanya terkait dengan masalah encok, arthritis, masalah ginjal dan penggunaan beberapa diuretic.
PEMERIKSAAN FAAL FUNGSI HATI Beberapa protein enzim yang membantu semua aktivitas kimia dalam sel, daintaranya adalah AST/SGOT, ALT/SGPT, Gamma-GT danAlkalin Phosphatase. AST/SGOT, ALT/SGPT, Gamma-GT Alkalin Phosphatase berada di dalam otot, hati dan jantung. Cedera pada sel dapat menyebabkan keluarnya enzim ini ke dalam darah. Kerusakan sel akibat alkohol dan sejumlah penyakit dapat menunjukkan tingginya nilai-nilai enzim-enzim tersebut. ALKALINE PHOSPHATE
Alkaline phosphatase merupakan enzim ditemukan terutama di tulang dan hati. Kadar yang lebih tinggi dapat dijumpai pada anak-anak dan wanita hamil atau kerusakan pada tulang atau hati atau batu empedu.
Kadar yang rendah mungkin tidak signifikan.
GAMMA GT
Gamma GT dijumpai tinggi pada penyakit hati
terutama sumbatan pada saluran empedu.
SGOT / SGPT
Enzim transaminase (AST/SGOT, ALT/SGPT) dijumpai meninggi pada gangguan hati
1. hepatitis 2. overdosis alkohol 3. cedera otot 4. dan serangan jantung.
LDH
LDH ( Lactat dehydrogenase) adalah enzim yang ada di semua sel di dalam tubuh.
Banyak jaringan mengandung LDH yang berfungsi mengkatalisis perubahan reversible laktat ke piruvat.
Kadar LDH meningkat signifikan pada
1. Anemia megaloblastik 2. Metastasis Karsinoma khususnya ke hati
3. Syok dan Hipoksia 4. Hepatitis 5. Infark Ginjal 6. Infark Miokard 7. dll.
Sesuatu yang merusak sel, akan meningkatkan jumlah di dalam darah.
Jika darah tidak segera diproses dengan benar, kadar yang tinggi dapat terjadi.
Jika semua nilai kecuali LDH berada dalam rentang yang diharapkan, itu mungkin suatu proses kesalahan dan tidak memerlukan evaluasi lebih lanjut.
BILIRUBIN Bilirubin adalah pigmen kuning yang berasal dari perombakan sel darah merah oleh hati. Tingginya kadar bilirubin sering dijumpai pada penyakit hati akut (hepatitis akut), anemia hemolitik, batu empedu., Pada penyakit hati konstitusional (Gilbert’s Syndrome), thalasemia, penyakit hati menahun dan anemia pernisiosa, bisanya bilirubin sedikit meningkat. Bilirubin Total Pemeriksaan bilirubin total merupakan pengukuran jumlah total bilirubin dalam darah, meliputi bilirubin tak terkonjugasi dan terkonjugasi. Bilirubin dibentuk dari pemecahan haem pada sistem retikuloendotelial. Bilirubin akan terikat dengan albumin dan bersikulasi di dalam darah, kemudian dikonjugasi dan disekresi oleh hati. Bilirubin terkonjugasi bersifat larut dalam air, sehingga dapat ditemukan di dalam urin. Sementara, bilirubin tak terkonjugasi tidak dapat larut di dalam air. Manfaat Pemeriksaan untuk mendeteksi berbagai kondisi seperti : 1) penyakit hepatobilier, hepatitis, sirosis, dan penyakit hati lainnya; 2) malnutrisi dan anoreksia; 3) anemia pernisiosa, anemia hemolitik, neonatal jaundice, hematoma, dan fetal aritoblastosis; 4) pulmonary embolism; 5) congestive heart failure (CHF). Bilirubin direk Pemeriksaan bilirubin direk merupakan pengukuran kadar bilirubin terkonjugasi dalam darah. Bilirubin dibentuk dari pemecahan haem pada sistem retikuloendotelial. Bilirubin akan terikat dengan albumin dan bersikulasi di dalam darah, kemudian dikonjugasi dan disekresi oleh hati. Bilirubin terkonjugasi bersifat larut dalam air, sehingga dapat ditemukan di dalam urin. manfaat Pemeriksaan untikl mendeteksi berbagai kondisi seperti : 1) lesi intrahepatik dan ekstrahepatik; 2) sindrom Dubin-Johnson dan sindrom Rotor; 3) infeksi bakteri, sepsis, hepatitis B, sifilis, dan TORCH; 4) kelainan genetik dan metabolik seperti galaktosemia, tirosinemia dan trisomy 18.
CREATININ KINASE
CPK (creatininkinase) merupakan enzim yang sangat berguna untuk diagnosing dari penyakit jantung dan kerangka otot.
CPK mengkatalisis pertukaran fosfat secara reversible antara kreatin dan ATP ( Adenosinetrifosfat ), ia berperan penting dalam menyimpan dan melepaskan energi dalam sel terutama dalam otot bergaris, otot jantung dan dalam jumlah kecil dalam ot ak.
Enzim ini adalah yang pertama meninggi setelah serangan jantung (3 hingga 4 jam).
Kadar CPK dalam serum darah meningkat signifikan setelah terjadi kerusakan otot
1. Dsytrophia muscularis Duchenne 2. Polimiositis 3. Infark Miokard 4. dll.
PROTEIN
Protein adalah senyawa organik kompleks yang berperan penting dalam struktur dan fungsi semua sel makhluk hidup dan virus.
Protein diperlukan dalam
1. pembetukan dan perbaikan sel dan jaringan 2. sintesis hormon 3. pembentukan enzim 4. pembentukan antibodi (kekebalan tubuh) 5. transport substansi khusus 6. sistem koagulasi (pembekuan) darah 7. pengaturan keseimbangan kadar asam basa dalam sel.
Protein kebanyakan disintesis di hati, yaitu
1. albumin 2. globulin 3. faktor-faktor pembekuan darah. 4. mengukur jumlah dan jenis protein dalam darah.
Pemeriksaan protein untuk mengetahui indeks kesehatan dan gizi seseorang.
Jenis pemeriksaan protein yang umum dilakukan adalah protein total (protein secara keseluruhan), albumin dan globulin.
PEMERIKSAAN LABORATORIUM BERKAITAN DENGAN PENYAKIT JANTUNG DAN PEMBULUH DARAH PEMERIKSAAN LEMAK DARAH Lemak darah terdiri dari trigliserid dan kolesterol. Sedangkan kolesterol terdiri dari kolesterol HDL (High Density Lipopretein), kolesterol LDL (Low Density Lipoprotein) dankolesterol VLDL (Very Low Density Lipopretein). Semua lemak dalam menu makanan kita akan diolah menjadi trigliserid, asam lemak bebas, fosfolipid dan kolesterol.
Tiga unsur yang perlu diperhatikian sehubungan dengan kesehatan adalah asam lemak bebas, trigliserid dan kolesterol.
Asam lemak bebas yang berlebihan di dalam darah akan diubah sebagai trigliserid.
Sebagian trigliserid digunakan untuk pembentukan kolesterol.
Jika trigliserid menumpuk dalam darah, dengan sendirinya kolesterol juga akan meninggi.
Dalam pemeriksaan laboratorium, lemak diperiksa sebagai kolesterol total (keseluruhan kolesterol), kolesterol HDL, kolesterol LDL dan trigliserid.
Seseorang harus puasa setidaknya 10 jam sebelum diambil darahnya.
Kolesterol total sebaiknya kurang dari 200 mg/dl, kolesterol HDL > 40 mg/dl, kolesterol LDL
Kolesterol HDL
Kolesterol HDL atau High-Density Lipoprotein merupakan lipoprotein yang berasal dari hati, memiliki densitas tinggi dan tidak mudah menggumpal.
Disebut juga sebagai kolesterol `baik` karena membantu “membersihkan” tumpukan kolesterol dari pembuluh darah dan mengangkutnya ke dalam hati (proses Reserve Cholesterol Transport). Manfaat Pemeriksaan untuk memprediksi terjadinya aterosklerosis dan risiko penyakit jantung koroner.
Kolesterol LDL
Kolesterol LDL atau Low Density Lipoprotein merupakan lipoprotein yang berasal dari penyerapan makanan di usus, memiliki densitas rendah, mudah menggumpal dan lengket pada dinding pembuluh darah.
Disebut juga sebagai kolesterol `jahat` karena dapat membentuk plak aterosklerosis yang mempersempit pembuluh darah.
Manfaat pemeriksaan untuk mendeteksi gangguan metabolisme lemak, menentukan faktor risiko penyakit jantung koroner, dan memantau terapi penurun lipid.
Kolesterol total
Kolesterol total merupakan pemeriksaan yang menentukan jumlah kolesterol yang terdapat di dalam semua partikel lipoprotein tubuh (semua jenis kolesterol dan trigliserida).
Pada kondisi penyakit jantung koroner, kolesterol total adalah suatu alat untuk menentukan risiko, bukan sebagai uji diagnostik.
Manfaat pemeriksaan untuk mendeteksi gangguan metabolisme lemak, d an menentukan faktor risiko penyakit jantung koroner.
CRP (C-Reactive Protein)
Protein C reaktif (C-Reactive Protein).
Pemeriksaan CRP digunakan untuk menilai respon tubuh terhadap adanya peradangan.
Sedangkan CRP sensitifitas tinggi atau hsCRP (high sensitive CRP) berguna dalam 1. predicting penyakit pembuluh darah (vascular) 2. serangan jantung 3. stroke.
HEMOCYSTEINE
Homocysteine adalah asam amino yang biasanya ditemukan dalam jumlah kecil di dalam darah.
Lebih tinggi terkait dengan peningkatan risiko serangan jantung dan penyakit vascular lainnya.
Homocysteine tinggi mungkin juga karena adanya kekurangan dari asam folat atau vitamin B12,
Karena turun temurun, usia tua, penyakit ginjal, atau obat tertentu.
Laki-laki cenderung memiliki tingkat yang lebih tinggi.
Kadar homocysteine tinggi dapat dikurangi dengan lebih banyak makan sayur -sayuran hijau, sereal atau vitamin B-12.
LIPOPROTEIN
Lipoprotein (a) atau Lp (a).
Konsentrasi yang tinggi terkait dengan penyakit jantung koroner (PJK).
Pada orang dengan diabetes dan tinggi Lp (a) ada peningkatan risiko penyakit asymptomatic koroner.
THYROID
Thyroid adalah kalenjar yang terletak di leher right below the adam’s apple.
Thyroid mengontrol kecepatan pembakaran energi, membangun energi tubuh, dan mengatur tingkat sensitivitas tubuh terhadap hormon2.
Thyroid juga menghasilkan hormon
1. Thyroxine (T4) 2. Triiodothyronin Triiodothyroninee (T3) yang berperan dalam metabolisme dan pertumbuhan tubuh keseluruhan
Thyroid juga memproduksi hormon kalsitonin (calcitonin) yang berperan dalam mengatur keseimbangan kalsium.
Pembentukan thyroxine (T4) dan triiodothyronine (T3) dikendalikan oleh hormon Thyroid
Stimulating Hormone (TSH) atau juga disebut thyrotropin, suatu hormon yang diproduksi oleh kelenjar pituitary anterior.
Pemeriksaan laboratorium terhadap thyroid terdiri atas
1. T3 total, 2. T4 total, 3. T3 bebas (free T3),
4. T4 bebas (free T4) 5. TSH.
Hasil pemeriksaan thyroid berguna untuk mengetahui aktifitas thyroid.
Beberapa keadaan yang berhubungan dengan aktivitas kelenjar thyroid adalah :
1. hyperthyroidi hyperthyroidisme/hyperactive sme/hyperactive thyroid, seperti pada penyakit graves 2. hypothyroidisme/ hypothyroidisme/hypoactive hypoactive thyroid, seperti pada congenital juvenilis, myxedema, dan goiter (gondok)
GLIKOHEMOGLOBIN
Hemoglobin Glikosilat sering disebut atau Glikohemoglobi Glikohemoglobin n
Glycohemoglobin-A1 atau hemoglobin A1c (HbA1c) berguna untuk mengukur jumlah gula kimia yang menempel pada sel darah merah.
Pemeriksaan ini untuk mengetahui apakah seseorang penderita diabetes terkontrol atau tidak selama 3 bulan.
HORMON INSULIN
Hormon Insulin diproduksi oleh pancreas
Hormon insulin berfungsi dalam metabolisme gula dalam tubuh.
Pada diabetes tipe 1 (turunan), kadar insulin kurang/rendah, kurang/rendah, karena itu tipe ini sangat bergantung pada insulin insulin (insulin dependent dependent diabetes). diabetes).
Sedangkan pada diabetes tipe 2 (didapat), kadar insulin tinggi tetapi fungsinya kurang bagus.
Kadar insulin sangat bervariasi dari orang ke orang, tergantung individu yang sensitifitas atau resistensi terhadap insulin.
Kadar insulin juga sangat bervariasi sesuai dengan saat terakhir makan terjadi.
C- PEPTIDA
C-peptide. Ini adalah fragmen melekat pada insulin (pro-insulin) saat diproduksi insulin dalam pankreas.
Kadar C-peptide biasanya berkorelasi dengan kadar insulin, kecuali bila orang mendapat suntikan insulin.
Ketika seorang pasien hypoglycemic (gula darah rendah), tes ini mungkin berguna untuk menentukan apakah kadar insulin yang tinggi karena pancreas berlebihan dalam melepas insulin, atau karena suntikan insulin.
ESTRADIOL- ESTROGEN
Estradiol adalah hormon estrogen yang penting untuk menilai fungsi reproduksi.
Pemeriksaan estradiol berguna untuk mengukur aktifitas ovarium.
Kadar estradiol pada perempuan bervariasi sesuai dengan usia, dan apakah mereka yang memiliki siklus haid normal atau tidak. \
Kadar hormon ini juga berubah pada kehamilan, melahirkan melahirkan atau penggunaan pe nggunaan pil KB.
PERBEDAAN HASIL PEMERIKSAAN KADAR GLUKOSA DENGAN METODE GOD-PAP DAN CARA STRIP PADA MAHASISWA ANALIS KESEHATAN POLTEKKES KEMENKES TANJUNGKARANG ABSTRAK PERBEDAAN HASIL PEMERIKSAAN KADAR GLUKOSA DENGAN METODE GOD-PAP DAN CARA STRIP PADA MAHASISWA ANALIS KESEHATAN POLTEKES KEMENKES TANJUNGKARANG
Oleh AHMAD AKUAN
Pemeriksaan kadar glukosa sekarang sudah diisyaratkan dengan cara enzimatik, tidak lagi dengan prinsip reduksi untuk menghindari ikut terukurnya zat-zat lain yang akan memberikan hasil tinggi palsu. Cara enzimatik dapat dilakukan dengan cara otomatis seperti dengan GOD- PAP dan cara Strip. Pemeriksaan dengan metode GOD-PAP memiliki kelebihan, yaitu : presisi tinggi, akurasi tinggi, spesifik, relatif bebas dari gangguan (kadar hematokrit, vitamin C, lipid, volume sampel, dan suhu). Sedangkan kekurangannya adalah memiliki ketergantungan pada reagen, pemeliharaan alat dan reagen dan membutuhkan biaya yang cukup mahal. Sedangkan pada cara strip memiliki kelebihan hasil pemeriksaan dapat segera diketahui, hanya butuh sampel sedikit, tidak membutuhkan reagen khusus, praktis dan mudah dipergunakan jadi dapat dilakukan oleh siapa saja tanpa butuh keahlian khusus. Kekurangannya adalah akurasinya belum diketahui, dan memiliki keterbatasan yang dipengaruhi oleh kadar hematokrit, interfensi zat lain (Vitamin C, lipid, bilirubin dan hemoglobin), suhu, volume sampel yang kurang, dan strip bukan untuk menegakkan diagnosa klinis melainkan hanya untuk pemantauan kadar glukosa. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengetahui perbedaan hasil pemeriksaan kadar glukosa pada Mahasiswa Analis Kesehatan Poltekkes Kemenkes Tanjung Karang dengan menggunakan metode GOD-PAP dan cara strip. Penelitian ini bersifat deskriptif. Sampel yang digunakan adalah Mahasiswa Analis Kesehatan yang berjenis kelamin laki laki yang berjumlah 61 orang. Hasil penelitian ini adalah kadar glukosa rata- rata yang diperiksa dengan metode GOD-PAP adalah 114 mg/dl, kadar maksimal adalah 209 mg/dl, kadar minimalnya adalah 73 mg/dl, dan kadar glukosa rata- rata yang diperiksa dengan cara strip adalah 103 mg/dl, kadar maksimalnya adalah 198 mg/dl, kadar minimalnya adalah 70 mg/dl. Nilai standar deviasi (Sd) dari seluruh sampel adalah 4,663. Diperoleh hasil nilai (t ) hitung sebesar 17,269 sedangkan (t) tabel sebesar 2,00. Dari hasil tersebut ( t) hitung > ( t) tabel,maka Hipotesis diterima
Kata kunci : kadar glukosa, metode GOD-PAP, cara strip.
BAB I
PENDAHULUAN A. Latar Belakang
Karbohidrat adalah suatu senyawa yang terdiri atas atom –atom karbon, hidrogen, dan oksigen. Karbohidrat memiliki rumus umum (CH 2O)n. Sebagai contoh, molekul glukosa mempunyai rumus kimia C6H12O6. Karbohidrat yang berasal dari makanan, dalam tubuh mengalami perubahan atau metabolisme. Hasil metabolisme karbohidrat antara lain glukosa yang terdapat dalam darah, sedangkan glikogen adalah karbohidrat yang disintesis dalam hati dan digunakan oleh sel- sel pada jaringan otot sebagai sumber energi (Poedjiadi, 2007).
Dalam ilmu kedokteran, glukosa darah adalah istilah yang mengacu kepada kadar glukosa di dalam darah. Kadar glukosa darah, diatur dengan ketat di dalam tubuh. Glukosa yang dialirkan melalui darah adalah sumber utama energi untuk sel-sel tubuh. Umumnya, kadar glukosa darah berada pada rentang kadar (70-110 mg/dl). Kadar g lukosa ini meningkat setelah makan dan biasanya berada dikadar terendah pada pagi hari, sebelum orang makan. Bila kadar glukosaterlalu terendah (<70 mg/dl), disebut hipoglikemia. Bila kadar gula darah berada pada kadar tinggi (>110 mg/dl) disebut hiperglikemia ( Price, 2005).
Dahulu, pengukuran glukosa darah dilakukan terhadap darah lengkap, tetapi sekarang sebagian besar laboratorium melakukan pengukuran kadar glukosa dalam serum. Karena eritrosit memiliki kadar protein (hemoglobin) yang lebih tinggi dari pada serum, serum memiliki kadar air yang lebih tinggi. Sehingga bila dibandingkan dengan darah lengkap, serum melarutkan lebih banyak
glukosa.Untuk mengubah glukosa pada darah lengkap, kalikan kadar glukosa yang diperoleh dengan 1,15 untuk menghasilkan kadar glukosa serum atau plasma. Pengukuran kadar glukosa digunakan untuk melakukan diagnosa klinis terhadap kelainan metabolisme glukosa dalam tubuh (Sacher, 2004) .
Terdapat dua metode utama yang digunakan untuk mengukur glukosa. Metode yang pertamaadalah metode kimiawi yang memanfaatkan sifat mereduksi dari glukosa, dengan bahan indikator yang akan berubah warna apabila tereduksi. Akan tetapi metode ini tidak spesifik karena senyawasenyawa lain yang ada dalam darah juga dapat mereduksi (misal : urea, yang dapat meningkat cukup bermakna pada uremia) (Sacher, 2004). Contoh metode kimiawi yang masih digunakan untuk pemeriksaan glukosa saat ini adalah m etode toluidin, karena murah, cara kerja sederhana, dan bahan mudah didapat (Departemen Kesehatan RI , 2005 ). Dengan metode kimiawi, kadar glukosa dapat lebih tinggi 5 sampai 15 mg/dl dibandingkan dengan kadar glukosa yang diperoleh dengan metode enzimatik (yang lebih spesifik untuk glukosa). Metode yang kedua adalah enzimatik yang umumnya menggunakan kerja enzim glukosa oksidase atau heksokinase,yang bereaksi pada glukosa, tetapi tidak pada gula lain (misal : fruktosa, galaktosa, dan lain-lain) dan pada bahan pereduksi. Contoh metode yang menggunakan kerja enzim adalah GOD – PAP dan cara strip (Sacher, 2004). Pemeriksaan kadar glukosa sekarang sudah diisyaratkan dengan cara enzimatik, tidak lagi dengan prinsip reduksi untuk menghindari ikut terukurnya zat-zat lain yang akan memberikan hasil tinggi palsu. Cara enzimatik dapat dilakukan dengan cara otomatis seperti dengan GOD- PAP dan cara Strip (Suryaatmadja, 2003). Berdasarkan pengamatan peneliti di laboratorium-laboratorium yang memiliki fasilitas lengkap, pemeriksaan kadar glukosa darah menggunakan metode GOD-PAP. Sedangkan di puskesmaspuskesmas yang ada di pedesaan daerah Lampung Tengah dan laboratorium-laboratorium kecil yang berada di Kabupaten Lampung Tengah, Kabupaten Lampung Selatan, dan Kota Bandar Lampung menggunakan cara strip untuk mengukur kadar glukosa. Pemeriksaan dengan metode GOD-PAP memiliki kelebihan, yaitu : presisi tinggi, akurasi tinggi, spesifik, relatif bebas dari gangguan (kadar hematokrit, vitamin C, lipid, volume sampel, dan suhu). Sedangkan kekurangannya adalah memiliki ketergantungan pada reagen, butuh sampel darah yang banyak, pemeliharaan alat dan reagen memerlukan tempat yang khusus dan membutuhkan biaya yang cukup mahal. Sedangkan pada cara strip memiliki kelebihan hasil pemeriksaan dapat segera diketahui, hanya butuh sampel sedikit, tidak membutuhkan reagen khusus, praktis dan mudah dipergunakan jadi dapat dilakukan oleh siapa saja tanpa butuh keahlian khusus. Kekurangannya
adalah akurasinya belum diketahui, dan memiliki k eterbatasan yang dipengaruhi oleh kadar hematokrit, interfensi zat lain (Vitamin C, lipid, bilirubin dan hemoglo bin), suhu, volume sampel yang kurang, dan strip bukan untuk menegakkan diagnosa klinis melainkan hanya untuk pemantauan kadar glukosa (Suryaatmadja, 2003). Berdasarkan uraian di atas, maka penulis ingin mengetahui apakah ada perbedaan hasil yang bermakna pada hasil pemeriksaan glukosa dengan metode GOD -PAP dan cara strip pada Mahasiswa Analis Kesehatan Poltekes Kemenkes Tanjung Karang dikarenakan kedua ca ra ini banyak digunakan dalam pemeriksaan kadar glukosa darah.
B.
Perumusan Masalah
Berdasarkan latar belakang di atas, dapat dirumuskan masalah sebagai berikut : 1. Berapa kadar glukosa Mahasiswa Analis Kesehatan Poltekes Kemenkes Tanjung Karangdengan menggunakan metode GOD-PAP dan cara strip? 2. Apakah terdapat perbedaan yang bermakna dari hasil pemeriksaan glukosa dengan metodeGOD – PAP dan cara strip?
C. Tujuan Penelitian
1. Mengetahui kadar glukosa Mahasiswa Analis Kesehatan Poltekes Kemenkes Tanjung Karang dengan menggunakan metode GOD-PAP dan cara strip. 2. Mengetahui perbedaan hasil pemeriksaan glukosa Mahasiswa Analis Kesehatan Poltekes Kemenkes Tanjung Karang dengan menggunakan metode GOD-PAP dan cara strip.
D. Manfaat Penelitian
Untuk penderita penyakit gula yang menggunakan alat ukur glukosa pribadi atau strip agar secara berkala memeriksa atau membandingkan pengukuran alatnya terhadap pengukuran glukosa laboratorium klinik.
E.
Ruang Lingkup Penelitian
Ruang lingkup masalah pada penelitian ini hanya pada pemeriksaan glukosa darah dengan metode GOD –PAP dan cara strip pada Mahasiswa Analis kesehatan Poltekes Kemenkes Tanjung Karang.
BAB II
TINJAUAN PUSTAKA
A. Tinjauan Kepustakaan
1. Karbohidrat
Karbohidrat adalah suatu senyawa yang terdiri atas atom-atom karbon, hidrogen, dan oksigen. Karbohidrat memiliki rumus umum (CH 2O)n. Sebagai contoh, molekul glukosa mempunyai rumus kimia C6H12O6. Karbohidrat yang berasal dari makanan, dalam tubuh mengalami perubahan atau metabolisme. Hasil metabolisme karbohidrat antara lain glukosa y ang terdapat dalam darah, sedangkan glikogen adalah karbohidrat yang disintesis dalam hati dan digunakan oleh sel-sel pada jaringan otot sebagai sumber energi (Poedjiadi, 2007). Ada empat macam kelompok karbohidrat, yaitu : a.
Monosakarida Monosakarida adalah bentuk karbohidrat paling sederhana. Monosakarida hanya m emiliki satu molekul gula sederhana. Jenis monosakarida yang paling luas dikenal masyarakat adalah glukosa, galaktosa, dan fruktosa. Dalam hal ini, istilah glukosa dalam darah sering dipertukarkan dengan gula.
b. Disakarida
Disakarida terbentuk dari dua molekul monosakarida. K edua molekul dihubungkan dengan ikatan kovalen. Contoh disakarida yang populer adalah sukrosa, maltosa, dan laktosa.
c.
Oligosakarida Oligosakarida disusun oleh 3-10 monosakarida. Contoh oligosakarida adalah raffinose ( glukosagalaktosa-fruktosa).
d. Polisakarida Polisakarida adalah golongan karbohidrat yang tersusun oleh lebih dari sepuluh monosakarida. Contohnya adalah amilum dan dekstrin (Murray, 2003).
Beberapa sifat kimia karbohidrat : a. Sifat mereduksi Monosakarida dan beberapa disakarida mempunyai sifat dapat mereduksi, terutama dalam suasana basa. Zat sebagai reduktor ini dapat digunakan untuk keperluan identifikasi karbohidrat maupun analisis kuantitatif. Sifat mereduksi ini disebabkan oleh adanya gugus aldehida atau keton bebas dalam molekul karbohidrat (Poedjiadi, 2007).
b. Pembentukan furfural Dalam larutan asam yang encer, walaupun dipanaskan monosakarida umumnya stabil. Tetapi apabila dipanaskan dengan asam kuat yang pekat, monosakarida menghasilkan furfural atau derivatnya. Reaksi pembentukan furfural ini adalah reaksi dehidrasi atau pelepasan molekul air dari suatu senyawa (Poedjiadi, 2007).
c. Pembentukan osazon Semua karbohidrat yang mempunyai gugus aldehida atau keton bebas akan membentuk osazon bila dipanaskan bersama fenilhidrazin berlebih. Osazon yang terjadi mempunyaibentuk kristal dan titik lebur yang khas bagi masing-masing karbohidrat (Poedjiadi, 2007).
d. Pembentukan ester Adanya gugus hidroksil pada karbohidrat memungkinkan terjadinya ester apabila direaksikan dengan asam. Monosakarida mempunyai beberapa gugus –OH dan dengan asam fosfat dapat menghasilkan ester asam fosfat (Poedjiadi, 2007).
e. Isomerisasi Kalau dalam larutan asam encer monosakarida dapat stabil, tidak demikian halnya apabila monosakarida dilarutkan dalam basa encer. Glukosa dalam larutan basa encer akan berubah sebagian menjadi fruktosa dan maltosa. K etiga monosakarida ini ada dalam keadaan keseimbangan. Demikian pula apabila yang dilarutkan itu fruktosa atau maltosa, keseimbangan antara ketiga monosakarida akan tercapai juga. Reaksi ini dikenal sebagai transformasi Lobry de Bruin Van Eckenstein (Poedjiadi, 2007).
f. Pembentukan Glikosida Apabila glukosa direaksikan dengan metil alkohol, menghasilkan dua senyawa. Kedua senyawa ini dapat dipisahkan satu dari yang lain dan keduanya tidak memiliki gugusaldehida. Keadaan ini membuktikan bahwa yang menjadi pusat reaksi adalah gugus –OH yang terikat pada atom karbon nomor 1. Senyawa yang terbentuk adalah suatu asetal dan disebut secara umum glikosida (Poedjiadi, 2007).
g. Karamelisasi Dengan adanya basa kuat, karbohidrat yang mempunyai gugus aldehid atau keton bebas pada waktu pemanasan pecah menjadi fragmen-fragmen yang terdiri dari rantai atom C 2-3-4 yang reaktif. Jika tidak ada O 2, maka fragmen-fragmen ini akan mengadakan kondensasi untuk membentuk karamel. Jika ada O 2 pada waktu pemanasan warna cokelat tidak terjadi karena fragmen yang reaktip akan teroksidasi sempurna ( Sutadipura, 1978).
2. Metabolisme Karbohidrat
Pencernaan karbohidrat sudah dimulai sejak makanan masuk k e dalam mulut. Makanan dikunyah agar menjadi bagian bagian kecil, sehingga jumlah permukaan makanan lebih luas dan kontak dengan enzim pencernaan lebih banyak. Di dalam mulut, makanan bercampur dengan air ludah yang mengandung enzim amilase. Enzim amilase bekerja memecah kar bohidrat rantai panjang seperti amilum dan dekstrin menjadi molekul yang lebih sederhana. Hanya sebagian kecil karbohidrat yang dapat dicerna di dalam mulut karena makanan hanya berada sebentar di dalam mulut(Poedjiadi, 2007).
Pencernaan di lambung : Proses pemecahan karbohidrat diteruskan di dalam lambung, disini kerja enzim amilase dalam air ludah dihentikan dengan adanya asam klorida yang dikeluarkan oleh lambung. Dalam keadaan normal bahan makanan tinggal beberapa jam di dalam lambung, sementara asam klorida dan pepsin menguraikan protein dan karbohidrat menjadi oligopeptida dan oligosakarida. Berbeda dengan amilase dan enzim lainnya, pepsin bekerja pada suasana sangat asam, pH 1,0- 2,5, sesuai dengan kondisi cairan lambung (Wirahadikusuma, 1985).
Pencernaan di usus halus : Di usus halus, maltosa, sukrosa, dan laktosa yang berasal dari makanan maupun dari hasil penguraian karbohidrat kompleks akan diubah menjadi monosakarida dengan bantuan enzim-enzim yang terdapat di dalam usus halus ( Poedjiadi, 2007).
Maltosa Laktosa Sukrosa
maltase laktase sukrose
2 (dua) molekul glukosa galaktosa dan glukosa fruktosa dan glukosa
Absorbsi : Semua jenis karbohidrat diserap dalam bentuk monosakarida, proses penyerapan ini terjadi di usus halus. Glukosa dan galaktosa memasuki aliran darah dengan jalan transfer aktif, sedangkan fruktosa dengan jalan difusi. Para ahli sepakat bahwa karbohidrat hanya dapat diserap dalam bentuk disakarida. Hal ini dibuktikan dengan dijumpainya maltosa, sukrosa, dan laktosa dalam urin apabila mengkonsumsi gula dalam jumlah banyak. Akhirnya, berbagai jenisdisakarida diubah menjadi glukosa sebelum masuk proses metabolisme (Poedjiadi, 2007).
Gambar 1. Alur pencernaan karbohidrat(Wirahadikusuma, 1985). Reaksi glikolisis
Reaksi pada proses glikolisis ada sepuluh. Reaksi pertama dalam jalur ini ialah fosforilasiglukosa oleh ATP, yang dikatalisis oleh heksokinase. Enzim ini ditemukan dalam semua sel dan mempunyai daya afinitas yang besar terhadap glukosa. Reaksi yang kedua ialah isomerasi glikosa-6-fosfat menjadi fruktosa-6-fosfat. Reaksi ini adalah reaksi reversible yang mengkatalisis perubahan suatu aldopiranosa (glukosa) menjadi suatu ketofuranosa (fruktosa). Enzim yang mengkatalisis reaksi ini adalah fosfoglukoisomerase. Selanjutnya reaksi yang ketiga adalah terjadinya fosforilasi fruktosa-6fosfat menjadi fruktosa-1,6-fosfat oleh enzim fosfofruktokinase dan memerlukan ATP sebagai sumber fosfat. Karena digunakan ATP, maka reaksi ini irreverssibel dalam keadaan seperti yang ada dalam sel. Berikutnya pada reaksi yang keempat, fruktosa 1,6-difosfat dipecah menjadi 2 triosa fosfat, yaitu gliseraldehid-3-fosfat dan dihidroksiaseton fosfat. Enzim yang mengkatalis reaksi ini adalah suatu enzim dari kelas liase dan dinamai aldose, reaksi yang dikatalisisnya reversibel. Kedua triosa fosfat dapat berubah oleh bantuan enzim triosa fosfat isomerase(Schumm, 1993). Pada reaksi kelima keseimbangan reaksi isomerasi ini condong ke arah dihidroksi aseton fosfat. Akan tetapi karena gliseraldehid -3-fosfat terus-menerus diubah, maka reksi berjalan ke arah selanjutnya. Pada reaksi keenam terjadilah oksidasi dan f osforilasi gliseraldehid-3-fosfat dehidrogenase, yang menggunakan fosfat anorganik bukan ATP sebagai sumber fosfat. Produk yang tarbentuk ialah suatu anhidrida campuran dari asam 3-fosfogliserat oleh asam fosfat. Pada reaksi yang ketujuh fosfogliserakinase memindahkan ikatan fosfat kaya energi dari 1,3-difosogliserat ke ADP sehingga tetrbentuklah 3-fosfogliserat dan ATP, pada reaksi ini tarjadilah peristiwa fosforilasi tingkat substrat. Pada reaksi kedelapan enzim fosfogliseromutase memindahkan fosfat yang ada di kedudukan 3 ke kedudukan 2 sehingga terbentuklah 2-fosfogliserat. Reaksi ini menyiapkan pembentukan senyawa fosfat lain yang juga kaya energi dan dari sini pembentukan molekul ATP. Pada reaksi yang kesembilan enolase mengkatalisis dahidrasi 2-fosfogliseral menjadi fosfoenolpiruvat, yang juga suatu senyawa yang kaya energi. Pada reaksi yang terakhir, senyawa ini memindahkan fosfatnya ke ADP menghasilkan piruvat dan ATP. Reaksi yang terakhir ini dikatalisis oleh enzim piruvat kinase(Schumm, 1993).
Gambar 2. Alur glikolisis (Wirahadikusuma, 1985). Daur Krebs Daur krebs dimulai dengan pembentukan asetil KoA dari piruvat. Langkah pertama yang dilakukan ialah membawa piruvat dari sitoplasma ke dalam matriks mitokondria. Tugas ini dilakukan oleh +
suatu zat yang mengikat piruvat serta H dalam sitoplasma ke dalam mitokondria. Piruvat juga dapat
dibawa ke dalam mitokondria sebagai penukar ion-ion hidroksil atau sitrat. Kemudian, piruvat dioksidasi dan dekarboksilasi untuk membentuk asetil KoA. Oleh karena itu, jumlah dari asetil KoA langsung mempengaruhi laju keseluruhan dari Daur K rebs, maka perubahan piruvat dari asetil KoA adalah reaksi penting yang mengatur laju Daur Krebs(Schumm, 1993). Reaksi perubahan piruvat menjadi KoA sebagai berikut : Piruvat + KoA + NAD
+
aseti KoA + CO 2 + NADH + H
+
Daur Krebs ini terdiri dari 9 reaksi kimia yang mengoksidasi 2 kabon menjadi CO 2. Reaksi yang pertama, asetil KoA mengalami kondensasi dengan oksaloasetat untuk membentuk sitrat. Reaksi ini dikatalisis oleh enzim sitrat sintase. Kemudian reaksi yang ke 2 dan 3 adalah sitrat mengalami isomerase secara dehidrasi dan rehidrasi sehingga terbentuklah isositrat. Zat antara dari reaksi ini ialah sis-akonitat dan pembentukan zat antara ini dikatalisis oleh enzim akonitase(Schumm, 1993). Pada reaksi keempat, isositrat mengalami dehidrogenase dan dekarboksilasi menjadi
-ketoglutarat
oleh enzim isositrat dehidrogenase. Dalam reaksi ini, NAD menerima hidrogen dan terbentuklah +
NADH dan H . Pada reaksi kelima
-ketoglutarat mengalami dekarboksilasi dan dehidrogenase
membentuk suksinil KoA. Pada reaksi yang keenam terjadilah reaksi satu-satunya di dalam Daur Krebs yang disertai fosforilasi tingkat substart. Dari suksinil KoA terbentuklah suksinat dan bersamaan dengan itu GDP mengalami fosforilasi menjadi GTP. Enzim yang mengkatalisis reaksi ini yaitu suksinil KoA sintetase(Schumm, 1993). Pada reaksi yang ketujuh suksinat mengalami dehidrokenase manjadi fumarat dan reaksi ini memerlukan enzim suksinat dehidrogenase. Koenzim yang digunakan dalm reaksi i ni adalah FAD yang terikat erat dengan apoenzimnnya dari pada bentuk bebas seperti NAD. Dan pada reaksi yang kedelapan fumarat kemudian menngalami hidrasi membentuk malat. Penambahan air i ni terjadi secara khas sekali karena selalu hanya L-Malat yang terbentuk. Enzim yang mengkatalisis reaksi bolak balik ini ialah fumarase(Schumm, 1993). Reaksi yang kesembilan yaitu memulihkan oksaloasetat yang terpakai di awal daur. Untuk ini enzim malat dehidrogenase mengubah malat menjadi oksalo asetat dengan menggunakan N AD sebagai penerima hidrogen(Schumm, 1993). Reaksi pada daur kreb ialah : +
Asetil KoA + 3NAD + FAD + GDP + Pi + 2H 2O +
2CO2 + 3NADH + FADH2 + GTP + 2H + KoA
Gambar 3. Alur daur krebs(Rodwell, 2003). 3. Glukosa Darah :
Dalam ilmu kedokteran, gula darah adalah istilah yang mengacu kepada kadar glukosa di dalam darah. Kadar glukosa darah diatur dengan ketat di dalam tubuh. Glukosa yang dialirkan melalui darah adalah sumber utama energi untuk sel-sel tubuh. Umumnya, kadar glukosa darah berada pada kadar (70-110 mg/dl) (Price, 2005).
Metabolisme glukosa yang tidak normal dapat menyebabkan : a. Hiperglikemia Bila kadar gula darah berada pada kadar tinggi (>110 mg/dl) disebut hiperglikemia (Price, 2005).
b. Hipoglikemia Bila kadar glukosa terlalu terendah (< 70 mg/dl), disebut hipoglikemia (Price, 2005).
4. Metode Pengukuran Kadar Glukosa
a. Metode kimia
Sebagian besar pengukuran dengan metode kimia yang di dasarkan atas kemampuan reduksi sudah jarang dipakai karena spesifitas pemeriksaan kurang tinggi (Departemen Kesehatan RI, 2005 ).
Prinsip pemeriksaan, yaitu proses kondensasi glukosa dengan akromatik amin dan asam asetat glasial pada suasana panas, sehingga terbentuk senyawa berwarna hijau kemudian diukur secara fotometri (Departemen Kesehatan RI, 2005 ).
Beberapa kelemahan atau kekurangan dari metode kimia adalah memerlukan langkah pemeriksaan yang panjang dengan pemanasan, sehingga memungkinkan terjadinya kesalahan besar bila dibandingkan dengan metode enzimatik. Selain itu, reagen-reagen pada metode kimiawi ini bersifat korosif pada alat laboratorium. Dan gula selain glukosa dapat terukur kadarnya sehingga menyebabkan hasil tinggi palsu. Pada penderita gagal ginjal, kadar ureum tinggi akan terjadi hasil pengukuran kadar glukosa yang lebih tinggi. Demikian juga pada bayi yang baru lahir, akan tetapi penyebabnya kadar bilirubin yang tinggi. Peningkatan kadar glukosa pada bayi yang baru lahir karena terbentuk biliverdin yang berwarna hijau dan pada metode kimiawi ini hasil reaksi antara glukosa dan reagen adalah warna hijau (Departemen Kesehatan RI, 2005 ).
b. Metode enzimatik
Metode enzimatik pada pemeriksaan glukosa darah memberikan hasil dengan spesifitas yang tinggi, karena hanya glukosa yang akan terukur. Cara ini adalah cara yang digunakan untuk menentukan nilai batas. Ada 2 macam metode enzimatik yang digunakan yaitu glucose oxidase dan metode hexokinase (Departemen Kesehatan RI, 2005 ).
1) Metode glucose oxidase Metode glucose oxidase merupakan metode yang paling banyak digunakan di laboratorium yang ada di Indonesia. Sekitar 85% dari peserta Program Nasional Pemantapan Mutu Eksternal bidang Kimia Klinik (PNPME-K) memeriksa glukosa serum kontrol dengan metode ini (Departemen Kesehatan RI, 2005).
Prinsip pemeriksaan pada metode ini adalah enzim glucose oxidase mengkatalisis reaksi oksidasi glukosa menjadi asam glukonat dan hidrogen peroksida. Hidrogen peroksida yang terbentuk bereaksi dengan phenol dan 4-amino phenazone dengan bantuan enzim peroksidase menghasilkan quinoneimine yang berwarna merah muda dan dapat diukur dengan fotometer pada panjang gelombang 546 nm. Intensitas warna yang terbentuk setara dengan kadar glukosa darah yang terdapat dalam sampel (Riyani, 2009).
Digunakannya enzim glucose oxidase pada reaksi pertama menyebabkan sifat reaksi pertama spesifik untuk glukosa (Departemen Kesehatan RI, 2005).
2) Metode hexokinase Metode hexokinase merupakan metode pengukuran kadar glukosa darah yang dianjurkan oleh WHO dan IFCC. Baru sekitar 10% laboratorium yang ikut PNPME-K menggunakan metode ini untuk pemeriksaan glukosa darah (Departemen Kesehatan RI, 2005).
Prinsip pemeriksaan pada metode ini adalah hexokinase akan mengkatalis reaksi fosforilasi glukosa dengan ATP membentuk glukosa-6-fosfat dan ADP. Enzim kedua yaitu glukosa-6-fosfat
dehidrogenase akan mengkatalisis oksidasi glukosa-6-fosfat dengan nicotinamide +
adenine dinocleotide phosphate (NADP ) (Departemen Kesehatan RI, 2005).
Pada metode ini digunakan dua macam enzim yang baik karena kedua enzim ini spesifik. Akan tetapi, metode ini membutuhkan biaya yang relatif mahal (Departemen Kesehatan RI, 2005).
c. Cara Strip
Merupakan alat pemeriksaan laboratorium sederhana yang dirancang hanya untuk penggunaan sampel darah kapiler, bukan untuk sampel serum atau plasma. Strip katalisator spesifik untuk pengukuran glukosa dalam darah kapiler (Suryaatmadja, 2003).
Prinsip pemeriksaan pada metode ini adalah strip test diletakkan pada alat, ketika darah diteteskan pada zona reaksi tes strip, katalisator glukosa akan mereduksi glukosa dalam darah. Intensitas dari elektron yang terbentuk dalam alat strip setara dengan konsentrasiglukosa dalam darah.
Cara strip memiliki kelebihan hasil pemeriksaan dapat segera diketahui, hanya butuh sampel sedikit, tidak membutuhkan reagen khusus, praktis, dan mudah dipergunakan, serta dapat dilakukan oleh siapa saja tanpa butuh keahlian khusus.
Kekurangannya adalah akurasinya belum diketahui, dan memiliki keterbatasan yang di pengaruhi oleh kadar hematokrit, interfensi zat lain (Vitamin C, lipid, dan hemoglobin), suhu, volume sampel yang kurang, dan strip bukan untuk menegakkan diagnosa klinis melainkan hanya untuk pemantauan kadar glukosa (Suryaatmadja, 2003).
5. Macam-macam Serum dalam Tes Glukosa
a. Glukosa sewaktu Glukosa sewaktu adalah serum yang diambil kapan saja, tanpa mempertimbangkan makan terakhir.
b. Glukosa puasa Glukosa puasa adalah serum yang diambil ketika tidak ada asupan kalori selama paling sedikit 8 jam (puasa).
c. Glukosa 2 jam setelah makan Glukosa 2 jam setelah makan adalah pemeriksaan glukosa yang dilakukan setelah makan (Sacher, 2004).
d. Oral glukosa Oral glukosa toleransi test dilakukan dengan cara pemberian larutan glukosa pada pasien yang dibuat 75 gram glukosa yang dilarutkan dalam 150 ml air atau aquades.
Sebelum pemberian larutan glukosa pasien puasa 8- 10 jam, kemudian diambil darahnya. P asien kemudian diberi larutan glukosa sebanyak 75gram untuk orang dewasa ( atau 1,75 gram/KgBB untuk anak) dilarutkan dalam 250 mL air, dan harus diminum habis dalam waktu 5 menit. Tepat 1 jam serta 2 jam setelah pemberian larutan glukosa darah diambil dan diperiksa hasilnya, dapat pula hanya diwaktu 2 jam setelah pemberian larutan glukosa darah diambil dan diperiksa (Suryaatmadja, 2003). Tabel 1. Tabel nilai normal kadar glukosa (DiaSys Glucose GOD FS, 2011)
Umur
Kadar Glukosa (mg/dL)
Baru lahir : Darah tali pusar
63-158
1 Hari
36-99
2 Hari
36-89
5-14 Hari
34-77
10-28 Hari
46-81
44-52 Hari
48-79
Anak- anak : 1-6 tahun
74-127
7-19 tahun
70-106
Dewasa : Plasma vena
70-115
6. Hormon-hormon yang Berperan dalam Menaikkan dan Menurunkan Glukosa Darah
a.
Insulin Insulin adalah hormon yang terbentuk di sel beta pankreas, memiliki efek metabolik meningkatkan masuknya glukosa ke dalam sel, meningkatkan penyimpanan glukosa sebagai glikogen atau konversi menjadi asam lemak, meningkatkan sintesis protein dan asam lemak, dan menekan perombakan protein menjadi asam amino, jaringan lemak menjadi asam lemak bebas.
b. Somatostatin Somatostatin adalah hormon yang terbentuk di sel D pankreas, memiliki efek metabolik menekan pelepasan glukagon dari sel alfa (bekerja lokal), menekan pelepasan insulin, hormon-hormon tropik gastrin dan sekretin.
c.
Glukagon Glukagon adalah hormon yang terbentuk dari sel alfa pankreas memiliki efek metabolik meningkatkan pelepasan glukosa dari glikogen, meningkatkan sintesin glukosa dari asam amino atau asam lemak.
d. Adrenalin
Adrenalin adalah hormon yang terbentuk di sel medulla adrenal memiliki efek metabolik meningkatkan pelepasan glukosa dari glikogen, meningkatkan pelepasan asam lemak dari jaringan lemak.
e.
Cortisol Cortisol adalah hormon yang terbentuk di sel cortex adrenal yang memiliki efek metabolik meningkatkan sintesis glukosa dari asam amino atau asam lemak, dan melawan insulin.
f.
ACTH ACTH adalah hormon yang terbentuk di sel pars anterior hipofisis yang memilki efek metabolik meningkatkan pelepasan cortisol, meningkatkan pelepasan asam lemak dari jaringan lemak.
g. Growth hormone Tiroxine Growth hormone Tiroxine adalah hormon yang terbentuk di sel pars anterior hipofisis kelenjar tiroid memiliki efek metabolik melawan insulin, meningkatkan pelepasan glukosa dan glikogen, meningkatkan absorbsi gula-gula dari usus (Sacher, 2004).
B. Karbohidrat dikonsumsi
Kerangka Teori
Gambar 4. Skema kerangka teori.
C.
Kerangka Konsep
Berdasarkan teori yang telah diuraikan sebelumnya, maka dapat disajikan dalam kerangka konsep perbedaan hasil pemeriksaan glukosa dengan metode GOD- PA P dan cara strip pada mahasiswa Analis Kesehatan Poltekes Kemenkes Tanjung Karang sebagai berikut :
Variabel penelitian Variabel penelitian
Glukosa darah
Gambar 5. Skema kerangka konsep. D. Definisi Operasional
Tabel 2. Definisi operasional. No
Variabel
Definisi
Cara ukur
Alat ukur
Hasil ukur
Skala
Metode
Suatu metode
Observasi
Panca
Mengetahui
Nominal
GOD – PAP
yang digunakan
indra
bentuk dan
untuk mengukur
(mata)
cara
penelitian 1
kadar glukosa yang
melakukan
menggunakan
pemeriksaan
kerja enzim
glukosa
glucose oxidase
darah
dan peroxidase.
dengan
yang digunakan
metode
untuk memeriksa
GOD – PAP
kadar glukosa darah mahasiswa analis kesehatan poltekes kemenkes tanjung karang
2
Cara strip
Suatu perangkat
observasi
atau instrumen
Panca
Mengetahui
indra(mat)
bentuk dan
untuk mengukur
cara
glukosa secara
melakukan
analitik yang
pemeriksaan
menggunakan
glukosa
biomolekul (enzim)
darah
yang digunakan
dengan cara
untuk memeriksa
strip
Nominal
kadar glukosa darah mahasiswa analis kesehatan poltekes kemenkes tanjung karang 3
Kadar
Adalah jumlah
Dengan
Fotometer
glukosa
glukosa yang ada
menggunakan
MD 150
dalam darah
metode GOD
dan strip
mahasiswa Analis
– PAP dan
kesehatan Poltekes
cara strip
mg/dl
Ordinal
Kemenkes Tanjung Karang .
E.
Hipotesis
Ada perbedaan hasil yang bermakna pada pemeriksaan glukosa dengan metode GOD-PAP dan cara strip.
BAB III
METODOLOGI PENELITIAN A. Rancangan Penelitian
Jenis penelitian ini bersifat deskriptif, ya itu penelitian yang menjelaskan karakteristik masing-masing variabel. Dengan dua variabel penelitian yaitu variabel penelitian yang pertama kadar glukosa darah dan variabel penelitian yang kedua metode GOD-PAP dan cara strip.
B.
Populasi dan Sampel
1. Populasi Populasi dalam penelitian ini adalah Mahasiswa Analis Kesehatan Poltekkes Kemenkes Tanjung Karang yang berjumlah 225 orang.
2. Sampel Sampel dalam penelitian adalah Mahasiswa Analis Kesehatan Poltekkes Kemenkes Tanjung Karang yang berjenis kelamin laki-laki, yaitu : 61 orang.
C.
Tempat dan Waktu Penelitian
Penelitian ini dilakukan di Laboratorium Kimia Klinik Jurusan Analis Kesehatan Poltekkes Kemenkes Tanjung Karang mulai bulan Maret sampai Mei 2012.
D. Alat dan Bahan untuk Pemeriksaan
1. Metode GOD-PAP a. Alat Fotometer MD 150, mikoropipet 5µL dan 500 µL, tip kuning dan tip biru, tabung reaksi, tisue, centrifuge, spuit 3ml, kertas label, kapas alkohol, dan kapas kering.
b. Bahan
Sampel (serum), reagen glukosa oksidase kit/GOD kit.
2. Cara strip a. Alat Alat cek darah strip, auto klik, lancet, kapas alkohol, dan kapas kering.
b. Bahan Bahan hanya terdiri dari darah kapiler.
E.
Cara Kerja Penelitian
1. Sampel yang digunakan adalah seluruh Mahasiswa Analis Kesehatan yang berjenis kelamin laki- laki dengan jumlah 61 orang. 2. Cara pengambilan sampel adalah dengan mengambil jumlah keseluruhan mahasiswa yang berjenis kelamin laki-laki dengan jumlah 61 orang. 3. Metode GOD-PAP (Glukosa Oksidase Para Amino Phenazone). Prisip kerja metode GOD-PAP adalah glukosa dioksidasi oleh glukosa oksidase (GOD) membentuk asam glukonat dan hidrogen peroksida. Hidrogen peroksida yang terbentuk bereaksi dengan phenol dan 4-amino phenazone dengan bantuan enzim peroksidase menghasilkan quinoneimine yang berwarna merah muda dan dapat diukur dengan fotometer pada panjang gelombang 546 nm. Intensitas warna yang terbentuk setara dengan kadar gl ukosa darah yang terdapat dalam sampel.
Reaksi : Glukosa
GOD
asam glukonat + 4H2O2
2H2O2 + phenol + 4-Aminophenazone (Riyani, 2009)
a. Cara pengambilan darah vena
POD
quinoneimine + 4H2O
1) Dibersihkan bagian tangan yang akan diambil darahnya tepat di bagian vena fossa cubiti dengan kapas alkohol 70% dan dibiarkan hingga mengering. 2) Dipasang tourniquet tiga jari di atas lipatan siku. Pemasangan tourniquet tidak boleh lebih dari 1 menit, hal ini menjaga terjadinya hemokonsentrasi. Untuk pengambilan darah vena pasien diminta untuk membuka dan menutup genggaman beberapa kali. 3) Ditegangkan bagian kulit di atas vena dengan jari-jari tangan kiri supaya vena tidak bergerak. 4) Ditusuk vena dengan spuit, lubang jarum menghadap ke atas dengan sudut kemiringan antara jarum 0
dan kulit 15 . 5) Dilepaskan atau diregangkan torniquet secara perlahan dan ditarik penghisap spuit sampai didapat jumlah darah yang dikehendaki. 6) Diletakkan kapas kering di atas jarum dan ditarik jarum secara perlahan lalu ditekan tempat bekas penusukan jarum beberapa saat. 7) Dipindahkan darah dari dalam spuit ke dalam wadah lalu dibuang spuit (Gandasoebrata, 2007).
b. Cara pembuatan serum. 1) Diambil darah vena sebanyak 3 ml. 2) Disentrifuge selama 15 menit dengan kecepatan 1500 rpm. 3) Dipisahkan antara sel darah merah dengan serum dan diambil serumnya.
c. Cara pemakaian Photometer. 1) Dihubungkan photometer dengan arus listrik. 2) Ditekan tombol power pada posisi ON (posisi tombol power di kanan belakang). 3) Setelah aktif, alat akan melakukan start up. Setelah selesai alat meminta untuk dihisapkan aquadest, pada layar tampak “ Destiled Water Test. Please asprirate!” 4) Diletakkan botol aquadest pada “pipette” lalu ditekan “aspiratingkey/sipper”, aquadest akan terhisap.
5) Alat akan membaca aquadest, setelah selesai akan muncul m enu utama yang terdiri dari : “Test”,”Records”,”System”,”power”,”Off”. 6) Dari menu dipilih “Test” 7) Lalu dipilih “Select Test” dipilih/klik/blok test yang akan dilakukan. 8) Selanjutnya akan tampak “Test Parameter”, lalu diisi semua text box yang t ampak. Pengisian disesuaikan dengan aplikasi reagensia yang dipakai. 9) Digunakan Mouse dan Virtual Keyboard yang terlihat pada layar untuk melakukan pengisian. 10) Dipilih “Test” untuk memeriksa sampel dari menu 11) Akan tampak pilihan test (menu “Select Test”) dipilih/klik/block test yang ingin diprogram (glukosa/Glu) klik “OK”. 12) Alat akan menyesuaikan dengan program yang akan dibaca. Lalu diikuti petunjuk yang tertulis berwarna biru di atas grafik. 13) Setelah suhu stabil photometer akan meminta membaca aquades. 14) Diklik Cal (calibrasi) untuk membaca STD (standar) dan diklik QC untuk membaca QC (Quality Control). Untuk membaca sampel (SPL) langsung saja. 15) Setelah selesai, hasil pemeriksaan akan secara otomatis tercetak. 16) Diletakkan botol aquadest pada “Pipette” setelah selesai melakukan pemeriksaan, lalu dipilih/kl ik “Rinse” selama beberapa detik untuk proses pembilasan dipilih / klik “Rinse” lagi dan diambil kembali botol aquadest. 17) Dipilih/klik “Back” sampai muncul kembali menu utama yang terdiri dari : “Test”,”Record”,”System”,”Power Off” 18) Dipilih/klik “Power Off” 19) Ditekan tombol power pada posisi Off. Posisi tombol power di kanan belakang (MD150 Biochemistry Analyzer, 2009) d. Cara pemeriksaan sampel. Tabel 3. Tabel cara kerja Blanko
QC
Standar
Sampel
QC
-
5 µL
Standar
-
-
Sampel
-
Larutan
500 µL
500 µL
5 µL
-
-
5 µL
500 µL
500 µL
kerja/reagen Catatan : QC ( 82,8 – 114) 1) Dihomogenkan o
2) Diinkubasi selama 20 menit pada suhu 20-25 C 3) Dibaca hasilnya dengan fotometer pada panjang gelombang 546 nm.
4. Cara strip
Prinsip kerjanya adalah pemeriksaan ini menggunakan prinsip dasar biosensor (enzim). Strip test diletakkan pada alat, ketika darah diteteskan pada zona reaksi tes strip, katalisator glukosa akan mengoksidasi glukosa dalam darah. Intensitas dari elektron yang terbentuk dalam alat strip setara dengan konsentrasi glukosa dalam darah (Suryaatmadja, 2003).
Cara pemeriksaan sampel : a. Dimasukkan baterai dan diaktifkan alat. b. Diatur jam, tanggal, dan tahun pada alat. c. Diambil chip warna kuning dan dimasukan ke dalam alat untuk cek alat. d. Apabila pada layar muncul “ERROR” artinya alat rusak. e. Apabila pada layar muncul “OK” artinya alat siap dipakai. f. Setiap botol strip pada gula darah, asam urat, dan kolestrol terdapat chip test. g. Dimasukan chip gula dan strip gula terlebih dahulu untuk cek kadar gula darah. h. Pada layar akan muncul angka atau kode sesuai pada botol strip.
i. Setelah itu akan muncul gambar tetes darah dan kedip-kedip . j. Dimasukan jarum pada autoclik dan atur kedalaman jarum. k. Dibersihkan jari menggunakan tisu alkohol. l. Ditusukkan jarum pada jari dan ditekan supaya darah keluar. m. Disentuhkan darah pada strip dan bukan diteteskan di atas strip alat test darah EasyTouch. Disentuh pada bagian garis yang ada tanda panah n. Darah akan langsung meresap sampai ujung strip dan bunyi beep. o. Ditunggu sebentar, dan hasil akan keluar beberapa detik pada layar. p. Dibuang jarum dan strip yang telah digunakan. q. Disimpan kembali chip gula ke botol (Musyaffa, 2010).
F.
Alur Penelitian Pengambilan sampel darah
Pengambilan sampel darah
vena
kapiler
Hasil yang diperoleh dikali 1,15 untuk menyetarakan hasil dari metode GODPAP
Perhitungan selisih hasil pemeriksaan glukosa
Gambar 6. Skema alur penelitian G. Pengumpulan Data
Data yang dipergunakan adalah data primer, yang diperoleh dari hasil pemeriksaan kadar glukosa dengan metode GOD – PAP dan cara strip.
H.
Analisis Data
1. Analisis univariat Bertujuan untuk menjelaskan atau mendeskripsikan karakteristik setiap variabel, seperti rata -rata selisih hasil pemeriksaan dan standar deviasi. Peda penelitian ini didapat data numerik sehingga digunakan nilai rata-rata atau mean, dan standar deviasi (Notoatmodjo, 2010).
2. Analisis bivariat Setelah dilakukan analisis univariat maka dapat dilanjutkan dengan analisis bivariat. Dalam penelitian ini dilakukan uji statistik ( t test ), untuk melihat ada perbedaan yang bermakna atau tidak dari metode GOD – PAP dan cara strip.
Tabel 4. Tabel analisa data hasil pemeriksaan glukosa.
No
Kadar glukosa
Kadar glukosa
dengan metode
dengan cara
GOD-PAP
strip
d ( selisih dari hasil pemeriksaan dengan metode GOD- PAP)
1 2 3 4 5 N ∑
Selisih rata- rata (
)=
Standar deviasi ( Sd)
=
d
2
Standar eror ( SE
t hitung =
)=
(Tjokronegoro, 1981)
Pada penelitian ini menggunakan derajat kepercayaan 95%. Setelah nilai t hitung didapat maka nilai tersebut dilihat pada tabel t distribusi, kemudian dilihat nilai probabilitasnya.
BAB IV HASIL PENELITIAN DAN PEMBAHASAN
A. Hasil Penelitian
Berdasarkan hasil pemeriksaan dari 61 sampel darah mahasiswa analis kesehatan Poltekkes Kemenkes Tanjung Karang yang berjenis kelamin laki - laki, terdapat perbedaan hasil antara pemeriksaan glukosa dengan metode GOD-PAP dan cara strip.
Hasil analisis data univariat untuk memperoleh kadar glukosa rata- rata, kadar glukosa maksimal, kadar glukosa minimal, serta standar deviasi yang diperiksa dengan metode GOD-PAP dan cara strip. Rata- rata kadar glukosa yang diperiksa dengan metode GOD-PAP adalah 114 mg/dl, kadar maksimal adalah 209 mg/dl, kadar minimalnya adalah 73 mg/dl, dan kadar glukosa rata- rata yang diperiksa dengan cara strip adalah 103 mg/dl, kadar maksimalnya adalah 198 mg/dl, kadar minimalnya adalah 70 mg/dl. Nilai standar deviasi (Sd) dari seluruh sampel adalah 4,663.Untuk analisis data bivariat dihitung menggunakan uji statistik ( t) dengan tingkat selang kepercayaan 95% dan diperoleh hasil nilai (t ) hitung sebesar 17,269 sedangkan (t ) tabel sebesar 2,00. Dari hasil tersebut ( t) hitung > (t) tabel, maka H1 diterima yaitu ada perbedaan hasil yang bermakna pada pemeriksaan glukosa dengan metode GOD-PAP dan cara strip. B.
Pembahasan
Dari hasil pemeriksaan kadar glukosa terhadap 61 sampel mahasiswa laki- laki di jurusan Analis Kesehatan Poltekkes Kemenkes Tanjung Karang dengan menggunakan metode GOD-PAP dan cara strip dapat diketahui hasil pemeriksaan tersebut menunjukkan tingkat perbedaan yang bermakna ( t hitung > t tabel).
Dari hasil ini menunjukkan bahwa pemeriksaan dengan menggunakan strip tidak dapat digunakan untuk menegakkan diagnosa laboratorium, melainkan hanya untuk kontrol bagi penderita diabetes. Cara strip bila digunakan untuk diagnosa laboratorium cendrung menunjukkan hasil yang rendah palsu. Hasil yang rendah palsu ini dapat mempengaruhi kesimpulan diagnosis pada pasien yang kadar glukosa berada pada batas maksimal atau minimal. Sedangkan kesimpulan dari diagnosis tersebut sangat berpengaruh terhadap pola penanganan pasien, jadi diagnosis laboratorium harus menggunakan metode dan alat yang dapat menghasilkan hasil yang valid.
Pada dasar nya metode yang digunakan pada strip adalah metode enzimatik sama seperti metode GOD-PAP. Akan tetapi alat yang digunakan untuk membaca hasil reaksi yang berbeda. Pada metode GOD-PAP alat yang digunakan adalah fotometer, pada fotometer dapat dilakukan kontrol dan presisi, akurasinya dapat diketahui sehingga hasilnya valid. Pada strip alat yang digunakan adalah strip, pada strip tidak dapat dilakukan kontrol, presisi dan akurasinya tidak diketahui.
Perbedaan hasil pemeriksaan kadar glukosa antara metode GOD-PAP dan cara strip dimungkinkan karena terjadi kadar hematokrit yang ada dalam darah lengkap. Kadar hematokrit yang rendah akan secara semu meningkatkan hasil pengukuran, begitu juga sebaliknya. Kadar hematokrit ini hanya dapat berpengaruh pada pemeriksaan dengan menggunakan sampel darah lengkap seperti pada cara strip (Sacher, 2004).
Antara serum dan darah lengkap memiliki kadar glukosa yang berbeda. Karena pada darah lengkap terdapat eritrosit, dan eritrosit memiliki kadar protein (hemoglobin) yang lebih tinggi dari pada serum, dan protein tersebut bersifat reduktor yang dapat mereduksi katalisator glukosa. Sedangkan dalam serum tidak terdapat banyak eritrosit serta kadar air dalam serum lebih tinggi sehingga bila dibandingkan dengan darah lengkap, serum lebih banyak melarutkan glukosa(Sacher, 2004).
Dalam penelitian ini kadar glukosa yang didapat dari sampel darah lengkap telah dikalikan dengan 1,15 untuk menyetarakan hasil dengan y ang menggunakan sampel serum.
Akan tetapi tetap terjadi perbedaan hasil, hal ini dimungkinkan karena adanya gangguan dari zat lain yang bersifat reduktor dalam jumlah yang banyak. Zat yang bersifat reduktor ini dapat mengganggu reaksi glukosa oksidase karena zat tersebut mengikat H 2O2 sehingga mengganggu reaksi selanjutnya dan menyebabkan hasil rendah palsu (Suryaatmadja, 2003).
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN
A. Kesimpulan
Berdasarkan hasil pemeriksaan kadar glukosa dengan metode GOD-PAP dan cara strip pada mahasiswa Analis Kesehatan Poltekkes Kemenkes Tanjung Karang, maka diperoleh kesimpulan sebagai berikut: 1.
Kadar glukosa rata- rata yang didapat dengan menggunakan metode GOD-PAP adalah 114 mg/dl, sedangkan pada cara strip 103 mg/dl.
2. Ada perbedaan yang bermakna dari hasil pemeriksaan kadar glukosa antara metode GOD-PAP dan cara strip.
B. Saran
Berdasarkan hasil pemeriksaan yang telah dilakukan, mak a penulis menyarankan: 1. Kepada pihak medis khususnya analis kesehatan agar tidak menggunakan strip sebagai alat yang digunakan untuk melakukan diagnosa laboratorium. 2. Kepada masyarakat khusunya penderita diabetes yang menggunakan strip, agar secara berkala memeriksakan kadar glukosanya ke laboratorium klinik untuk mengetahui kerja strip apakah masih baik atau tidak. 3. Untuk penelitian lebih lanjut, dilakukan penelitian dengan menggunakan kriteria sampel yang memperhatikan faktor-faktor pengganggu reaksi glukosa.
DAFTAR PUSTAKA A.Price, Sylvia; M.Wilson, Lorraine, 2005, Patofisiologi, EGC, Jakarta.
A.Sacher, Ronald; A. Mcpherson , Richard, 2004, Tinjauan Klinis Hasil Pemeriksaan Laboratorium, EGC, Jakarta. Departemen Kesehatan RI, 2005, Pedoman Pemeriksaan Laboratorium Untuk Penyakit Diabetes Melitus, Jakarta.
Djaeni Sediaoetama, Achmad, 1989, Ilmu Gizi, Dian Rakyat, Jakarta. DiaSys Diagnostic System GmbH, 2011, Jerman. MD150 Biochemistry Analyzer, 2009, Jakarta. Gandasoebrata. R, 2007, Penuntun Laboratorium Klinik, Dian Rakyat, Jakarta. Musyafallab. Ripani, 2010, http://ripanimusyaffalab.blogspot.com/2010/12/biosensor-glukosadarah.html,musyaffalb.rifani,2010
Notoatmodjo. Soekidjo, 2010, Metode Penelitian Kesehatan, PT RIENEKA CIPTA, Jakarta.
Poedjiadi, Anna; Titin Supriyanti, F.M, 2007, Dasar – Dasar Biokimia, UI-Press, Jakarta. Riyani, Ani, 2009, Penuntun Praktikum Kimia Klinik II , Analis Kesehatan Bandung, Bandung. Rodwell, Peter A, 2003, Biokimia Harper, Edisi 25, EGC, Jakarta. Schum, Dorothy E, 1993, Intisari Biokimia, Bina Putra Aksara, Jakarta. Suryaatmadja, Marzuki, 2003, Pendidikan Berkesinambungan Patolohi Klinik 2003, Bagian Patologi Klinik Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia, Jakarta. Sutadipura, Nugraha, 1978, penuntun praktikum biokimia, Fakultas Kedokteran UNPAD, Bandung. Tjokronegoro, Arjatmo, 1981, Dasar Dasar Metodologi Riset Ilmu Kedokteran, Departemen Pendidikan dan Kebudayaan Konsorsium Ilmu Kedokteran, Jakarta. Wirahadikusuma, Muhamad, 1985, Biokimia Mutu Energi, Karbohidrat, Lipid, ITB, Bandung.
