COLORACIONES MICROBIÓLOGICAS
COLORANTE •
Los colorantes, son sustancias que pueden tener un orien natural o arti!cial " que se usan para potenciar el color# $%I&ERENCIA ENTRE TINCION ' COLORACION(
Coloraci)n* Ocurre Ocurre a ni+el de la super!cie# Tinci)n* Tinci)n* Ocurre Ocurre ni+el olecular o celular
COLORANTE •
Los colorantes, son sustancias que pueden tener un orien natural o arti!cial " que se usan para potenciar el color# $%I&ERENCIA ENTRE TINCION ' COLORACION(
Coloraci)n* Ocurre Ocurre a ni+el de la super!cie# Tinci)n* Tinci)n* Ocurre Ocurre ni+el olecular o celular
CLASIFICACION DE LOS COLORANTES COLORANTES Se-n su orien
orcenina
A1ul de etileno, sa0ranina
Se-n sus propiedades quiicas
Natural
Colorante s acidos
Eosina
arti!cial
Colorante s ./sicos
A1ul de etileno
Colorante s neutros
Eosinato de a1ul de etileno
Colorante s indi0erent
Colorante sudan
MECANISMO %E SIM2LE COLORACIONES 3 Taa4o, arrelo " %I&ERENCIAL 0ora 3 5n solo tinte se di+ide* %IRECTA Ti4e .acteria E6eplos* tinci)n a1ul de etileno A1ul de lacto0enol •
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3 IN%IRECTA ti4e el 0ondo pero no a la Bacteria E6eplos* tinci)n neati+a
3Separar " clasi!car los icrooranisos o.ser+ados de acuerdo a sus Caracter9sticas 3M/s de un tinte E6eplos* Tinci)n Gra " :cido Resistente
ES2EC7&ICA
32ara identi!car estructuras* E6eplos* Tinci)n de 8aelos, espiroquetas c/psulas " esporas#
Coloraci)n siple •
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Ti4e las c;lulas de los icrooranisos proporcionando in0oraci)n so.re MOR&OLOG7A, de!nida por el taa4o, 0ora, arupaci)n 5SAN%O 5NICO COLORANTE coo sa0ranina, a1ul de etileno, cristal +ioleta " car.ol0uesina,etc Se le puede a4adir un ordiente#
Coloraci)n siple C#S %IRECTA El reacti+o que se usa, que pre0erenteente es de tipo ./sico " contiene un cro)eno
Todas las c;lulas a.sor.er/n el colorante " quedar/n te4idas del iso color#
E>EM2LOS *COLORACION CO A?5L %E METILENO, A?5L %E
2rocediiento en el la.oratorio #&rotis* acer un eDtendido a partir de un culti+o .acteriano en un portao.6etos# #&i6ar la preparaci)n eDponiendo el portao.6etos r/pidaente a la llaa del ecero e+itando un eDcesi+o calentaiento# F#Cu.ra el eDtendido con una peque4a cantidad de a1ul de etileno " d;6elo actuar por un inuto# #La+e con aua asta eliinar el eDceso de colorante# H#Seque la preparaci)n al aire o al ecero# #EDaine las preparaciones te4idas al icroscopio, con el lente de inersi)n#
COLORACION %E A?5L %E LACTO&ENOL Colorante acido que ti4e que ti4e el citoplasa " la quitina presente en las celulas 0unicas# Jtil para la identi!caci)n de estructuras " esporas de onos 2rocediiento en el la.oratorio #Kacer una eDtendido a partir de un culti+o en un portao.6etos# #Cu.ra la uestra con a1ul de lacto0enol# F#cu.rir con cu.reo.6etos# #o.ser+ar#
COLORACION %E A?5L %E LACTO&ENOL&otoicrora09a de onos !laentosos con el ;todo de a1ul alod)n de lacto0enol# Exserohilum sp.
C# SIM2LE IN%IRECTA
Las c;lulas se de6an sin te4ir, pero se colorea en ca.io el edio que las rodea# Lo que se +e, por tanto, es el per!l de las c;lulas#
COLORACION NEGATI@A 2erite o.ser+ar las .acterias con color translucido so.re un capo oscuro, utili1ando LA TINTA CKINA#
Liitado por la presencia de un 0ondo oscuro que no peritir/ la correcta identi!caci)n " detallada de
Mani!esta la presencia del ono cr"ptococcuc neo0orans, causante de
COLORACIÓN NEGATI@A 2ROCE%IMIENTO EN LABORATORIO #Kacer un eDtendido a partir de un culti+o .acteriano en un portao.6etos # Cu.ra el eDtendido con tinta cina F#Cu.rir con portao.6etos #O.ser+ar •
COLORACIÓN %I&ERENCIAL
COLORACIÓN DIFERENCIAL El colorante utili1ado pone de ani!esto di0erencias entre c;lulas .acterianas o entre partes de una isa c;lula# Estas t;cnicas utili1an as de un colorante o .ien ciertos reacti+os copleentarios para la tinci)n# E6eplos* Tinci)n de Gra, Tinci)n de ?iel Neelsen#
TINCIÓN %E GRAM Esta tinción diferencial depende de la estructura de la pared celular de las bacterias.
Las .acterias Gra neati+as tienen una e.rana eDterna de la que carecen las .acterias Gra positi+as# La t;cnica consiste en una tinci)n priaria, una decoloraci)n " una tinci)n de contraste#
!TODO DE TINCIÓN:
Tinci"n de Resistentes=
#IE$L%NEELSEN
<:cido
Alcool
Esta tinción permite diferenciar micobacterias, bacterias con ácidos micólicos en su pared celular pertenecientes a los géneros Mycobacterium y Nocardia.
Mani!esta la capacidad de resistir a la decoloraci)n racias al alto contenido de l9pidos cople6os
Tincione& e&peciale&
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las tinciones especiales increentan el contraste en las c;lulas icro.ianas " re+elan estructuras particulares, entre las que se inclu"en endosporas, los 8aelos " las c/psulas#
TINCIÓN DE ES'ORAS !TODO (IRT#%CON)LIN • •
ES2ORAS* La espora .acteriana es un cuerpo re0rinente o+al 0orado dentro de la c;lula # Esta puede estar u.icada en el centro o en un eDtreo# La espora puede tener di/etro a"or que la .acteria +eetati+a " ser de0orante de ella#
2ROCE%IMIENTO* • •
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2reparar un 0rotis. Cu.rir con +erde alaquita " calentar asta el desprendiiento de +apores por H inutos# La+ar con aua corriente# Colorear con sa0ranina por inuto# La+ar " secar# O.ser+ar#
TINCIÓN DE C*'S+LAS
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La c/psula .acteriana o lucoc/liD es una capa que se 0ora en la parte eDterna de la pared de la a"or9a de las .acterias#
TINCIÓN %E C:2S5LAS 2OR EL MTO%O %E KISS • •
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2reparar un 0rotis . # Cu.rir 0ucsina ./sica " calentar asta el desprendiiento de +apores por F seundos# F# La+ar con soluci)n acuosa de sul0ato de co.re al # # La+ar con aua corriente " secar# H# O.ser+ar#
TINCIÓN DE ES'IRO,+ETAS •
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.acterias Gra neati+as laras, deladas, elicoidales " )+iles# Treponema, Borrelia y Leptospira
TINCIÓN %E ES2IROP5ETAS CON EL MTO%O %E @AGO •
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Con el palito ondadientes o.tener una uestra de sarro dentario " reali1ar un 0rotis en capa !na eDtendiendo en sentido espiral de adentro acia 0uera# &i6ar el 0rotis al calor sua+e Cu.rir con Mercuro croo durante F inutos La+ar con aua corriente Cu.rir el 0rotis con @ioleta de enciana por F inutos La+ar con aua corriente Secar " o.ser+ar al icroscopio con o.6eti+o de inersi)n#
TINCIÓN DE FLA-ELOS
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&laelo* Es un or/nulo !li0ore# 2ro+ee de o+iiento a las c;lulas#
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Los 8aelos son estructuras deasiado !nas para poder ser +isi.les en el icroscopio de lu1#
