1) ¿Cómo definiría definiría métodos de Screening? Enumere ventajas ventajas y desventajas desventajas de los mismos.
Los métodos de Screening son sistemas de medida de respuesta rápida que responden más a análisis cualitativos que cuantitativos. La respuesta r espuesta mas usual es binaria del tipo SI/NO, determinando la presencia o no de cierto analito en una muestra, así como también la presencia o no de dicho analito por encima de un nivel estipulado esti pulado generalmente de concentración, el cual esta fijado por la legislación. Las ventajas de estos métodos reparan en la forma directa de determinar los resultados, además de su bajo costo y su rapidez. Mientras que la principal desventaja es que no es tan seguro debido a los falsos negativos y positivos, pero eso tiene solución, la cual se ve detallada mas adelante.
2) ¿Es correcta correcta la siguiente siguiente expresión? expresión? “Presen “Presencia/a cia/ausen usencia cia de determinado analito en una muestra” Justifique.
La afirmación si es correcta, ya que es una función de los métodos de Screening determinar si en cierta muestra hay o no presencia de sustancias a analizar (analitos), y a partir de ello obtener los efectos de dicha presencia en la muestra.
3)
Cuando en el texto se menciona la necesidad de “validar” los métodos de análisis cualitativos ¿a qué hace referencia? Relacione su opinión con los conceptos aportados en clase.
El concepto “validar los sistemas de medida cualitativos” hace referencia además de a la caracterización de dichos métodos, a la determinación de los parámetros de calidad previamente establecidos (falsos positivos y negativos, sensibilidad y especificidad, región de incertidumbre, límite de corte o cut-off , entre otros), es decir, es sumamente necesario porque al validar estamos comprobando la validez del sistema de medida y como se adecúa a dichos parámetros.
4)
Se quiere determinar la presencia de nitritos en agua de bebida. ¿Qué criterios tendría en cuenta para validar el/los métodos utilizados? ¿Qué implicancia tendrían sobre los resultados un método que posea gran cantidad de falsos positivos?¿Y de falsos negativos? Justifique.
El criterio a tener en cuenta sería la presencia/ausencia de nitritos en agua de bebida, y en el caso de que el analito este presente en la muestra y tenga un límite de concentración que su sobrepaso implique perjuicios determinaría la presencia/ausencia del nitrito por encima del nivel permitido. Si el método posee gran cantidad de falsos positivos y el nitrito presente en agua de bebida no sobrepasa el valor límite permitido por la legislación, el test de Screening arrojará como resultado que si hay presencia de analito por encima de dicho nivel. En cambio, si el método tiene falsos negativos y la muestra contiene nitritos sobrepasando el nivel, el método nos dará una respuesta negativa, concluyendo en que el analito no sobrepasa el nivel permitido.
5) Idee un sistema se Screening, a modo de ejemplo, que se relacione con la figura 1. PRESENCIA DE NITRITOS EN AGUA DE BEBIDA POR ENCIMA DEL NIVEL PERMITIDO.
6) ¿Por qué es tan importante contar con un blanco cuando se lleva a cabo el análisis cualitativo clásico sensorial? En este tipo de análisis, ¿se establece un límite de detección? Justifique.
En el análisis cualitativo clásico sensorial es necesario contar con un blanco, debido a que nos ofrece la posibilidad de comparar el color del analito con el de dicho blanco (muestra sin analito), y la respuesta se obtiene de forma directa. Por ejemplo, si en la muestra se obtiene un determinado color hay analito y si no se obtiene el color del blanco el analito no se haya presente. En este análisis no se establece un límite de detección, debido a que no se realiza ningún tratamiento de datos y la respuesta binaria SI/NO se obtiene de forma directa en base a los sentidos humanos, principalmente la vista.
7) En los análisis cualitativos instrumentales, ¿Qué significa la respuesta SI/NO?.
En los análisis cualitativos instrumentales la respuesta SI/NO nos indica la comparación de la respuesta instrumental establecida con la respuesta instrumental obtenida para cada muestra. Por ejemplo, un valor de absorbancia para la concentración correspondiente al valor que se quiere cribar (nivel de concentración establecido por la legislación), comparado con la respuesta práctica obtenida para cada muestra. Si dicho valor es superior la respuesta es “SÍ” (presencia de analito) y si es inferior la respuesta es “NO” (ausencia de analito).
8)
A pesar de que los métodos de Screening solo aporten respuestas binarias de SI/NO se desarrollan métodos para caracterizarlos y sustentar su aplicación. ¿Qué relación encuentra con el tratamiento y análisis de datos que se realiza en los métodos analíticos cuantitativos?.
Los análisis cualitativos y cuantitativos difieren en la forma de expresar el resultado, el primero nos ofrece una respuesta que al ser binaria SI/NO se expresa en probabilidades, mientras que los análisis del tipo cuantitativo se caracterizan por dar como resultado dos valores numéricos: la estimación del valor verdadero y la incertidumbre asociada a la dispersión del resultado (intervalo donde creemos que esta el valor real). Pese a esta diferencia, la relación que existe entre ambos es que hay algunos análisis cualitativos con finalidad cuantitativa.
Para que esto ocurra los métodos de Screening cuentan con ciertas connotaciones que requieren una cuidadosa adaptación de los parámetros de calidad en los procesos con finalidad cuantitativa. En resumen, para que un análisis cualitativo sea analizado cuantitativamente debe adaptar sus parámetros de calidad (físicos o químicos). Únicamente serán analizados cuantitativamente aquellas muestras que resulten “SI” (positivo), es decir, donde haya presencia de analito que sobrepase el nivel estipulado.
9)
¿Qué significan los términos cut-off , o límite de corte y límite legislativo? Relacione estas definiciones con los conceptos de sensibilidad y especificidad analizados.
El límite de corte o cut-off es un límite experimental relacionado con la concentración. Este es el límite real al que criba el test kit. El límite legislativo también esta en las concentraciones, pero es un límite teórico que puede o no coincidir con el experimental (lo ideal es que si). El límite legislativo siempre tiene un valor ya estipulado. La relación de estos límites con la sensibilidad es que al disminuir el limite de concentración va a aumentar la sensibilidad, ya que el límite es la concentración por debajo de la cual no podríamos identificar la sustancia. Se relacionan estos conceptos también con la especificidad, porque estos límites de concentración son por encima de la cual se va a reconocer una sustancia específica en una muestra. Debemos asegurarnos de que el método usado para cribar detecte sustancias a un límite inferior o igual al límite de corte.
¿Puede asegurar qué los resultados obtenidos a través de estos métodos de cribado son totalmente seguros? Justifique.
10)
En mi opinión los resultados obtenidos en el cribado son totalmente seguros, porque si bien existen posibilidades de error (falsos positivos y negativos),
en todos los métodos de caracterización se realizan elevados números de muestras y también se comparan los resultados obtenidos en el cribado con los obtenidos mediante un método confirmatorio y a partir de esa comparación se calculan los parámetros básicos (falsos negativos y positivos, especificidad y sensibilidad).
Establezca una relación entre los conceptos de especificidad y sensibilidad con las definiciones de falsos positivos y negativos.
11)
Los falsos negativos y positivos nos ofrecen un resultado tergiversado porque su presencia en muestras que contengan o no analito por encima del nivel permitido nos cambia el resultado real, a diferencia de la sensibilidad y la especificidad, que nos dan una respuesta real y correcta a nuestro análisis. La relación que hay entre estos conceptos es que existe una zona de error (o no fiabilidad) que se encuentra alrededor del límite de corte, esta zona es el intervalo de concentraciones en las que se encuentran falsos positivos y negativos y esta definida por un valor superior e inferior de analito en muestra, donde el valor superior esta relacionado con la sensibilidad y el inferior con la especificidad. Es decir, la no fiabilidad de los resultados en la región de error donde se encuentran falsos positivos y negativos esta demarcada por la sensibilidad y la especificidad, que son parámetros que si nos brindan fiabilidad .
12) Explique las definiciones de sensibilidad y especificidad que se expresan en el artículo.
El artículo nos dice que la sensibilidad es la habilidad del sistema de Screening de detectar muestras positivas cuando realmente lo son. Esto significa que se diferencia de un sistema con falsos positivos que dan como resultado positivo una muestra que no contiene analito por encima del nivel permitido. Lo mismo ocurre con las muestras negativas, que a diferencia de los sistemas con falsos negativos nos detectan muestras negativas cuando de verdad lo son.
Esto nos informa que sensibilidad y especificidad son parámetros de calidad cualitativos confiables.
