TÉCNICAS DE COLETA, FIXAÇÃO E COLORAÇÃO EM CITOLOGIA CLÍNICA Citologia Cérvico-V Cérvico-Vaginal aginal Profa. Janaina Cristiana de Oliveira Crispim Freitas
[email protected] 2011.1
COLO UTERINO
Ectocérvice Endocérvice Junção Escamo Colunar (JEC)
TÉCNICAS DE COLETA
Esfoliativa
Abrasiva
Objetivo da Técnica de coleta
Citologia Oncótica Citologia Hormonal
VANTAGENS X DESVANTAGENS
Esfoliativa:
Vantagens: Boa representatividade; + eficaz na detecção de tumores ocultos do endométrio, das tubas e ovários. Desvantagem: O mau estado de conservação das células.
VANTAGENS X DESVANTAGENS Abrasiva
Vantagem: Detecção precoce de lesões. Desvantagem: Exige prática e destreza manual.
COLETA E ESFREGAÇO Papanicolaou Convencional 1) Espátula de Ayre
2) Swab
3) Espátula Cervex Amostragem simultânea do canal endocervical e da ectocérvice
4) Escova endocervical
COLETA E ESFREGAÇO Papanicolaou Convencional
Espátula de Ayre
Escova Endocervical
COLETA E ESFREGAÇO Papanicolaou Convencional - Esfregaço
Amostragem simultânea do canal endocervical e da ectocérvi
COLETA E ESFREGAÇO Papanicolaou Convencional - Esfregaço
1)
2)
3)
Fixação e Fixadores Função: Preservar as características morfológicas das células.
Fixador ideal:
Não pode ser tóxico, não pode ser volátel a T.A. e baixo custo.
Fixadores + usados
ETANOL 70 A 90% ETANOL DESNATURADO 95% PROPANOL 80% AEROSSÓIS (ISOPROPANOLOL E PROPILENOGLICOL)
Fixadores habituais para esfregaços cervicais
A FIXAÇÃO COM UM AEROSSOL DEVE OBEDECER A CERTAS REGRAS:
COLETA E ESFREGAÇO Papanicolaou Líquida - Esfregaço ou
COLETA E ESFREGAÇO Papanicolaou Convencional X Líquida
Convencional
Líquida
COLETA E ESFREGAÇO Papanicolaou Convencional X Líquida LÍQUIDA
Thin Prep Autocyte DNA Citoliq
ESFREGAÇO Má fixação
Convencional
Líquida
ESFREGAÇO Obscurecimento por Sangue
Convencional
Líquida
ESFREGAÇO Obscurecimento por Exsudato
Convencional
Líquida
COLORAÇÃO
O processo facilita o reconhecimento dos componentes celulares.
No geral: Os núcleos: captam os elementos basofílicos dos corantes.
O citoplasma pode adquirir uma cor rosa (eosinofílico) ou azul (cianofílico)
COLORAÇÃO Tipos de corantes usados na citologia:
Coloração de Shorr: produz um bom contraste na coloração citoplasmática das células escamosas. Coloração de Papanicolaou: é empregada de forma universal na citologia ginecológica
COLORAÇÃO DE PAPANICOLAOU Alcool 70° - 2 min
Água – 2 min
EA50 - 4 min
Álcool 95° - 2 min
Álcool 95° - 2 min
Hematoxilina de Harris
Orange G - 3 min
Água – 5 min
Álcool 95° - 2 min
Álcool Absoluto - 2 min (mínimo)
Montagem e Fixação da lâmina
Princípio do Método - Coloração Alcool 70°
Água
Meio aquoso para coloração dos núcleos
Hidratação Coloração dos núcleos
Hematoxilina de Harris Orange G
Coloração do citoplasma
EA36/65
Álcool 95°
Desidratação
Oxidação pelo óxido de mercúrio (hemateína) = cor azul. Laranja = citoplasma de células queratinizadas e grânulos das células superficiais. Eosina + Verde Luz Epiteliais superf /hemácias/cílios Epiteliais ativas/leuco/microrgan.
Álcool 95° Álcool Absoluto
Meio álcóolico - montagem
Princípios de Rastreamento
I ETAPA:
Identificação Formulário com os dados clínicos Rastreamento na objetiva de 10 Rastreamento pode ser vertical ou horizontal Anormalidades devem ser confirmadas na objetiva de 40.
Princípios de Rastreamento
Células anômalas ou não habituais devem ser marcadas com pontos de tinta, sempre posicionados da mesma forma por todos os funcionários do laboratório
CITOLOGIA CÉRVICO-VAGINAL
CÉLULAS NORMAIS
CRIT RIOS DE ADEQUAÇÃO DA AMOSTRA Satisfatório – Células Epiteliais Escamosas
7 campos ou mais com equivalente celularidade. Aumento de 40
8 campos ou mais com equivalente celularidade Aumento de 40
American Society of Cytpathology, NCI, Bethesda System http://www.cytopathology.org/NIH/view.php?patientId=117
CRIT RIOS DE ADEQUAÇÃO DA AMOSTRA
CRITÉRIOS DE ADEQUAÇÃO DA AMOSTRA
Insatisfatório
CRIT RIOS DE ADEQUAÇÃO DA AMOSTRA Insatisfatório – Células Epiteliais Escamosas
Celularidade escassa. Aumento de 10 vezes.
Aproximadamente 75 células. Aumento de 4x
American Society of Cytpathology, NCI, Bethesda System http://www.cytopathology.org/NIH/view.php?patientId=117
CRITÉRIOS DE ADEQUAÇÃO DA AMOSTRA Insatisfatório – Obscurecimento e Artefatos Sangue e Leucócitos
Artefato de Fixação
Sangue
Contaminação
CRITÉRIOS DE ADEQUAÇÃO DA AMOSTRA Esfregaços Inadequados Causa
Prevenção
Fixação incorreta
Aplicar o fixador imediatamente à lâmina
Esfregaço muito espesso
Espalhar o material bem delgada e rapidamente à lâmina
Sangue demasiado
Evite coletar material durante a menstruação
Artefato de esfregaço
Espalhe o esfregaço delicada, mas rapidamente
Citólise excessiva
Colha material durante, ou antes, da ovulação
Lubrificante excessivo
Use menos lubrificante, ou água quente no espéculo
Polimorfos em demasia
Retire delicadamente o tampão de muco antes de coletar o material
Perfil Celular
