Teknik Teknik transfer gen Untuk mentransfer molekul molekul DNA asing dapat menggunakan vektor maupun non-vektor Beberapa vektor yang biasa digunakan adalah : Virus Prosesnya sama dengan transduksi dimana gen manusia dimasukan kedalam virus yang akan menginfeksi sel manusia yang mengalami mutasi Virus Virus yang dapat digunakan sebagai vektor : - !etro virus - Adeno virus - Adeno asso"iated virus - Virus herpes - Virus lent - Virus po# $asing-masing vektor virus ini tentu ada mempunyai kelebihan dan kekurangannya % Virus yang banyak digunakan adalah retrovirus dan d an adenovirus% Retrovirus
!etrovirus adalah salah satu andalan pendekatan Terapi Terapi gen yang saat ini% !etrovirus rekombinan seperti virus murine leukemia $oloney memiliki kemampuan untuk mengintegrasikan ke dalam genom host dengan "ara yang stabil% $ereka berisi transkriptase yang memungkinkan integrasi ke host genom% $ereka telah digunakan dalam ¨ah yang disetu&ui 'DA u&i klinis seperti ()*D-+ , per"obaan% !etroviral vektor dapat men&adi kompeten replikasi atau replikasi-"a"at% !eplikasi-"a"at vektor adalah pilihan yang paling umum dalam studi karena virus memiliki daerah "oding untuk gen yang diperlukan untuk tambahan putaran virion replikasi dan kemasan yang digantikan dengan gen lain lain atau dihapus%
Virus ini mampu menginfeksi sel target mereka dan memberikan muatan virus mereka tetapi kemudian gagal untuk melan&utkan &alur lyti" khas yang mengarah ke sel isis dan kematian% (ebaliknya kompeten replikasi virus vektor berisi semua gen yang diperlukan untuk sintesis virion dan terus menyebarkan diri setelah infeksi ter&adi% .arena genetika virus untuk vektor ini &auh lebih pan&ang pan&ang dari gen dimasukkan sebenarnya menarik terbatas dibandingkan dengan pan&ang mungkin insert untuk replikasi-"a"at vektor% Tergantung pada vektor virus pan&ang maksimum khas memasukkan DNA yang dii/inkan di sebuah "a"at replikasi virus vektor adalah biasanya sekitar 0,1 kB% (ementara ini membatasi pengenalan banyak urutan genom sebagian besar "DNA urutan masih dapat ditampung% .elemahan utama untuk menggunakan retrovirus seperti $oloney retrovirus melibatkan persyaratan untuk sel-sel membagi se"ara aktif untuk transduksi% (ebagai akibatnya sel-sel seperti neuron sangat tahan terhadap infeksi dan transduksi oleh retrovirus% Ada kekha2atiran bah2a mutagenesis insertional karena untuk integrasi ke genom host dapat mengakibatkan kanker atau leukemia% Adenovirus
(ebagai la2an untuk lentiviruses adenoviral DNA tidak mengintegrasikan ke genom dan tidak direplikasi semasa pembelahan% 3al ini membatasi penggunaannya dalam penelitian dasar meskipun vektor adenoviral kadang-kadang digunakan dalam eksperimen 44 in vitro44% Aplikasi utama mereka berada di Terapi gen dan vaksinasi% .arena manusia biasanya datang dalam kontak dengan adenoviruses yang menyebabkan pernafasan pen"ernaan dan mata infeksi memi"u respon imun yang "epat dengan konsekuensi yang berbahaya% Untuk mengatasi masalah ini para ilmu2an sedang menyelidiki adenoviruses manusia yang tidak memiliki kekebalan%
(e"ara non-vektor ,% Transfer iposom iposom dapat memba2a gen kedalam sel somatik karena sifat-sifat fisik dan kimianya untuk mengganti gen yang abnormal% 5% .imia2i .alsium dan fosfat dapat membuat lobang sementara pada membran sel yang dapat dilalui DNA pengganti 6% 7lektroporasi obang pada membran dibuat dengan bantuan arus listrik% 8% $ikro in&eksi DNA baru diin&eksikan dengan menggunakan &arum mikro ke sel normal 9% Bombardir partikel dengan bantuan tekanan udara DNA pengganti yang dilapisi partikel metal dapat memasuki sel resipien % )himeraplasti merangsang sel mutasi untuk memperbaiki DNAnya sendiri% )himeraplast terdiri dari DNA dan !NA dengan 59-81 nukleotida%
