PEMERIKSAAN BTA ( BAKTERI TAHAN ASAM ) SOP
No. Dokumen No. Revisi Tgl. Terbit Halaman
UPT.
: 23/SOP/Lab-NPI/2016 : 01 : 01 April 2016 :1-5 Kepala UPT Puskesmas Nusa Penida I
PUSKESMAS NUSA PENIDA I
dr. I Ketut Rai Sutapa NIP. 19790401 200604 1 012
1. Pengertian
Bakteri Tahan Asam adalah bakteri pada pengecatan Ziehl-Neelsen (ZN) tetap mengikat warna pertama, tidak luntur oleh asam dan alkohol, sehingga tidak mampu mengikat warna kedua. Bakteri tersebut jika diamati di bawah mikroskop tampak berwarna merah dengan warna dasar biru muda.
2. Tujuan
Menemukan
dan
mengidentifikasi
Bakteri
Tahan
Asam
yaitu
mycobakterium tuberculosis pada sampel sputum pasien.
3. Kebijakan
1. SK Kepala Puskesmas Nusa Penida I No. 133 Tahun 2016 Tentang
Pemberlakuan
Standar
Operasional
Prosedur
unit
Laboratorium UPT. Puskesmas Nusa Penida I 2. SK Kepala Puskesmas Nusa Penida I No. 38 Tahun 2015 Tentang
Pelayanan
Laboratorium
dan
Jenis
Pemeriksaan
Laboratorium UPT. Puskesmas Nusa Penida I 4. Referensi
1. Petunjuk Pemeriksaan Laboratorium Puskesmas, Departemen Kesehatan RI, Th. 1991 2. Pedoman Penyelenggaraan Praktek Laboratorium, Pus Lab Kes Dep.Kes RI, Jakarta Tahun 1999.
1/7
5. Prosedur
A. Bahan/Reagensia Larutan Ziehl Neelsen : 1. Larutan carbol fuchsin 0,3 % 2. Larutan Asam Alkohol 3 % 3. Larutan Methylen blue 0,3 %
B. Alat 1. Pot dahak ( bermulut lebar, tutup ulir, steril, tidak mudah 2. 3. 4. 5. 6.
pecah dan bocor, sekali pakai, berlabel ) Slide / objek glass Ose / sengklit / lidi Pensil kaca Lampu spritus Rak pewarnaan Mikroskop
C.
Persiapan
1. Petugas Laboratorium : a. Sebelum melakukan
pemeriksaan
dahak,
petugas
laboratorium harus menggunakan Alat Pelindung Diri (APD) seperti ; Jas Laboratorium, Masker, Sarung tangan 2. Pasien ; Melakukan pengumpulan specimen dahak : a. Waktu : Spesimen diambil dalam jangka waktu 2 hari yaitu : - Pengumpulan Dahak Sewaktu - Pengumpulan Dahak Pagi - Pengumpulan dahak Sewaktu Pengumpulan dahak dahak yang baik adalah dahak pagi hari atau pun dahak semalam dengan jumlah dahak yang terkumpul sebanyak 3-5 ml setiap botol dahak. b. Tempat : dahak dikeluarkan di ruang terbuka dan mendapat sinar matahari langsung dan specimen di tamping dalam pot dahak yang sudah di beri label yang jelas sesuai dengan nomer indentitas sediaan dahak ( TB 06) 2/7
c. Cara pengumpulan dahak : 1. Beri petunjuk kepada pasien untuk berkumur dengan air sebelum mengeluarkan dahak dan bila memakai gigi palsu, lepaskan sebelum berkumur. 2. Letakkan pot dahak yang sudah terbuka dekat dengan mulut dan keluarkan dahak dalam pot dahak. 3. Tutup pot dahak dengan rapat dengan cara memutar tutupnya 4. Bila dahak sulit keluar, pasien dapat melakukan : a. Olahraga ringan kemudian menarik nafas dalam beberapa kali. Bila terasa akan batuk nafas ditahan selama mungkin lalu disuruh batuk. b. Malam hari sebelum tidur banyak minum air atau menelan 1 tablet glyseril guaykolat 200mg. Bila Spesimen dahak jelek, pemeriksaan dilakukan
dengan
mengambil
mukopurulen
bagian
yang
tetap paling
( kuning kehijauan kental ) dan
diberi catatan bahwa
‘ specimen tidak
memenuhi syarat/ air liur ’.
D. Cara kerja : 1. Cara Membuat Sediaan Apus a. Tulis nomor identitas pasien pada bagian ujung kaca b. Pilih dan ambil bagian dahak yang purulen menggunakan lidi yang di pipihkan ujungnya. c. Buat sediaan yang berbentuk spiral-spiral kecil berulang yang tersebar rata dengan ukuran ± 2 – 3 cm, tidak terlalu tebal atau tipis. Jika diletakkan di atas tulisan masih bisa dibaca. d. Keringkan di udara. 2. Cara pewarnaan Metode Ziehl Neelsen a. Sediaan yang sudah kering di fiksasi diatas nyala api sebanyak 3 kali. b. Letakkan sediaan dengan bagian apusan menghadap ke atas pada rak yang ditempatkan diatas bak cuci atau baskom, antara satu sediaan dengan sediaan lainya masing-masing berjarak kurang lebih 1 jari. 3/7
c. Genangi seluruh permukaan sediaan dengan larutan ZN A ( karbol fuchsin 0.3 % ) d. Panasi dari bawah dengan sulut api lampu spritus setiap sediaan sampai keluar uap tapi jangan sampai mendidih. e. Diamkan selama 5 menit f. Kemudian bilas sediaan dengan hati-hati dengan air mengalir dan jangan ada percikan ke sediaan yang lain. g. Buang air dan genangi dengan larutan
ZN
B
( asam alcohol 3 % ) sampai tidak tampak warna merah karbol fuchsin kemudian bilas dengan air mengalir pelan. Jika warna merah masih ada lakukan dekolorisasi dengan asam alcohol selama 30 detik. h. Kemudian genangi sediaan
dengan
larutan
ZN
C
i.
( Methylen blue 0.3 % ) biarkan selama 10 – 20 detik Bilas dengan air mengalir dan jangan ada percikan ke sediaan
j.
yang lain. Keringkan
sediaan
pada
rak
pengering
dan
jangan
dikeringkan dengan kertas tissue.
3. Cara Pembacaan Sediaan Apus a. Gunakan lensa Objektif 10 x untuk menetapkan focus dan menemukan lapang pandang b. Teteskan satu tetes minyak emersi pada permukaan sediaan c. Putar lensa objektif 100x dengan hati-hati ke atas sediaan apus d. Lakukkan pembacaan sediaan apus secara sistemastis untuk memastikan hasil yang dilaporkan mewakili seluruh bagian sediaan. e. Pembacaan dimulai dari ujung kiri ke kanan dan dilakukan pada sediaan yang sel-selnya terlihat. Bila sediaan tampang 4/7
kosong, geser pada lapang padang berikunya. f. Setelah selesai pembacaan, bersihkan minyak dari sediaan apus dengan menggunakan kertas tissue lensa. g. Hapus sisa imersi pada sediaan dengan menggunakan ujung kertas tissue yang bersih h. Simpan sediaan dalam kotak sediaan secara berurutan menurut
nomer
register
laboratorium
untuk
keperluan
pemantapan mutu.
E. Nilai Normal : Menurut Skala IUATLD ( Internatioanal Union Against Tubekulosis and Lung Disease ) : Pengujian 0 BTA / 100 LP 1 – 9 BTA / 100 LP 10 – 99 BTA / 100 LP 1 – 10 BTA / 1 LP > 10 BTA / 1 LP
5/7
Hasil
Penulisan
Negative Scanty
NEG (-) Ditulis jumlah BTA yang
Positive 1 Positive 2 Positive 3
ditemukan 1+ 2 + 3+
6. Diagram/
Persiapan Alat dan Pasien
Bagan Alir
Melakukan pengumpulan specimen dahak : Spesimen diambil dalam jangka waktu 2 hari yaitu : -Pengumpulan Dahak Sewaktu -Pengumpulan Dahak Pagi -Pengumpulan dahak Sewaktu
Tulis nomor identitas pasien pada bagian ujung kaca kemudian buat sediaan yang berbentuk spiral-spiral kecil berulang yang tersebar rata dengan ukuran ± 2 – 3 cm, tidak terlalu tebal atau tipis. Jika diletakkan di atas tulisan masih bisa dibaca dan Keringkan di udara.
Lakukan pewarnaan Metode Ziehl Neelsen
Amati sedian dibawah mikroskop
perbesaran
lensa objektif 100x dengan oil emersi.
Catat hasil pengamatan jika di temukan basil gram negatif (batang berwarna merah) sesuai skala IUATLD
7. Unit Terkait
1. 2. 3. 4.
Laboratorium Rawat Jalan Rawat Inap UGD
6/7
Nengah Mahendra Risanu,Amd.AK Dibuat oleh
Koordinator Laboratorium dr. Agus Putu Agung,S.Ked Koordinator UKP
Disetujui oleh
dr. I Ketut Apriantara,S.Ked WMM
7/7
