PRUEBA CON NINHIDRINA. Al agregar 2 gotas de ninhidrina a cada uno de los tubos de ensayo que contenían 0,5mL de la solución de proteína, se pudo observar que cada una de ellas reaccionó de forma diferente al entrar en contacto con la ninhidrina y produjo una variación de color en cada una de estas como se puede observar en la tabla (Resultados de las pruebas de coloración). !ebido a que la l a ninhidrina y el "a"#$ son reactivos que por medio de calorimetría reaccionan con las proteínas y los amino%cidos formando soluciones de tonalidades violetas& 'odas aque aquellllas as sust sustanc ancia iass que que prese present ntan an al menos menos un grupo grupo amin amino o y uno uno carbo(ilo libre, reaccionaran con la ninhidrina& La ninhidrina reacciona r%pidamente con el grupo amino, lo o(ida y libera amonio el cual se condensa con la ninhidrina reduc reducid ida, a, y con con otra otra mol) mol)cul cula a de ninh ninhid idri rina na libre libre,, para para produ produci cirr un aduc aducto to *producto formado por la unión de dos mol)culas+ prpura de -uhemann& Al observar obser var los resultados obtenidos se puede notar que las pruebas que en este caso dieron positivas ante la presencia de amino%cidos libres fueron la albmina de huevo, gelatina y la histidina ya que estas se tornaron de color a.ul con tendencia a morado y violeta respectivamente& /sto se debe a que la albmina huevo es rica en sisteína, metionina y presenta grupos sulfihidrilo, la cual est% const co nstititui uida da por al alre rede dedo dorr de 5 55 5 am amin ino% o%ci cidos dos co con n 1 pu puen ente tess di disu sulflfuro uro,, la conce co ncent ntra raci ción ón de est estos os am amin ino% o%ci cidos dos en la al alb bmi mina na de hu huev evo o hac hace e que al encontrarse en presencia de ninhidrina se torne de un color a.ul con tendencia a morado adem%s de que en su estructura presenta m%s de un grupo amino y carbo(ilo libre&
Estructura u!"ica de la alb#"ina &
Adem%s de la albmina de huevo, otra sustancia que presentó positividad en el momento de entrar en contacto con la ninhidrina fue la gelatina, esto se debe a que al ser una proteína compleja con gran presencia de amino%cidos y poseer un car%cter anfótero, asociado con la presencia de los grupos amino y carbo(ílicos en los amino%cidos hace que la reacción con la ninhidrina sea positiva& #tra de las sustancias que dio una respuesta positiva al estar en presencia de ninhidrina fue la histidina, esto se debe a que su cadena lateral est% cargada positivamente, este amino%cido esencial presenta una gran concentración de amino%cidos libres y como se puede observar en su estructura contiene un grupo amino y carbo(ilo lo cual permite la reacción positiva con la ninhidrina dando así un color violeta fuerte m%s que la presentada en la gelatina y el huevo, esto quiere decir que es este el que contiene mayor presencia de amino%cidos libres&
E$%RUC%URA HI$%IDINA.
iguiendo con las observaciones se puede detallar que la urea y el agua no presentan ningn amino%cido libre ya que estos dos compuestos no cambiaron de color en el momento de entrar en contacto con la ninhidrina& Adem%s la fenilalanina, asparagina, glicina, muestra problema y el triptófano tampoco reaccionaron positivamente ante la presencia de ninhidrina ya que presentaron un cambio a color a caf) en diferentes tonalidades, esto indica la poca concentración de los amino%cidos libres en las estructuras moleculares de estos compuestos&
3inalmente se puede decir que la reacción con ninhidrina identifica compuestos que contengan grupo alfa amino libres y es una de las reacciones m%s sensibles para identificar aminoacidos en general, ya que detecta una parte de aminoacido en 500 000 partes de agua&
BIB&IO'RAA. •
Armstrong, 3 4ioquímica& /ditorial -everte, &A& 4arcelona /spaa& 62&
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L/:"?">/-9 7-?"@?7?# !/ 4?#BCD?@A E !avid L& "elson y Dichael D& @o( F 5G edición F 4arcelona9 /diciones #mega 2006& 'raducido por9 @laudi D& @uc hillo /& Haiser, -& L& @olescott, @& !& 4ossinger, 7& ?& @ooI, Analytical Biochemistry $= 565 *610+
