Identificación de los aminoácidos por reacciones químicas de sus cadenas laterales. Ser%io Ale&andro !astro 'l(ate )
RESUMEN Los aminoá aminoácid cidos os son los los “monó “monómer meros” os” de las proteínas y le confieren a estas sus propiedades especi especiale ales, s, todos todos los aminoá aminoácid cidos os tiene tienen n una estructura básica y se diferencian, principalmente, por los grupos funcionales de su cadena lateral. Este informe tiene como objetivo reconocer, cualitativame amente, algunos ami aminoácidos por medio de reacciones colori colorimé métri tricas cas.. or medio medio de die! die! reacci reaccion ones es colo colorim rimét étri rica cas" s" nin# nin#id idri rina na,, $ant $antop opro rote teic ica, a, %illón, &op'ins()ole, *a'aguc#i, nitroprusiato de sodio sodio,, acetat acetato o de plomo plomo,, E#rlic E#rlic#, #, auly auly y +iur +iuret et se anal anali! i!aro aron n una una seri seriee de patr patron ones es,, soluciones problema y una solución diluida - de clara de #uevo, se pudieron determinar una serie de aminoácidos en las soluciones problema como como arg arginin ininaa y tiro tirosi sin na" así así como como los los aminoá aminoácid cidos os /ue compon componen en la clara clara de #uevo #uevo entr entree esto estoss trip triptó tófa fano no,, tiro tirosi sina na,, argi argini nina na y cisteína. Es posible determinar la presencia de una serie de aminoácidos por medio de reacciones cualitativas colorimétricas.
PALARAS
!LA"ES#
pruebas colorimétricas, identificación aminoácidos a minoácidos..
0minoácidos, composición #uevo,
AS$RA!$ 0mino acids are t#e monomers of proteins and give give t#em t#em it1s it1s princi principal pal prope properti rties, es, all amino amino acids #ave a basic structure an differentiate from one anot#er, mainly, by t#e functional groups of t#eir side c#ain. 2#is 3or' 3ants to recogni!e, /ualitatively, /ualitatively, some amino acids 3it# colorimetric reacti reaction ons. s. 4sing 4sing ten colori colorime metri tricc reacti reactions ons"" nin#id nin#idri rine, ne, $anto $antopro protei teic, c, %illón %illón,, &op'i &op'ins( ns()o )ole, le, *a'aguc#i, nitroprusiate, lead acetate, E#rlic#, auly y +iuret a series of controls 3ere analy!ed, as 3ell as some problem solutions and a diluted - solution of egg. 5t could be determined a series of amino acids in t#e problem solutions suc# as arginine and tyrosine, as 3ell as t#e amino acids t#at are contained in eggs suc# as tryptop#an tryptop#an,, tyrosine, tyrosine, arginine arginine and cysteine. cysteine. 5t is possible to determinate t#e presence or absence of amino acids using colorimetric tests.
)
articular, 6786977. 4niversidad :istrital ;rancisco
aturales, +ogotá, )olombia. E(mail- sacastroa?correo.udistrital.edu.co
Andr*s Morales +ussan , 6
articular, 6786977@9. 4niversidad :istrital ;rancisco aturales, +ogotá, )olombia. E(mail- moralesdussan?correo.udistrital.edu.co
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-E/0R+S# 0mino acids, colorimetric tests, egg composition, identification of amino acids.
INTRODUCCIÓN. Las proteínas se encuentran en todos los organismos vivos, son de muchos tipos diferentes y desempeñan funciones biológicas distintas. La queratina de la piel y uñas de los dedos, la fibrina de la seda y las telarañas, y el estimado de 50000 a 70000 enimas que catalian las reacciones biológicas en nuestros cuerpos son todas proteínas. !"c"urry #., $00%& 'ndependientemente de su función, todas las proteínas est(n construidas de muchas unidades de aminoácidos unidos entre sí en una cadena larga. !"c"urry #., $00%& Los amino(cidos, como su nombre lo implica, son bifuncionales. )ontienen un grupo amino b(sico y un grupo carbo*ilo (cido. !"c"urry #., $00%&
+ig. . -lanina, un amino(cido. !"c"urry #., $00%&
u valor como bloques de construcción para formar proteínas se deriva del hecho de que los amino(cidos pueden asociarse entre sí en cadenas largas formando enlaces amida entre el / $ de u n amino(cido y el )1 $ de otro. !"c"urry #., $00%& Los amino(cidos se ligan entre sí, como lo hacen los monómeros de los polisac(ridos y lípidos !-udesir2 3., et al, $04&,
A
e*pulsando una molcula de agua. e desprende un 61 del grupo carbo*ilo del primer amino(cido y un 6 del grupo amino del siguiente. l enlace formado entre los (tomos ) y / de los grupos carbo*ilo y amino se llama enlace peptídico. !+ried 8., 990& :n dipéptido es una molcula formada por dos amino(cidos unidos por un enlace peptídico. :n tripéptido tiene tres amino(cidos unidos por dos enlaces peptídicos, un tetrapéptido tiene cuatro amino(cidos, y así sucesivamente. Los pptidos que tienen m(s de 40 a 50 amino(cidos son polipéptidos. Las proteínas son polipptidos con alguna función biológica. !)arey +., $00;& 3odos son α -aminoácidos, lo que significa que el grupo amino en cada uno es un sustituyente en el (tomo de carbono, siguiente al grupo carbonilo.
asociadas con las sales. 3ienen momentos dipolares grandes, son solubles en agua pero insolubles en hidrocarburos y son sustancias cristalinas con puntos de fusión relativamente altos. !"c"urry #., $00%& -dem(s, los amino(cidos son anfóteros, ya que pueden reaccionar como (cidos o como bases, dependiendo de las circunstancias. n disolución (cida acuosa, un @itterion de amino(cido es una base que acepta un protón para producir un catiónA en disolución b(sica acuosa, el @itterion es un (cido que pierde un protón para formar un anión. /ótese que es el carbo*ilato, )1 $ el que act=a como el sitio b(sico y acepta un protón en la disolución (cida, y es el catión amonio, /4, el que act=a como el sitio (cido y dona un protón en la disolución b(sica. !"c"urry #., $00%& Los amino(cidos soportan los cambios de acide y alcalinidad y por lo tanto son importantes amortiguadores biológicos. !olomon B., et al, $04&
+ig. 4. -mino(cido con p de 7 !olomon B., $04&
+ig. $. structura de los amino(cidos !-udesir2 3, et al, $04&
Los amino(cidos e*isten en disolución acuosa principalmente en la forma de un ion dipolar, o zwitterion !del alem(n zwitter , que significa >híbrido?&. !"c"urry #., $00%& Los @itteriones de los amino(cidos son sales internas y, por lo tanto, tienen muchas de las propiedades físicas
Los $0 amino(cidos comunes pueden clasificarse como neutros, (cidos o b(sicos, dependiendo de la estructura de sus cadenas laterales. Cuince de los veinte tienen cadenas laterales neutras, dos !(cido asp(rtico y (cido glut(mico& tienen una función e*tra de (cido carbo*ílico en sus cadenas laterales, y tres !lisina, arginina e histidina& tienen grupos aminos b(sicos en sus cadenas laterales. !"c"urry #., $00%& in embargo, la cisteína !un tiol& y la tirosina !un fenol&, es usual clasificarlos
@
como amino(cidos neutros, tienen cadenas laterales dbilmente (cidas que pueden desprotonarse en una disolución fuertemente b(sica. !"c"urry #., $00%& ntre los amino(cidos con cadenas laterales no polares, encontramosD La Glicina es el amino(cido m(s pequeño, porque no tiene cadena lateral. l principal servicio que ofrece es a la cadena misma de polipptidos. Buede añadir longitud y fle*ibilidad a un poli pptido, sin sacrificar la resistencia ni tener por sí mismo demandas espaciales. !)arey +., $00;&
el triptófano tiene un anillo arom(tico m(s rico en electrones, y es m(s polariable. u función es m(s especialiada, y abunda menos en las proteínas que la mayoría de los dem(s amino(cidos. !)arey +., $00;& n cuanto a los amino(cidos con cadenas laterales polares, pero no ioniadas la serina es el menorA no es mucho m(s grande que la -lanina. )on una cadena lateral H) $1, participa bien en los puentes de hidrógeno, y con frecuencia se presenta en regiones de un pptido que est(n e*puestas al agua. La treonina tiene un grupo metilo en lugar de uno de los hidrógenos del grupo H) $1 de la serina, que obstaculia estricamente al grupo 1 y lo hace menos efectivo en la formación de puentes de hidrógeno. !)arey +., $00;& )omo pHhidro*iderivado de la fenilalanina, la tirosina tiene propiedades parecidas a ella, y adem(s la capacidad de formar puentes de hidrógeno donde interviene un grupo fenólico H1. !)arey +., $00;& La cisteína se relaciona con la serina porque su cadena lateral es 6) $ y no 6)$1. La cantidad de cisteína en una proteína suele ser relativamente pequeña, pero su efecto sobre su forma tridimensional es apreciable. La o*idación de dos cisteínas convierte sus cadenas laterales en un puente 6) $H)$ H entre ellas. sto une entre sí a dos amino(cidos que con frecuencia est(n aleIados, y ayuda a guiar el doble de la proteína para tener una forma específica. !)arey +., $00;& La asparagina y la glutamina son amidas. Las cadenas laterales de ambas terminan en 61F)/$, y difieren sólo por un grupo )$. Las funciones amida son bastante polares, e interaccionan fuertemente con molculas de agua mediante puentes de hidrógeno. -l igual que la serina, la asparagina y la glutamina se encuentran con frecuencia en las regiones de un
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pptido que est(n en contacto con agua. !)arey +., $00;& Los amino(cidos tienen las reacciones características de sus grupos funcionales amino y (cido carbo*ílico. :na reacción típica del grupo amino es la acilación. La formación de steres es una reacción típica del grupo carbo*ilo. e puede detectar la presencia de amino(cidos por la formación de un color p=rpura al tratarlos con ninhidrina. l mismo compuesto causante del color p=rpura se forma con todos los amino(cidos en los que el grupo JHamino es primario. La prolina, donde el grupo JHamino es secundario, produce un compuesto anaranIado al reaccionar con la ninhidrina !)arey +., $00;& n este informe se busca reconocer algunos amino(cidos por medio de reacciones cualitativas colorimtricas. -dem(s de demostrar la presencia de grupos funcionales org(nicos en la cadena lateral de algunos amino(cidos e identificar en una marcha analítica los amino(cidos presentes en una solución problema.
MT!RI"!# $ M%TODO#. n cada prueba se utilió un amino(cido control, una solución problema y una solución de clara de huevo D; con agua destilada. - e*cepción de la prueba de acetato de plomo para amino(cidos aufrados donde no se utilió solución problema.
Reacci&n de Nin'idrina. e utilió un tubo de ensayo para calentar suavemente ml de (cido asp(rtico o de serina, se realió el mismo procedimiento para la solución problema y la solución de clara de huevo. - cada tubo se agregó 0.5 ml de la solución de ninhidrina y se calentó a baño de maría por 0 minutos.
Reacci&n (antoproteica. e calentaron, hasta que hirvieron, $ ml de tirosina, solución problema y solución de clara de huevo en $ ml de (cido nítrico concentrado. Luego se agregó cuidadosamente gota a gota hidró*ido de sodio al K0 hasta alcaliniar.
Reacci&n de Mill&n. e agregaron en tres tubos de ensayo por separado 4 ml de tirosina, solución problema y solución de clara huevo, respectivamente. Luego se añadieron 5 gotas de "illon a cada uno de los tubos, observando que no quedara reactivo en las paredes, se calentó en un baño de agua hirviendo durante 0 minutos y luego se deIó enfriar.
Reacci&n del ácido )lico*ílico. - 4 ml de solución de triptófanoA solución problema y solución clara de huevo, se adicionaron $ ml de reactivo de op2ins )ole, se mecló bien y se agregó cuidadosamente, por las paredes de los tubos, ml de (cido sulf=rico concentrado.
Reacci&n de #a+a),c'i. e enfrió en un baño con hielo tres tubos de ensayo que contenían 5 ml de solución de arginina, solución problema y solución de clara de huevo respectivamente. e añadió a cada uno ml de hidró*ido de sodio al 0, ml de JHnaftol al 0.5, se mecló y se les puso en baño de hielo durante 4 minutos. Luego se añadieron de 0 a $0 gotas de hipoclorito de sodio, se agitó bien y despus de $0 segundos se añadió ml de urea y se mecló.
Reacci&n de nitropr,siato.
e utiliaron 4 tubos de ensayo limpios y secos, agregando $ ml de cisteína, solución problema y solución de clara de huevo respectivamente. e adicionó a cada uno 0.5 ml de nitroprusiato de sodio. e mecló bien y se añadió a cada uno 0.5 ml de /K1, por =ltimo se agitaron los tubos de ensayo.
r,ea del acetato de plomo. e calentaron $ ml de cisteína y solución de clara de huevo con $ ml de solución de hidró*ido de sodio al K0, luego se añadieron 0 gotas de acetato de plomo al 0, se calentó nuevamente hasta que se dio el oscurecimiento de los tubos de ensayo.
r,ea de !'rlic'. e mecló ml de (cido sulfanílico con ml de nitrito de sodio al 0.5 en tres tubos de ensayo, se deIó reposar la mecla durante 5 minutos. Luego se agregó a cada tubo ml de tirosina, solución problema y solución de clara de huevo respectivamente. Bor =ltimo se alcalinió con una gota de hidró*ido de amonio al $.
r,ea de a,l/. e mecló ml de (cido sulfanílico con $ ml de triptófano, solución problema y clara de huevo respectivamente. e deIaron enfriar en hielo durante $ minutos y se agregó ml de solución de nitrito de sodio !/a/1$& a cada uno, se los deIó enfriar durante 4 minutos. Bor =ltimo se alcalinio añadiendo $ ml de /a $)14 a cada uno de los tubos.
R!#U"TDO#. Reacci&n de Nin'idrina. Comp,esto. erina. olución Broblema. olución clara de huevo.
Res,ltado. -
3abla . Eesultados para reacción con ninhidrina.
Reacci&n (antoproteica. Comp,esto. 3riptófano. olución Broblema. olución clara de huevo.
Res,ltado. 111 111
3abla $. Eesultados para reacción *antropoteica.
Reacci&n de Mill&n. Comp,esto. 3irosina. olución Broblema. olución clara de huevo.
Res,ltado. 111 111
3abla 4. Eesultados para reacción de "illón.
Reacci&n del ácido )lico*ílico. Comp,esto. 3riptófano. olución Broblema. olución clara de huevo.
Res,ltado. -
3abla K. Eesultados para reacción de "illón.
r,ea de 0i,ret. - $ ml de solución de problema se añadieron 4 ml del reactivo de Miuret, se mecló y se deIó calentar a 47 ) durante 0 minutos. Bor =ltimo, se deIó enfriar.
Reacci&n de #a+a),c'i. Comp,esto. -rginina. olución Broblema.
Res,ltado. 1 11
B
olución clara de huevo.
111
3abla 5. Eesultados para reacción de a2aguchi.
Reacci&n de nitropr,siato de sodio. Comp,esto. )isteína. olución Broblema. olución clara de huevo.
Res,ltado. 111 -
3abla ;. Eesultados para reacción de nitroprusiato de sodio.
Reacci&n de acetato de plomo. Comp,esto. )isteína. olución clara de huevo.
Res,ltado. 111 111
3abla 7. Eesultados para reacción de acetato de plomo.
Reacci&n de !'rlic'. Comp,esto. 3irosina. olución Broblema. olución clara de huevo.
Res,ltado. 111 111 111
3abla 0. Eesultados para reacción de Miuret.
N2"I#I# D! R!#U"TDO#. Reacci&n de Nin'idrina. Bara la ninhidrina el resultado fue negativo para el patrón y para las dos soluciones. sto contradice a la teoría presentado por )arey +., !$00;& ya que tanto el patrón como la solución de huevo contienen JH amino(cidos capaces de reaccionar con est(, formando dió*ido de carbono, amoniaco y un aldehído. Las posibles causas de este resultado son un error e*perimental o la contaminación de la ninhidrina que no le permitió reaccionar con la cadena lateral del amino(cido estudiado.
Reacci&n (antoproteica. La reacción Nantoproteica presentó un resultado positivo para el triptófano y la solución de clara de huevo, pero no para la solución problema. e confirma lo dicho en la teoría ya que el huevo contiene en su composición triptófano seg=n lo reportado por )arbaIal -., !$0;&.
3abla %. Eesultados para reacción de hrlich.
Reacci&n de a,l/. Comp,esto. 3riptófano. olución Broblema. olución clara de huevo.
Res,ltado. 111 111 111
-dem(s tanto el triptófano del huevo como el patrón presentan un n=cleo arom(tico que reacciona para formar derivados nitro.
3abla 9. Eesultados para reacción de Bauly.
Reacci&n de 0i,ret. Comp,esto. )isteína. olución Broblema. olución clara de huevo.
Res,ltado. 1 1 111
+ig. K. structura del triptófano. !"c"urry #., $00%&
Reacci&n de Mill&n. La reacción de "illón presentó un resultado positivo para el patrón tirosina y
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para la solución de clara de huevo. )arbaIal -., !$0;& confirma que el huevo contiene en su composición el amino(cido tirosina que forma parte de las proteínas corporales. 3ambin, "c"urry #., !$00%& confirma que la tirosina reacciona con el reactivo de "illón debido a la presencia de anillos fenólicos.
+ig. 5. structura de la tirosina, con su anillo fenólico en la cadena E. !"c"urry #., $00%&
-dem(s esta prueba permite determinar que la solución problema utiliada presenta -rginina. s importante remarcar que el resultado m(s pró*imo a un color roIo intenso fue el del huevo, seguido por la solución problema y por =ltimo el patrón esto se pudo deber a la concentración de arginina en el huevo y en la sustancia problema. )arbaIal -., !$0;& reporta que 00 g de huevo pueden contener hasta 755 mg de arginina. e confirma entonces que el grupo guanidino de la arginina reacciona para formar compuestos de color roIo.
Reacci&n del ácido )lico*ílico. Bara la reacción de op2insH)ole o (cido glico*ílico se presentó un resultado negativo tanto para el patrón como para las dos soluciones estudiadas, sin embargo esto contradice a lo reportado por )arbaIal -., !$0;& ya que el huevo, como se confirmó en la prueba Nantoproteica, si contiene triptófano. stos resultados pudieron deberse a un error e*perimental de tipo sistem(tico o a la composición de los reactivos utiliados así como la influencia del (cido sulf=rico utiliado en el p.
Reacci&n de #a+a),c'i. La reacción de a2aguchi presentó un resultado positivo para los 4 compuestos estudiados. )onfirmando la teoría, ya que el huevo seg=n )arvaIal -., !$0;& presenta un contenido de arginina, un sustrato en la síntesis de ó*ido nítrico y creatina, adem(s necesario para la síntesis de urea.
+ig. ;. structura del amino(cido arginina !"c"urry #., $00%&
Reacci&n de nitropr,siato de sodio. La reacción de nitroprusiato de sodio sólo presento un resultado positivo para el patrón de cisteína, sin embargo seg=n )arbaIal -., !$0;& el huevo contiene cisteína dentro de su estructura, aunque a una concentración baIa comparada con los dem(s amino(cidos, esta concentración es de $4; mg por cada 00 g de huevo !)arbaIal -., $0;& l resultado entonces se puede deber a un error e*perimental o a la concentración de cisteína en la solución de clara de huevo.
Reacci&n de acetato de plomo 3para aminoácidos az,4rados5 La reacción de acetato de plomo sólo se realió para el patrón cisteína y para la solución de clara de huevo. l resultado fue positivo para estos dos, confirmando lo reportado por )arbaIal -., !$0;& y )arey
C
+., !$00;& en cuanto a la composición del huevo y a la confirmación estructural del amino(cido cisteína. )arey +., !$00;& tambin reporta que la cisteína es el amino(cido responsable del plegamiento en algunas proteínas conocidas como proteínas terciarias. n consecuencia la formación del precipitado al tratar estos compuestos con acetato de plomo es una consecuencia de su conformación estructural, que se puede observar en la figura 7.
+ig. 7. structura del amino(cido cisteína. !"c"urry #., $00%&
Reacci&n de !'rlic'. La reacción de hrlich se presentó positiva para los tres compuestos estudiados, indicando la presencia de tirosina o histidina, como se observó en la prueba de "illón y seg=n lo reportado por )arbaIal -., !$0;& el huevo contiene dentro de su estructura tirosina. sta prueba tambin permitió determinar la presencia de tirosina en la sustancia problema.
Reacci&n de a,l/. La reacción de Bauly presentó sustancias coloreadas para cada uno de los reactivos, es decir fue positiva para cada uno de ellos, present(ndose un color amarillo, roIo y naranIa para la solución patrón, solución problema y solución de clara de huevo respectivamente. ste resultado es consecuencia directa de la conformación estructural de los amino(cidos ya que la prueba de Bauly
act=a sobre las aminas. :na característica esencial de los amino(cidos es la presencia de un grupo amino y uno carbo*ilo seg=n "c"urry #., !$00%&, )arey +., !$00;& +ried 8., !990& y olomon B., et al !$04&.
Reacci&n de 0i,ret. Bara la reacción de Miuret se presentó un resultado positivo para el patrón y las dos soluciones estudiadas. Oa que el reactivo de Miuret act=a sobre el enlace peptídico esto confirma lo reportado por "c"urry #., !$00%& y )arey +., !$00;&. Bara el patrón es poco probable que la reacción se d fuertemente debido a la presencia de un solo amino(cido, sin embargo es de esperarse que el huevo reaccione con una mayor intensidad debido a la gran cantidad de enlaces peptídicos que se presentan en su conformación. 3ambin se pudo detectar que la solución problema presenta un agregado de amino(cidos, probablemente un pptido o proteína de alguna clase o conformación. n consecuencia la muestra de huevo utiliada contiene una composición de amino(cidos como triptófano, tirosina, arginina y cisteína.
CONC"U#ION!#. s posible reconocer algunos amino(cidos con reacciones cualitativas colorimtricas y los mtodos adecuados. -lgunos amino(cidos presentan en su cadena lateral grupos funcionales org(nicos como la arginina, la tirosina y el triptófano. s posible identificar los amino(cidos presentes en una
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solución problema por medio de pruebas cualitativas.
CU!#TIONRIO. 6. Cons,ltar otras reacciones con las c,ales se p,edan identi4icar aminoácidos por la presencia de )r,pos 4,ncionales en el radical.
Método de "owr/.
constituyente del reactivo de +olinH )iocalteau es el (cido fosfomolibdot=ngstico, de color amarillo, que al ser reducido por los grupos fenólicos da lugar a un compleIo de color aul intenso. !1.. Lo@ry, /.#. Eosebrough, -.L. +arr y E.#. Eandall. #. Miol., 95&
7. Cons,ltar las ec,aciones 8,ímicas de las reacciones 8,e no aparecen en la ),ía.
"todo colorimtrico de valoración cuantitativa de las proteínas. - la muestra se añade un reactivo que forma un compleIo coloreado con los proteínas, siendo la intensidad de color proporcional a la concentración de proteínas, seg=n la ley de LambertHMeer -F P.l.c ste mtodo consta de dos etapasD & Los iones )u$Q, en medio alcalino, se unen a las proteínas formando compleIos con los (tomos de nitrógeno de los enlaces peptídicos. stos compleIos )u$QH proteína tienen un color aul claro. -dem(s, provocan el desdoblamiento de la estructura tridimensional de la proteína, e*ponindose los residuos fenólicos de tirosina que van a participar en la segunda etapa de la reacción. l )u$Q se mantiene en solución alcalina en forma de su compleIo con tartrato. $& La reducción, tambin en medio b(sico, del reactivo de +olinH )iocalteau, por los grupos fenólicos de los residuos de tirosina, presentes en la mayoría de las proteínas, actuando el cobre como cataliador. l principal
+ig. %. Eeacción por el mtodo de Lo@ry.
!1.. Lo@ry, et al., 95&
9. !scria el o los posile3s5 aminoácido3s5 8,e tiene la sol,ci&n prolema completando el c,adro 6. N:mero rolema.
minoácidos.
$ 4 K 5 ; 7
/o se encontraron. /o se encontraron /o se encontraron. /o se encontraron. -rginina /o se encontraron. /o se utilió muestra problema. 3irosina o histidina. )ualquier amino(cido. )ualquier amino(cido, pptido o proteína.
% 9 0
3abla . 'dentificación amino(cidos en las muestras problema.
;. Completar el c,adro.
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Reacci&n.
minoácido patr&n.
Color 8,e se ot,
Color 8,e se ot,
Color 8,e se ot,
/inhidrina. Nantoproteica "illón. op2ins )ole. a2aguchi. /itroprusiato de sodio. -cetato de plomo. hrlich. Bauly. Miuret.
erina. 3riptófano. 3irosina. 3riptófano. -rginina. )isteína.
-marillo. /aranIa. Brecipitado roIo. /aranIa. EoIo claro. )armesí.
3ransparente. -marillo. 3ransparente. 3ransparente. EoIo. -marillo.
-marillo. /aranIa. Brecipitado roIo. /aranIa. EoIo intenso. 3ransparente.
)isteína.
Brecipitado oscuro. /aranIa. -marillo. Gioleta 1scuro.
H
Brecipitado oscuro.
/aranIa. EoIo. -ul.
/aranIa. /aranIa. Gioleta.
3irosina. 3riptófano. )isteína.
3abla $.
0I0"IO=R>?.
•
•
"c"urry #., !$00%& Química Orgánica ptima dición. ditorial )engage Learning. "*ico <.+., "*ico. )arey +. !$00;& Química Orgánica e*ta dición. ditorial "c8ra@Hill. "*ico <.+, "*ico. +ried 8. !990& Miología. e*ta dición. ditorial "c8ra@ illR 'nteramericana de "*ico .-. /aucalpan de #u(re, stado de "*ico. K44 pp. olomon B., et al !$04& !iología /ovena edición. ditorial )engage Learning. "*ico <.+., "*ico. -udesir2 3., et al !$04& !iología la "ida en la tierra con fisiología /ovena edición. ditorial Bearson ducación. "*ico <.+., "*ico. )arbaIal -., !$0;& #a composición del hue"o Eecuperado el 4 de noviembre deD httpDRR@@@.huevo.org.esRhuevoSsaludScomposicionSaminoacidos.asp 1.. Lo@ry, /.#. Eosebrough, -.L. +arr y E.#. Eandall. #. Miol., !95& Valoración de proteínas por el m$todo de #owr% )hem. 94D $;5H$75. Eecuperado el 4 de noviembre deD httpDRR@@@4.uah.esRbioquimicaR[email protected]