LAPORAN PRAKTIKUM KULTUR JARINGAN OVERPLANTING
Disusun oleh :
1 2
Neny Andriyani Theopile Niyonsaba
(14304241022) (14304249903)
JURUSAN PENDIDIKAN BIOLOGI FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM UNIVERSITAS NEGERI NE GERI YOGYAKARTA YOGYAKARTA
!"#
BAB I Pen$%hulu%n A& L%'%( Bel%)%n* Tanaman angrek merupakan tanaman hias yang potensial untuk
dikembangkan. al ini dikarenakan permintaan konsumen untuk tanaman anggrek dari tahun ke tahun yang semakin meningkat. !leh karena itu metode budidaya anggrek terus dikembangkan. "alah satu metode budidaya anggrek yang sekarang dikembangkan adalah metode kultur invitro. #etode ini merupakan metode perbanyakan bibit anggrek dalam medium tertentu dalam kondisi bebas hama. #etode in-vitro dapat digunakan untuk memperbanyak tanaman anggrek se$ara $epat. al ini dikarenakan %aktu budidaya yang singkat& yaitu sekitar ' bulan untuk menghasilkan beratusratus bibit anggrek. "elain itu proses perbanyakan tanaman anggrek yang tidak menggunakan tempat yang luas ("riyanti& 200) *erbanyakan tanaman anggrek dengan menggunakan teknik tabur bi+i anggrek menghasilkan plantlet yang $ukup rapat& karena sekali tabur dangan menggunakan spatula dapat memba%a ratusan bi+i anggrek. ,i+i anggrek yang sudah ditabur akan berke$ambah men+adi planlet dalm %aktu 34 bulan. -alam keadaan demikian& pertumbuhan anggrek sudah saling berdesakan dan saling berebutan unsur hara yang semakin menipis sehingga perlu dipindahkan ke medium baru. *ada praktikum kali ini praktikan melakukan oerplanting plantlet anggrek kedalam medium N* (Ne% *halaenopsis) dengan tambahan air kelapa.
B& Tu+u%n
*en+arangan anggrek dalam botol
BAB II TINJAUAN PUSTAKA
Anggrek
se$ara
taksonomi
diklasi/ikasikan
ke
dalam phyllum
Spermatophyta atau tumbuhan berbi+i& kelas Angiospermae atau berbi+i tertutup& subkelas Monocotyledonae atau bi+inya berkeping satu& ordo Gynandrae karena alat reproduksi +antan dan betina bersatu sebagai tugu bunga dan /amili Orcidaceae atau keluarga anggrek (artiman& . 2004). amili anggrek mempunyai 0 genus berbeda dengan 2 000 spesies dan lebih dari 30 000 kultiar hasil persilangan (e% dan ong& 199'). Dendrobium merupakan salah satu genus anggrek terbesar di Asia (5arren dan Tettoni& 199'). Nama Dendrobium berasal dari bahasa unani& yang terdiri dari kata dendron artinya pohon dan biein artinya untuk hidup. "e$ara keseluruhan Dendrobium berarti tanaman yang hidup pada pohon. 6enus Dendrobium diperkenalkan oleh seorang botanist "%edia& !la/ "%arts pada tahun 1700. Botanist tersebut mendiskripsikannya
dalam
sembilan
spesies. Dendrobium
tumbuh
di
AsiaTenggara& imalaya (Nepal dan "ikkim)& ,irma& propinsi #oulmein& 8ndia ,arat -aya& eylon& #alaysia& ilipina& 8ndonesia& Ne% 6uinea& Australia& ina dan :epang (5idiastoety. 199). ,entuk daun anggrek berma$amma$am dari sempit meman+ang& pensil& bulat& bulatlon+ong& bulat telur& mata lembing;lanset& +antung dan masih banyak lagi ariasi lainnya. "eperti umumnya tumbuhan monokotil& daun anggrek memiliki tulang daun yang se+a+ar dengan helaian daun dan tidak memiliki pertulangan yang ber$abang. Tebal daun berariasi dari tipis hingga tebal berdaging (sukulen). *ada setiap bukunya& daun melekat berselangseling atau berpasangan dan setiap buku terdapat dua helai daun yang berhadapan (5idiastoety. 199). #enurut -ressler dan -odson (2000)& klasi/ikasi anggrek Dendrobium adalah sebagai berikut< ingdom
*lantae
-iisi
"permatophyta
"ubdiisi
Angiospermae
elas
#ono$otyledoneae
!rdo
!r$hidales
amili
!r$hida$eae
"ub/amili
=pidendroideae
"uku
=pidendreae
"ubsuku
-endrobiinae
6enus
Dendrobium
"emua bunga anggrek merupakan hermaphrodit & yaitu polen (serbuk sari) dan putik terdapat dalam satu bunga. "i/at kelaminnya monoandri& yaitu kelamin +antan dan betina berada dalam satu tempat. al ini yang menyebabkan anggrek mudah mengalami penyerbukan dan proses penyerbukannya sendiri dapat ter+adi tanpa disenga+a. Tanaman anggrek terdapat dalam berbagai +enis dan berbeda dalam %arna bunga& kedudukan dan bentuk dari sepala atau petala& tebal tipisnya sepala atau petala. *erbanyakan tanaman anggrek pada umumnya dilakukan melalui dua $ara yaitu& konensional dan dengan metoda kultur in itro. *erbanyakan konensional
biasanya
dilakukan
dengan
$ara
*erbanyakan konensional se$ara egetati/ ini
egetati/ tidak
dan
praktis
generati/. dan tidak
menguntungkan untuk tanaman bunga potong& karena +umlah anakan yang diperoleh dengan $ara$ara ini sangat terbatas. *erbanyakan generati/ yaitu dengan bi+i. ,i+i anggrek sangat ke$il dan tidak mempunyai endosperm ($adangan makanan)& sehingga perke$ambahan di alam sangat sulit tanpa bantuan +amur yang bersimbiosis dengan bi+i tersebut. >ntuk menghasilkan bunga dalam +umlah banyak dan seragam diperlukan tanaman dalam +umlah banyak pula. !leh karena itu peningkatan produksi bunga pada tanaman anggrek hanya dapat di$apai dengan usaha perbanyakan tanaman yang e/isien. Teknik kultur +aringan dapat digunakan untuk memperbanyak tanaman anggrek se$ara $epat. ,i+i anggrek merupakan organ tumbuhan yang siap untuk tumbuh men+adi tanaman lengkap. ,i+i anggrek perlu ditanam dalam botol karena
tidak mempunyai $adangan makanan (endosperm) yang dapat digunakan pada a%al perke$ambahannya. !leh karena itu& anggrek perlu diberi makanan yang bisa diambil dari media kultur. #edia kultur biasanya ditambah dengan bahan organik seperti kelapa& tomat& kentang atau pisang ("andra& 2003). #enurut andaryono dan 5i+ayani (1994)& overplanting adalah pemindahan anggrek yang masih sangat ke$il dari medium lama ke medium baru yang dilakukan se$ara aseptis didalam ruang penabur. Tu+uannya adalah agar anggrek tersebut tetap mendapat unsur hara untuk pertumbuhannya. alhal yang harus diperhatikan dalam overplanting adalah < 1. ,i+i anggrek yang sudah ditabur akan berke$ambah men+adi planlet dalm %aktu 34 bulan. -alam keadaan demikian& pertumbuhan anggrek sudah saling berdesakan dan saling berebutan unsur hara yang semakin menipis sehingga perlu dipindahkan ke medium baru. 2. #edium overplanting yang digunakan sama dengan medium lama& biasanya berupa medium ?5. -alam ruang penabur anggrek diambil satu persatu
dengan
menggunakan pinset
pan+ang
kemudian
langsung
dipindahkan kedalam botol baru& kemudian disimpan dalam ruang inkubasi dengan suhu 2 0. 3. Overplanting perlu dilakukan dua kali sebelum tanaman anggrek siap dipindahkan kedalam pot. !erplanting adalah pemindahan bibit anggrek (planlet) ke dalam botol steril yang baru. Tu+uan oerplanting adalah agar planlet tetap mendapatkan unsur hara untuk pertumbuhannya. ,ila media agar lebih dari 3 bulan tidak diganti& maka media akan tampak ke$oklatan& men+adi menipis dan mengering& serta layu. >ntuk anggrek silangan& keadan demikian akan sanat merugikan. !leh karena itu sebelum terlambat& angrek botol harus segera diper+arang dalam media segar yang baru (endaryono& 1994). ,i+i anggrek mulai membesar setelah dua minggu dikulturkan. "etelah 3 sampai ' minggu& $hlorophyl mulai terbentuk diikuti dengan perke$ambahan bi+i. e$ambah berkembang men+adi plantlet muda dengan akar& batang dan daun
setelah ' bulan dikulturkan. ,ibit muda ini menyerap nutrisi dan karbohidrat dalam media dengan sangat $epat. "elain itu& media men+adi asam karena akumulasi senya%asenya%a /enolik dalam ruang kultur. >ntuk mengatasinya& ditambahkan media baru dengan $ara memasukkan media baru dengan +arum steril melalui botol kultur. :ika semua bi+i telah berke$ambah dan bibit ini mulai membesar& botol men+adi terlalu penuh dan sesak sehingga ruang yang tersedia untuk pembesaran bibit terbatas. >ntuk mengatasinya dilakukan pen+arangan dengan mensubkulturkan bibit ke media dan botolbotol kultur lainnya. *lantlet membesar dan dapat dipindahkan ke lapangan setelah berumur 12 bulan (#ulyaningsih& 200). #edia N*A terdiri dari unsur makro amonium sul/at& potasium sul/at& amonium nitrat& potasium nitrat& kalsium nitrat& dan magnesium nitrat. ,esi berupa Na2=-TA& -AN /=so 4 2!. >nsur mikro berupa mangan sul/at& @ink "ul/at& bori$ a$id& potasium iodida& sodium moly/odate& $obalt $loride& $upper sul/ate dan itamin berupa ni$otini$ a$id& pyridoin a$id& thiamine l& 6ly$ine& #iyoinositol& sukrosa dan agar. *enggunaan air kelapa sebagai pengganti Bat pengatur tumbuh (@*T) impor akan di$oba untuk mendorong pertumbuhan& air kelapa mengandung asam asam amino& asam nukleat& auksin& asam giberelat dan lainnya. Air kelapa mengandung antara lain Beatin yang termasuk ke dalam golongan sitokinin yang berman/aat untuk mendorong pembukaan stomata& pembelahan sel serta meningkatkan pembentukan dan perbanyakan tunas. omposisi utama air kelapa adalah 2&07C gula yang sebagian besar terdiri dari sukrosa& beberapa mineral yaitu 294' mg kalsium& dan &9&0 mg /os/or tiap 100 ml air kelapa. Air kelapa mengandung komponen akti/ pengganti hormon seperti diphenil urea yang mempunyai aktiitas seperti sitokinin& mioinositol& leukoantosianin& adenin& guanin& asam amino. @atBat tersebut memiliki kemampuan mema$u pertumbuhan akar dan tunas daun tanaman anggrek (*alungkun& 1992).
BAB III METODE A& Al%' 1. Daminar air /lo% (DA) 2. *inset steril 3. *etridish steril 4. ,urnsen . orek api '. ,otol +amp . anebo 7. 6loe 9. ,otol media B& B%h%n 1. ,ibit anggrek siap dipindah 2. #edia N*A 3. Alkohol 0C ,& Me'o$e 1. *enanaman =ksplan Daminar air /lo% sebelum digunakan di sinari dengan sinar >?& setelah akan digunakan di matikan& la/ dilap menggunakan kanebo yang direndam alkohol 0C. ,lo%er dinyalakan. Alat alat yang akan digunakan beker+a dalam la/ (skalpel steril& petridish&botol +amp& pinset& burnsen dsb) disterilkan dengan kanebo yang direndam alkohol 0C. #asukan alatalat tersebut kedalam la/ segera setelah di sterilisasi. ,ibit anggrek dikeluarkan dari botol dan diletakan pada petridish steril. ,ibit dikeluarkan dengan $ara men+epit diantara akar dan daun. emudian ditarik diusahakan agar keluar terlebih dahulu. ,ibit yang masih saling menempel dipisahkan satu samalain dan bersihkan medium yang masih menempel pada akar. ,ibit ditanam kedalam medium N*A baru satu persatu hingga +umlah bibit dalam botol sebanyak buah. ,otol ditutup kembali dan dilapisi dengan plastik %arp.
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN A& H%sil
ari; tangga l
elompo k
asil
amis & 11 17 April 201
1
ontamina si ontamina si ontamina si ontamina si ontamina si ontamina si ontamina si ontamina si
2 3 4 ' 7
B& Pe-.%h%s%n *raktikum kultur +aringan ber+udul !erplanting bi+i anggrek
bertu+uan untuk pen+arangan anggrek dalam botol. Anggrek yang digunakan untuk praktikum merupakan anggrek -endrobium
yang
ditanam sekitat 34 bulan yang lalu. #edium yang digunakan dalam melakukan oerplanting yaitu medium Ne% *halaenopsis dengan tanbahan air kelapa (N*A)
merupakan medium yang sama dengan
medium yang digunakan untuk penaburan bi+i anggrek. Tu+uan utama dari oerplanting merupakan untuk men+arangkan anggrek yang tumbuh pada medium N*A dalam botol& karena bi+i anggrek sangatlah ke$il sehingga dalam sekali penaburan bi+i anggrek& bi+i yang tertanam sangatlah banyak. "aat anggrek mulai tumbuh maka media yang digunakan pun semakin sesak oleh plant let tersebut dan ter+adi kompetisi nutrisi pada medium
sehingga anggrek perlu di pindah ke medium baru dengan +umlah plan let yang lebih sedikit. ,ibit anggrek yang akan ditanam pada medium baru harus memenuhi beberapa syarat& yaitu < nama +enis tanaman harus +elas& tanaman hi+au segar& tanaman tidak layu& kuat dan tidak ada daun yang busuk& akar tanaman sudah mun$ul dan kuat serta medium belum terkontaminasi. *engamatan overplanting +uga dilakukan selama 2 minggu. ondisi a%al bibit anggrek pada medium ?5 air kelapa dan ?5 pisang masih baik yaitu tanaman hi+au& sehat& akar kuat& dan posisi tegak. *emindahan bibit yang dilakukan harus benarbenar teliti& +arak antar bibit diperhatikan sehingga tidak terlalu berdekatan& pada satu botol ditanam 7 bibit anggrek& dan yang paling utama adalah di+aga kesterilannya. Dangkah yang dilakukan pada praktikum kultur bi+i ini adalah membuat medium pertumbuhan Ne% *halaenopsis dan kelapa yang dilakukan satu minggu sebelum dilakukan oer planting. #edium N*A ini terdiri dari unsur mikro& unsur makro& itamin dan iron. >nsur makro terdiri dari amonium sul/at& potasium sul/at& amonium nitrat& potasium nitrat& kalsium nitrat& dan magnesium nitrat. ,esi berupa Na 2=-TA& -AN /=so4 2!. >nsur mikro berupa mangan sul/at& @ink "ul/at& bori$ a$id& potasium iodida& sodium moly/odate& $obalt $loride& $upper sul/ate dan itamin berupa ni$otini$ a$id& pyridoin a$id& thiamine l& 6ly$ine& #iyoinositol& sukrosa dan agar. Namun bahan bahan ini sudah tersedia dalam stok sehingg tinggal menambahkan myoinositol& iron& sukrosa& air kelapa dan agar. *enggunaan air kelapa sebagai pengganti Bat pengatur tumbuh (@*T) impor akan di$oba untuk mendorong pertumbuhan& air kelapa mengandung asamasam amino& asam nukleat& auksin& asam giberelat dan lainnya. Air kelapa mengandung antara lain Beatin yang termasuk ke dalam golongan sitokinin yang berman/aat untuk mendorong pembukaan stomata&
pembelahan
sel
serta
meningkatkan
pembentukan
dan
perbanyakan tunas. omposisi utama air kelapa adalah 2&07C gula yang sebagian besar terdiri dari sukrosa& beberapa mineral yaitu 294' mg kalsium& dan &9&0 mg /os/or tiap 100 ml air kelapa. Air kelapa mengandung komponen akti/ pengganti hormon seperti diphenil urea yang mempunyai aktiitas seperti sitokinin& mioinositol& leukoantosianin& adenin& guanin& asam amino. @atBat tersebut memiliki kemampuan mema$u pertumbuhan akar dan tunas daun tanaman anggrek (*alungkun& 1992). *emindahan ,ibit anggrek dilakukan dengam mengeluarkan bibit anggrek dari botol dan diletakan pada petridish steril. ,ibit dikeluarkan dengan $ara men+epit diantara akar dan daun. emudian ditarik diusahakan agar keluar terlebih dahulu. ,ibit yang masih saling menempel dipisahkan satu samalain dan bersihkan medium yang masih menempel pada akar. ,ibit ditanam kedalam medium N*A baru satu persatu hingga +umlah bibit dalam botol sebanyak buah. ,otol ditutup kembali dan dilapisi dengan plastik %arp. ,erdasarkan hasil pengamatan dua minggu setelah oerplanting hanya satu botol yang tidak terkontaminasi. "edangkan kelompok yang lain terkontaminasi. #eskipun terkontaminasi terlihat bah%a plantlet masih dalam keadaan segar tetapi di permukaan agar terdapat lapisan ber%arna putih yang diduga sebagai kontaminan. Ter+adinya kontaminasi pada oerplanting anggrek ini diduga karena saat proses pemindahan terlalu banyak orang yang berada pada ruang kultur yang berlalulalang keluar dan masuk ruangan serta berbi$ara pada ruangan medium N* air kelapa yang mengandung nutrisi +uga $o$ok untuk pertumbuhan +amur ataupun bakteri kontaminan sehingga ter+adilah kontaminasi.
BAB V PENUTUP A& Kesi-/ul%n !erplanting bertu+uan untuk
men+arangkan kultur yang sudah
terlalu padat dan media sudah tidak mampu mendukung pertumbuhan kultur
serta
agar
planlet
tetap
mendapatkan
unsur
hara
untuk pertumbuhannya. !erplanting yang berhasil dilakukan ada satu botol dengan hasil yang diperoleh setelah dua minggu pemindahan tidak ter+adi kontaminasi dan tanaman dalam keadaan segar. B& S%(%n 1. *erlu peningkatan dalam upaya sterilisasi alat& media& dan eksplan agar tidak terkontaminasi. 2. *embatasan +umlah orang pada ruang kultur perlu di lakukan untuk mengurangi resiko kontaminasi.
D%0'%( Pus'%)%
-ressler . dan . -odson. 2000. lassi/i$ation and phylogeny in !r$hida$eae. Annal o/ the #issouri ,otani$ 6arden. http<;;digilib.unila.a$.id endaryono& -.*.". dan A. 5i+ayani. 1994. ultur :aringan (*engenalan dan *etun+uk *erbanyakan Tanaman "e$ara ?egetati/ #edia). ogyakarta< *enerbit anisius. artiman& . 2004.
=//e$t o/ $ombinations o/ gro%th regulators and pie$es
proto$orm like bodies /or the propagation o/ the giant moon or$hid (*halaenopsis gigantea) %ith tissue $ulture methods. Thesis& a$ulty o/ Agri$ulture& ,ogor Agri$ultural 8nstitute. *alungkun& ony. 1992. Aneka *roduk Tanaman elapa. *enebar "%adaya. :akarta 5idiastoety& -.& ". usumo dan "ya/ni. 199. *engaruh Tingkat etuaan Air elapa dan :enis elapa terhadap *ertumbuhan *lantlet Anggrek -endrobium http<;;bio.unsoed.a$.id;sites;de/ault;/iles;,1:00910.pd/
