MIKROTOM Kelompok 2 Alda Khoirunnisa Anisa Nur Insani Nurmalia Dini P Nurul Intan Ramadhani
Defnisi Mikrotom Mikrotom berasal dari bahasa Yunani yaitu mikros! berarti ke"il# dan temnein! yan$ berarti untuk memoton$% Mikrotom adalah mesin untuk men$iris spesimen biolo$i biolo$i men&adi men&adi ba$ian yan$ san$at tipis untuk pemeriksaan mikroskop mikroskop%% 'e"ara umum# mikrotom mempunyai ba$ian(ba$ian yan$ pentin$# yaitu) 'kala pen$atur ketebalan sayatan# biasanya terdapat di ba$ian kana atas badan mikrotom% 'kala ini dapat di$eser ke kiri dan kekanan sesuai den$an ketebalan sayatan yan$ diin$inkan% Pisau mikrotom# merupakan komponen yan$ bisa menentukan kualitas sayatan% Pe$an$an blok &arin$an# merupakan koponen yan$ men$hubun$kan mikrotom den$an blok &arin$an yan$ hendak disayat% Pen$atur &arak# ber*un$si untuk men$atur blok &arin$an den$an mata pisau%
•
•
•
•
Ma"am(ma"am Mikrotom Mikrotom Putar Mikrotom putar umumnya serin$ di$unakan pada metoda para+n% Posisi kedudukan pisau tetap# sementara &arin$an yan$ dilekatkan pada holder ber$erak naik turun sehin$$a diperoleh sayatan yan$ umumnya berbentuk pita%
,a$ian(ba$ian Mikrotom
Keteran$an -ambar ) .% Pisau men$atur batan$ untuk men"ondon$kan sudut 2% 'lidin$ peme$an$ pisau /% Peme$an$ untuk men$atur knob 0% Peme$an$ pen$un"ian batan$ 1% Kni*e memperbaiki tombol % Parafn blok knob trans3ersal re$ulatin$ 4% Pen$un"i blok parafn batan$ tetap 5% 'ekrup blok parafn 6% Parafn blok tombol 3ertikal re$ulatin$ .7% Roda pemutar ..% 'e"tionin$ knob ketebalan men$atur .2% Tan$an roda men$un"i batan$
'pesifkasi mikrotom putar ) .% 2% /% 0% 1%
Rentan$ ketebalan se"tionin$ ) .(07 8m Ketebalan Minimum re$ulasi ) .8m 'e"tionin$ Area) 07 mm 9 /7 mm Dimensi) 015 mm 9 /11 mm 9 251 mm ,era t) 02 k$ :appre9;
etakkan tempat duduk blok parafn beserta blok preparat pada tempatnya pada mikrotom% 2% Persiapan Ka"a Ob&ek = Ka"a ob&ek yan$ akan direkatkan preparat harus telah di"oated :disalut; den$an ?at perekat seperti albumin :putih telur;# $elatin atau tespa /% Persiapan @aterbath atau adah berisi air han$at den$an temperatur /4(07o<
>an&utanB 0% Persiapan sen$kelit atau kuas Tehnik pemoton$an parafn yan$ men$andun$ preparat adalah seba$ai berikut ) Rekatkan blok parafn yan$ men$andun$ preparat pada tempat duduknya di mikrotom% Tempat duduk blok parafn beserta blok parafnnya kemudian diletakkan pada peme$an$nya :holder; pada mikrotom dan dikun"i den$an kuat% >etak pisau mikrotom pada tempatnya dan atur sudut kemirin$annya% ,iasanya sudut kemirin$an berkisar 27(/7 dera&at% Atur ketebalan poton$an yan$ diin$inkan# biasanya dipakai ketebalan antara 1(4 mikrometer% -erakkan blok preparat ke arah pisau sedekat mun$kin dan poton$lah blok preparat se"ara teratur dan ritmis den$an memutar $a$an$ pemutar pada mikrotom putar% ,uan$ pita( pita parafn yan$ aal tanpa &arin$an hin$$a kita mendapatkan poton$an yan$ men$andun$ preparat &arin$an%
Pita
parafn yan$ men$andun$ &arin$an lalu dipindahkan se"ara hati(hati men$$unakan sen$kelit atau kuas kedalam aterbath yan$ temperaturnya diatur /4(07< dan biarkan beberapa saat hin$$a poita parafn tersebut men$emban$% 'etelah pita parafn terkemban$ den$an baik# tempelkan pita parafn tersebut pada ka"a ob&ek yan$ telah di"oated den$an "ara memasukkan ka"a ob&ek itu kedalam aterbath dan men$$erakkannya ke arah pita parafn% >etakkan ka"a ob&ek yan$ berisi pita parafn di atas hotplate den$an temperatur 07(01<# biarkan selama beberapa &am%
Mikrotom Sorong Sliding microtome atau mikrotom soron$# dimana &arin$an tetap posisinya dan pisau yan$ ber$erak ma&u dan mundur% Mikrotom ini serin$ di$unakan pada mikroteknik metode para+n# alau umumnya di$unakan pada penyayatan &arin$an yan$ di tanam dalam "elloidin% ,iasanya di$unakan pada ob&ek( ob&ek yan$ keras%
Pen$$unaan Mikrotom 'oron$
PCN-CRTIAN MIKROTCKNIK •
•
Mikroteknik merupakan ilmu atau seni mempersiapkan or$an# &arin$an atau ba$ian &arin$an untuk dapat diamati dan ditelaah% Pembuatan preparat histolo$i berpedoman kepada metoda mikroteknik :-unarso# .656;
TAAPAN DA>AM MIKROTCKNIK Eiksasi
dehidr asi
Pemoton$ an
Cmbeddin $
Infltrasi
deparafn asi
pearnaa n
dehidrasi
Penutupa n den$an ka"a
EIK'A'I •
•
Tu&uan fksasi adalah untuk mempertahankan bentuk sel atau &arin$an seperti &arin$an aslinya# men"e$ah otolisis den$an men$inakti*kan en?im(en?im dan men$hambat pertumbuhan bakteri dan &amur Difksasi dalam larutan bouin :.1 ml asam pikrat &enuh F 1 ml *ormalin pekat F . ml "uka pekat;
DCIDRA'I •
•
•
Men$$unakan alkohol yan$ diberikan se"ara bertin$kat dari konsentrasi tin$$i ke konsentrasi rendah% Tu&uan dari dehidrasi yaitu untuk men$hilan$kan sisa(sisa "airanGair yan$ ada pada sampel sehin$$a saat proses selan&utnya tidak terbentuk es di dalam sampel%
Or$an direndam dalam larutan alkohol bertin$kat :57H# 51H# 67H; masin$( masin$ selama dua &am
<>CARIN- I •
•
•
•
•
Alkohol di$anti den$an suatu medium y$ dapat ber"ampur den$an alkohol maupun parafn% men$$unakan a"eton# ben?ol#toluol# dan 9ilol larutan 9yline untuk membersihkan sisa(sisa alkohol% Memudahkan masuknya parafn ke dalam &arin$an Or$an direndam dalam 9ylol I# II# dan III masin$(masin$ selama 01 menit%
INEI>TRA'I •
Or$an direndam dalam 9ylol F parafn :.).; pada suhu 7 J<% Dan selan&utnya direndam di parafn murni%
CM,CDDIN•
•
'ampel dikeraskan den$an men$$unakan lilinGa9es# resin untuk membentuk blok parapin% Dikeraskan supaya mudah untuk dilakukan pemoton$an sampel% Or$an ditanam ke dalam balok parafn "air pada suhu 7 J< sampai parafn men$eras selama 20 &am%
PCMOTON-AN •
'pesimen dipoton$ setebal mikron ditempelkan pada $elas ob&ek yan$ telah disediakan%
DCPARAEINI'A'I Proses pen$hilan$an parafn dalam &arin$an Pre*arat direndam berturut(turut :9ylol I# II dan II# alkohol .77H I dan II# 61H# 67H# 51H# 57H# 47H dan 7H; masin$(masin$ dua menit dan "u"i sampai arna putih%
•
•
PC@ARNAAN •
•
untuk memperta&am atau memper&elas berba$ai elemen &arin$an# terutama sel(selnya# sehin$$a dapat dibedakan dan ditelaah den$an mikroskop% Preparat direndam dalam larutan hematoksilin selama 2 menit# di"u"i den$an air keran men$alir# rendam dalam larutan eosin selama 2 menit# "u"i den$an air keran men$alir%
DCIDRA'I •
Pre*arat direndam berturut(turut di dalam alkohol 47H# 7H# 51H# 67H# 61H I# 61H II# .77H I# .77H II masin$( masin$ selama satu menit%
<>CARIN•
Preparat direndam dalam 9ylol I dan 9ylol II masin$(masin$ selama satu menit%
Penutupan •
•
Preparat diberi perekat "anada balsem# ditutup den$an $elas penutup# kerin$kan selama .7 menit% Preparat diberi lebel sesuai den$an perlakuan sehin$$a didapatkan preparat permanen histolo$i yan$ dapat diamati di baah mikroskop%
