LAPORAN PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI PENGENALAN PERALATAN PRAKTIKUM
Disusun sebagai salah satu syarat untuk memenuhi tugas Laporan Praktikum mata kuliah Mikrobiologi semester ganji
Disusun oleh : Kelompok 8 - A Rifai Dermawan 230110120061 230110120061 Luthfy Wulandari 230110120062 230110120062 Thaha Yasin 230110120063 230110120063 Birta Baruna 230110120064 230110120064 Azka Iqbal 230110120066 230110120066 Kenny Pramudya 230110120067 Inda Andiani 230110120068 230110120068 Respandu Zulfachri 230110120069 230110120069 Muhammad Rizki M 230110120070 230110120070 Ahmad Rizqi Rubiansyah 230110120072 230110120072 Efran Adzi Solihat 230110120073 230110120073 Anita Nur Azizah D P 230110120074 230110120074
UNIVERSITAS PADJADJARAN FAKULTAS PERIKANAN DAN ILMU KELAUTAN PROGRAM STUDI PERIKANAN JATINANGOR 2013
KATA PENGANTAR Puji dan syukur kami panjatkan kehadirat Allah SWT karena dengan rahmat dan karunia-Nya saya dapat menyelesaikan laporan Akhir Praktikum ”Pengenalan Peralatan” yang merupakan bagian dari tugas Mata Kuliah Mikrobiologi Perikanan. Saya mengucapkan terima kasih kepada Dosen mata kuliah Mikrobiologi Perikanan, yang telah membantu dan membimbing kami selama penyusunan Laporan Akhir Praktikum ini. Tidak lupa teman-teman dan semua pihak yang ikut berpartisipasi dalam menyelesaikan tugas makalah ini. Dalam penulisan makalah ini mungkin masih terdapat banyak kesalahan, oleh karena itu kritik dan saran sangat diperlukan untuk memperbaiki kesalahan agar dapat lebih baik lagi kedepannya. Saya berharap semoga makalah ini dapat berguna bagi semua civitas akademika yang membutuhkannya. membutuhkannya.
Jatinangor, 4 November 2013
Penulis
i
DAFTAR ISI
KATA PENGANTAR PENGANTAR ......................................................................................................... i DAFTAR ISI ...................................................................................... ....................................................................................................................... ................................. ii BAB I ............................................................................................................ .................................................................................................................................. ...................... 1 PENDAHULUAN PENDAHULUAN .................................................................. .............................................................................................................. ............................................ 1 1.1 Latar belakang.............................................................. ........................................................................................................... ............................................. 1 1.2 Tujuan ....................................................................................................................... ....................................................................................................................... 2 1.3 Manfaat .......................................................................................................... ..................................................................................................................... ........... 2 BAB II.............................................................. ................................................................................................................................. ................................................................... 3 LANDASAN LANDASAN TEORI .................................................................................... .......................................................................................................... ...................... 3 BAB III ............................................................................................................................... ............................................................................................................................... 7 METODOLOGI METODOLOGI PRAKTIKUM ......................................................................................... ......................................................................................... 7 3.1. Waktu dan Tempat Pelaksanaan .............................................................................. .............................................................................. 7 3.2. Alat dan Bahan............................................................ ......................................................................................................... ............................................. 7 3.3. Prosedur Kerja ......................................................................................................... 9 BAB IV ............................................................................................................................. ............................................................................................................................. 10 HASIL DAN PEMBAHASAN PEMBAHASAN.......................................................... ......................................................................................... ............................... 10 4.1 Hasil .................................................................................................... ........................................................................................................................ .................... 10 BAB IV ............................................................................................................................. ............................................................................................................................. 20 PEMBAHASAN PEMBAHASAN ............................................................................................................... 20 BAB V .............................................................................................................................. .............................................................................................................................. 25 PENDALAMAN................................... PENDALAMAN...................................................................................................... ............................................................................ ......... 25 DAFTAR PUSTAKA ....................................................................................................... ....................................................................................................... 27
ii
BAB I PENDAHULUAN 1.1 Latar belakang
Mikroba adalah organisme yang sangat kecil, sehingga tidak dapat dilihat dengan mata telanjang. Sesuai namanya, bidang ilmu mikrobiologi (mikros = kecil/sangat kecil; bios = hidup/kehidupan) mempelajari tentang bentuk, kehidupan, sifat, dan penyebaran organisma yang termasuk golongan mikroba (jasad renik). Ilmu yang mempelajari tentang mikroba disebut mikrobiologi. Karena peranan mikroba yang sangat penting di perikanan, maka kita memiliki matakuliah mikrobiologi, dan matakuliah ini memiliki praktikum. Karena peralatan yang digunakan di labolatorium tergolong baru maka kita perlu mengenalnya. Pengenalan alat merupakan langkah pertama sebelum kita melakukan percobaan atau penelitian . Dengan mengenal alat, kita dapat mengetahui fungsi masing-masing bagian dari alat tersebut serta cara pengoprasian atau penggunaan alat-alat
yang
akan
digunakan
dalam
percobaan
atau
penelitian
yang
dilakukan. Dan dengan kita mengetahui akan fungsi dan cara penggunaan alatalat yang akan digunakan dapat memperlancar jalannya suatu percobaan atau penelitian. Sehingga dengan berbekal pengetahuan pemahaman akan fungsi dan cara kerja dari alat yang digunakan kita dapat memperoleh hasil suatu percobaan atau penelitian yang maksimal. Selain pengetahuan pemahaman akan alat, kita juga dituntut untuk terampil dalam alat-alat yang kita gunakan. Hal tersebut harus dibarengi dengan ketelitian dalam melakukan suatu percobaan ataupun penelitian sehingga didapatkan hasil yang maksimal.
1
Dengan pengenalan alat-alat laboratorium. Kita dapat mengetahui berbagai macam alat yang terdapat di Laboratorium. Selain itu kita juga dapat meminimalisir
resiko
kesalahan
kerja
pada
saat
melakukan
percobaan
mikrobiologi. Alat-alat laboratorium mempunyai cara dan prinsip kerja yang berbeda. Setiap pengguna harus mengikuti hal-hal tersebut agar dalam menggunakan alat-alat laboratorium tidak terjadi kerusakan alat ataupun hal-hal yang berbahaya. 1.2 Tujuan
1.
Praktikan mengetahui nama alat-alat yang ada di laboraturium
2.
Praktikan mengetahui fungsi pada setiap alat yang digunakan
3.
Praktikan mampu menggunakan alat-alat sesuai dengan kegunaan dan
fungsinya 1.3 Manfaat
Manfaat dari praktikum ini adalah praktikan dapat mengetahui, memahami, dan mampu menggunakan alat-alat di laboratorium serta dapat melakukan proses sterilisasi yang baik dan benar baik terhadap bahan atau peral atan praktikum agar dapat menjadi dasar untuk menunjang praktikum selanjutnya.
2
BAB II LANDASAN TEORI
Mikrobiologi adalah salah satu cabang ilmu dari biologi yang mempelajari tentang organisme yang mikroskopik yakni meliputi bakteri, virus, fungi, alga dan protozoa. Dunia jasad renik barulah ditemukan sekitar 300 tahun yang lalu dan makna sesungguhnya mengenai mikroorganisme itu barulah dipahami sekitar 200 tahun kemudian. Selama 40 tahun terakhir, mikrobiologi muncul sebagai bidang biologi yang sangat berarti karena mikroorganisme digunakan oleh para peneliti dalam penelaah hampir semua gejala biologis yang utama. Antoni van Leeuwenhoek (1632-1723) ialah orang yang pertama kali mengetahui adanya dunia mikroorganisme itu. Dengan mikroskop ciptaannya ia dapat melihat bentuk makhluk-makhluk kecil yang sebelumnya itu tidak diduga sama sekali keadaannya. Mikroskop buatan Leeuwenhoek itu memberikan pembesaran sampai 300 kali. Dari air hujan yang menggenang di kubangankubangan dan dari air jambangan bunga ia peroleh beraneka sel hewan bersel satu yang
olehnya
diberi
nama
Infusoria
atau
“Hewan
tuangan”.
Antara tahun 1674 sampai 1683 ia terus-menerus mengadakan hubungan dengan lembaga “Royal Society” di Inggris. Ia m elaporkan hal-hal yang diamatinya dengan mikroskop itu kepada lembaga tersebut. Laporan-laporan itu disertai dengan gambar-gambar mikroorganisme yang beraneka ragam. Di dalam sejarah mikrobiologi, Leeuwenhoek dapat dipandang sebagai peletak batu pertamanya. Mikroorganisme tersebut diantaranya adalah bakteri dan cendawan yang merupakan penghasil bermacam-macam zat organik dan obat-obatan antibiotik. Alat merupakan salah satu pendukung dari pada keberhasilan suatu pekerjaan di laboratorium. Sehingga untuk memudahkan dan melancarkan berlangsungnya praktikum, pengetahuan mengenai penggunaan alat sangat diperlukan.
3
Pada dasarnya setiap alat memiliki nama yang menunjukkan kegunaan alat, prinsip kerja atau proses yang berlangsung ketika alat digunakan. Beberapa kegunaan alat dapat dikenali berdasarkan namanya. Penamaan alat-alat yang berfungsi mengukur biasanya diakhiri dengan kata meter seperti thermometer, hygrometer dan spektrofotometer, dll. Alat-alat pengukur yang disertai dengan informasi tertulis, biasanya diberi tambahan “graph” seperti thermograph, barograph (Moningka,2008). Peralatan utama yang digunakan dalam kegiatan praktikum mikrobiologi perairan terdiri dari peralatan yang berkaitan dengan inokulasi mikroba dan sterilisasi.
Adapun prinsip kerja dan kegunaan peralatan tersebut adalah sebagai
berikut : a) Mikroskop adalah alat untuk memperbesar kenampakan objek sehingga mempermudah melakukan pengamatan. b) Colony counter adalah peralatan yang dilengkapi dengan kuadran penghitungan,
lampu
dan
kaca
pembesar
untuk
mempermudah
penghitungan mikroba. c) Inkubator adalah peralatan yang dilengkapi dengan sistim untuk mempertahankan suhu dan kelembaban selama masa inkubasi sehingga mikroba dapat tumbuh secara baik d) Hot plate stirrer adalah alat yang dilengkapi fasilitas pengaduk dan pemanas sehingga dapat digunakan untuk membantu pengadukan agar suspensi tidak mengendap dan pendistribusian mikroba dalam media kaldu atau media fermentasi, baik pada suhu kamar maupun suhu yang lebih tinggi. e) Electric shaker adalah alat yang dapat digerakkan kearah depan dan belakang atau melingkar sehingga dapat digunakan untuk membantu pengadukan larutan dan pendistribusian mikroba dalam media kaldu atau media fermentasi
4
f) Lemari pendingin adalah lemari yang dilengkapi sistim penurunan suhu sehingga
dapat
digunakan
untuk
mengendalikan
aktivitas
dan
pertumbuhan mikroba dalam media kultur g) Oven adalah alat pemanas yang dapat digunakan untuk sterilisasi peralatan secara kering h) Otoklaf adalah alat yang dilengkapi sistim peningkatan suhu sehingga dapat mengubah air menjadi uap panas. Otoklaf dapat digunakan untuk melakukan sterilisasi basah, baik peralatan maupun media kultur i) Timbangan analitik adalah alat ukur yang dapat digunakan untuk menentukan bobot sampel dengan ketelitian tinggi j) Peralatan untuk memudahkan proses inokulasi, isolasi maupun transfer mikroba. Peralatan ini teridiri dari : 1) Jarum ose adalah alat berupa kawat baja berujung tajam atau membulat yang digunakan untuk mengambil mikroba yang akan diinkubasi, diisolasi atau ditransfer ke media kultur lain. 2) Lampu spirtus adalah lampu berbahan bakar spirtus yang digunakan untuk sterilisasi panas dan mempertahankan sterilisasi ruang inokulasi, isolasi dan transfer mikroba 3) Tabung reaksi adalah tabung berbahan gelas atau plastik yang digunakan sebagai wadah media kultur berupa agar tegak dan agar miring 4) Cawan petri (Petri disk) adalah cawan berbahan gelas atau plastik yang digunakan sebagai wadah media kultur dalam bentuk lempeng agar 5) Pipet tetes adalah pipet yang memiliki alat penghisap berbahan karet dan digunakan untuk memindahkan cairan dalam jumlah kecil 6) Pipet hisap adalah pipet yang berkerja dengan cara dihisap sehingga cairan akan memasuki pipet sebanyak yang diinginkan. Pipet hisap digunakan untuk memindahkan cairan dalam jumlah relatif lebih banyak 7) Balon pipet adalah bola terbuat dari bahan karet yang dipasang di bagian pangkal pipet hisap. Balon pipet digunakan untuk menghisap
5
cairan yang akan dipindahkan ke media lainnya menggunakan pipet hisap
6
BAB III METODOLOGI PRAKTIKUM
3.1. Waktu dan Tempat Pelaksanaan
Praktikum ini dilaksanakan pada : Hari / Tanggal : Rabu / 30 Oktober 2013 Tempat
: Laboratorium Teknologi Industri Hasil Perikanan FPIK, Universitas Padjajaran
3.2. Alat dan Bahan
Peralatan utama yang digunakan dalam kegiatan praktikum mikrobiologi perairan terdiri dari peralatan yang berkaitan dengan inokulasi mikroba dan sterilisasi. Adapun prinsip kerja dan kegunaan peralatan tersebut adalah sebagai berikut :
Mikroskop adalah alat untuk memperbesar kenampakan objek sehingga mempermudah melakukan pengamatan.
Colony counter adalah peralatan yang dilengkapi dengan kuadran penghitungan,
lampu
dan
kaca
pembesar
untuk
mempermudah
penghitungan mikroba.
Inkubator adalah peralatan yang dilengkapi dengan sistim untuk mempertahankan suhu dan kelembaban selama masa inkubasi sehingga mikroba dapat tumbuh secara baik
Hot plate stirrer adalah alat yang dilengkapi fasilitas pengaduk dan pemanas sehingga dapat digunakan untuk membantu pengadukan agar suspensi tidak mengendap dan pendistribusian mikroba dalam media kaldu atau media fermentasi, baik pada suhu kamar maupun suhu yang lebih tinggi.
Electric shaker adalah alat yang dapat digerakkan kearah depan dan belakang atau melingkar sehingga dapat digunakan untuk membantu 7
pengadukan larutan dan pendistribusian mikroba dalam media kaldu atau media fermentasi
Lemari pendingin adalah lemari yang dilengkapi sistim penurunan suhu sehingga
dapat
digunakan
untuk
mengendalikan
aktivitas
dan
pertumbuhan mikroba dalam media kultur
Oven adalah alat pemanas yang dapat digunakan untuk sterilisasi peralatan secara kering
Otoklaf adalah alat yang dilengkapi sistim peningkatan suhu sehingga dapat mengubah air menjadi uap panas. Otoklaf dapat digunakan untuk melakukan sterilisasi basah, baik peralatan maupun media kultur
Timbangan analitik adalah alat ukur yang dapat digunakan untuk menentukan bobot sampel dengan ketelitian tinggi
Peralatan untuk memudahkan proses inokulasi, isolasi maupun transfer mikroba. Peralatan ini terdiri dari : 1. Jarum ose adalah alat berupa kawat baja berujung tajam atau membulat yang digunakan untuk mengambil mikroba yang akan diinkubasi, diisolasi atau ditransfer ke media kultur lain. 2. Lampu spirtus adalah lampu berbahan bakar spirtus yang digunakan untuk sterilisasi panas dan mempertahankan sterilisasi ruang inokulasi, isolasi dan transfer mikroba. 3. Tabung reaksi adalah tabung berbahan gelas atau plastik yang digunakan sebagai wadah media kultur berupa agar tegak dan agar miring 4. Cawan petri (Petri disk) adalah cawan berbahan gelas atau plastik yang digunakan sebagai wadah media kultur dalam bentuk lempeng agar. 5. Pipet tetes adalah pipet yang memiliki alat penghisap berbahan karet dan digunakan untuk memindahkan cairan dalam jumlah kecil 6. Pipet hisap adalah pipet yang berkerja dengan cara dihisap sehingga cairan akan memasuki pipet sebanyak yang diinginkan.
8
Pipet hisap digunakan untuk memindahkan cairan dalam jumlah relatif lebih banyak 7. Balon pipet adalah bola terbuat dari bahan karet yang dipasang di bagian pangkal pipet hisap.
Balon pipet digunakan untuk
menghisap cairan yang akan dipindahkan ke media lainnya menggunakan pipet hisap 3.3. Prosedur Kerja
Prosedur kali ini adalah mengamati mengamati alat-alat yang akan digunakan dalam laboratorium mikrobiologi, serta dapat memahami prinsip kerja dan fungsi dari masing-masing alat.
9
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN
4.1 Hasil Nama Peralatan
Prinsip Kerja
Prosedur Kerja
Prinsip Kerjanya
1. Letakkan
yaitu memantulkan
mikroskop di atas
cahaya melalui
meja dengan cara
cermin,lalu
memegang lengan
diteruskan hingga
mikroskop
lensa obyektif
sedemikian rupa
dilensa obyektif
sehingga mikroskop
bayangan yang
berada persis di
dihasilkan adalah
hadapan pemakai !
maya,terbalik dan Mikroskop
diperbesar kemudian bayangan akan diteruskan dan dihasilkan bayangan tegak,nyata dan diperbesar oleh mata pengamat semakin banyak
Gambar Peralatan
2. Putar revolver sehingga lensa obyektif dengan perbesaran lemah berada pada posisi satu poros dengan lensa okuler yang ditandai bunyi klik pada revolver.
cahaya yang
3. nyalakan
dipantulkan melalui
mikroskop dengan
cermin ,maka akan
ukuran cahaya yang
10
semakin terang pula
normal ( jangan
mikroorganisme
terlalu terang )
yang dilihat
4. Tempatkan preparat pada meja benda tepat pada lubang preparat dan jepit dengan penjepit obyek/benda! 5. Aturlah fokus untuk memperjelas gambar obyek dengan cara memutar pemutar kasar, sambil dilihat dari lensa okuler. Untuk mempertajam putarlah pemutar halus. 6. Apabila bayangan obyek sudah ditemukan, maka untuk memperbesar gantilah lensa obyektif dengan ukuran dari 10 X,40 X atau 100 X,
11
dengan cara memutar revolver hingga bunyi klik. 7. Apabila telah selesai menggunakan, bersihkan mikroskop dan simpan pada tempat yang tidak lembab. Cara menggunakannya adalah setelah kita on-kan, kita simpan cawan petri yang
Colony counter
Prinsip kerjanya
berisi bakteri atau
adalah menghitung
jamur kedalam
mikroba secara
kamar hitung,
otomatis dengan
mengatur alat
bantuan
penghitung pada
pulpen/tombol
posisi dan mulia
hitung.
menghitung dengan menggunakan jarum penunjuk sambil melihat jumlah pada layar bidang.
12
1.Hubungkan kabel power ke stop kontak. 2.Putar tombol power ke arah kiri (lampu power hijau menyala). 3.Atur suhu dalam incubator dengan menekan tombol set. Prinsip kerjanya adalah menginkubasi Inkubator
sesuai suhu yang diinginkan
4.Sambil menekan tombol set, putarlah tombol di sebeklah kanan atas tombol set hingga mencapai suhu yang di inginkan. 5. Setelah suhu yang diinginkan selesai diatur, lepaskan tombol set. 6.Inkubator akan menyesuaikan setingan suhu secara otomatis setelah beberapa
13
menit. Pelat (plate) yang terdapat dalam alat ini dapat dipanaskan sehingga mampu
Hot plate stirrer
Prinsip kerjanya
mempercepat
dilakukan dengan
proses
cara menambah air
homogenisasi.Peng
pada ferri tartrat
adukan dengan
lalu meletakkannya
bantuan batang
di atas hot plate.
magnet Hot plate
Setelah
dan magnetic stirrer
dihubungkan
seri SBS-100 dari
dengan arus listik,
SBS® misalnya
alat ini akan
mampu
menghomogenkan
menghomogenkan
sekaligus
sampai 10 L,
memanaskannya
dengan kecepatansangat lambat sampai 1600 rpm dan dapatdipanaskan sampai 425oC.
14
Prinsip kerjanya
Sambungkan alat
yaitu mengagitasi
dengan listrik
pertumbuhan
kemudian simpan
mikroba dengan
tabung reaksi atau
Electric
kecepatan yang bisa
media yang akan
shaker
diatur atau
kita aduk di
menghomogenkan
penjepit karet pada
isolat-isolat dalam
electric shaker. Atur
medium cair.
waktu dan kecepatan yang akan digunakan.
dengan Prinsip kerjanya Lemari pendingin
yaitu, mengawetkan mikroba/medium sesuai pada suhu yang diinginkan
memasukkan medium secara langsung kedalamnya, kemudian mengatur suhunya sesuai dengan ketentuan
Oven
Prinsip kerjanya
tekan saklar power
yaitu alat-alat yang
indikator lampu
ingin disterilkan
menyala, setelah itu
dibungkus dalam
atur suhu dalam
kertas kemudian
ruangan yang
dimasukkan dalam
diinginkan dengan
oven lalu ditutup.
cara memutar
Setelah itu
pengatur suhu,
mengaktifkan
begitu pula dengan
15
tombol power dan
waktunya
mengatur suhu yang diinginkan. tekan saklar power indikator lampu
Autoklaf
Prinsip kerjanya
menyala, setelah itu
menggunakan uap
atur suhu dalam
bersuhu dan
ruangan yang
bertekanan tinggi
diinginkan dengan
121 C selam kurang
cara memutar
lebih 15 menit
pengatur suhu, begitu pula dengan waktunya 1. Nolkan terlebih dulu neraca tersebut
Prinsip kerjanya
Timbangan analitik
Pastikan timbangan
2.Letakkan zat yang
hidup/masih bagus
akan ditimbang
Letakkan zat yang
pada bagian
akan ditimbang
timbangan
diatasnyakemudian
3.Baca nilai yang
lihat hasil yang
tertera pada layar
ditunjukkan
monitor neraca 4.Setelah digunakan, nolkan kembali neraca tersebut
16
sebelum alat ini digunakan, terlebih
Jarum Ose
Prinsip kerjanya
dahulu disterilkan
yaitu ose
dengan
disentuhkan pada
memanaskan
bagian mikrobia
ujungnya sampai
kemudian
berpijar, kemudian
menggosokkan
membiarkan ujung
pada kaca preparat
ose dingin sebelum
untuk diamati
digunakan untuk mencegah matinya bakteri.
Prinsip kerja alat ini dengan menyalakan bekerja berdasarkan
sumbu pada tabung
metode pemanasan
spiritus kemudian
bakteri dengan
lampu spiritus dapat
nyala api langsung
digunakan.
Prinsip kerjanya
dapat diisi media
yaitu sebagai
padat maupun cair.
Tabung
wadah
Media padat yang
Reaksi
penyimpanan
dimasukkan ke
medium dengan
tabung reaksi dapat
volume tidak
diatur menjadi 2
diketahui karena
bentuk menurut
Lampu spirtus
17
tidak dilengkapi
fungsinya, yaitu
dengan skala
media agar tegak dan agar miring.
Prinsip kerjanya yaitu, medium diletakkan di dalam cawan petri Cawan
kemudian ditutup
digunakan untuk
Petri
dengan
membiakkan sel.
menggunakan penutup cawan.
Prinsip kerjanya yaitu pengambilan Pipet Tetes
larutan berdasarkan pompa karet atau pengatur skala pada bagian atas.
Pipet ini digunakan untuk mengambil dan memindahkan larutan yang akan digunakan dan dikeluarkan tetes per tetes
Prinsip kerjanya
Pipet Hisap
mengambil zat cair
Pipet ini digunakan
yang akan
untuk mengambil
direaksikan,
dan memindahkan
ditetesi, maupun
larutan
dicampurkan
18
Prinsip kerjanya Letakkan dahulu larutan kedalam
Balon pipet
Beker gelas lalu
Digunakan bersama
tekan S untuk
pipet ukur, untuk
menghisap, tekan E
mengambil cairan
untuk
dengan ketelitian
mengeluarkan
yang akurat
cairan
19
BAB IV PEMBAHASAN
Dari hasil pengamatan alat-alat tersebut kita mengetahui masing-masing dari fungsi alat praktikum. 1. Mikroskop Mikroskop adalah alat untuk memperbesar kenampakan objek sehingga mempermudah melakukan pengamatan. o
Lensa okuler adalah lensa yang menghadap ke arah mata kita yang berfungsi untuk memperbesar bayangan dari lensa objektif. Perbesaran yang tersedia adalah 5 kali, 10 kali, dan 12,5 kali.
o
Tubus okuler adalah bagian yang menghubungkan lensa okuler, revolver, dan lensa objektif.
o
Kaca atau cermin merupakan bagian alat penerang yang berfungsi untuk menangkap cahaya, kemudian memantulkannya ke arah kondensor.
o
Diafragma merupakan bagian yang dapat mengatur banyak sedikitnya cahaya yang masuk. Bagian ini dapat menutup dan membuka.
o
Kondensor merupakan bagian yang berfungsi memusatkan cahaya pada preparat.
2. Colony counter Colony counter adalah peralatan yang dilengkapi dengan kuadran penghitungan, lampu dan kaca pembesar untuk mempermudah penghitungan mikroba. Selain itu alat tersebut dilengkapi dengan skala/ kuadran yang sangat berguna untuk pengamatan pertumbuhan koloni sangat banyak. Jumlah koloni pada cawan Petri dapat ditandai dan dihitung otomatis yang dapat di-reset.
Bagian bagian dari colony counter : o
Pen jack (tempat memasukkan countpen)
20
o
Tombol
reset ( untuk
mengaturtayangan
dari
indikator
hitung
dalamkeadaan 000) o
Power Switch (untuk menghidupkan lampu fluoresen sebelah kiri)
o
Power Switch (untuk menghidupkanlampu fluoresen sebelah kanan)
o
Source Switch (untuk menghidupkan lampu pada count indicator)
o
Tombol hitung (tombol untuk memulai hitungan pada count indicator)
o
Lampu signal Count indicator
o
Pembesar (Loupe)
o
Indikator hitung / Count indicator (maksimal 3 digit/3 angka)
o
Petridish/cawan petri yang akan dihitung jumlah koloninya
o
Penjepit petridish/Cawan petri
o
Pen hitung / Count pen
Cara kerjanya: 1. Hubungkan stop kontak dengan sumber tenaga. 2. Nyalakan alat dengan menekan tombol „ON‟. 3. Reset jumlah perhitungan hingga menunjuk angka „0‟. 4. Letakkan cawan petri yang berisi koloni bakteri yang akan dihitung di atas meja yang 5. dilengkapi dengan skala. 6. Tandai koloni dengan mengarahkan pulpen ke meja skala. 7. Hitung koloni bakteri yang terpisah. 8. Lihat koloni dengan bantuan kaca pembesar. 9. Matikan alat dengan menekan tombol „OFF‟. 10. Inkubator
3. Inkubator Inkubator
adalah
peralatan
yang
dilengkapi
dengan
sistim
untuk
mempertahankan suhu dan kelembaban selama masa inkubasi sehingga mikroba dapat tumbuh secara baik. Inkubator adalah alat untuk menginkubasi atau memeram mikroba pada suhu yang terkontrol (umumnya diatas suhu ambient).
21
Alat ini dilengkapi dengan pengatur suhu, dan pengatur waktu. Semakin kecil ukuran inkubator maka semakin rentan pula perubahan suhunya saat pintu inkubator dibuka. Perlu dipertimbangkan pula keseragaman suhu yang ada didalam dengan memperhatikan pola penempatan elemen pemanas atau terdapatnya kipas penyebar suhu. Pintu kaca yang terdapat pada beberapa model dibiarkan tertutup saat melihat biakan secara sekilas supaya tidak terjadi penurunan suhu. Tipe lain inkubator berdasarkan kegunaannya secara khusus menurut Collins et al. (2004) adalah
Shaker incubator; inkubator yang dilengkapi dengan pengocok untuk aerasi biakan.
Cooled incubator; inkubator untuk suhu inkubasi dibawah suhu ambient.
CO2 incubator; inkubator yang mampu menyediakan keadaan kaya karbondioksida.
Automatic temperature change incubator;
inkubator
yang
dengan pengatur perubahan suhu otomatis sehingga
dilengkapi tidak perlu
memindahkan kultur ke inkubator lain saat membutuhkan perubahan suhu secara bertahap.
Portable incubator; inkubator jinjing atau mudah dibawa yang umumnya diaplikasikan untuk mikrobiologi lingkungan.
Incubator room; suatu ruangan yang diubah menjadi inkubator sesuai dengan keperluan dan syarat mikrobiologisnya.
4. Hot plate stirrer Hot plate stirrer adalah alat yang dilengkapi fasilitas pengaduk dan pemanas sehingga dapat digunakan untuk membantu pengadukan agar suspensi tidak mengendap dan pendistribusian mikroba dalam media kaldu atau media fermentasi, baik pada suhu kamar maupun suhu yang lebih tinggi. Alatini juga dapat dipakai untuk melarutka ferri tartrat yang tidak mudah dilarutkan. Dilakukan
dengan cara menambah air pada ferri tartrat lalumeletakkannya di
22
atas
hot
plate.
Setelah
dihubungkan
dengan
arus
listik,alat
ini
akan
menghomogenkan sekaligus memanaskannya (Lahay, 2004). 5. Electric shaker Electric shaker adalah alat yang dapat digerakkan kearah depan dan belakang atau melingkar sehingga dapat digunakan untuk membantu pengadukan larutan dan pendistribusian mikroba dalam media kaldu atau media fermentasi. Prinsip kerjanya yaitu tabung reaksi pada shaker
kemudian
yang
berisi larutan ditaruh
di lubang
menekan tombol ON dengan mengatur kecepatannya
(Lahay, 2004). 6. Lemari pendingin Lemari pendingin adalah lemari yang dilengkapi sistim penurunan suhu sehingga dapat digunakan untuk mengendalikan aktivitas dan pertumbuhan mikroba dalam media kultur. 7. Oven Oven adalah alat pemanas yang dapat digunakan untuk sterilisasi peralatan secara kering. 8. Otoklaf Otoklaf adalah alat yang dilengkapi sistim peningkatan suhu sehingga dapat mengubah air menjadi uap panas. melakukan
sterilisasi
basah,
baik
Otoklaf dapat digunakan untuk
peralatan
maupun
media
kultur.
Cara penggunaannya yaitu mengisi air sampai dasar yang berlubang, kemudian alat dinyalakan.
Materi
yang
akan
disterilkan
dimasukkan.
Selanjutnya penutup autoklaf dipasang dan skerup dikencangkan. Kran pengatur tempat keluar uap dibiarkan terbuka dan ditutup hingga tekanan uap naik 2 atm dan suhu 121 C selama 15-30 menit. Apabila sterilisasi telah selesai, autoklaf dibiarkan sampai tekanan turun hingga
0 C. Kran uap air dibuka
secara perlahan-lahan (Ali dan Hala, 2008). 9. Timbangan Analitik Timbangan analitik adalah alat ukur yang dapat digunakan untuk menentukan bobot sampel dengan ketelitian tinggi. Prinsip kerjanya yaitu meletakkan bahan pada timbangan tersebut kemudian melihat angka yang tertera
23
pada layar, dan angka itu merupakan berat dari bahan yang ditimbang (Ali dan Hala, 2008).
10. Peralatan untuk memudahkan proses inokulasi, isolasi maupun transfer mikroba. Peralatan ini teridiri dari : o
Jarum ose adalah alat berupa kawat baja berujung tajam atau membulat yang digunakan untuk mengambil mikroba yang akan diinkubasi, diisolasi atau ditransfer ke media kultur lain.
o
Lampu spirtus adalah lampu berbahan bakar spirtus yang digunakan untuk sterilisasi panas dan mempertahankan sterilisasi ruang inokulasi, isolasi dan transfer mikroba
o
Tabung reaksi adalah tabung berbahan gelas atau plastik yang digunakan sebagai wadah media kultur berupa agar tegak dan agar miring
o
Cawan petri (Petri disk) adalah cawan berbahan gelas atau plastik yang digunakan sebagai wadah media kultur dalam bentuk lempeng agar. Medium dapat dituang ke cawan bagian bawah dan cawan bagian atas sebagai penutup. Cawan petri tersedia dalam berbagai macam ukuran, diameter cawan yang biasa berdiameter 15 cm dapat menampung media sebanyak 15-20 ml, sedangkan cawan berdiameter 9 cm kira-kira cukup diisi media sebanyak 10 ml.
o
Pipet tetes adalah pipet yang memiliki
alat penghisap berbahan karet dan
digunakan untuk memindahkan cairan dalam jumlah kecil o
Pipet hisap adalah pipet yang berkerja dengan cara dihisap sehingga cairan akan memasuki pipet sebanyak yang diinginkan. Pipet hisap digunakan untuk memindahkan cairan dalam jumlah relatif lebih banyak.
o
Balon pipet adalah bola terbuat dari bahan karet yang dipasang di bagian pangkal pipet hisap. Balon pipet digunakan untuk menghisap cairan yang akan dipindahkan ke media lainnya menggunakan pipet hisap
24
BAB V PENDALAMAN
1. Menurut Anda, Proses sterilisasi seperti apa yang tepat
untuk
melakukan proses sterilisasi media kultur?
Jawab : Proses sterilisasi yang tepat menurut kami, yaitu dengan cara menggunakan alcohol atau dimasukkan kedalam oven agar mikroba yang masuk kedalam oven terhambat dan pada saat mikroba disiram oleh alcohol, lama kelamaan mikroba tersebut akan mati/menghambat untuk tumbuh kembali
2. Jelaskan oleh Saudara
perbedaan utama hot plate stirrer dengan
electric shaker.
Jawab : -
Hot plate stirrer dan Stirrer bar (magnetic stirrer) berfungsi untuk menghomogenkan suatu larutan dengan pengadukan. Pelat (plate) yang terdapat
dalam
alat
ini
dapat
dipanaskan
sehingga
mampu
mempercepat proses homogenisasi. Pengadukan dengan bantuan batang magnet Hot plate dan magnetic stirrer seri SBS-100 dari SBS® misalnya mampu menghomogenkan sampai 10 L, dengan kecepatan sangat lambat sampai 1600 rpm dan dapat dipanaskan sampai 425oC. Alat ini digunakan untuk mengocok media cair sambil dipanasi. Alat ini juga dapat dipakai untuk melarutkan ferri tartrat yang tidak mudah dilarutkan. Prinsip kerjanya dilakukan dengan cara menambah air pada ferri tartrat lalu meletakkannya di atas hot plate. Setelah dihubungkan
25
dengan arus listik, alat ini akan menghomogenkan sekaligus memanaskannya -
Sedangkan Electric shaker Adalah alat yang dapat digerakkan kearah depan dan belakang atau melingkar sehingga dapat digunakan untuk membantu pengadukan larutan dan pendistribusian mikroba dalam media kaldu atau media fermentasi. Shaker adalah alat yang digunakan untuk menghomogenkan dan menginkubasi mikroba. Prinsip kerjanya yaitu mengagitasi pertumbuhan mikroba dengan kecepatan yang bisa diatur atau menghomogenkan isolat-isolat dalam medium cair.
3. Jelaskan oleh Saudara, prinsip kerja dari balon pipet. Apa kerugian yang mungkin dihadapi apabila tidak menggunakan balon pipet tersebut?
Jawab : Prinsip kerjanya Letakkan dahulu larutan kedalam Beker gelas lalu tekan S untuk menghisap, tekan E untuk mengeluarkan cairan. berfungsi untuk mengeluarkan cairan dari pipet ukur. Jika tidak menggunakan balon pipet dan menggunakan pipet biasa akan mem ekan waktu lebih lama dan tidak akurat dalam penggambilan larutan dan bisa terjadi kontaminasi
26