BAB I PENDAHULUAN 1.1. Latar Belakang
Mikroorgnisme tersebar secara luas di alam, tumbuh dalam suatu spectrum lingkungan fisik dan kimiawi yang sangat luas. Mikroorganisme tidak membatasi diri tinggal di suatu tempat sepanjang lingkungan tempat tinggal tersebut memenuhi persyaratan. Pertumbuhan dan kegiatan fisiologik lainnya merupakan suatu respon terhadap lingkungan fisiko-kimiawinya. Pada mikroorganisme, pertumbuhan individu dapat berubah langsung menjadi pertumbuhan populasi, sehingga batas antara pertumbuhan sel sebagai individu serta satu kesatuan populasi yang kemudian terjadi, kadang-kadang terlalu cepat perubahannya sehingga sulit untuk diamati dan dibedakan. Pertumbuhan microbial biasanya dicirikan dengan waktu yang dibutuhkan untuk mengandakan massa sel atau jumlah sel. Waktu ganda massa dapat berbeda dengan waktu ganda sel, karena massa sel dapat meningkat tanpa peningkatan jumlah sel.Penambahan dan pertumbuhan sel mikroorganisme pada umumnya digambarkan dalam bentuk kurva pertumbuhan. Salah satu cara yang dapat digunakan adalah dengan menggunakan ruang hitung (counting chamber ) 1.2. Tujuan 2. Menemukan letak ruang hitung dibawah mikroskop 3. Menentukan konsentrasi sel dari cuplikan (suspense) yang ditentukan.
BAB II LANDASAN TEORI
Counting chamber merupakan suatu kaca obyek tebal, diatasnya diasahkan suatu dataran yang dalamnya 0,1 mm. Pada dataran ini di buat garis-garis berbentuk 16 persegi besar, pada setiap persegi besar di bagi lagi menjadi 16 persegi kecil. Panjang sisi persegi kecil 0,05 mm. Jika di atas bagian yang diasah ini di letakan sebuah kaca tutup, maka terbentuk suatu ruang yang tingginya adalah 0,1 mm. Tiap-tiap persegi kecil dibawah kaca tutup tersebut merupakan suatu ruang dengan isi 0,05 x 0,05 x 0,1 mm3 = 25. 10 -5 mm3. Jika di bawah kaca tutup tersebut dimasukan setetes suspensi, maka dengan mikroskop dapat di hitung jumlah sel dalam tiap-tiap persegi tersebut, sehingga dapat di hitung pula jumlah sel per ml dari suspensi tersebut. Untuk menghitung konsentrasi sel dilakukan peng amatan terhadap 5 (lima) persegi besar atau 80 (delapan puluh) persegi kecil. Jumlah sel dalam setiap persegi kecil dihitung kemudian jumlahkan seluruh hasil perhitungan untuk ke-80 persegi kecil. Karena letak mikroorganisme hidup tidak teratur, maka dalam menghitung dibuat kesepakatan agar sel yang terletak pada garis tidak dihitung dua kali, yaitu :
Sel-sel yang terletak pada garis sebelah kanan dan bawah tidak termasuk dalam persegi kecil yang sedang dihitung selnya. Contoh pada persegi nomor 1 jumlah selnya adalah 6. Sel-sel yang terletak pada garis sebelah kiri dan atas termasuk dalam persegi kecil yang sedang dihitung selnya. Contoh pada persegi nomor 2 jumlah selnya adalah 3, pada persegi nomor 6 jumlah selnya 5.
Dari
hasil
penentuan
tersebut
dapat
ditentukan
konsentrasi
sel
dengan
rumus
:
Jumlah sel dalam setiap persegi kecil harus berisi sekitar 10 sel. Bila pada saat pengamatan diperoleh jumlah sel lebih besar dari 10 (sepuluh) sel dalam setiap persegi kecil, maka perlu dilakukan pengenceran. Pengenceran harus dilakukan dengan sangat teliti. Konsentrasi sel sesungguhnya bila dilakukan pengenceran adalah :
Counting chamber memiliki dua saluran yang dalam pada kedua sisi ruang hitungnya yang berfungsi untuk menampung kelebihan cairan. Kaca tutup yang diletakkan di atas ruang hitung harus kering agar ketinggian dari ruang hitung tetap terjaga. Pada counting chamber model baru, diatas satu kaca objek dibuat 2 ruang hitung yang satu sama lain dipisahkan dengan saluran.
BAB III METODOLOGI PERCOBAAN 3.1 Alat dan Bahan 3.1.1 Alat yang digunakan
Metode Counting chamber
Counter
Tabung reaksi
Pipet tetes
Pipet ukur
Mikroskop
Kaca preparat + cover
Metode berat sel kering
Tube dan Centrifuge
Pipet ukur 1 ml
Oven
Neraca analitik
Bola hisap
Spirtus bakar
3.1.2 Bahan uyang digunakan
GYEB
Glukosa
Aquades
Pepton
Yeast Extract
Permipan
3.2 Langkah Kerja 3.2.1 Tahap persiapan alat dan bahan
Menyiapkan bahan yang akan digunakan yaitu GYEB yang terbuat dari glukosa, yeast extract , pepton, dan aquades.
Menyiapkan peralatan yang akan dipakai dan disterilisasi terlebih dahulu bersama bahan yang digunakan
Menyimpan bahan di dalam showcase dan alat yang sudah steril di
Memasukan permipan ke dalam GYEB satu hari sebelum melakukan praktikum.
3.2.2 Counting chamber
Melakukan pengenceran terhadap biakan yang disiapkan, sesuai dengan arahan pembimbing
Meneteskan biakan yang telah diencerkan ke dalam kaca preparat dan menyimpannya di bawah mikroskop.
Menghitung jumlah sel yang hidup dan juga sel yang mati.
3.2.3 Berat sel kering
Mengambil 1,5 ml biakan ke dalam masing-masing 6 tube dengan menggunakan pipet ukur secara aseptis.
Melakukan sentrifugasi dengan kecepatan 10000 rpm selama 10 menit. Sebelum sentrifugasi, penyimpanan tube harus merat dan seimbang
Melakukan penguapan terhadap cairan yang ada di dalam tube dengan menggunakan oven
Menimbang tube dengan sel keringnya setiap 15 menit, hingga didapatkan nilai yang konstan.
Menimbang berat kosong tube yang digunakan.
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN 4.1 Hasil Pengamatan
Berdasarkan percobaan yang telah dilaksanakan, didapatkan hasil pengamatan untuk metoda perhitungan jumlah sel counting chamber dan metoda berat sel kering sebagai berikut : 4.1.1 Perhitungan Jumlah Sel dengan Metoda Counting Chamber Tabel 1. Jumlah Sel Pada Konsentrasi Awal Konsentrasi Pengenceran 10 kali No
Jumlah Sel
1.
165
2.
141
3.
187
4.
243
5.
217
Tabel 2. Jumlah Sel Pada Konsentrasi Pengenceran 10 Kali Konsentrasi Pengenceran 10 kali No
Jumlah Sel
1.
10
2.
10
3.
5
4.
13
5.
22
Tabel 3 Jumlah Sel Pada Konsentrasi Pengenceran 100 Kali Konsentrasi Pengenceran 100 kali No
Jumlah Sel
1.
1
2.
6
3.
2
4.
3
5.
2
Tabel 4. Jumlah Sel Pada Konsentrasi Pengenceran 1000 Kali Konsentrasi Pengenceran 1000 kali No
Jumlah Sel
1.
3
2.
1
3.
1
4.
8
5.
0
4.1.2. Berat Sel Kering
Tabel 4. Berat Sel kering + kuvet Analisis ke-
1 2 3 4
Berat Sel Kering + tabung 1 1,11
2 1,10
1,11 1,11 1.11 1,11 1.11 1,11
3 1,12
4 1,10
5 1,07
6 1,07
1,11 1,11 1,06 1,11 1,11 1,06 1,11 1,11 1,06
1,08 1,08 1,08
Tabel 5.Berat Kuvet Kosong
1 1,09
Berat tabung kosong 2 3 4 5 1,03 1,09 1,07 0,96
6 1,07
Tabel 6.Berat Sel Kering
1 0,02
Berat Sel Kering 2 3 4 5 0,08 0,02 0,04 0,1
6 0,01
Berat sel kering rata – rata adalah sebesar 0,045
4.2 Pembahasan
Pembahasan Muhamad Januar R (151411049)
Tujuan dari praktikum ini adalah menggunakan metode Counting Chamber untuk menghitung jumlah sel dari suatu mikroba dan penentuan berat sel kering.
Counting Chamber
Prinsip dari perhitungan jumlah sel mikroba dengan metode ini adalah menghitung jumlah sel yang terdapat pada kotak (bagian dari alat counting chamber) sesuai ketentuan. Terdapat 5 kotak besar dan 80 kotak kecil di dalamnya. Sebelum dipindahkan ke dalam alat counting chamber, mikroba sebelumnya dibiakkan dalam media (GYEB) selama 24 jam. Kemudian diambil sampel sebanyak 1 mL (3 kali) dan divariasikan konsentrasinya dengan cara diencerkan 10 kali, 100 kali, dan 1000 kali. Berdasarkan pengamatan yang dilakukan, semakin pekat konsentrasi sampel yang diuji maka jumlah sel yang terdapat dalam sampel semakin banyak. Bedasarkan perhitungan juga demikian, dimana pada sampel yang tidak diencerkan konsentrasinya sebesar 47,650,000/mL, pada pengenceran 10 kali sebesar 3,000,000/mL, pada pengenceran 100 kali sebesar 700,000/mL, dan pada pengenceran 1000 kali sebesar 650,000/mL dengan rata-rata konsentrasi sel keseluruhan sebesar 13,000,000/mL.
Berat Sel Kering
Berat sel kering adalah penentuan jumlah sel dengan cara menghitung berat dari sel yang sudah dikeringkan. Bakteri yang telah dikembangbiakan dalam media (GYEB) di masukan ke dalam 6 buah kuvet masing-masing 1.5 mL. Kuvet-kuvet tersebut kemudian disentrifugasi pada 10,000 rpm selama 10 menit untuk memisahkan padatan dan supernatant (cairan). Padatan yang diperoleh dikeringkan dalam oven pada suhu 60OC. Padatan ditimbang setiap 15 menit hingga beratnya konstan. Tujuan dari penimbangan setiap 15 menit adalah untuk mengetahui berat sel sebenarnya, karena jika berat yang diperoleh tidak konstan maka masih terdapat cairan dalam kuvet. Berdasarkan data yang diperoleh berat sel kering pada kuvet pertama sebesar 0.02 gr, kuvet kedua 0.08 gr, kuvet ketiga 0.02 gr, kuvet keempat 0.04 gr, kuvet kelima 0.1 gr, dan kuvet keenam 0.01 gr dengan berat rata-rata sebesar 0.045 gr.
Pembahasan Muhamad Adam (151411050)
Pembahasan Muhamad Adam Abraham (151411050)
a. Counting Chamber Prinsip perhitungan dalam perhitungan menggunakan counting chamber didasarkan pada menghitung jumlah sel yang terdapat pada kotak-kotak kecil . Untuk menemukan kotakkotak kecil pada counting chamber diperlukan ketelitian yang cukup tinggi karena garis pembatas kotak-kotak terlihat sangat samar sehingga dibutuhkan juga konsentrasi dalam mengoprasikannya. Preparat yang digunakan pada percobaan ini adalah biakkan murni dari ragi Saccharomyces cereviceae yang dibiakkan dalam larutan GYEB selama 24 jam. Biakkan murni tersebut kemudian dilakukan pengenceran dengan variasi pengenceran 10 kali, 100 kali, dan 1000 kali. Perhitungan jumlah sel dilakukan dengan menggunakan mikroskop dengan menghitung jumlah sel yang berada pada kotak kecil kemudian diambil jumlah rata-rata. Berdasarkan hasil percobaan, didapatkan konsentrasi sel sebagai berikut. Konsentrasi 47650000/ml 3000000/ml 700000/ml 650000/ml
Keterangan Tanpa pengenceran Pengenceran 10 kali Pengenceran 100 kali Pengenceran 1000 kali
b. Berat Sel Kering Percobaan ini merupakan metoda penentuan berat biomassa dengan cara perolehan biomassa dari hasil biakkan murni yang kemudian dilakukan penghilangan kadar air dan dilakukan pengukuran berat. Tujuan dari percobaan ini yaitu untuk mengetahui jumlah biomassa yang terdapat pada produk. Langkah awal dalam percobaan ini yaitu membuat biakkan murni dari Saccharomyces cereviceae dalam larutan GYEB. Biakkan murni kemudian didiamkan didalam inkubator selama 24 jam. Biakkan murni yang telah diperoleh kemudian dimasukkan kedalam 6 buah kuvet dan kemudian dilakukan pemusingan dengan menggunakan alat centrifuge. Setelah dilakukan pemusingan akan terdapat endapan dibagian bawah kuvet yaitu berupa biomassa. Biomassa yang sudah diperoleh kemudian dilakukan pemanasan guna mengurangi kadar air agar didapatkan berat biomassa bebas air. Berdasarkan percobaan, didapatkan data berat sel kering sebagai berikut. Kuvet pertama 0,02 g Kuvet kedua 0,08 g Kuvet ketiga 0,02 g Kuvet keempat 0,04 g Kuvet kelima 0,1 g Kuvet keenam 0,01 g Berat rata-rata ,045 g
Pembahasan Muhamad Faizal (1514110451)
Pada praktikum kali ini yang berjudul “ Perhitungan konsentrasi sel mikroba dengan menggunakan ruang hitung (counting chamber)” yang bertujuan menemukan letak ruang hitung di bawah mikroskop dan menghitung konsentrasi sel dalam suspensi yang digunakan. Untuk menentukan letak ruang hitung pada percobaan kali ini langkah-langkah yang harus dilakukan adalah 1. Siapkan suspensi yang akan dianalisis sebesar 1 mlke dalam tabung reaksi pada praktikum ini yaitu berupa media cairan GYB yang telah diisi permifan. 2. Kocok suspensi tersebut agar sel mikroorganisme yang akan dianalisis tercampur secara homogen di dalam suspensi tersebut sehingga sel mikroorganisme tersebut dapat teramati secara optimal. 3. Setelah itu teteskan kurang lebih satu atau dua tetes ke hemasitometer (counting chamber) setelah itu tutup dengan penutup kaca preparat. Hemasitometer merupakan suatu alat yang dapat digunakan untuk melakukan perhitungan sel secara cepat dan dapat digunakan untuk konsentrasi sel yang rendah Hemasitometer terdiri dari 2 counting chamber dan tiap chambernya memiliki garisgaris mikroskopis yang terdiri dari persegi besar di mana di dalam persegi besar tersebut terdapat 16 persegi kecil pada permukaan kacanya sehingga jumlah sel yang diamati dapat terhitung dengan menggunakan alat ini secara teliti. Dengan aturan, pada persegi kecil apabila terdapat mikroba di garis sebelah kanan dan garis bawah maka mikroba tersebut tidak dihitung dan apabila sel mikroba tersebut terletak di garis sebelah kiri dan garis atas maka mikroba tersebut termasuk ke dalam hitungan satu persegi kecil. 4. Setelah diteteskan pasang kaca hemasitometer pada mikroskop dengan lensa mikroskop tersebut tepat di atas kaca penutup preparat. 5. Setelah itu fokuskan lensa tersebut dan akan terlihat garis garis berbentuk persegi.. Untuk mencari fokus, lakukanlah dengan dua cara berikut ini.
Perbesaran lemah. Lensa okuler dengan perbesaran 5 kali dan lensa objektif dengan perbesaran 10 kali dapat diartikan bahwa preparat diamati dengan perbesaran 50 kali. Dengan cara menurunkan lensa okuler serendah mungkin, lensa objektif juga diturunkan sampai berjarak kira-kira 8 mm dari kaca preparat. Setelah itu, arahkan salah satu mata kalian ke lubang lensa okuler sambil memutar-mutar makrometer sampai diperoleh gambaran preparat yang jelas.
Perbesaran kuat. Lensa okuler dengan perbesaran 12,5 dan lensa objektif dengan perbesaran 60 kali sehingga preparat dapat diamati dengan perbesaran 750 kali. Mulailah dengan menutup preparat dengan kaca penutup, lalu naikkan kondensor sampai mau menyentuh kaca preparat (objek), kemudian bukalah diafragma selebar-lebarnya dan turunkan lensa objektif sampai hampir menyentuh kaca penutup preparat. Setelah itu, dengan makrometer, naikkan lensa objektif sampai diperoleh gambaran preparat yang jelas.
6. Setelah letak ruang hitung ditemukan, amati mikroba yang terdapat di dalam suspensi tersebut. Asumsikan satu persegi besar yang diamati merupakan satu persegi kecil. Sehingga dalam percobaan ini diamati 5 persegi besar yang tertangkap oleh mikroskop. Suspensi yang digunakan dalam percobaan ini adalah media cair GYB (Glucose Yeast Broth) yang terbuat dari bahan baku yeast ekstrak, tripton, glukosa dan aquadest. Pada percobaan menggunakan counting chamber ini kultur media yang digunakan harus bersih dan bebas dari partikel yang dapat menghalangi sel oleh sebab itu sebelum percobaan ini dilakukan. Media serta alat yang digunakan harus dalam keadaan steril. Setelah suspensi diambil sebanyak 1 ml ke dalam tabung reaksi dan dilakukan analisa terlebih dahulu apabila hasil analisa tersebut di setiap persegi terdapat lebih dari 10 mikroba yang terdeteksi maka dari itu suspensi tersebut harus dilakukan pengenceran yaitu dengan cara 1 ml ditambah denga 9 ml air garam sterilmaka didapat konsentrasi suspensi dengan pengenceran sebanyak 10 kalinya. Apabila masih terdapat mikroba dalam satu persegi lebih dari 10 lagi maka lakukan pengenceran lagi dengan cara yang sama yaitu ambil 1 ml dari larutan yang sudah di encerkan tersebut lalu tambahkan 9 ml air garam steril sehingga didapatkan faktor pengenceran 100 kalinya. Dan terakhir pada percobaan ini dilakukan pengenceran 1000 kalinya untuk menganalisa mikroba di dalamnya. Pengenceran ini dilakukan dengan tujuan untuk melarutkan atau melepaskan mikroba dari substratnya ke dalam air sehingga lebih mudah penanganannya Counting chamber merupakan kaca objek tebal, diatasnya ditorehkan garis-garis presisi berbentuk persegi panjang dan bujur sangkar besar. Satu bujur sangkar besar terbagi menjadi 16 bujur sangkar kecil dengan ukuran 0,05 mm. Jika diatas kaca objek ini diletakkan kaca tutup maka akan terbentuk ruang dengan ketinggian 0,1 mm. Sehingga vol. satu bujur sangkar kecil
adalah 0,05 x 0,05 x 0,1 = 25x 10-5 mm. Dilakukan pengamatan untuk 5 bujur sangkar besar atau 80 bujur sangkar kecil. Jumlah sel dalam bujur sangkar kecil dihitung dan dijumlahkan untuk 80 bujur sangkar kecil.
1 =
1 8 0 × 2 5 × 1 0− × 10−
Dari jumlah sel yang telah diamati dapat dihitung konsentrasi sel tersebut dalam 1 ml suspensi dengan menggunakan rumus di atas sehingga didapatkan hasil konsentrasi sel untuk setiap pengenceran. Faktor – faktor yang mempengaruhi hasil dari percobaan tersebut diantaranya adalah kondisi lingkungan seperti suhu dan pH serta pengadukan menggunakan alat pengaduk otomatis yang menyebabkan mikroba terhomogenasi bersama media cair tersebut. Dengan menciptakan lingkungan yang bersih dan higienis hal tersebut dapat mengeliminir dan meminimalisir sumber nutrisi bagi mikroba agar pertumbuhannya terkendali. Selain ketiga faktor tersebut, kesterilan media dan bahan juga mempengaruhi hasil percobaan sehingga apabila media dan bahan benar benar steril maka tidak akan ada pengotor yang dapat mengganggu pada proses pengamatan dengan menggunakan mikroskop. Untuk penentuan massa mikroba dengan menggunakan metoda berat sel kering dilakukan dengan cara mengambil sampel sebanyak kemudian dimasukan ke dalam tabung sentrifugal dengan kecepatan putaran putaran per menit dalam suhu 4°C kemudian dicuci dengan buffer atau air dan dikeringkan pada suhu 80°C selama 24 jam atau pada °C selama 8 jam. Pada praktikum yang dilakukan sel di dalam tabung dikeringkan pada suhu 80°C dilakukan pengamatan sampai berat sel yang ada dalam kuvet konstan. Pengamatan yang praktikan lakukan adalah sebanyak 4 kali selama satu jam sekali. Berdasarkan percobaan di atas berhasil dilakukan pengamatan dan menemukan letak ruang hitung dengan mengatur lensa okuler pada mikroskop dan hasil yang didapatkan untuk metoda counting chamber adalah sebesar 13.000.000/ dan untuk perhitungan massa sel dengan berat sel kering didapatkan berat rata – rata sel sebesar 0,045 sehingga berdasarkan hasil tersebut tujuan percobaan telah tercapai.
Pembahasan Muhammad Ikhsan (151411052)
Praktikum kali ini adalah penghitungan jumlah sel suatu mikroba dengan metode counting chamber dan penentuan berat sel kering. Tujuan dari percobaan adalah menemukan letak ruang hitung dibawah mikroskop dan menentukan konsentrasi sel dari cuplikan (suspense) yang ditentukan. -
Counting Chamber
Counting chamber merupakan suatu kaca obyek tebal, diatasnya diasahkan suatu dataran yang dalamnya 0,1 mm. Pada dataran ini di buat garis-garis berbentuk 16 persegi besar, pada setiap persegi besar di bagi lagi menjadi 16 persegi kecil. Panjang sisi persegi kecil 0,05 mm. Jika di atas bagian yang diasah ini di letakan sebuah kaca tutup, maka terbentuk suatu ruang yang tingginya adalah 0,1 mm. Prinsip dalam pengitungan konsentrasi sel mikroba dengan metode counting chamber adalah menghitung jumlah sel yang terdapat di dalam kotak dengan memperhatikan ketentuannya. Pada praktikum penghitungan jumlah sel mikroba dilakukan pada 5 kotak besar dengan jumlah kotak kecil sebanyak 80 kotak. Pada saat percobaan, menemukan kotak tersebut yang terdapat pada hemasitometer cukup sulit, dibutuhkan ketelitian mata dan pengaturan pada mikroskop yang sesuai, agar mata tidak kelelahan pada saat mencari kotak tersebut. Berdasarkan percobaan bakteri yang digunakan adalah saccharomyces cerevisiae. Bakteri dikembangbiakan dalam media GYEB selama 24 jam. Bakteri yang sudah dikembangbiakan diambil sebanyak 1 ml dimasukan dalam tabung reaksi yang dijadikan sampel. 1 ml sampel tersebut kemudian diencerkan sebanyak 3 kali yaitu diencerkan 10 kali, 100 kali dan 1000 kali. Dengan konsentrasi sampel yang berbeda-beda dapat diketahui perbedaan konsentrasi sel dalam setiap sampel dan dapat diketahui konsentrasi rata-rata dari sel pada sampel secara keseluruhan. Berdasarkan pengamatan pada saat percobaan, semakin encer sampel yang diuji maka konsentrasi sel yang terdapat dalam sampel semakin sedikit, hal ini ditandai dengan jumlah bakteri yang dapat dilihat dibawah mikroskop pada konsentrasi yang semakin encer, senakin sedikit. Hal ini juga dapat dilihat berdasarkan perhitungan hasil dari percobaan, dimana konsentrasi sampel pada pengenceran 10, 100 dan 1000 kali semakin kecil. Konsentrasi sel pada sampel yang belum diencerkan sebesar 47.650.000/, pada pengenceran 10 kali sebesar 3.000.000/ , pada pengenceran 100 kali sebesar 700.000 / dan pada pengenceran 1000 kali sebesar 650.000/. Rata-rata konsentrasi sel keseluruhan adalah sebesar 13.000.000/. -
Berat sel kering
Berat sel kering merupakan metoda penentuan berat sel dengan cara dikeringkan pada suhu tertentu. Berdasarkan percobaan bakteri yang telah dikembangbiakan dimasukan ke dalam 6 buah kuvet, masing-masing kuvet berisi 1,5 ml sampel bakteri. Sampel terlebih dahulu dicentrifuge 10 menit dengan kecepatan 10000 rpm dengan tujuan memisahkan biomasa sel dari larutan sampel.
Setelah pemishan dilakukan, larutan sampel dibuang dan biomasa tetap tertinggal di dalam kuvat bagian bawah. Biomasa yang terdapat dalam kuvet di oven dengan tujuan mengeringkan biomasa dari sisa-sasa larutan sampel. Kuvet yang berisi biomasa dimasukan kedalam oven selama 15 menit dengan suhu 600C. Setiap 15 menit berat kuvet dengan biomasa selalu ditimbang dengan tujuan mengetahui berat biomasa sebenarnya. Berdasarkan pengamatan pada saat percobaan, berat kuvet dan biomasa tidak konstan antara 15 menit pertama dengan 15 slanjutnya, ini menandakan masi terdapatnya cairan pada kuvet. Pengeringan menggunakan oven dihentikan ketika berat kuvet dengan biomasa telah konstan antara 15 menit pertama dengan selanjutnya. Berdasarkan perhitungan diperoleh berat sel kering pada kuvet pertama sebesar 0,02 g, kuvet kedua 0,08 g, kuvet ketiga 0,02 g, kuvet ke empat 0,04 g, kuvet kelima 0,1g dan kuvet ke enam 0,01g . Berat rata- rata sel kering dari percobaan tersebut adalah sebesar sebesar 0,045 g .
V. Kesimpulan
Pembahasan Muhamad Januar R (151411049)
1. Penentuan letak ruang hitung di bawah mikroskop dilakukan dengan mensetting jarak antara counting chamber dengan lensa serta posisinya dan pengaturan fokusnya. 2. konsentrasi sel rata-rata yang diperoleh adalah 13,000,000/mL Pembahasan Muhamad Adam (151411050) 1. Menentukan letak ruang hitung dibawah mikroskop dilakukan dengan mengatur makrometer dan mikrometer pada mikroskop dan harus dilakukan dengan ketelitian tinggi karena garik ruang hitung terlihat samar. 2. Berdasarkan percobaan, diperoleh data konsentrasi sel sebagai berikut.
Konsentrasi 47.650.000 sel/ml 3.000.000 sel/ml 700.000 sel/ml 650.000 sel/ml
Keterangan Tanpa pengenceran Pengenceran 10 kali Pengenceran 100 kali Pengenceran 1000 kali
. Pembahasan Muhamad Faizal (1514110451)
1. Penentuan letak ruang hitung di bawah mikroskop dilakukan dengan mensetting jarak antara counting chamber dengan lensa serta posisinya dan pengaturan fokusnya. 2. konsentrasi sel rata-rata yang diperoleh adalah 13,000,000/mL Pembahasan Muhammad Ikhsan (151411052) 1. Penentuan letak ruang hitung pada mikroskop dapat dilakukan dengan baik 2. Konsentrasi sel rata-rata : 13.000.000/
DAFTAR PUSTAKA
Maria Widyanti, Emmanuela, Ir, dkk, “Praktikum Dasar Bioproses”, Jurusan Teknik Kimia, Politeknik Negeri Bandung, 2002 Sastramihardja, Ibrahim, “Petunjuk praktikum Mikrobiologi Dasar”, Jurusan Teknik Kimia, ITB, 1993
LAMPIRAN A. Perhitungan 1. Konsentrasi Sel dalam Konsentrasi Awal
1 = =
1 8 0 × 2 5 × 1 0− × 10− 1
8 0 × 2 5 × 1 0− × 10−
× 953
= 47.650.000/ 2. Konsentrasi Sel dalam Konsentrasi Pengenceran 10 kali
1
1 =
8 0 × 2 5 × 1 0− × 10− 1 = × 60 8 0 × 2 5 × 1 0− × 10− = 3.000.000/
3. Konsentrasi Sel dalam Konsentrasi Pengenceran 100 kali 1 1 = 8 0 × 2 5 × 1 0− × 10− 1 = × 14 8 0 × 2 5 × 1 0− × 10−
= 700.000 / 4.
Konsentrasi Sel dalam Konsentrasi Pengenceran 1000 kali 1 1 = 8 0 × 2 5 × 1 0− × 10− 1 = × 13 8 0 × 2 5 × 1 0− × 10− = 650.000/
5. Konsentrasi Rata- rata
=
47.650.000 + 3.000.000 + 700.000 + 650.000 4 = 13.000.000/
