Informe de laboratorio, microscopio y micro estereoscopio.
Josué Sebastián Cárdenas A. 20181010004 Febrero 2018.
Universidad distrital Francisco José de Caldas Bogotá D.C Biología
Tabla de Contenidos
Introducción .................................................................................................................................... 3 Objetivos ..................................................................................................................................... 3 Marco teórico .......................................................................................................................... 3 Capítulo 4 Resultados y discusión. ...................................................... ................................................................................................ .......................................... 2 Lista de referencias ......................................................................................................................... 3 Apéndice ......................................................................................................................................... 4 Vita.................................................... ........................................................................................................ .............................................................................................. .......................................... 5
Introducción
La primera práctica de laboratorio será acerca de la microbiología una rama de la biología que estudia los microorganismos, para llevar acabo de manera correcta esta práctica fue necesario usar el microscopio y el micro estereoscopio, además de tener el conocimiento previo de su uso y sus partes. Mediante el reconocimiento de varios montajes en el microscopio y el micro estereoscopio se pretende realizar un reconocimiento de su función y estructura mediante la práctica además de introducir a los estudiantes al laboratorio. Objetivos
Tener claro el uso del microscopio y el micro estereoscopio, poder usarlos de manera correcta. Objetivos específicos
Realizar montajes húmedos teniendo en cuenta los criterios mínimos para poder
realizar observaciones óptimas. Analizar el sentido o posición de la imagen dada por el microscopio con relación a la
posición del objeto que se observa. Interpretar claramente el concepto de profundidad del campo.
Realizar observaciones de microorganismos por medio de montajes húmedos simples.
Realizar un análisis comparativo entre el microscopio y el estereoscopio.
Demostrar que el área del campo visual varía de acuerdo el número de aumento del
objetivo que se está utilizando. Marco teórico
Para observar microorganismos de forma detallada es necesario el uso de herramientas específicas por ende fue necesario emplear un microscopio óptico compuesto, el cual mediante su aumento y campo visual nos facilitó el reconocimiento de microorganismo en el agua; además de esto fue posible reconocer las partes de este las cuales eran: oculares, objetivos, diafragma, condensador, foco, tornillo macro y micrométrico, pinzas, revólver, platina, brazo y base. Con el fin de hacer más fácil la comprensión de las partes se muestra muestr a una imagen.
Figura 1: microscopio óptico compuesto y sus partes.
El principio de funcionamiento de un microscopio óptico se basa en la propiedad de algunos materiales que permiten cambiar la dirección de los rayos de luz. Esto permite fabricar lentes capaces de hacer converger o divergir los rayos de luz. Mediante la combinación de estas lentes se puede generar una imagen una imagen aumentada de cualquier objeto. El ejemplo más sencillo sería utilizar una sola lente, como en el caso de una lupa, para producir una imagen aumentada de una muestra.
En el caso de un microscopio óptico se genera la imagen aumentada a partir de distintas lentes. Algunas de ellas montadas en el objetivo del microscopio y otras en el ocular. En primer lugar, las lentes del objetivo generan una imagen real re al aumentada de la muestra. Esta imagen real es a continuación ampliada mediante las lentes del ocular dando lugar a una imagen virtual de tamaño superior a la muestra original. (Mundo Microscopio, 2018) Dentro de la práctica también se emplearon los micro estereoscopios con el fin de observar particularidades de varios insectos esto mediante el campo y el aumento que brinda esta herramienta cuyas partes son: enfoque, platina, pinzas, base, oculares, lentes auxiliares y el foco de luz. Mostrando que este es menos complejo que el microscopio; en la imagen se pueden observar su sencillez a comparación compa ración del microscopio.
Figura 2: microestereoscopio y sus partes.
Lo que primero se observa con el microscopio son los microorganismos presentes en el agua, para ello el agua debe ser cultivada, esto con el fin de aumentar los microorganismos existentes en ella. Todas las criaturas vivientes están formadas por células. Las células son unas muy pequeñas unidades básicas de la vida. Son las estructuras mas pequeñas capaces de realizar
los procesos básicos de la vida, tales como absorción de nutrientes y expulsión de desechos. Las células solo se pueden observar al microscopio. Los microorganismos son organismos normalmente formados por una sola célula. Debido a esto, a veces se les denomina “organismos unicelulares”.
Son tan pequeños que los humanos no los podemos visualizar. Solo los podemos ver a través de un microscopio, mediante el cual las células son agrandadas enormemente. Al principio, los microorganismos no eran vistos como un tipo diferente de organismo. Los microorganismos que realizaban fotosíntesis eran incluidos en el reino vegetal, y los microorganismos que ingerían alimentos eran situados en el reino animal. Sin embargo, en el siglo XIX, los científicos identificaron una amplia variedad de microorganismos con diversas estructuras celulares, estructuras internas muy específicas, y patrones de reproducción muy específicos que les hicieron darse cuenta de que estos organismos no pertenecían a los reinos vegetal ni animal. (Lenntech.es, 2018) La flor es un órgano fundamental dentro de las plantas ya que esta es denominada el órgano de la reproducción, siendo sus partes: un pedicelo, receptáculo floral, cáliz, coral, androceo y gineceo. En la siguiente imagen es posible notar dichas partes.
Figura 3. Partes de la flor.
La flor se compone de todos los órganos reproductivos y "sobres" que rodean las angiospermas (plantas con flores también llamadas). Después de la polinización, la flor es fertilizada y se convierte en semillas de frutas que contiene. Las flores pueden ser solitarias, pero por lo general se agrupan en inflorescencias. Muy temprano, las flores han atraído la atención humana, que utiliza y los cultiva para el adorno (guirnalda), para la decoración de interiores (flores cortadas, ramos, ikebana) y exteriores (jardines, plataforma cintas, etc.), así como su olor y pigmentos. Las Flores menudo han inspirado a artistas, pintores, poetas, escultores y decoradores. El cultivo de flores es la floricultura o la horticultura. (Foroplantas.com, 2018) Los insectos son pequeños animales, sin huesos (invertebrados), compuestos por tórax, abdomen y cabeza. Son artrópodos además de ser los organismos más abundantes del reino animal, la ciencia que los estudia es llamada entomología. La siguiente imagen permite apreciar el insecto y sus partes.
Figura 4. Partes de un insecto.
Metodología Materiales:
Microscopios
Estereoscopios
Porta y cubre objetos
Papel impreso con letras
Hebras de hilo
Papel milimetrado
Tijeras o bisturí
Goteros
Agua de charco o florero
Flores
insectos
Procedimiento:
2.3.1 Análisis de la imagen dada por el microscopio 1. Del papel impreso con letras, seleccione una letra que no sea “0” ni “x”, y recorte por ejemplo la letra “e” más pequeña que encuentre, colóquela en un porta-objeto limpio y
agréguele dos gotas de agua, esto se llama montaje húmedo. Espere a que el papel se moje totalmente. Mantenga el cubre-objeto en un ángulo de 45º respecto al porta-objeto, déjelo caer suavemente sobre la muestra de manera que el agua quede distribuida uniformemente. Una ligera presión sobre el cubre-objeto eliminará las burbujas de aire que pudieran haber quedado. Coloque la lámina preparada sobre la platina de tal manera que la letra quede en
posición derecha de lectura y sujétela con las pinzas de ajuste. Mueva el portaobjeto de tal modo que la letra quede en el centro del orificio de la platina. Enfoque con menor aumento. Teniendo en cuenta el sentido con que usted colocó la letra para ser observada, describa como ve su imagen a través del microscopio. Haga un esquema de lo observado. 2. Mueva hacia adelante el porta-objeto, ¿qué parece sucederle a la letra que usted observa? Mueva el porta objeto hacia la derecha. Haga un dibujo de la letra tal como la observa con el objetivo de menor aumento. 2.3.2. Profundidad del campo visual Haga un montaje húmedo de dos hebras de hilo, dispuestas una sobre otra (en forma de cruz). Observe con el objetivo de menor aumento y dibuje. Ubique el portaobjeto de manera que el cruzamiento de los cabellos quede en el centro del campo. Gire el revólver hasta que el objetivo de mayor aumento quede en posición de enfoque, si los hilos no quedan nítidamente n ítidamente enfocados ajuste el enfoque con el tornillo micrométrico. Los detalles observados nítidamente en un determinado campo se encuentran en el mismo plano focal (nivel de enfoque). En la preparación puede haber detalles que queden sobre o debajo de ese plano focal y no se ven o simplemente se ven borrosos o desenfocados. Es necesario mover el micrométrico para ajustar el enfoque enfo que a diferentes planos y así obtener una observación más completa. Para cada plano focal existe una distancia comprendida desde el punto de vista bien enfocado más cerca de la cara frontal del objetivo, hasta el punto bien enfocado más distante, esta distancia se conoce como “profundidad del campo”.
2.3.3 Variación de la superficie del campo visual Recorte un pedacito de papel milimetrado de 1 cm2 y colóquelo sobre una porta-objeto. Agregue una gota de agua y luego coloque el cubre-objeto. Enfoque con el objetivo de menor aumento y determine el diámetro aproximado del campo visual.
Sabiendo que la
superficie del cír culo culo del campo visual (S) es igual a Πr 2, donde Π= 3.14 y r = ½ d. Calcule el valor de esta superficie para el objetivo de menor aumento. Enfoque con el objetivo de mediano aumento y siguiendo el procedimiento anterior calcule, para este objetivo, la superficie del círculo del campo visual. Sabiendo que el diámetro del campo visual es inversamente proporcional al poder de aumento de los objetivos, se puede determinar el diámetro correspondiente al objetivo de mayor aumento mediante la siguiente fórmula: (a 1 / a 2 ) = (d 2 / d 1 ); donde: a 1 = Número de aumento del objetivo de menor aumento a 2 = Número de aumento del objetivo de mayor aumento d 1 = Diámetro del campo observado con menor aumento d 2 = Diámetro del campo observado con mayor mayor aumento Calcule el diámetro y la superficie del círculo del campo visual para el objetivo de mayor aumento de su microscopio. Compare este valor con los anteriores obtenidos y saque conclusiones. 2.3.4 Observación de microorganismos Realice un montaje húmedo empleando una gota de agua de florero. Realice observaciones en los tres primeros aumentos y dibuje lo observado en cada uno de ellos. 2.3.5 Observaciones estereoscópicas Empleando como base cajas petri, realice disecciones de flores y realice los dibujos correspondientes empleando un aumento menor y otro mayor. Realice el mismo procedimiento con partes de insectos. Resultados y discusión.
Microscopio Se toma la letra “a ” con la posición
a
Imagen
Figura 5. Letra vista en 4X.
Figura 6. Letra vista en 10X
Al observar la letra es posible notar que la direccion es opuesta a la que se coloco en el portaobjetos esto sucde gracias a que el lente del objetivo es un lente convexo; esto se debe a que un lente convexo al ser incidido por rayo de luz que se refracta en una pantalla y la imagen formada en esta siempre será por una rayo convergente, invertida y real. Esto también sucede con la platina ya que al estar observando el microscopio si se quiere subir la platina se debe realizar la acción de bajarla y lo mismo hacia los lados. Al ver la letra en 4X es posible observar que lo que aparentemente es una línea continua es en realidad una línea con pequeñas discontinuidades, al verlo en 10X se pueden observar las fibras del papel y aún más discontinuidades dentro del trazo; en casi ningún objeto se puede apreciar claramente la vista en 40X ya que por po r lo menos en la letra se ve un manchón negro que nos permite concluir que el campo visual del microscopio es inversamente proporcional a su aumento.
Se toman dos hebras de hilo formando una X una sobre la otra
Imagen
Figura 7. Montaje hilo visto en 4X
Figura 8. Montaje hilo visto 10X
En las hebras de hilo se busca demostrar el poder de resolución del microscopio está dándose gracias a que los dos hilos se ven en un primer y segundo plano, mediante el uso del tornillo micrométrico o macro métrico para enfocar bien sea el primer o el segundo plano uno imposibilitando la visibilidad del otro cuando se enfoca. Cabe aclarar que qu e solo se nota la profundidad en 10X mientras que en 4X no. Además es posible ver la pequeñez del hilo formado por otras fibras entrelazadas que forman una sola hebra de hilo, junto a esto es posible notar que para cada aumento de los objetivos existe un plano focal distinto y así mismo un enfoque. La profundidad del campo visual es directamente proporcional a los objetivos. Variación de superficie Imagen
Figura 9. Papel milimetrado visto en el microscopio
Diámetro de los objetos
4x= 4.2 mm 10x=1.5 mm
Área de los objetivos 4x r= 4.2 mm / 2 r= 2.1mm A=π (2.1mm)2
A=13.85 mm2 10x r=1.5 mm/2 r=0.75mm A=π (0.75mm)2
A=1.76mm2 Es posible concluir que el área es inversamente proporcional al aumento del objetivo esto siendo demostrable en las anteriores operaciones.
Nombre
Tabla 1.
Clasificación
característica
Esquema
Clasificación microorganismo hallados en agua.
Estereoscopio
Figura 10. Flor de sambucus adoxaceae
La flor que se observo es la flor de mejor conocido como sauco, las
[Capte la atención de los lectores mediante una
un sambucus adoxaceae o peculiaridades que nos
llevaron a ser específicos en su reconocimiento fueron en cuanto a la flor que el ovulo es brotado y que los peciolos son cuatro además de cinco pétalos y su color, también ayudo el lugar donde se hayo y las condiciones climáticas. En el estereoscopio es más fácil notar el enfoque en un plano de la imagen, o la resolución al observar las muestras
Abdomen Tórax Cabeza
Figura 11. Mosca vista en estereoscopio.
Capítulo 4 Resultados y discusión.
Más texto.
Lista de referencias
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Blankenberg, D., Kuster, G. V., Coraor, N., Ananda, G., Lazarus, R., Mangan, M., ... & Taylor, J. (2010). Galaxy: a web‐ based based genome analysis tool for experimentalists. exper imentalists. Current protocols in molecular biology, 19-10.
Bolger, A., & Giorgi, F. Trimmomatic: A Flexible Read Trimming Tool for Illumina NGS Data. URL http://www. usadellab. org/cms/index. php.
Giardine, B., Riemer, C., Hardison, R. C., Burhans, R., Elnitski, L., Shah, P., ... & Nekrutenko, A. (2005). Galaxy: a platform for interactive in teractive large-scale genome analysis. Genome research, 15(10), 1451-1455.
Apéndice
Las tablas y figuras pueden ir en el apéndice como se mencionó anteriormente. También es posible usar el apéndice para incluir datos en bruto, instrumentos de investigación y material adicional.
Vita
Acá se incluye una breve biografía del autor de la tesis.